miR-106a抑制胶质瘤细胞SLC2A3表达和糖摄取的用途
【专利摘要】本发明涉及miR-106a抑制胶质瘤细胞SLC2A3表达和糖摄取的用途。具体地，本发明首次证实了过高表达的miR-106a是通过靶定SLC2A3的3’UTR从而下调SLC2A3表达，导致胶质瘤细胞的细胞增殖和细胞糖摄取被抑制，而SLC2A3基因是miR-106a在胶质瘤中一个新颖和关键的靶基因。这些结果揭示了miR-106a和SLC2A3可作为胶质瘤的潜在治疗靶点，同时为SLC2A3基因过度表达相关疾病如短暂性缺血发作的治疗提供了新的手段。
【专利说明】miR-106a抑制胶质瘤细胞SLC2A3表达和糖摄取的用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及分子生物学【技术领域】，具体地说，是miR-106a抑制胶质瘤细胞SLC2A3表达和糖摄取的用途。
【背景技术】
[0002]胶质瘤(glioma)为神经上皮性肿瘤，是颅内最多见的肿瘤，发病率约为十万分之十二，有发病率、复发率、死亡率高和治愈率低等“三高一低”的特点。WHO在1997年按病理将胶质瘤分为1-1V级:1级为纤维型星形细胞瘤；11级为低度恶性星形细胞瘤(LGA)，占所有神经胶质瘤的25% ;111级为退变型星形细胞瘤(AA)，易转化为IV级；IV级为多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme, GBM)。
[0003]小分子RNAs (miRNAs)已被证实通过阻断其靶基因mRNA的翻译在癌症的发展和恶化过程中发挥了关键作用。紊调的miRNAs在胶质瘤中可以分为致癌miRNAs或肿瘤抑制miRNAs ο
[0004]miR_106a是miR-106a_92簇中的一个成员，位于X染色体的Xq26.2区域。现有的研究表明miR-106a在多种肿瘤中表达上调，并发挥着致癌性作用。而中国期刊《中华神经外科疾病研究杂志》，2012年I期，刊出的论文“miR-106a抑制胶质瘤细胞增殖并诱导凋亡”，通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定了不同级别胶质瘤组织和胶质瘤细胞系(T98G, SHG44, U87, U251, U3730内的miR_106a水平，分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和流式细胞仪测定了转染miRNA寡聚核苷酸后的U87和U251细胞的增殖能力和细胞周期，并且通过膜联蛋白/碘化丙唳(annexin V/PI)双染法测定了 miR_106a对胶质瘤细胞的凋亡影响，结果发现miR-106a在胶质瘤组织和胶质瘤细胞系内表达水平相对正常脑组织显著下降，并且miR-106a表达水平与胶质瘤病理级别负相关，胶质瘤细胞转染miR_106a后，检测到过表达的miR-106a可显著抑制胶质瘤细胞的增殖能力，阻滞细胞周期于G0/G1期，同时诱导胶质瘤细胞凋亡增加，进而得出miR-106a可阻滞胶质瘤细胞细胞周期、抑制增殖和诱导凋亡的结论。尽管如此，miR-106a在胶质瘤中的功能性作用及相关机制仍然是未知的，这需要进一步的研究，为miR-106a在临床上的应用提供理论依据。
[0005]SLC2A3 (葡萄糖转运蛋白3)为葡萄糖代谢通路上的SLC2A基因家族中成员之一，对葡萄糖具有很强的亲和力。中国专利文献CN201180043685.2，公布日2013.05.08，专利名称为“用于诊断短暂性缺血发作的生物标志物”公开了短暂性缺血发作相关生物标志物表达水平的升高指示所述患者罹患短暂性缺血发作或有经历短暂性缺血发作的风险，其中所述短暂性缺血发作相关生物标志物即包括SLC2A3。
[0006]目前关于miR_106a抑制胶质瘤细胞的增殖能力和诱导胶质瘤细胞凋亡的机制仍不清楚，未见胶质瘤细胞中miR-106a靶标基因的报道，也未见miR_106a对胶质瘤细胞糖摄取影响的相关报道。
【发明内容】
[0007]本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供miR_106a及其调节剂的一种用途。
[0008]本发明的再一的目的是，提供SLC2A3蛋白或其编码基因的抑制剂的一种用途。
[0009]为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是:
miR-106a及其调节剂在制备SLC2A3基因表达相关疾病的药物中的用途。
[0010]作为本发明的一个实施例，所述的SLC2A3基因表达相关疾病是由于SLC2A3基因过度表达引起的，所述的疾病是胶质瘤或短暂性缺血发作。
[0011]作为本发明的一个实施例，所述的疾病是胶质瘤，所述的miR-106a及其调节剂还用于抑制胶质瘤细胞糖摄取或抑制胶质瘤细胞ATP生产。[0012]所述的调节剂可以选自抑制剂或增效剂。
[0013]作为本发明的一个实施例，所述的增效剂是模拟核酸。
[0014]为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是:
SLC2A3蛋白或其编码基因的抑制剂在制备治疗胶质瘤药物中的用途。
[0015]所述的抑制剂还用于抑制胶质瘤细胞糖摄取或抑制胶质瘤细胞ATP生产。
[0016]所述的抑制剂选自以SLC2A3蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制SLC2A3蛋白表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸；或能表达或形成所述小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。
[0017]本发明优点在于:
本发明首次证实了过高表达的miR-106a是通过靶定SLC2A3的3’UTR从而下调SLC2A3表达，导致GBM细胞的细胞增殖和细胞糖酵解被抑制，而SLC2A3基因是miR_106a在GBM中一个新颖和关键的靶基因。这些结果揭示了 miR-106a和SLC2A3可作为GBM的潜在治疗靶点，同时为SLC2A3基因过度表达相关疾病如短暂性缺血发作的治疗提供了新的手段。
【专利附图】
【附图说明】
[0018]图1.miR_106a下调导致了 GBMs预后不良。(A)实时PCR检测miR_106a在胶质瘤样品和正常组织中的表达；(B) TCGA数据的GBM中miR_106a表达的Kaplan-Meier生存曲线。
[0019]图 2.5^:2六3是砧1?-1063的直接靶基因。(六)11^1?-1063在5^:2六3 1111?應3’^1?中假定目标位点的示意图。(B)miR-106a转染细胞后，蛋白质免疫印迹分析SLC2A3的表达，GAPDH表达作为内参对照。(C)荧光素酶构建体转染miR-106a转导的细胞，转染48小时后测定荧光素酶活性，归一化的传感器与对照荧光素酶活性的比值如图所示。
[0020]图3.SLC2A3与miR-106a和GBM生存呈负相关性。(A)实时PCR测定SLC2A3在胶质瘤中的表达水平。(B)皮尔森相关分析表明在胶质瘤组织中miR-106a与SLC2A3表达呈负相关性。(C，D)TCGA数据和GSE4290数据GMB中SLC2A3表达的Kaplan-Meier生存曲线。
[0021]图4.miR-106a体内抑制胶质瘤细胞增殖。(A) SLC2A3 mRNA体内表达分析及其与增殖相关的mRNAs的关联。病人中与增殖相关的基因表达的热图，根据SLC2A3的表达进行了排序(列)。(B)MTT分析表明转染后miR-106a处理的细胞与对照组相比具有显著性低的增殖速率。(C)处理48小时后，收获细胞并进行细胞周期分析。结果用3个实验的均值表不。[0022]图5.miR-106a抑制了体内胶质瘤细胞葡萄糖摄取。(A)SLC2A3 mRNA体内表达分析及其与凋亡相关的mRNAs的关联。病人中与糖酵解相关的基因表达的热图，根据SLC2A3的表达进行了排序(列)。(B，C)miR-106a或SLC2A3 siRNA处理48小时后，收获细胞并进行葡萄糖摄取和ATP生产分析。结果用3个实验的均值表示。
[0023]图6.SLC2A3表达降低了 miR-106a介导的糖酵解和增殖。(A)细胞用SLC2A3质粒(不含3’ UTR)和miR-106a转染后，SLC2A3蛋白质水平通过蛋白免疫印迹分析检测。GAPDH蛋白作为内部标准化参照物。(B-D)细胞用SLC2A3质粒(不含3’爪10和1^1?-106&转染后，分别进行了细胞周期、葡萄糖摄取和细胞内ATP生产分析。3个独立实验的结果用均值土标准差(mean 土 SD)表示。
[0024]图7.Pgl3-对照载体图谱及 WT-SLC2A3-3’ UTR 和 MUT-SLC2A3-3’ UTR 质粒构建示意图。
[0025]图8.定量RT-PCR检测显示miR_106a表达在U87和LN229细胞中显著性下调。
[0026]图9.Pgenesil-1 载体图谱。
【具体实施方式】
[0027]下面结合附图对本发明提供的【具体实施方式】作详细说明。
[0028]如本文所用，所述的“miR_106a增效剂”包括了激动剂、上调剂、稳定剂等，只要它们能够上调miR-106a的表达水平，或维持miR_106a的稳定性，或增加miR_106a的有效作用时间等。它们可以是化合物、化学小分子、生物分子。所述的生物分子可以是核酸水平(包括DNA、RNA)的，也可以是上调miR-106a表达的病毒产品。
[0029]所述的miR-106a增效剂是指任何可提高miR_106a的活性、提高miR_106a的稳定性、上调miR-106a的表达、增加miR-106a有效作用时间的物质，这些物质均可用于本发明，作为对于上调miR-106a有用的物质，从而可用于降低SLC2A3蛋白的表达。例如，所述的增效剂是:表达miR-106a的质粒/病毒、化学合成的小分子化合物。
[0030]如本文所用，所述的“模拟核酸”是模拟生物体内源的miRNA，运用化学合成的方法合成，能增强内源性miRNA的功能。人工合成的miRNA已经成功应用于沉默预期靶基因表达及其功能研究。miRNA模拟核酸能够进一步增强内源miRNA的沉默作用，降低细胞内蛋白的表达量，进行功能获得性研究。化学合成的miRNA模拟核酸已经成为研究动植物基因家族的功能的有用工具，并且也是癌症治疗和临床研究的一种新策略。miRNA的模拟核酸可以从各生物公司购得。
[0031]如本文所用 ，所述的“miR_106a抑制剂”包括了拮抗剂、下调剂、阻滞剂、阻断剂等，只要它们能够下调miR-106a的表达水平。它们可以是化合物、化学小分子、生物分子。所述的生物分子可以是核酸水平(包括DNA、RNA)的，也可以是抑制miR-106a表达的病毒产
品O
[0032]所述的miR_106a抑制剂是指任何可降低miR_106a的活性、降低miR_106a的稳定性、下调miR-106a的表达、减少miR-106a有效作用时间的物质，这些物质均可用于本发明，作为对于下调miR-106a有用的物质。例如，所述的抑制剂是:核酸抑制物，蛋白抑制剂，核酸酶，核酸结合分子，只要其能够下调miR-106a的表达。
[0033]如本文所用，所述的“ SLC2A3蛋白或其编码基因的抑制剂”是指任何可降低SLC2A3蛋白的活性、降低SLC2A3蛋白或其编码基因的稳定性、下调SLC2A3蛋白的表达、减少SLC2A3蛋白有效作用时间、或抑制SLC2A3基因的转录和翻译的物质，这些物质均可用于本发明，作为对于下调SLC2A3蛋白或其编码基因有用的物质，从而可用于治疗SLC2A3过度表达相关的疾病。例如，所述的抑制剂是:核酸抑制物，蛋白抑制剂，抗体，配体，蛋白水解酶，蛋白结合分子，只要其能够在蛋白或基因水平上下调SLC2A3蛋白或其编码基因的表达。
[0034]实施例1
一、材料和方法 I临床样本收集
本研究中用到的人类组织于2012年从长海医院、中国第二军医大学获得，包括了 3个正常的脑组织，6个II级胶质瘤组织，6个III级胶质瘤组织和7个IV级胶质瘤(GBM)组织。肿瘤组织样本通过手术切除获得。正常脑组织在手术治疗重型颅脑损伤的过程中获得。样本在液氮中快速冷冻。如果患者的诊断由两个神经病理学家根据世界卫生组织的分类指导在组织结构学上成立的话，患者将被选为参加本研究。患者样本的收集和使用经过了上海长海医院伦理委员会审查委员会的审查和批准，并适当地获得了所有患者的书面知情同意书。
[0035]2体内分析
包含有完整生存信息的465个GBMs的miRNA和mRNA的表达谱从TCGA数据库获得。包含有完整生存信息的 67个GBMs的mRNA表达谱通过GEO数据库(http: //www.ncb1.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE4290)获得。使用 Gene Ontology 项目的 AmiGO 工具，我们获得了与增殖(G0:0008283)和醣酵解(GO:0006096)等生物过程相关的转录子列表。随后，每个本体中包含的基因在芯片数据集中进行了查询。根据SLC2A3的表达水平对样本进行了排序，并且对与SLC2A3表达显著性相关的基因(P〈0.001)的表达绘制了热图。
[0036]3细胞培养和转染
U252和LN229 GBM细胞在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中培养。miR-106a (5 ' -AAAAGUGCUUACAGUGCAGGUAG-3 ')和阴性对照的寡聚核苷酸(5' -UUGUACUACACAAAAGUACUG-3')购于GenePharma公司(中国上海)。在表达质粒的构建中，不含3’ UTR的野生型SLC2A3的cDNA序列(具体序列参见NCBI Gene ID:6515)被筛选出并克隆到Pgenesil-1载体(购于Genesil公司，载体图谱如图9所示)上。细胞在达到50%-60%融合时使用脂质体2000 (Invitrogen公司)进行转染。转染48小时后，细胞被收获进行下一步研究。
[0037]4 定量 RT-PCR
通过茎环RT-PCR方法进行has-miR_106a的实时定量化。用于TaqMan miRNA实验的miRNAs引物购于吉玛制药技术有限公司(中国上海)。人类SLC2A3 (正义链)/ (反义链)的序列如下:5 ‘TCCCCTCCGCTGCTCACTATTT3’；5 iATCTCCATGA CGCCGTCCTTTC3’。GAPDH (正义链)/ (反义链)的序列如下:5’-GTCGGAGTCAACGGATT-3’； 5’-AAGCTTCCCGTTCTCAG-3’。严格按说明书步骤进行实时PCR。所有的实验使用生物三倍体并进行了重复实验。相对表达值通过I一方法计算。
[0038]5 MTT 试验细胞接种在带有六个重复孔的96孔板中，每孔IO4细胞。按如上所述方法进行转染，处理后连续4天每天向每孔中加入20 μ L MTT (5 g/L，Sigma)。4天后将细胞额外培养4小时后，去除上清液，向每孔中加入200 μ L DMSO溶解沉淀。光密度(OD)在波长550nm时进行测定。数据用均值土标准差(mean土SD)表示，这些数据来源于至少三次独立实验的3个样本。
[0039]6细胞周期分析
细胞用PBS进行洗涤后用70%乙醇固定至少I小时。充分洗涤后，将细胞悬浮在含有50 μ g/mL PI和50 μ g/mL RNase A的PBS中在室温培养I小时，然后用FACScan分析仪(Becton Dickinson)进行分析。细胞周期通过ModFit软件进行分析。每次实验重复3次，结果以在每个特定阶段的％细胞数表示。
[0040]7细胞内ATP产生和葡萄糖摄取实验
细胞内ATP水平使用ATP生物发光检测分析试剂盒进行测定(罗氏应用科学，RocheApplied Science)，简而言之，5X IO5细胞通过煮沸的裂解试剂裂解后收集上清液，把50 μ L的稀释样本和50 μ L虫突光素/突光素酶试剂混合。突光发光使用冷光微盘分析仪测定(赛默飞世尔，Thermo Scientific)。在葡萄糖摄取实验中，3 X IO5细胞在20 μ mol/L2-NBDG (英杰公司，Invitrogen)中培养2个小时后，将细胞重悬浮在冷却的生长培养基中并用碘化丙啶染色，将样本置于冰上然后用流式细胞仪(Becton Dickinson)进行分析。
[0041]8蛋白质印迹分析
每个条带上的等量的蛋白质首先用8%的SDS聚丙烯酰胺凝胶分离然后将产物转移到PVDF膜上。PVDF膜先用5%的脱脂牛奶封闭I小时然后与特定的抗体反应2个小时。在本研究中使用的抗体是:抗SLC2A3抗体(Santa Cruz),抗GAPDH抗体(Santa Cruz)(被用来作为对照)。反应获得的特定的蛋白质通过SuperSignal蛋白质检测试剂盒(皮尔斯，PiermiR-106Ace)检测。这些特定的蛋白质的条带密度在与GAPDH的密度归一化后进行定量测定。
[0042]9荧光素酶报告基因分析
人类SLC2A3 3，UTR扩增后克隆到Pgl3_对照载体(Promega)的XbaI位点，此位点位于荧光素酶基因的下游，从而构造质粒WT-SLC2A3-3’ UTR0通过去除WT-SLC2A3-3’ UTR中miR-106a的结合位点“CACUUU”从而构建突变的MUT-SLC2A3-3’ UTR质粒。以上载体的构建过程请参照图7。在荧光素酶报告基因分析中，细胞培养在96孔板中，然后用质粒和miR_106a通过脂质体介导法(Lipofectamine 2000)进行转染。转染48小时后,突光素酶活性通过荧光素酶检测系统(普洛麦格，Promega)进行检测。
[0043]10统计学分析
统计学分析包括AN0VA、t检验、皮尔森相关分析或Kaplan-Meier分析。P〈0.05被认为具有统计学显著性。
[0044]二、实验结果
I miR-106a下调导致了 GBMs预后不良
为了进一步探讨miR-106a在胶质瘤中的表达，我们通过实时PCR检测了 19个人类胶质瘤样品和3个正常脑组织样品。如图1A所示，与正常组织相比，在胶质瘤中miR-106a表达显著下调(P〈0.01)。更一步的研究表明，与低级别胶质瘤相比，miR-106a在高级别胶质瘤中显著性下调(P〈0.05)。我们同样发现miR-106a表达在U87和LN229细胞中显著性下调(图8)。接下来我们通过具有时序比较功能的Kaplan-Meier生存曲线分析研究了 miR_106a表达与整体生存率的相关性。我们从TCGA数据中选择了 465个包含完整生存信息的GBMs做进一步研究(图1B)。与miR-106a高表达的GBM样本相比，miR_106a表达水平低的GBM样本与低生存率相关联(P=0.008)。这些数据表明miR-106a表达低的病例具有明显更坏的生存结果。
[0045]2 SLC2A3是miR_106a的直接靶基因
miRNA靶基因生物信息学分析表明SLC2A3包含了高度保守的假定的miR-106a结合位点(图2A)。为了检测SLC2A3是否直接被miR_106a调控，我们进行了蛋白质印迹分析和荧光素酶报告基因分析。蛋白质印迹分析表明在U251和LN229细胞中过高表达miR-106a后，SLC2A3的表达明显降低(图2B)。进一步，我们构建了 WT-SLC2A3-3’ UTR和MUT-SLC2A3-3’ UTR质粒。荧光素酶报告基因分析揭示了 miR_106a在U251和LN229细胞中诱导了 WT-SLC2A3-3’ UTR质粒荧光素酶活性的显著性下调，而MUT-SLC2A3-3’ UTR质粒的荧光素酶活性并没有显著性变化(图2C)。
[0046]3 SLC2A3与miR_106a和GBM生存呈负相关性
我们进一步研究了 miR-106a与SLC2A3表达在胶质瘤中的关联。实时PCR结果显示与低级别胶质瘤和正常组织相比，SLC2A3水平在高级别胶质瘤中显著性提高(P〈0.05)(图3A)。关联分析显示在miR-106a和SLC2A3表达间存在一个显著的负相关性(R = -0.7465，P < 0.0001)(图3B)。同样我们发现在TCGA的465个GBMs中，miR-106a表达与SLC2A3表达存在负关联(R = -0.139 2,P = 0.0026)。这些数据表明在胶质瘤中SLC2A3是miR_106a的直接靶基因。
[0047]同样，我们研究了 SLC2A3表达与GBM生存之间的关系。在TCGA的465个GBMs中，SLC2A3表达水平高的样本预后不良(P = 0.0037)(图3C)。为了进一步验证这个结果，我们使用另外一组独立的数据集(GSE4290)进行检验。Kaplan-Meier生存曲线表明在生存率与SLC2A3表达水平之间存在统计学上显著的关联(P=0.0453)(图3D)。这些数据表明SLC2A3呈高阳性的病例具有较坏的生存结果。
[0048]4 miR-106抑制了胶质瘤细胞增殖
为了研究miR-106a通过SLC2A3介导对胶质瘤细胞增殖的影响，我们分析了在胶质瘤中与细胞增殖和SLC2A3表达同时相关联的基因。首先，通过使用AmiGO分析获得与增殖基因本体相关联的基因，其中836个基因与TCGA的GBM中的SLC2A3表达具有一个很明显的关联(P < 0.001)(图4A)。有意思的是，SLC2A3表达水平正常的GBM样本与正常组织的基因表达模式是相似的。其次，miR-106a诱导显著性降低了 U251和LN229细胞的细胞内增殖(图4B)。更进一步，miR-106a处理的细胞与正常的未处理的细胞相比在G0/G1期表现出了显著性的上升(图4C)。
[0049]5 miR_106a抑制了胶质瘤细胞葡萄糖摄取
我们分析了糖酵解基因本体中包含的与SLC2A3表达相关的基因。并且观察到了 76个基因的表达与细胞糖酵解和SLC2A3表达显著性相关(图5A)。为了研究miR_106a的上调是否影响了胶质瘤细胞的糖酵解，我们对葡萄糖摄取和细胞内ATP生产进行了检测。miR-106a的过高表达导致了 U251和LN229细胞葡萄糖摄取和ATP生产的显著性降低(图5B 和 C)。
[0050]6 SLC2A3在miR_106a介导的细胞糖酵解和增殖中的功能作用
之前的结果表明SCL2A3是miR-106a的直接目标基因，我们接下来探讨SLC2A3在miR-106a介导的细胞糖酵解和细胞增殖中的重要性。首先，我们构建了一个不含3’UTR的SLC2A3的表达质粒，蛋白免疫印迹实验表明被不含3’ UTR的SLC2A3质粒转染极大降低了miR-106a靶定的SCL2A3的表达(图6A)。进一步用不含3’UTR的SLC2A3质粒和miR_106a转染，SLC2A3表达的影响在很大程度上超过了 miR-106a对细胞糖酵解和增殖的影响(图6B-D)。这些结果揭示了 SLC2A3是miR-106a在胶质瘤细胞糖酵解和增殖中的一个主要功能靶基因。
[0051]三、讨论
最近的研究表明miR-106a在人类肿瘤发生和进展过程中起了重要的作用。miR_106a在胃癌、结肠直肠癌和套细胞淋巴瘤中的表达都上调了，然而它在胶质瘤中的表达却下调了。在本文的研究中，我们发现miR-106a是一个与GBM生存结果相关的肿瘤抑制miRNA，这与之前的数据是一致的。过高表达的miR-106a会通过靶定SLC2A3的3’ UTR从而下调SLC2A3表达，导致GBM细胞的细胞增殖和细胞糖酵解被抑制。据我们所知，这是首次证实miR-106a具有调节细胞糖酵解的功能。在我们的研究中，我们还发现，SLC2A3在高级别胶质瘤组织中过高表达，而且抑制SLC2A3表达极大减弱了 miR-106a介导的GBM细胞的细胞增殖和葡萄糖摄取。这些数据表明胶质瘤中较高的SLC2A3表达与恶性的较差的预后表型紧密相关。
[0052]四、结论
总体来说，我们发现了 miR-106a是一种肿瘤抑制miRNAs，SLC2A3是miR_106a在GBM中一个新颖和关键的靶基因。这些结果揭示了 miR-106a和SLC2A3可能是GBM的潜在治疗革巴点。
[0053]以上所述仅是本发明的优`选实施方式，应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。
【权利要求】
1.miR-106a及其调节剂在制备SLC2A3基因表达相关疾病的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的SLC2A3基因表达相关疾病是由于SLC2A3基因过度表达引起的，所述的疾病是胶质瘤或短暂性缺血发作。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的疾病是胶质瘤，所述的miR-106a及其调节剂还用于抑制胶质瘤细胞糖摄取或抑制胶质瘤细胞ATP生产。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的调节剂选自抑制剂或增效剂。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的增效剂是模拟核酸。
6.SLC2A3蛋白或其编码基因的抑制剂在制备治疗胶质瘤药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述的抑制剂还用于抑制胶质瘤细胞糖摄取或抑制胶质瘤细胞ATP生产。
8.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述的抑制剂选自以SLC2A3蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制SLC2A3蛋白表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸；或能表达或形成所述小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。
【文档编号】A61P35/00GK103611167SQ201310602658
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月25日 优先权日:2013年11月25日
【发明者】鲁琼, 戴冬伟, 岳志健, 李亚楠, 刘建民 申请人:中国人民解放军第二军医大学