抗生素Indimicins A–E及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了抗生素Indimicins?A–E及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。Indimicins?A-E，结构式如式(I)所示，其是由链霉菌Streptomyces?sp.SCSIO03032发酵产生，含有新颖6′-氯-1′,3′-双甲基-2′-H-吲哚结构且对人乳腺癌MCF-7细胞，人肝癌细胞HepG2，人肺癌H460细胞和人神经胶质瘤细胞SF-268有细胞毒活性，对其进行生物工程改造或化学结构修饰有望开发成为抗肿瘤新药。
【专利说明】抗生素Indimicins A - E及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用
【技术领域】:
[0001]本发明属于工业微生物领域,具体涉及新的抗生素Indimicins A-E及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。
【背景技术】:
[0002]双吲哚生物碱结构多样且具有多种生物、药理活性。目前，一些双吲哚生物碱的类似物作为蛋白激酶K的抑制剂或DNA拓扑异构酶I的抑制剂已用于临床试验(H.Nakano, and S.0mura, 1 Chemical B1logy of NaturalIndolocarbazole Products:30Years since the Discovery of Staurosporine ' , JAntib1t, 62(2009)，17-26.)。
【发明内容】
:
[0003]本发明的第一个目的是提供五种新的具有抗肿瘤活性的双吲哚生物碱indimicins A-E。
[0004]本发明的五种新的双Π引哚生物碱indimicins A - E,其结构如式⑴所示:
[0005]
【权利要求】
1.化合物indimicinsA-E,其结构如式(I)所示:
2.一种权利要求1所述的化合物indimicins A-E的制备方法,其特征在于,所述的化合物indimicins A-E是从链霉菌(Streptomyces sp.) SCS1003032的发酵培养物中制备分离得到的。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下: a、制备链霉菌(Sti^ptomycessp.) SCS1003032的发酵培养物，将该发酵培养物的发酵液和菌丝体分离开，发酵液经大孔树脂吸附，后用丙酮洗脱大孔树脂，洗脱液回收丙酮后剩余的水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到浸膏A ;菌丝体先用丙酮浸提，浸取液回收丙酮后剩余的水混合液再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到浸膏B ; b、将浸膏A和浸膏B合并的粗提物经硅胶柱层析，用氯仿/甲醇作为洗脱剂，从体积比100:0~O:100进行梯度洗脱，收集氯仿/甲醇体积比98:2梯度洗脱下来的馏分Fr.2，后经ODS反相中压液相色谱，用水/甲醇作为洗脱剂，从体积比100:0~O:100进行梯度洗脱，收集水/甲醇体积比20:80梯度洗脱下来的馏分Fr.2-3，再过LH-20凝胶柱，以氯仿/甲醇体积比1:1作为流动相洗脱，洗脱馏分再经薄层层析纯化分离，得到化合物indimicinA、indimicin B、indimicin C、indimicin D 和 indimicin E0
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的a步骤的制备链霉菌(Streptomyces sp.) SCS1003032的发酵培养物是通过以下方法制备:将活化的链霉菌(Streptomyces sp.) SCS1003032接入种子培养基,28°C，200rpm,培养48h得种子液，将种子液以10%的接种量接入到发酵培养基中，28°C，200rpm，振荡培养120h，而制得发酵培养物，所述的种子培养基和发酵培养基的配方都为每升培养基中含有:淀粉10g，酵母粉5g，蛋白胨4g，CaC032g，粗海盐30g，余量为水，pH7.2。
5.链霉菌(Streptomycessp.) SCS1003032在制备权利要求1所述的化合物indimicinA、indimicin B、indimicin C、indimicin D 或 indimicin E 中的应用。
6.权利要求1所述的化合物indimicinsA、B、C、D或E在制备抗肿瘤药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的抗肿瘤药物为抗乳腺癌，人肝癌，人肺癌或人神经胶质瘤的药物。
8.一种抗肿瘤药物，其特征在于，包含有效量的indimicin A、B、C、D或E作为活性成份。
9.根据权利要求8所述的抗肿瘤药物，其特征在于，所述的抗肿瘤药物为抗乳腺癌，人肝癌，人肺癌或人神 经胶质瘤的药物。
【文档编号】C07D487/14GK104031052SQ201410214540
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年5月20日 优先权日:2014年5月20日
【发明者】张长生, 张文军, 马亮, 李苏梅, 张庆波, 张海波, 张光涛 申请人:中国科学院南海海洋研究所