绿及咳喘片在制备抑制胶质瘤细胞shg-44细胞增殖药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药技术领域，具体设及一种绿及咳喘片在制备抑制胶质瘤细胞SHG-44 细胞增殖药物中的应用及绿及咳喘片的制备方法。
【背景技术】
[0002] 绿及咳喘颗粒标准号WS-10616(ZD-0616)-2002,记载于国家中成药标准汇编内科 肺系(二)分册。由小绿巧200g、鸡矢藤200g、功劳木lOOg、通关藤lOOg、白及lOOg、虎杖lOOg、 透骨草lOOg、黄精100g作为原料药制成，具有养阴润肺、清热解毒、化疲止血的功效，用于 热燥犯肺引起的咳嗽，潮热，盗汗等症。
[0003] 现有技术中，尚未有绿及咳喘片在在制备抑制人胶质瘤细胞SHG-44细胞增殖药物 中的应用的报道，也未见有绿及咳喘片提取制备方面采用超临界萃取的报道，而传统水煎 煮、乙醇回流提取的方法，工艺粗糖、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影 响了本品在临床上应用。
【发明内容】
[0004] 发明目的:本发明的目的在于提供一种绿及咳喘片在制备抑制胶质瘤细胞SHG-44 细胞增殖药物中的应用。
[0005] 本发明的另一个目的在于提供一种绿及咳喘片的制备方法。
[0006] 本发明的目的是通过如下的方案实现的： 绿及咳喘片在制备抑制胶质瘤细胞SHG-44细胞增殖药物中的应用，所述绿及咳喘片由 小绿巧200g、鸡矢藤200g、功劳木lOOg、通关藤lOOg、白及lOOg、虎杖lOOg、透骨草lOOg、黄精 100g作为原料药制成，所述绿及咳喘片的制备方法包括如下步骤:取小绿巧200g、鸡矢藤 200g、功劳木lOOg、通关藤lOOg、白及lOOg、虎杖lOOg、透骨草lOOg、黄精lOOg，加入到C〇2超 临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，溫度30-50°C，C〇2流量^3ml/g生药? min，萃取时间700-800min，得超临界萃取物， 将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成200片，每片重0.50g。
[0007] 优选的，上述的绿及咳喘片在制备抑制胶质瘤细胞SHG-44细胞增殖药物中的应 用，所述绿及咳喘片的制备方法包括如下步骤:取小绿巧200g、鸡矢藤200g、功劳木lOOg、通 关藤lOOg、白及lOOg、虎杖lOOg、透骨草lOOg、黄精lOOg，加入到C〇2超临界萃取器中，乙醇作 为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，溫度40°C，0)2流量 2ml/g生药? min，萃取时间750min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制 颗粒，干燥，压片，制成200片，每片重0.50g。
[000引现有技术中，绿及咳喘颗粒口服，一次1 Og，一日3-4次。绿及咳喘颗粒服药量大。采 用本发明方法制备成的绿及咳喘片每片重0.50g，每次仅需2片，一日服用3-4次。在具有更 多活性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可W通过下述试验证明。
[0009] 试验一、不同方法制备的绿及咳喘片中大黄素含量的比较 1、仪器及试药本发明绿及咳喘片:按实施例1方法制备，使用1000 g原料药，经提取制成 200片，每片重0.50g。原绿及咳喘颗粒，按照WS-10616(ZD-0616)-2002标准方法制备。 Agi 1 ent 1200高效液相色谱仪;METTLER AE240电子分析天平;大黄素对照品（中国药品生物 制品检定所）。
[0010] 2、方法 照高效液相色谱法(中国药典2015年版第四部凡例十五)测定。
[0011] 色谱条件及系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%憐酸 溶液(80:20)为流动相;检测波长为437nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于4000。
[0012] 对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品适量，加甲醇制成每1ml含IOyg的溶 液，即得。
[0013] 供试品溶液的制备取本发明绿及咳喘片10片，研细，混匀，取0.1 g,精密称定，加 水20ml使溶解，加盐酸2ml，摇匀，加热回流30分钟，冷却，加氯仿30ml，超声处理10分钟，转 入分液漏斗中，分取氯仿液，水液再用氯仿振摇提取2次，每次15ml，合并氯仿液，在80°C水 浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜 (0.45ym)滤过，取滤液，即得。
[0014] 对照产品供试品溶液的制备取对照的绿及咳喘颗粒20g，研细，混匀，取Ig,精密 称定，加水20ml使溶解，加盐酸2ml，摇匀，加热回流30分钟，冷却，加氯仿30ml，超声处理10 分钟，转入分液漏斗中，分取氯仿液，水液再用氯仿振摇提取2次，每次15ml，合并氯仿液，在 80°C水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔 滤膜(0.45ym)滤过，取滤液，即得。
[0015] 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液、对照产品供试品溶液各20iU，注 入液相色谱仪，测定，即得。
[0016] 3、结果 结果表明，本发明绿及咳喘片中大黄素的含量为1.65-3.28mg/片;而原绿及咳喘颗粒 中大黄素的含量为1.62mg/袋(每袋含颗粒剂IOg)，每次服用量2片的大黄素含量为原颗粒 剂IOg含量的2-4倍，在服用量减少的情况下，大黄素含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明，采用本发明制备方法制备的绿及咳喘片，有效成分含量远远高于 WS-10616 (ZD-0616 ) -2002标准记载的方法制备的绿及咳喘颗粒。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，W便本领域的技术人员更了解 本发明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于W下的实例，凡基于本发明上述 内容所实现的技术均属于本发明的范围。
[0019]实施例1 取小绿巧200g、鸡矢藤200g、功劳木lOOg、通关藤lOOg、白及lOOg、虎杖lOOg、透骨草 lOOg、黄精lOOg，加入到C〇2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积 百分比为5%，萃取压力25MPa，溫度40°C，C〇2流量2ml/g生药? min，萃取时间750min，得超临 界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成200片，每片重 0.50g〇
[0020] 经检测，成品中大黄素的含量为3.28mg/片。
[0021] 实施例2 取小绿巧200g、鸡矢藤200g、功劳木lOOg、通关藤lOOg、白及lOOg、虎杖lOOg、透骨草 lOOg、黄精lOOg，加入到C〇2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积 百分比为4%，萃取压力15MPa，溫度30°C，C〇2流量Iml/g生药? min，萃取时间900min，得超临 界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成200片，每片重 0.50g〇
[0022] 经检测，成品中大黄素的含量为1.65mg/片。
[0023] 实施例3 取小绿巧200g、鸡矢藤200g、功劳木lOOg、通关藤lOOg、白及lOOg、虎杖lOOg、透骨草 l