一种天然藏红花素提取分离方法及其降血脂药物的制备方法
【专利摘要】本发明具体涉及一种天然藏红花素提取分离方法及其降血脂药物的制备。其提取分离的方法是将栀子干果清洗去杂，经去离子水提取后过滤去渣，然后融合在线膜分离浓缩、大孔吸附树脂层析纯化，最后经低温喷雾干燥制备藏红花素,发明的关键是创制一种新的萃取剂，采用含一定助溶剂的水提取藏红花素，提取率可达到95%以上；集成一种融合在线膜分离与浓缩、大孔吸附树脂柱层析纯化藏红花素的工艺技术。本发明生产高纯度藏红花素的方法成本低，适合工业化扩大生产；复合的药物制剂具有明显的降血脂功效，无副作用，并且可以有效的预防心脑血管相关疾病，促进血液循环，是三高人群的首选保健药品。
【专利说明】一种天然藏红花素提取分离方法及其降血脂药物的制备
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物提取及分离【技术领域】，同时涉及中药制剂【技术领域】。发明涉及一种以桅子为原料制备高纯度藏红花素，以及一种具有降血脂功能的藏红花素、银杏叶提取物黄酮和葡萄籽提取物原花青素复合制剂的配方。
【背景技术】
[0002]桅子为茜草科植物属，在我国分布广泛，是卫生部颁布的首批药食两用资源。桅子具有护肝、利胆、降脂、止血、清热、止泻等功效。桅子中含有多种功效成分，主要是以桅子苷为主的环烯醚萜类，以桅子藏红花素为主的类胡萝卜素类和以绿原酸为主的酚酸类等物质。藏红花素是自然界唯一的水溶性类胡萝卜素类色素，无毒，安全性高，在人体内可以转化为维生素A，具有一定的营养价值和保健功能，同时作为一种色调高，染色性好的天然色素，在食品轻化工领域具有广泛应用和开发价值。临床医学表明，藏红花素不仅可以增强肝脏的解毒功能、降低血中胆红素、降低胆固醇，而且其作为胰脂酶抑制剂，在降血脂方面具有非常明显的效果。银杏叶提取物黄酮在调节血脂、改善胰岛素抵抗方面已有30余年的历史，而葡萄籽提取物原花青素能够清除自由基，提高免疫力。将藏红花素、银杏叶提取物黄酮和葡萄籽提取物原花青素按照一定质量配比制成的降血脂药物被医学界所亲睐。
[0003]桅子提取物藏红花素的生产工艺有很多，目前国内外大多采用水渗鹿浸提法或有机溶剂(甲醇、乙醇、丙酮及含水有机溶剂等)法提取，结合大孔吸附树脂法精制的工艺路线，如CN200910042702.5.CN200710008780.4。有机溶剂浸提法需要大量的浸提溶剂，生产成本高，回收率低，容易造成活性物质结构的改变和活性的下降，。水渗鹿浸提法萃取周期长，浸提率低，因此原料利用率和生产效率低。
[0004]发明专利CN200910307800.7中通过`由微滤(MF)、超滤(UF)、纳滤(NF)、反渗透(RO)组成的膜系统分离纯化藏红花素，但是采用的水渗鹿浸提法延长了生产周期。发明专利CN201010190584.5中采用大孔吸附树脂层析法对藏红花素进行二次分离纯化，消耗了过量的提取、洗脱溶剂，增加成本。目前还未见融合在线膜分离和大孔吸附树脂柱层析纯化集成的工艺技术，以制备高纯度藏红花素。
[0005]本发明目的首先在于研制一种加入高效萃取剂的水浸提法代替现有溶剂法，并结合在线膜分离和大孔吸附树脂柱层析法高效制备高纯度的藏红花素。本发明的萃取剂及其提取、膜分离去杂、柱层析纯化工艺具有工艺简便、提取率高，产品质量好的显著优点，适用于工厂扩大化生产。
[0006]本发明目的还在于利用上述生产的高纯度藏红花素，研制一种具有高效协同降血脂作用的复合制剂配方。将藏红花素、银杏叶提取物黄酮和葡萄籽提取物原花青素按照一定质量配比制成的降血脂药物，充分利用三者在降血脂、抗氧化、调节胆固醇脂质代谢等方面的协同增效作用，复合的药物制剂具有明显的调节血脂功效，无副作用，并且可以有效的预防心脑血管相关疾病，促进血液循环，是三高人群的首选保健药品。
【发明内容】
[0007]本发明要解决的主要技术问题是:
(1)提供一种加入助溶剂的去离子水浸提、膜过滤分离除杂结合大孔吸附树脂层析法纯化藏红花素新工艺技术；
(2)提供一种具有降血脂功能的藏红花素、银杏叶提取物黄酮和葡萄籽提取物原花青素复合制剂的配方，该药物降血脂效果明显，无副作用。
[0008]本发明通过以下技术方案实现:
一种用于提取藏红花素的高效萃取剂按w/w的成分和配比为:
烷基酚与环氧乙烷缩合物或吐温-800.001~0.5
水补充至100
pH 值5.0 ~7.0
经多次优化的萃取剂按《/V的成分和配比为:
烷基酚与环氧乙烷缩合物或吐温-800.01~0.05
水补充至100
pH 值4.5 ~6.5
所述的萃取剂从烷基酚与环氧乙烷缩合物或吐温-80中选择。
[0009]一种用于藏红花素分离纯化的膜分离系统按截留分子量或孔径分:
微滤陶瓷膜0.1 μ m
微滤膜PP棉I~10 μ m
超滤膜10000~30000
一种天然藏红花素提取分离的工艺，所述的工艺包括以下步骤:
(I)将桅子干果清洗去杂，粉碎过筛后，加入所述的萃取剂，该萃取剂从烷基酚与环氧乙烷缩合物或吐温-80中选择，添加量按w/w比例为0.001-0.5，并补充水至100。
[0010](2)按w/w，将干净的桅子果按原料与浸提剂之比为1:10-50，投料浸提，浸提温度40~60°C，处理I~5小时，浸提过程中间歇搅拌原料，控制降温速度为I~10°C /小时，然后留取料液，再加入10~20倍于桅子果的萃取剂进行第二次提取，合并两次料液；
(3)将步骤(2)得到的料液经过离心机过滤，去除200目以下的杂质，料液冷却至30°C以下；
(4)将步骤(3)得到的滤液用微滤膜PP棉过滤，操作温度25~35°C，压力0.1~0.5Mpa ；
(5)将步骤(4)得到的滤液用超滤膜(UF)进一步过滤，操作温度25~35°C，压力0.05 ~0.1Mpa ；
(6)将步骤(5)得到的滤液流经大孔吸附树脂层析柱X吸附，依次用去离子水去除多糖、蛋白质类等微量亲水性杂质，得到洗脱液A ;用10~30%的低级醇冲洗树脂柱，得到洗脱液B ;然后用35~90%的醇冲洗树脂柱，得到洗脱液C ；
(7)将步骤(6)所述得到的洗脱液C在温度40°C以下真空浓缩，回收溶剂，得到浓缩液
C；
(8)将步骤(7) 得到的浓缩液干燥；
(9)将步骤(8)得到的产品用反相高效液相色谱法定量分析藏红花素(西红花苷及类似物)，并用紫外分光光度计法定量测定总色价；
(10)将步骤(8)得到的粉末产品与银杏叶提取物黄酮、葡萄籽提取物原花青素按照质量分数比，包括藏红花素2~10份，银杏叶提取物黄酮35~50份，葡萄籽提取物原花青素20~40份；
(11)将步骤(10)称取好的组分，混合均匀，按照常规方法制成胶囊剂、片剂、散剂或颗粒剂。
[0011]所述的原料可以是桅子鲜果或经干燥的桅子果，以及桅子叶、桅子花、桅子树枝或根等原料。
[0012]所述的工艺还包括从步骤(1)到步骤(6 )均在密闭容器内进行。
[0013]所述的工艺还包括:
(I)步骤(4)中的微滤包括孔径为0.1~10 μ m的纤维素膜、陶瓷膜或PP棉。
[0014](2)步骤(5)中的超滤膜为截留分子量为10000道尔顿聚砜或聚丙烯超滤膜。
[0015](3)步骤(6)中的大孔吸附树脂为弱极性或非极性树脂。
[0016](4)步骤(6)中的低级醇为乙醇或者甲醇。
[0017](5)将步骤(6)得到的醇洗脱液在真空条件下浓缩。
[0018]所述的生产工艺采用冷冻干燥或低温喷雾干燥或低温真空带式干燥将步骤(7)得到的浓缩液进行干燥。
[0019](6)将步骤(8)得到的粉末`与银杏叶提取物黄酮、葡萄籽提取物原花青素，混匀，加入其它辅料制成胶囊剂、片剂、散剂或颗粒剂降血脂药物。
[0020]更详细的技术方案如下所述:
一、浸提:将洗净的桅子果按原料与萃取剂之比为1:10~50(w/w)投料浸提罐中，浸提温度40~60°C，提取时间I~5小时，浸提过程中每小时间歇搅拌原料3次，每次I~5分钟，提取过程结束时，料液温度控制在50°C以下，滤除料液。向残余桅子果中加入10~20倍的萃取剂进行第二次提取，过程同上，合并两次料液；
二、过滤:将步骤一得到的料液温度降至30°C以下后，离心过滤，去除200目以下的杂质；得到的滤液经过孔径为I~IOym的PP棉过滤，操作温度25~35°C，压力0.1~0.5Mpa ;得到的滤液再用截留分子量10000道尔顿的聚砜超滤膜(UF)进一步过滤，操作温度 25 ~35°C，压力 0.05 ~0.1Mpa ；
三、精制:经步骤二得到的料液泵入已再生好的大孔树脂吸附柱X上，依次用I~5倍柱体积的去离子水过柱去除微量亲水性杂质；然后用10~30%的低级醇冲洗树脂柱X后；再用35-90%的醇溶液洗脱树脂柱，收集该浓度醇洗脱液；
四、浓缩:醇洗脱液在40°C以下真空浓缩，回收溶剂得藏红花素浸膏；
五、干燥:将步骤四藏红花素浓缩液低温喷雾干燥或真空冷冻干燥；
六、质检:依照公认的检验方法和国标进行。
[0021]七、降血脂药物配制:将步骤五干燥的粉末与银杏叶提取物黄酮、葡萄籽提取物原花青素按照质量比(2~10):(35~50):(20~40)，混匀，加入其它辅料制成胶囊剂、片剂、散剂或颗粒剂降血脂药物。
[0022]在上述工艺中，原料可以是桅子鲜果或经干燥的桅子果，以及桅子叶、桅子花、桅子树枝或根等原料。[0023]在上述工艺中，原料浸提至醇洗脱浓缩液，均在密闭容器内进行。
[0024]在上述工艺中，采用微滤包括孔径为0.1~10 μ m的纤维素膜、陶瓷膜或PP棉去除多糖、蛋白质等水溶性的大分子物质。
[0025]在上述工艺中，精制纯化所使用的吸附柱为对藏红花素(西红花苷及其类似物)有选择性吸附的大孔树脂柱，如D101、HP20、X-5、HPD300、H103、AB-8等。洗脱用的低级醇为乙醇或甲醇，推荐使用40-90%的乙醇。
[0026]在上述工艺中，可以采用冷冻干燥或喷雾干燥对藏红花素的浓缩液进行干燥。为了使产品有更好的内在质量和外观，建议采用真空冷冻干燥。
[0027]在上述工艺中银杏叶提取物黄酮、葡萄籽提取物原花青素通过商业途径购买所得，其银杏叶提取物中黄酮总含量> 24-28%，葡萄籽提取物中原花青含量≥ 90%。
[0028]经过多次生产总结，采用本发明的工艺方法生产藏红花素，产品得率为89.2%~93.5% (与原料的品种相关)，产品提取或利用率均达95%，生产周期为28-45小时，每生产I公斤上述藏红花素，乙醇消耗量低于6公斤。
[0029]
【权利要求】
1.一种天然藏红花素提取分离方法及其降血脂药物的制备，它包括水提取、膜过滤结合大孔吸附树脂柱层析；还包括藏红花素、银杏叶提取物黄酮和葡萄籽提取物原花青素降血脂药物复合制剂按照质量比的配方，其特征在于:包括以下步骤: (1)去离子水浸提:将桅子干果清洗去杂，粉碎过筛成20目粗粉，然后加入50~100倍的去离子水，加入1%的助溶剂，在温度40~50°C下浸提2次，每次4~6h，将提取液合并； (2)离心除杂:将提取液经过离心机进行分离除杂； (3)膜分离去多糖:经离心机分离除杂后的提取液，用微滤膜PP棉过滤，操作温度25~35°C，压力0.1~0.5Mpa ;得到的滤液用截留分子量为10000道尔顿的聚砜中空纤维式超滤膜(UF)进一步过滤，操作温度25~35 °C，压力0.05~0.1Mpa ； (4)大孔吸附树脂精制藏红花素:采用非极性大孔吸附树脂对步骤(3)中的滤液进行吸附，先用去离子水洗去杂质，再用20~30%醇溶液洗去桅子苷等极性较大的物质，最后用40~90%醇溶液洗脱目标物质，洗脱液浓缩后经喷雾干燥成高纯度藏红花素； (5)藏红花素产品品质:将步骤(4)所得产品用反相高效液相色谱法定量分析藏红花素(西红花苷及类似物)，并用紫外分光光度计法定量测定总色价； (6)降血脂药物的复配:将步骤(4)制备的高纯度藏红花素与银杏叶提取物黄酮、葡萄籽提取物原花青素按照质量分数配比成降血脂药物。
2.根据权利要求1所述的步骤(1)中萃取助溶剂，其特种在于所述的萃取助溶剂从烷基酚与环氧乙烷缩合物、吐温-80中选择。
3.根据权利要求1所述的步骤(2)中离心机，其特征在于所述的离心机从平板离心机、卧式离心机和碟式离心机中选择。
4.根据权利要求1所述的步骤(3)中的膜系统，其特征在于所用的膜是微滤陶瓷膜、微滤PP棉、中空式纤维超滤膜或卷式超滤膜。
5.根据权利要求1所述的步骤(4)中的低级醇为乙醇或甲醇。
6.根据权利要求1所述的步骤(4)中的干燥方式为冷冻干燥或低温喷雾干燥。
7.根据权利要求1所述的步骤(5)中的藏红花素检测方法，其特征在于所述的检测方案按照、GB7912-2010方法测定。
8.根据权利要求1所述的步骤(5)中的降血脂药物的复配，按照质量分数配比，包括步骤(4)制备的高纯度藏红花素2~10份，银杏叶提取物黄酮35~50份、葡萄籽提取物原花青素20~40份。
9.根据权利要求1步骤(5)和权利要求8所述，降血脂药物按照常规方法制成胶囊剂、片剂、散剂或颗粒剂。
【文档编号】A61P3/06GK103665059SQ201310652092
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年12月5日 优先权日:2013年12月5日
【发明者】何静仁, 刘莉, 段李歌, 蔡小双, 张瑞 申请人:武汉新国峰科技开发有限公司