一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂及其制备方法

一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂及其制备方法。该制备方法包括制备改性壳聚糖、制备栀子油、制备栀子苷、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽与配制壳聚糖喷雾剂等步骤。本发明的喷雾剂应用于治疗男女性外阴瘙痒与真菌感染，病菌感染，毛囊炎，阴道炎，还应用于褥疮与皮肤长期炎症的治疗等，应用十分广泛，它对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌或其它真菌的抗菌能力达到99％以上。
【专利说明】一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂及其制备方法 【【技术领域】】
[0001] 本发明属于医用药品【技术领域】。更具体地，本发明涉及一种抗菌改性壳聚糖喷雾 齐?，还涉及所述抗菌改性壳聚糖喷雾剂的制备方法， 【【背景技术】】
[0002] 壳聚糖是一种来源于甲壳类动物（蟹虾）的外壳及节肢类动物（蟑螂等）骨骼的 天然碱性高分子多糖，具有良好的生物相容性、生物可降解性以及抗菌、防腐、促进内皮细 胞、毛细血管、心肌细胞及神经轴突的再生，止血和促进伤口愈合等优良性能。研究表明，低 分子量壳聚糖具有人体易吸收，能够活化淋巴细胞、增强机体免疫力、抗菌抑菌、抑制肿瘤 细胞生长等生理活性，此外，研究发现，壳聚糖脱乙酰度越高，其清除羟自由基、超氧自由基 和有机自由基的效果越好。这些性质使它作为天然的抗菌剂、抗菌材料、防腐剂有着很好的 应用前景。
[0003] 随着喷雾容器日趋完善，新型抛射剂不断涌现，为适应现代社会快节奏的生活方 式和临床应用的需要，各种喷雾剂的制备工艺趋于成熟，在局部、全身治疗以及环境消毒等 方面应用更加广泛，充分显示其独特的优势，近年来发展较快，已成为目前医疗器械领域中 的一个重要分支。
[0004] 喷雾剂在局部治疗方面独显优势，因药液能够均匀分布于局部病患部位，并能迅 速吸收而发挥作用。目前，在治疗烧伤、烫伤效果显著，治愈率均在90%以上。在小儿湿疹、 花斑癣、闭合性骨伤、脚气及各种皮炎、妇科疾病、皮肤损伤以及体表溃疡、关节周围炎、防 治疤痕增生等方面的临床需求呈上升趋势。
[0005]目前，人们利用壳聚糖制备出喷雾剂，例如CN102846655A公开了一种抗菌喷雾剂 及其制备方法，该喷雾剂由水、壳聚糖、甘油、聚六亚甲基胍、维生素Ε制成，其中0. 01 %壳 聚糖难以发挥抗菌效果，抗菌主体聚六亚甲基胍是一种合成的高分子聚合物，主要用于水 产品因细菌引起的各种疾病的预防和治疗。CN102860567A公开了一种壳聚糖保鲜喷雾剂， 它由、壳聚糖、食用胶、冰醋酸、柠檬酸与水制成，但它没有清楚说明壳聚糖的分子量及脱乙 酰度，也没有评价它的抗菌、防腐保鲜效果。CN102524316B公开了一种壳聚糖基橡胶树割面 防冻抗菌喷雾剂及其制备方法，该喷雾剂含有壳聚糖、茶树精油、聚乙烯醇、植物生长调节 剂等，它同样没有清楚说明壳聚糖的分子量及脱乙酰度，也没有评价它的抗菌效果。
[0006] 另外，目前尚未见到有关利用壳聚糖作为主要原料制备泡沫剂的专利。目前应用 的壳聚糖是主要是高分子壳聚糖，也未见到通过对壳聚糖改性，控制其分子量和脱乙酰度 来提高泡沫剂抗菌作用的相关报道。
[0007] 本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点，解决目前缺乏纯壳聚糖类环保、 高效抗菌喷雾剂等问题，提出一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂的制备方法，获得的喷雾剂具有 喷雾效果好，药液能够均匀分布于病患部位，并能迅速吸收而发挥作用，抗菌广谱，同时能 够促进病灶细胞修复与愈合生长，可应用于病患的局部、全身治疗。 【
【发明内容】
】
[0008][要解决的技术问题]
[0009] 本发明的目的是提供一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂。
[0010] 本发明的另一个目的是提供所述抗菌改性壳聚糖喷雾剂的制备方法。
[0011][技术方案]
[0012] 本发明是通过下述技术方案实现的。
[0013] 本发明涉及一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂的制备方法。
[0014] 该抗菌改性壳聚糖喷雾剂制备方法的步骤如下：
[0015]A、制备改性壳聚糖
[0016] 将脱乙酰度80%、分子量20X104?30X104Da的壳聚糖溶解于以重量计1. 0? 3. 0%醋酸水溶液中，再加入为壳聚糖重量1?3倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在超 声波清洗机中进行超声处理，得到低分子量壳聚糖复合物溶液，再经过聚丙烯腈超滤膜分 子截留与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计35?45% 氢氧化钾水溶液中，在温度105?115°C的条件下处理10?20min，接着用1. 0?3. 0N盐 酸水溶液进行中和、过滤、蒸馏水洗涤、干燥，得到脱乙酰度99?100%、分子量为500Da以 下的改性壳聚糖；
[0017]B、制备桅子油
[0018] 往80?120重量份桅子粉中加入700?900重量份石油经，然后在超声波清洗机 中进行超声提取，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用500?700重量份石油醚以同样 方式重复超声提取2?3次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度60?90°C的条件下除去 合并滤液中的石油烃，得到桅子油；
[0019] C、制备桅子苷
[0020] 往80?120重量份桅子粉中加入800?1200重量份以体积计70?80%乙醇水 溶液，然后在超声波清洗机中进行超声提取，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着以同样 方式重复超声提取2?3次，滤液合并，然后在流速为20?30微升/秒的条件下通过非极 性大孔吸附树脂柱和在流速为30?37微升/秒的条件下通过聚酰胺柱，接着使用浓度以 体积计15?25%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱，得到的洗脱液在旋转蒸发器中在减压 蒸馏的条件下处理得到桅子苷；
[0021]D、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽
[0022] 将新鲜螺旋藻在低温细胞破碎机中在4°C?6°C低温条件下处理12?18分钟，得 到的处理液再经过低温超速离心机在温度4°C?6°C条件下进行离心处理，接着使用低温 过滤设备在温度2°C?5°C的条件下过滤，然后在温度2°C?8°C的条件下使用截留分子量 为10kD的渗透膜进行膜渗透处理，得到螺旋藻多糖与螺旋藻多肽；
[0023]E、配制壳聚糖喷雾剂
[0024] 将2. 5?3. 2重量份在步骤A得到的改性壳聚糖溶解于6?15重量份浓度以重 量计0. 8?1. 2%醋酸水溶液中，然后往所得到的溶液中加入0. 8?1. 2重量份吐温60、 0. 8?1. 2重量份月桂酰胺丙基甜菜碱，混合均匀，再加入0. 3?0. 8重量份在步骤C得到 的桅子苷、〇. 1?〇. 4重量份在步骤B得到的桅子油、0. 1?0. 4重量份在步骤D得到的螺 旋藻多肽、0. 1?0. 4重量份在步骤D得到的螺旋藻多糖，混合均匀，最后加入0. 1?0. 4重 量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸馏水将其总重量达到100重量份，得到所述的抗菌改性壳 聚糖喷雾剂。
[0025] 根据本发明的一种优选实施方式，在步骤A中，脱乙酰度80 %壳聚糖在醋酸水溶 液中在搅拌速度250?350rpm的条件下溶解5?15min。
[0026] 根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤A中，得到的溶液在超声频率22kHz与 超声功率为200W的条件下超声处理35?45min。
[0027] 根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤B中，所述的滤渣在第1次超声提取 时，桅子粉与石油烃的重量比是90?110 :750?850 ;在第2次或第3次超声提取时，桅子 粉与石油烃的重量比是90?110 :550?650。
[0028] 根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤C中，所述的大孔吸附树脂是由苯乙 烯与二乙烯苯共聚合制备得到的非极性D10ULX-60或LX-20型树脂；所述的聚酰胺是由己 内酰胺或己二酸与己二胺合成制备得到的高分子聚酰胺。
[0029] 根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤C中，所述大孔吸附树脂柱的洗脱剂 或所述聚酰胺柱的洗脱剂是浓度以体积计18?22%乙醇水溶液。
[0030] 根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤D中，所述的渗透膜是由聚醚砜、三醋 酸纤维素或再生纤维素制备的渗透膜。
[0031] 根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤D中，所述的低温超速离心机的转速 是20000?30000转/分钟。
[0032] 根据本发明的另一种优选实施方式，改性壳聚糖、吐温60、月桂酰胺丙基甜菜碱、 桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、螺旋藻多糖与烯丙基三丁基溴化膦的重量比是2. 8?3. 0 : 0. 85 ?1. 12 :0. 85 ?1. 12 :0. 45 ?0. 65 :0. 15 ?0. 24 :0. 15 ?0. 26 :0. 15 ?0. 25 :0. 15 ? 0· 24。
[0033] 本发明还涉及采用所述制备方法得到的抗菌改性壳聚糖喷雾剂。所述的抗菌改性 壳聚糖喷雾剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌或其它真菌的 抗囷能力达到99%以上。
[0034] 下面将更详细地描述本发明
[0035] 本发明涉及一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂的制备方法。
[0036] 本发明以纯天然生物质壳聚糖为主要基质，通过调整其分子量，改变其脱乙酰度， 再与其它增效剂配合使用，同时辅以能够促进组织细胞修复的营养与生长调节辅料等的组 合，制备了新型的壳聚糖抗菌喷雾剂，在治疗妇科疾病、皮肤损伤以及体表溃疡、男女性外 阴骚痒、小儿湿疹、花斑癣、脚气及各种皮炎等的治疗方面独显优势。
[0037] 本发明改性壳聚糖抗菌喷雾剂制备方法的步骤如下：
[0038]A、制备改性壳聚糖
[0039] 将脱乙酰度80%、分子量20X104?30X104Da的壳聚糖溶解于以重量计1. 0? 3. 0%醋酸水溶液中，再加入为壳聚糖重量1?3倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在超 声波清洗机中进行超声处理，得到低分子量壳聚糖复合物溶液，再经过聚丙烯腈超滤膜分 子截留与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计35?45% 氢氧化钾水溶液中，在温度105?115°C的条件下处理10?20min，接着用1. 0?3. 0N盐 酸水溶液进行中和、过滤、蒸馏水洗涤、干燥，得到脱乙酰度99?100%、分子量为500Da以 下的改性壳聚糖。
[0040] 壳聚糖（β-(1 -4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖）的化学结构为带阳离子的高 分子碱性多糖聚合物，是自然界唯一带正电荷、阳离子食用纤维；它具有物理性能稳定、良 好的溶解性、亲水吸湿性、生物降解性、生物相容性和成膜性、粘结性、透气性等理化性能。
[0041] 在步骤A中，脱乙酰度80 %壳聚糖在醋酸水溶液中在搅拌速度250?350rpm的条 件下溶解5?15min。
[0042] 本发明使用的壳聚糖是目前市场上销售的产品，例如由济南海得贝海洋生物工程 有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的产品。
[0043] 在这个步骤加入二叔戊基过氧化物（Di-tert-amylperoxide)的作用是通过过氧 化物的作用使壳聚糖分子链产生断裂，形成低分子壳聚糖，使用有机过氧化物而不是采用 过氧化氢的目的是使断链过程温和可控，而不会产生无法控制的断链反应。
[0044] 本发明使用的二叔戊基过氧化物是目前市场上销售的产品，例如由泰州市海翔化 工有限公司以商品名叔戊基过氧化物销售的产品。
[0045] 在本发明中，超声波清洗处理的目的在于让高分子量壳聚糖醋酸水溶液在超声波 频率20?25kHz与功率180?220W的条件下进行超声波处理30?50分钟，得到低分子 量壳聚糖复合物溶液。优选地，高分子量壳聚糖醋酸水溶液在超声频率22kHz与超声功率 为200W的条件下超声处理35?45min。
[0046] 本发明使用的超声波清洗机是目前市场上销售的产品，例如由.常州市佑达超声 波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的产品。
[0047] 本发明通过分子超滤技术，将壳聚糖分级，截取分子量小于500Da的具有最佳分 子水平范围的壳聚糖，然后通过再次脱乙酰化，得到高脱乙酰度、低分子量、分子量分布窄 的改性壳聚糖，大大提高抗菌广谱性能。
[0048] 聚丙烯腈超滤膜通常是一种具有良好的生物学惰性、化学稳定性、热稳定性的疏 水性超滤膜。
[0049] 用聚丙烯腈超滤膜进行分级是一种将分子量大于500Da的壳聚糖分子截留，而让 分子量小于500Da的壳聚糖分子通过的操作。壳聚糖的分子量是采用常规凝胶渗透色谱方 法测定得到的。
[0050] 本发明使用的聚丙烯腈超滤膜的性能如下：厚度50-90μm、单位重量2. 1-3. 4mg/ cm2、孔隙率75-81 %、强度大于15pst。
[0051] 本发明使用的聚丙烯腈超滤膜是目前市场上销售的产品，例如由招远金汇膜科技 有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜销售的产品。
[0052] 在分级后，让收集的分子量为500Da以下的壳聚糖分子部分在热空气干燥设备中 在温度60°C的条件下干燥至含水量低于6%。
[0053] 接着，对所得到的分子量为500Da以下的壳聚糖分子用碱进行改性，即进一步脱 乙酰化处理。
[0054] 在这个改性步骤中，洗涤的目的在于去除中和产生的盐及其它杂质。干燥的目的 在于去除水分，这个干燥步骤所使用的设备与前面描述的相同，干燥温度条件也与前面描 述的相同。
[0055] B、制备桅子油
[0056]往80?120重量份桅子粉中加入700?900重量份石油烃，然后在超声波清洗机 中进行超声提取，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用500?700重量份石油醚以同样 方式重复超声提取2?3次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度60?90°C的条件下除去 合并滤液中的石油烃，得到桅子油；
[0057] 桅子粉是目前市场上销售的产品，例如由广州南北行中药饮片有限公司以商品名 桅子销售的产品。桅子粉的粒度一般是60?100目。
[0058] 石油烃也是目前市场上销售的产品，例如由广州化学试剂公司以商品名石油醚销 售的产品。
[0059] 在这个步骤中，用石油烃从桅子粉中提取油溶性成分桅子油。
[0060] 在这个步骤中，所述的滤渣在第1次超声提取时，桅子粉与石油烃的重量比是 90?110 :750?850 ;在第2次或第3次超声提取时，桅子粉与石油烃的重量比是90? 110 :550 ?650。
[0061] 这个步骤使用的超声波清洗机及其超声处理条件如前面所述，在此不再赘述。
[0062] C、制备桅子苷
[0063] 往80?120重量份桅子粉中加入800?1200重量份以体积计70?80%乙醇水 溶液，然后在超声波清洗机中进行超声提取，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着以同样 方式重复超声提取2?3次，滤液合并，然后在流速为20?30微升/秒的条件下通过非极 性大孔吸附树脂柱和在流速为30?37微升/秒的条件下通过聚酰胺柱，接着使用浓度以 体积计15?25%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱，得到的洗脱液在旋转蒸发器中在减压 蒸馏的条件下处理得到桅子苷；
[0064] 这个步骤使用的桅子粉的粒度一般是60?100目。
[0065] 在这个步骤中，用乙醇水溶液从桅子粉中提取醇溶性成分桅子苷。
[0066] 在这个步骤中，使用的超声波清洗机及其超声处理条件如前面所述，在此不再赘 述。
[0067] 在这个步骤中，所得到的滤液用非极性大孔吸附树脂处理的目的在于分离桅子苷 与桅子黄色素及其它杂质。本发明使用的大孔吸附树脂是由苯乙烯与二乙烯苯共聚合制备 得到的非极性D101、LX-60或LX-20型树脂，例如由西安蓝晓科技新材料股份有限公司以商 品名大孔树脂销售的D101、LX-60、LX-20大孔吸附树脂。
[0068] 在本发明中，所述滤液通过所述树脂床的流速小于20微升/秒，则会影响流出时 间；如果所述的流速大于30微升/秒，则会使吸附与分离不完全。因此，所述的流速为20? 30微升/秒是恰当的，优选地是22?28微升/秒，更优选地是24?26微升/秒。
[0069] 所述树脂床的流出液接着通过聚酰胺柱，其目的在于进一步分离色素及杂质成 分，纯化样品。
[0070] 所述的聚酰胺是由己内酰胺或己二酸与己二胺合成制备得到的高分子聚酰胺。本 发明使用的高分子聚酰胺是由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂以商品名聚酰胺树脂销售 的聚酰胺。
[0071] 在本发明中，所述树脂床流出液通过所述聚酰胺柱的流速小于30微升/秒，则会 影响流出时间；如果所述的流速大于37微升/秒，则会影响分离效果。因此，所述的流速为 30?37微升/秒是恰当的，优选地是32?36微升/秒，更优选地是34?36微升/秒。
[0072] 优选地，所述大孔吸附树脂柱的洗脱剂或所述聚酰胺柱的洗脱剂是浓度以体积计 18?22%乙醇水溶液。
[0073] 得到的洗脱液在广州星烁仪器有限公司以商品名RE-301型旋转蒸发器销售的旋 转蒸发器中在压力〇. 002-0. 098MPa的条件下进行减压蒸馏。
[0074] D、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽
[0075] 将新鲜螺旋藻在低温细胞破碎机中在4°C?6°C低温条件下处理12?18分钟，得 到的处理液再经过低温超速离心机在温度4°C?6°C条件下进行离心处理，接着使用低温 过滤设备在温度2°C?5°C的条件下过滤，然后在温度2°C?8°C的条件下使用截留分子量 为10kD的渗透膜进行膜渗透处理，得到螺旋藻多糖与螺旋藻多肽；
[0076] 螺旋藻（SpirulinaplatensisGeitl.)是一类低等生物，原核生物，由单细胞或多 细胞组成的丝状体，体长200-500μm，宽5-10μm，圆柱形，呈疏松或紧密的有规则的螺旋 旋形弯曲。它具有减轻癌症放疗、化疗的毒副反应，提高免疫功能，降低血脂等功效。
[0077] 本发明使用的低温细胞破碎机是目前市场上销售的产品，例如由广州聚能生物科 技有限公司公司以商品名JN-02C低温连续流细胞破碎机销售的产品。
[0078] 在这个步骤中，所述的低温超速离心机的转速是20000?30000转/分钟。本发 明使用的低温超速离心机是目前市场上销售的产品，例如由美国贝克曼库尔特有限公司公 司以商品名XPN-80超速离心机销售的产品。
[0079] 所述的低温过滤设备是目前市场上销售的产品，例如由东莞龙田过滤设备有限公 司以商品名LT600保温夹套过滤器销售的产品。
[0080] 本发明使用的渗透膜是目前市场上销售的产品，例如由美国海德能公司以商品名 QUALSEPDairyRO系列浓缩分离膜销售的产品。
[0081] 在这个步骤中，膜渗透处理是在2°C?8°C低温条件下进行。
[0082] 膜渗透处理所得到的产物采用常规的红外光谱、质谱分析方法分析确定其螺旋藻 多糖和螺旋藻多肽。
[0083]E、配制壳聚糖喷雾剂
[0084] 将2. 5?3. 2重量份在步骤A得到的改性壳聚糖溶解于6?15重量份浓度以重 量计0. 8?1. 2%醋酸水溶液中，然后往所得到的溶液中加入0. 8?1. 2重量份吐温60、 0. 8?1. 2重量份月桂酰胺丙基甜菜碱，混合均匀，再加入0. 3?0. 8重量份在步骤C得到 的桅子苷、〇. 1?〇. 4重量份在步骤B得到的桅子油、0. 1?0. 4重量份在步骤D得到的螺 旋藻多肽、0. 1?0. 4重量份在步骤D得到的螺旋藻多糖，混合均匀，最后加入0. 1?0. 4重 量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸馏水将其总重量达到100重量份。
[0085] 优选地，改性壳聚糖、吐温60、月桂酰胺丙基甜菜碱、桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、 螺旋藻多糖与烯丙基三丁基溴化膦的重量比是2. 8?3. 0 :0· 85?1. 12 :0· 85?1. 12 : 0. 45 ?0. 65 :0. 15 ?0. 24 :0. 15 ?0. 26 :0. 15 ?0. 25 :0. 15 ?0. 24。
[0086] 本发明使用的吐温60的作用在于能够稳定桅子油及桅子苷，使其不会在喷雾剂 中出现分层、分离现象；它是目前市场上销售的产品，例如由江苏省海安石油化工厂以商品 名T-60销售的吐温60。
[0087] 本发明使用的月桂酰胺丙基甜菜碱的作用在于能够均匀分散螺旋藻多肽和螺旋 藻多糖，使其不会出现沉淀，同时，月桂酰胺丙基甜菜碱也能够起到进一步提升壳聚糖抗 菌效能的作用；它是目前市场上销售的产品，例如由上海中翔精细化工有限公司以商品名CAB35销售的产品。
[0088] 本发明还涉及采用所述制备方法得到的抗菌改性壳聚糖喷雾剂。本发明的抗菌改 性壳聚糖泡沫剂经过国家标准抑菌检测法（GB/T16886)检测分析，对金黄色葡萄球菌、大 肠杆菌、链球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌或其它真菌的抗菌能力达到99%以上。
[0089] 本发明的抗菌改性壳聚糖喷雾剂主体采用壳聚糖、桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、 螺旋藻多糖等天然产物，提高了喷雾剂的生物安全性与生产过程的环保。
[0090] 本发明的喷雾剂通过高脱乙酰度的小分子壳聚糖与桅子提取物、螺旋藻多糖提取 物的协同影响，充分发挥了壳聚糖多糖的抗菌作用，极大提高了喷雾剂整体抗有害微生物 作用，对细菌、病毒、真菌均具有明显杀灭效果。同时，桅子与螺旋藻的提取物具有生物活 性，能够达到促进受损皮肤、组织的愈合与生长，促进细胞代谢，增强肌肤的抗病能力。
[0091] 本发明通过加入少量桅子油，吐温60与月桂酰胺丙基甜菜碱两种非离子表面活 性剂，提高了产品的渗透扩散性能，使喷雾剂中的有效成分更容易与表皮产生作用，均匀扩 散，发挥治疗效果。
[0092] 本发明的喷雾剂应用于治疗男女性外阴瘙痒与真菌感染，病菌感染，毛囊炎，阴道 炎，还应用于褥疮与皮肤长期炎症的治疗等，应用十分广泛。
[0093][有益效果]
[0094] 本发明的有益效果是：
[0095] 本发明采用二叔戊基过氧化物与超声技术相结合的方式以降解壳聚糖，本发明 方法采用有机过氧化物，作用温和，减少壳聚糖氧化变色，再通过分子超滤技术，将壳聚糖 分级，截取分子量低于500Da的小分子壳聚糖，然后通过脱乙酰化，获得低分子量高脱乙酰 度、分子量分布窄的改性壳聚糖，其抗自由基与清除自由基能力大大提高，对提高了消炎能 力，病原微生物的作用能力也大大提高。
[0096] 本发明的抗菌改性壳聚糖喷雾剂主体采用壳聚糖、桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、 螺旋藻多糖等天然产物，提高了喷雾剂的生物安全性与生产过程的环保。
[0097] 本发明的喷雾剂通过高脱乙酰度的小分子壳聚糖与桅子提取物、螺旋藻多糖提取 物的协同影响，充分发挥了壳聚糖多糖的抗菌作用，极大提高了喷雾剂整体抗有害微生物 作用，对细菌、病毒、真菌均具有明显杀灭效果。同时，桅子与螺旋藻的提取物具有生物活 性，能够达到促进受损皮肤、组织的愈合与生长，促进细胞代谢，增强肌肤的抗病能力。
[0098] 本发明通过加入少量桅子油，吐温60与月桂酰胺丙基甜菜碱两种非离子表面活 性剂，提高了产品的渗透扩散性能，使喷雾剂中的有效成分更容易与表皮产生作用，均匀扩 散，发挥治疗效果。
[0099] 本发明的喷雾剂应用于治疗男女性外阴瘙痒与真菌感染，病菌感染，毛囊炎，阴道 炎，还应用于褥疮与皮肤长期炎症的治疗等，应用十分广泛。
[0100] 本发明的喷雾剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌或 其它真菌的抗菌能力达到99%以上。 【【具体实施方式】】
[0101] 通过下述实施例将能够更好地理解本发明。
[0102] 实施例1 :制备抗菌改性壳聚糖喷雾剂
[0103] 该实施例的实施步骤如下：
[0104] A、制备改性壳聚糖
[0105] 由济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的、脱乙酰 度80 %、分子量20X104Da的壳聚糖，在以重量计1. 6 %醋酸水溶液中在搅拌速度250rpm的 条件下溶解5min，再加入为壳聚糖重量1. 0倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理35min，得到低分子量壳聚糖复合物溶 液，再经过由招远金汇膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜销售的聚丙烯腈超滤膜 分子截留与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计35%氢 氧化钾水溶液中，在温度105°C的条件下处理lOmin，接着用1.6N盐酸水溶液进行中和、过 滤、蒸馏水洗涤、在温度60°C的条件下干燥，得到脱乙酰度99%、分子量为500Da以下的改 性壳聚糖；
[0106] B、制备桅子油
[0107] 往80重量份桅子粉中加入700重量份石油烃，然后在由常州市佑达超声波设备有 限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中在超声频率22kHz与超声功 率为200W的条件下超声处理35min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用500重量份石 油醚以同样方式重复超声提取2次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度60°C的条件下除 去合并滤液中的石油烃，得到桅子油；
[0108] C、制备桅子苷
[0109] 往80重量份桅子粉中加入800重量份以体积计70%乙醇水溶液，然后在由常州市 佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超声 频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理35min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣 接着以同样方式重复超声提取3次，滤液合并，然后在流速为26微升/秒的条件下通过由 西安蓝晓科技新材料股份有限公司以商品名大孔树脂销售的D101型大孔吸附树脂柱，接 着在流速30微升/秒的条件下通过由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂以商品名聚酰胺树 脂销售的聚酰胺柱，然后使用浓度以体积计15%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱，得到的 洗脱液在广州星烁仪器有限公司以商品名RE-301型旋转蒸发器销售的旋转蒸发器中在压 力0. 002-0. 098MPa的条件下进行减压蒸馏得到桅子苷；
[0110] D、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽
[0111] 将新鲜螺旋藻在由广州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低温连续流 细胞破碎机销售的低温细胞破碎机中在温度4°C低温条件下处理12分钟，得到的处理液 再经过由美国贝克曼库尔特有限公司公司以商品名XPN-80超速离心机销售的低温超速 离心机在温度4°C条件下进行离心处理，接着使用由东莞龙田过滤设备有限公司以商品名 LT600保温夹套过滤器销售的低温过滤设备在温度2°C的条件下过滤，然后在温度2°C的条 件下使用由美国海德能公司以商品名QUALSEPDairyRO系列浓缩分离膜销售的截留分子量 为10kD的渗透膜进行膜渗透处理，得到螺旋藻多糖与螺旋藻多肽；
[0112] E、配制壳聚糖喷雾剂
[0113] 将2. 5重量份在步骤A得到的改性壳聚糖溶解于6重量份浓度以重量计0. 8% 醋酸水溶液中，然后往所得到的溶液中加入0. 8重量份由江苏省海安石油化工厂以商品名T-60销售的吐温60、0. 8重量份由上海中翔精细化工有限公司以商品名CAB35销售的月桂 酰胺丙基甜菜碱，混合均匀，再加入〇. 3重量份在步骤C得到的桅子苷、0. 1重量份在步骤B 得到的桅子油、〇. 4重量份在步骤D得到的螺旋藻多肽、0. 2重量份在步骤D得到的螺旋藻 多糖，混合均匀，最后加入〇. 1重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸馏水将其总重量达到100 重量份。
[0114] 根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例制备的抗菌 改性壳聚糖泡沫剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓杆菌的抗菌能力均达到 99. 0%。
[0115] 实施例2 :制备抗菌改性壳聚糖喷雾剂
[0116] 该实施例的实施步骤如下：
[0117]A、制备改性壳聚糖
[0118] 由济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的、脱乙酰 度80 %、分子量24X104Da的壳聚糖，在以重量计3. 0 %醋酸水溶液中在搅拌速度320rpm的 条件下溶解5min，再加入为壳聚糖重量1. 6倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理38min，得到低分子量壳聚糖复合物溶 液，再经过由招远金汇膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜销售的聚丙烯腈超滤膜 分子截留与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计40%氢 氧化钾水溶液中，在温度105°C的条件下处理12min，接着用3. 0N盐酸水溶液进行中和、过 滤、蒸馏水洗涤、在温度60°C的条件下干燥，得到脱乙酰度100%、分子量为500Da以下的改 性壳聚糖；
[0119] B、制备桅子油
[0120] 往110重量份桅子粉中加入800重量份石油烃，然后在由常州市佑达超声波设备 有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中在超声频率22kHz与超声 功率为200W的条件下超声处理45min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用500重量份 石油醚以同样方式重复超声提取3次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度70°C的条件下 除去合并滤液中的石油烃，得到桅子油；
[0121] C、制备桅子苷
[0122] 往100重量份桅子粉中加入1060重量份以体积计75%乙醇水溶液，然后在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理45min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤 渣接着以同样方式重复超声提取2次，滤液合并，然后在流速为20微升/秒的条件下通过 由西安蓝晓科技新材料股份有限公司以商品名大孔树脂销售的LX-60型树脂大孔吸附树 脂柱，接着在流速32微升/秒的条件下通过由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂以商品名聚 酰胺树脂销售的聚酰胺柱，然后使用浓度以体积计22%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱， 得到的洗脱液在广州星烁仪器有限公司以商品名RE-301型旋转蒸发器销售的旋转蒸发器 中在压力0. 002-0. 098MPa的条件下进行减压蒸馏得到桅子苷；
[0123] D、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽
[0124] 将新鲜螺旋藻在由广州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低温连续流 细胞破碎机销售的低温细胞破碎机中在5°C低温条件下处理15分钟，得到的处理液再经过 由美国贝克曼库尔特有限公司公司以商品名XPN-80超速离心机销售的低温超速离心机在 温度4°C条件下进行离心处理，接着使用由东莞龙田过滤设备有限公司以商品名LT600保 温夹套过滤器销售的低温过滤设备在温度3°C的条件下过滤，然后在温度5°C的条件下使 用由美国海德能公司以商品名QUALSEP DairyRO系列浓缩分离膜销售的截留分子量为10kD 的渗透膜进行膜渗透处理，得到螺旋藻多糖与螺旋藻多肽；
[0125] E、配制壳聚糖喷雾剂
[0126] 将3. 2重量份在步骤A得到的改性壳聚糖溶解于14重量份浓度以重量计1. 0% 醋酸水溶液中，然后往所得到的溶液中加入〇. 9重量份由江苏省海安石油化工厂以商品名 T-60销售的吐温60、0. 9重量份由上海中翔精细化工有限公司以商品名CAB35销售的月桂 酰胺丙基甜菜碱，混合均匀，再加入〇. 5重量份在步骤C得到的桅子苷、0. 3重量份在步骤B 得到的桅子油、〇. 2重量份在步骤D得到的螺旋藻多肽、0. 4重量份在步骤D得到的螺旋藻 多糖，混合均匀，最后加入〇. 1重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸馏水将其总重量达到100 重量份。
[0127] 根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例制备的抗菌 改性壳聚糖泡沫剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓杆菌的抗菌能力均达到 99. 6%。
[0128] 实施例3:制备抗菌改性壳聚糖喷雾剂
[0129] 该实施例的实施步骤如下：
[0130] A、制备改性壳聚糖
[0131] 由济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的、脱乙酰 度80 %、分子量24X104Da的壳聚糖，在以重量计3. 0 %醋酸水溶液中在搅拌速度350rpm的 条件下溶解l〇min，再加入为壳聚糖重量2. 0倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理40min，得到低分子量壳聚糖复合物溶 液，再经过由招远金汇膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜销售的聚丙烯腈超滤膜 分子截留与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计38%氢 氧化钾水溶液中，在温度ll〇°C的条件下处理18min，接着用1. 0N盐酸水溶液进行中和、过 滤、蒸馏水洗涤、在温度60°C的条件下干燥，得到脱乙酰度99%、分子量为500Da以下的改 性壳聚糖；
[0132] B、制备桅子油
[0133] 往100重量份桅子粉中加入840重量份石油烃，然后在由常州市佑达超声波设备 有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中在超声频率22kHz与超声 功率为200W的条件下超声处理42min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用700重量份 石油醚以同样方式重复超声提取3次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度60°C的条件下 除去合并滤液中的石油烃，得到桅子油；
[0134] C、制备桅子苷
[0135] 往95重量份桅子粉中加入880重量份以体积计75 %乙醇水溶液，然后在由常州市 佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超声 频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理45min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣 接着以同样方式重复超声提取2次，滤液合并，然后在流速为24微升/秒的条件下通过由 西安蓝晓科技新材料股份有限公司以商品名大孔树脂销售的LX-20型树脂大孔吸附树脂 柱，接着在流速34微升/秒的条件下通过由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂以商品名聚酰 胺树脂销售的聚酰胺柱，然后使用浓度以体积计18%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱，得 到的洗脱液在广州星烁仪器有限公司以商品名RE-301型旋转蒸发器销售的旋转蒸发器中 在压力0. 002-0. 098MPa的条件下进行减压蒸馏得到桅子苷；
[0136] D、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽
[0137] 将新鲜螺旋藻在由广州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低温连续流 细胞破碎机销售的低温细胞破碎机中在4°C低温条件下处理18分钟，得到的处理液再经过 由美国贝克曼库尔特有限公司公司以商品名XPN-80超速离心机销售的低温超速离心机在 温度6°C条件下进行离心处理，接着使用由东莞龙田过滤设备有限公司以商品名LT600保 温夹套过滤器销售的低温过滤设备在温度2°C的条件下过滤，然后在温度3°C的条件下使 用由美国海德能公司以商品名QUALSEP DairyRO系列浓缩分离膜销售的截留分子量为10kD 的渗透膜进行膜渗透处理，得到螺旋藻多糖与螺旋藻多肽；
[0138] E、配制壳聚糖喷雾剂
[0139] 将3. 2重量份在步骤A得到的改性壳聚糖溶解于14重量份浓度以重量计1. 0% 醋酸水溶液中，然后往所得到的溶液中加入〇. 8重量份由江苏省海安石油化工厂以商品名 T-60销售的吐温60、0. 9重量份由上海中翔精细化工有限公司以商品名CAB35销售的月桂 酰胺丙基甜菜碱，混合均匀，再加入〇. 5重量份在步骤C得到的桅子苷、0. 2重量份在步骤B 得到的桅子油、〇. 4重量份在步骤D得到的螺旋藻多肽、0. 1重量份在步骤D得到的螺旋藻 多糖，混合均匀，最后加入〇. 4重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸馏水将其总重量达到100 重量份。
[0140] 根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例制备的抗菌 改性壳聚糖泡沫剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓杆菌的抗菌能力均达到 99. 8%。
[0141] 实施例4:制备抗菌改性壳聚糖喷雾剂
[0142] 该实施例的实施步骤如下：
[0143] A、制备改性壳聚糖
[0144] 由济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的、脱乙酰 度80 %、分子量26X104Da的壳聚糖，在以重量计2. 5 %醋酸水溶液中在搅拌速度250rpm的 条件下溶解8min，再加入为壳聚糖重量2. 0倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理40min，得到低分子量壳聚糖复合物溶 液，再经过由招远金汇膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜销售的聚丙烯腈超滤膜 分子截留与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计42%氢 氧化钾水溶液中，在温度115°C的条件下处理lOmin，接着用1. 0N盐酸水溶液进行中和、过 滤、蒸馏水洗涤、在温度60°C的条件下干燥，得到脱乙酰度99%、分子量为500Da以下的改 性壳聚糖；
[0145] B、制备桅子油
[0146] 往120重量份桅子粉中加入860重量份石油经，然后在由常州市佑达超声波设备 有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中在超声频率22kHz与超声 功率为200W的条件下超声处理42min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用700重量份 石油醚以同样方式重复超声提取3次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度60°C的条件下 除去合并滤液中的石油烃，得到桅子油；
[0147] C、制备桅子苷
[0148] 往90重量份桅子粉中加入920重量份以体积计80%乙醇水溶液，然后在由常州市 佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超声 频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理42min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤 渣接着以同样方式重复超声提取3次，滤液合并，然后在流速为30微升/秒的条件下通过 由西安蓝晓科技新材料股份有限公司以商品名大孔树脂销售的D101型树脂大孔吸附树脂 柱，接着在流速36微升/秒的条件下通过由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂以商品名聚酰 胺树脂销售的聚酰胺柱，然后使用浓度以体积计18%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱，得 到的洗脱液在广州星烁仪器有限公司以商品名RE-301型旋转蒸发器销售的旋转蒸发器中 在压力0. 002-0. 098MPa的条件下进行减压蒸馏得到桅子苷；
[0149] D、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽
[0150] 将新鲜螺旋藻在由广州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低温连续流 细胞破碎机销售的低温细胞破碎机中在6°C低温条件下处理18分钟，得到的处理液再经过 由美国贝克曼库尔特有限公司公司以商品名XPN-80超速离心机销售的低温超速离心机在 温度5°C条件下进行离心处理，接着使用由东莞龙田过滤设备有限公司以商品名LT600保 温夹套过滤器销售的低温过滤设备在温度3°C的条件下过滤，然后在温度2°C的条件下使 用由美国海德能公司以商品名QUALSEPDairyRO系列浓缩分离膜销售的截留分子量为10kD 的渗透膜进行膜渗透处理，得到螺旋藻多糖与螺旋藻多肽；
[0151]E、配制壳聚糖喷雾剂
[0152] 将2. 8重量份在步骤A得到的改性壳聚糖溶解于10重量份浓度以重量计1. 1% 醋酸水溶液中，然后往所得到的溶液中加入1. 2重量份由江苏省海安石油化工厂以商品名 T-60销售的吐温60、1. 0重量份由上海中翔精细化工有限公司以商品名CAB35销售的月桂 酰胺丙基甜菜碱，混合均匀，再加入〇. 8重量份在步骤C得到的桅子苷、0. 4重量份在步骤B 得到的桅子油、〇. 2重量份在步骤D得到的螺旋藻多肽、0. 3重量份在步骤D得到的螺旋藻 多糖，混合均匀，最后加入〇. 2重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸馏水将其总重量达到100 重量份。
[0153] 根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例制备的抗菌 改性壳聚糖泡沫剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓杆菌的抗菌能力均达到 99. 1%。
[0154] 实施例5 :制备抗菌改性壳聚糖喷雾剂
[0155] 该实施例的实施步骤如下：
[0156] A、制备改性壳聚糖
[0157] 由济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的、脱乙酰 度80 %、分子量24X104Da的壳聚糖，在以重量计1. 6 %醋酸水溶液中在搅拌速度270rpm的 条件下溶解l〇min，再加入为壳聚糖重量2. 5倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理42min，得到低分子量壳聚糖复合物溶 液，再经过由招远金汇膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜销售的聚丙烯腈超滤膜 分子截留与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计45%氢 氧化钾水溶液中，在温度105°C的条件下处理12min，接着用3.ON盐酸水溶液进行中和、过 滤、蒸馏水洗涤、在温度60°C的条件下干燥，得到脱乙酰度100%、分子量为500Da以下的改 性壳聚糖；
[0158] B、制备桅子油
[0159] 往105重量份桅子粉中加入820重量份石油烃，然后在由常州市佑达超声波设备 有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中在超声频率22kHz与超声 功率为200W的条件下超声处理45min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用500重量份 石油醚以同样方式重复超声提取2次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度70°C的条件下 除去合并滤液中的石油烃，得到桅子油；
[0160] C、制备桅子苷
[0161] 往100重量份桅子粉中加入1000重量份以体积计75%乙醇水溶液，然后在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理45min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤 渣接着以同样方式重复超声提取3次，滤液合并，然后在流速为25微升/秒的条件下通过 由西安蓝晓科技新材料股份有限公司以商品名大孔树脂销售的LX-60型树脂大孔吸附树 脂柱，接着在流速37微升/秒的条件下通过由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂以商品名聚 酰胺树脂销售的聚酰胺柱，然后使用浓度以体积计20%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱， 得到的洗脱液在广州星烁仪器有限公司以商品名RE-301型旋转蒸发器销售的旋转蒸发器 中在压力0. 002-0. 098MPa的条件下进行减压蒸馏得到桅子苷；
[0162] D、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽
[0163] 将新鲜螺旋藻在由广州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低温连续流 细胞破碎机销售的低温细胞破碎机中在6°C低温条件下处理18分钟，得到的处理液再经过 由美国贝克曼库尔特有限公司公司以商品名XPN-80超速离心机销售的低温超速离心机在 温度5°C条件下进行离心处理，接着使用由东莞龙田过滤设备有限公司以商品名LT600保 温夹套过滤器销售的低温过滤设备在温度3°C的条件下过滤，然后在温度2°C的条件下使 用由美国海德能公司以商品名QUALSEP DairyRO系列浓缩分离膜销售的截留分子量为10kD 的渗透膜进行膜渗透处理，得到螺旋藻多糖与螺旋藻多肽；
[0164] E、配制壳聚糖喷雾剂
[0165] 将2. 6重量份在步骤A得到的改性壳聚糖溶解于10重量份浓度以重量计1. 1% 醋酸水溶液中，然后往所得到的溶液中加入1. 〇重量份由江苏省海安石油化工厂以商品名 T-60销售的吐温60、1. 0重量份由上海中翔精细化工有限公司以商品名CAB35销售的月桂 酰胺丙基甜菜碱，混合均匀，再加入〇. 3重量份在步骤C得到的桅子苷、0. 4重量份在步骤B 得到的桅子油、0. 1重量份在步骤D得到的螺旋藻多肽、0. 2重量份在步骤D得到的螺旋藻 多糖，混合均匀，最后加入〇. 3重量份烯丙基三丁基溴化膦，用蒸馏水将其总重量达到100 重量份。
[0166] 根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例制备的抗菌 改性壳聚糖泡沫剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓杆菌的抗菌能力均达到 99. 4%。
[0167] 实施例6 :制备抗菌改性壳聚糖喷雾剂
[0168] 该实施例的实施步骤如下：
[0169]A、制备改性壳聚糖
[0170] 由济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的、脱乙酰 度80 %、分子量24X104Da的壳聚糖，在以重量计1. 6 %醋酸水溶液中在搅拌速度270rpm的 条件下溶解l〇min，再加入为壳聚糖重量2. 5倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理42min，得到低分子量壳聚糖复合物溶 液，再经过由招远金汇膜科技有限公司以商品名UFbIA250-PAN膜销售的聚丙烯腈超滤膜 分子截留与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计35%氢 氧化钾水溶液中，在温度105°C的条件下处理12min，接着用3.ON盐酸水溶液进行中和、过 滤、蒸馏水洗涤、在温度60°C的条件下干燥，得到脱乙酰度99%、分子量为500Da以下的改 性壳聚糖；
[0171] B、制备桅子油
[0172] 往90重量份桅子粉中加入900重量份石油烃，然后在由常州市佑达超声波设备有 限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中在超声频率22kHz与超声功 率为200W的条件下超声处理35min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用500重量份石 油醚以同样方式重复超声提取2次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度90°C的条件下除 去合并滤液中的石油烃，得到桅子油；
[0173] C、制备桅子苷
[0174] 往120重量份桅子粉中加入1200重量份以体积计74%乙醇水溶液，然后在由常州 市佑达超声波设备有限公司以商品名YD1008超声波清洗机销售的超声波清洗机中，在超 声频率22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理38min，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤 渣接着以同样方式重复超声提取2次，滤液合并，然后在流速为23微升/秒的条件下通过 由西安蓝晓科技新材料股份有限公司以商品名大孔树脂销售的LX-20型树脂大孔吸附树 脂柱，接着在流速35微升/秒的条件下通过由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂以商品名聚 酰胺树脂销售的聚酰胺柱，然后使用浓度以体积计25%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱， 得到的洗脱液在广州星烁仪器有限公司以商品名RE-301型旋转蒸发器销售的旋转蒸发器 中在压力0. 002-0. 098MPa的条件下进行减压蒸馏得到桅子苷；
[0175] D、制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽
[0176] 将新鲜螺旋藻在由广州聚能生物科技有限公司公司以商品名JN-02C低温连续流 细胞破碎机销售的低温细胞破碎机中在4°C低温条件下处理14分钟，得到的处理液再经过 由美国贝克曼库尔特有限公司公司以商品名XPN-80超速离心机销售的低温超速离心机在
【权利要求】
1. 一种抗菌改性壳聚糖喷雾剂的制备方法，其特征在于该制备方法的步骤如下： A、 制备改性壳聚糖 将脱乙酰度80%、分子量20X104?30X104Da的壳聚糖溶解于以重量计1. 0?3. 0% 醋酸水溶液中，再加入为壳聚糖重量1?3倍的二叔戊基过氧化物，得到的溶液在超声波清 洗机中进行超声处理，得到低分子量壳聚糖复合物溶液，再经过聚丙烯腈超滤膜分子截留 与分级，得到分子量为500Da以下的壳聚糖；把这种壳聚糖加到以重量计35?45%氢氧化 钾水溶液中，在温度105?115°C的条件下处理10?20min，接着用1. 0?3. 0N盐酸水溶 液进行中和、过滤、蒸馏水洗涤、干燥，得到脱乙酰度99?100%、分子量为500Da以下的改 性壳聚糖； B、 制备桅子油 往80?120重量份桅子粉中加入700?900重量份石油经，然后在超声波清洗机中进 行超声提取，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着用500?700重量份石油醚以同样方式 重复超声提取2?3次，滤液合并，采用水浴加热方式在温度60?90°C的条件下除去合并 滤液中的石油烃，得到桅子油； C、 制备桅子苷 往80?120重量份桅子粉中加入800?1200重量份以体积计70?80%乙醇水溶 液，然后在超声波清洗机中进行超声提取，过滤得到滤液与滤渣，所述的滤渣接着以同样方 式重复超声提取2?3次，滤液合并，然后在流速为20?30微升/秒的条件下通过非极性 大孔吸附树脂柱和在流速30?37微升/秒的条件下通过聚酰胺柱，接着使用浓度以体积 计15?25%乙醇水溶液洗脱剂从吸附柱洗脱，得到的洗脱液在旋转蒸发器中在减压蒸馏 的条件下处理得到桅子苷； D、 制备螺旋藻多糖与螺旋藻多肽 将新鲜螺旋藻在低温细胞破碎机中在4°C?6°C低温条件下处理12?18分钟，得到 的处理液再经过低温超速离心机在温度4°C?6°C条件下进行离心处理，接着使用低温过 滤设备在温度2°C?5°C的条件下过滤，然后在温度2°C?8°C的条件下使用截留分子量为 10kD的渗透膜进行膜渗透处理，得到螺旋藻多糖与螺旋藻多肽； E、 配制壳聚糖喷雾剂 将2. 5?3. 2重量份在步骤A得到的改性壳聚糖溶解于6?15重量份浓度以重量计 0. 8?1. 2%醋酸水溶液中，然后往所得到的溶液中加入0. 8?1. 2重量份吐温60、0. 8? 1. 2重量份月桂酰胺丙基甜菜碱，混合均匀，再加入0. 3?0. 8重量份在步骤C得到的桅子 苷、0. 1?0. 4重量份在步骤B得到的桅子油、0. 1?0. 4重量份在步骤D得到的螺旋藻多 肽、0. 1?0. 4重量份在步骤D得到的螺旋藻多糖，混合均匀，最后加入0. 1?0. 4重量份烯 丙基三丁基溴化膦，用蒸馏水将其总重量达到100重量份。
2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤A中，脱乙酰度80%壳聚糖在 醋酸水溶液中在搅拌速度250?350rpm的条件下溶解5?15min。
3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤A中，得到的溶液在超声频率 22kHz与超声功率为200W的条件下超声处理35?45min。
4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤B中，所述的滤渣在第1次超声 提取时，桅子粉与石油烃的重量比是90?110 :750?850 ;在第2次或第3次超声提取时， 桅子粉与石油烃的重量比是90?110 :550?650。
5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤C中，所述的大孔吸附树脂是由 苯乙烯与二乙烯苯共聚合制备得到的非极性D10ULX-60或LX-20型树脂；所述的聚酰胺是 由己内酰胺或己二酸与己二胺合成制备得到的高分子聚酰胺。
6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤C中，所述大孔吸附树脂柱的洗 脱剂或所述聚酰胺柱的洗脱剂是浓度以体积计18?22%乙醇水溶液。
7. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤C中，所述的渗透膜是由聚醚 砜、三醋酸纤维素或再生纤维素制备的渗透膜。
8. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在步骤D中，所述的低温超速离心机的 转速是20000?30000转/分钟。
9. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于改性壳聚糖、吐温60、月桂酰胺丙基甜 菜碱、桅子苷、桅子油、螺旋藻多肽、螺旋藻多糖与烯丙基三丁基溴化膦的重量比是2. 8? 3. 0 :0. 85 ?1. 12 :0. 85 ?1. 12 :0. 45 ?0. 65 :0. 15 ?0. 24 :0. 15 ?0. 26 :0. 15 ?0. 25 : 0. 15 ?0. 24。
10. 根据权利要求1-9中任一项权利要求所述制备方法得到的抗菌改性壳聚糖喷雾 齐?，其特征在于它对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、大肠杆菌、链球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌 或其它真菌的抗菌能力达到99%以上。
【文档编号】A61P17/02GK104042719SQ201410318861
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年7月7日 优先权日:2014年7月7日
【发明者】汤瑞明, 耿在云 申请人:江苏瑞京科技发展有限公司