本发明属于医药领域，具体涉及薏苡仁提取物在抗埃博拉病毒中的用途。
背景技术：
埃博拉病毒是引起发病且致死率高达90％的生物安全四级烈性病毒。自1976年首次被发现至今，埃博拉病毒已经在非洲肆虐了近40年。而最近一次，于2014年3月在几内亚、利比里亚和塞拉利昂为中心的西非地区蔓延的埃博拉病毒疫情，据数据统计，两年时间内共计吞噬超过1.13万条生命，确诊和可能感染病例超过2.85万例。由于其发病无明显季节性，人群普遍易感，无性别差异，世界卫生组织已将埃博拉病毒列为对人类危害最严重的病毒之一。多年来，全球的医药科研工作者一直致力于研发能够抑制该病毒的有效药物，但至今尚无特效的治疗方法，已知的很多抗病毒药物，如干扰素和利巴韦林等对埃博拉病毒均无效。
目前临床上对于感染埃博拉病毒的病人主要采取对症治疗的策略，包括注意水电解质平衡、控制出血，肾脏衰竭时进行透析治疗等。经研究发现，埃博拉病毒致病的原因主要在于两方面，一是对血管以及肝、脾、肾等脏器和免疫系统的破坏；二是抑制宿主的免疫反应，患者经常还没有出现有效的免疫反应就已经死亡，在感染晚期可发生脾脏、胸腺和淋巴结等大量淋巴细胞凋亡。
薏苡仁作为传统中药，系禾本科草本植物薏苡的成熟种仁，含有多种生物活性物质。从20世纪60年代开始，中外学者陆续报道了薏苡仁的抗肿瘤、免疫调节、降血糖血钙、降压、抗病毒及抑制胰蛋白酶、诱发排卵等方面的药理活性。其研究热点主要集中在薏苡仁提取或其各活性成分在抗肿瘤中的应用，且以薏苡仁油为活性成分的注射液已用于临床治疗原发性肝癌和非小细胞肺癌多年。关于其在抗病毒方面的报道，基本都是薏苡仁和其它多味中草药组合用药。就单独用药方面，仅张聿梅等在“薏苡化学成分及药理活性研究进展”一文中提到，薏苡仁甲醇提取物对epstein-barr病毒早期抗原(ebvea)激活作用有强烈的抑制活性,并分离出一个抗病毒活性成分，即α-单亚麻酯(中国药学杂志2002年1月第37卷第1期，第8-11页)。除此之外，未见薏苡仁或其活性成分单独用于抗病毒的研究，更何况是对于致病机制复杂、死亡率高、治愈率低，其尚无有效疫苗和治疗方法的埃博拉病毒，更是毫无记载。
本发明人多年致力于薏苡仁药用研究，将薏苡仁提取物，尤其是经本发明所述方法得到的薏苡仁提取物，在一定剂量范围内可显著抑制埃博拉病毒。
技术实现要素：
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本发明的目的在于提供一种将薏苡仁提取物在抗埃博拉病毒中的用途。
本发明的目的还在于提供一种抗埃博拉病毒的方法，包括：对需要治疗的哺乳动物给予有效量的薏苡仁提取物。
其中，薏苡仁提取物的有效量为：50-200ml/天/人。
所述埃博拉病毒包括以确定及尚未确定的各个亚型，其中确定的亚型为：即埃博拉-扎伊尔型(ebo-zaire)、埃博拉-苏丹型(ebo-sudan)、埃博拉-莱斯顿型(ebo-r)和埃博拉-科特迪瓦型(ebo-ci)。
所述薏苡仁提取物可以制成片剂、胶囊、胶囊剂、颗粒剂或注射剂。
上述制剂具体包括本发明所述薏苡仁提取物及一种或几种药学上可接受的载体。
其中，所述药学上可接受的载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、乳化剂、粘合剂、润滑剂、吸收促进剂、表面活性剂、崩解剂或抗氧化剂，必要时还可以加入香味剂、甜味剂、防腐剂或着色剂。
所述药学上可接受的载体可以选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、大豆磷脂、维生素c、维生素e、edta二钠、edta钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、羟苯乙酯溶液、苯甲酸、山梨酸钾、醋酸氯己定、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β-环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙或硬脂酸镁。
所述薏苡仁提取物是按照如下方法制得：
超临界二氧化碳萃取：取薏苡仁粉碎成10目～50目，采用超临界co2萃取器萃取，将薏苡仁粉装入萃取釜，用夹套循环热水加热co2预热器、萃取釜和分离柱，使萃取温度和分离温度分别达到33～45℃和30～45℃，保持一级解析釜和二级解析釜出口温度分别为20～50℃和15～35℃；液态co2流量按所萃取薏苡仁粉末质量计，以2.5kg～7.5kg/h·kg的流量经高压泵加压进入co2预热器，成为超临界状态下的流体，进入萃取釜，保持压力19～23mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的co2流体进入分离柱，控制分离柱压力7～10mpa，分离得到薏苡仁油；从分离柱出来的co2气体先后进入一级、二级解析釜，分别保持压力为5～7mpa和4～6mpa，弃去解析得到的水分等杂质，co2气体经冷凝器变成液 态co2，循环使用，连续萃取2～3h，即得。
优选的，上述制备方法还包括精制步骤，即石油醚溶解，水洗，脱色，再水洗，氧化铝处理后过滤。
所述精制步骤具体为：
将二氧化碳萃取得到的粗油加入工艺罐中，取样检测酸值，之后加入石油醚及约2％naoh，升温至30～40℃，混合15～20分钟，静置至少20小时；弃去底层,加2次纯化水进行水洗，第一次水洗后的静置时间不少于22小时，第二次水洗后的静置时间不少于46小时，弃去废弃物；加入丙酮破乳，乳液静置3小时，弃去底层，得“带溶薏苡仁油”；加入加热活化后的氧化铝脱水，搅拌30分钟以上，之后过滤得“脱水薏苡仁油”；脱水带溶油中加入加热活化的高岭土进行脱色，脱色温度41～47℃，时间30～35分钟，然后真空条件下升温至60-65℃脱溶；加入60～65℃的纯化水，搅拌20～30分钟，静置至少1小时后弃去下层废水，加热脱水，操作条件为100～115℃，真空度≥0.094mpa，处理时间不少于70分钟，得到“精炼薏苡仁油”；精炼油转移至不锈钢桶中，加入油重10％的活化氧化铝，在2～10℃条件下储存；油/氧化铝混合物以一套含3个20μ滤器的初滤器过滤，再经过一个0.2μ过滤器过滤去除氧化铝；过滤后，油在165±5℃加热2小时；冷却至60～80℃后，经过一个0.2μ过滤器进行终端过滤，之后装瓶，密封。
发明效果：
本发明所述薏苡仁提取物，原料易得、价格低廉，制备方法简便、易操作，适用于工业化生产；由于其化学成分的多元性，将其用于抗埃博拉病毒实现了多机制综合作用的结果，并且还具有病毒抑制率高，较少产生抗药性等优点。
附图说明：
图1不同浓度薏苡仁提取物的抗埃博拉病毒活性
具体实施方式：
以下通过实施例进一步说明本发明，但所述实施例仅用于理解本发明而不是限制本发明的范围。
实施例1薏苡仁提取物的制备
取薏苡仁粉碎成10目，采用超临界co2萃取器萃取，将薏苡仁粉装入萃取釜，用夹套循环热水加热co2预热器、萃取釜和分离柱，使萃取温度和分离温度分别达到33℃和35℃，保持一级解析釜和二级解析釜出口温度分别为20℃和15℃；液态co2流量按所萃取薏 苡仁粉末质量计，以2.5kg/h·kg的流量经高压泵加压进入co2预热器，成为超临界状态下的流体，进入萃取釜，保持压力19mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的co2流体进入分离柱，控制分离柱压力7mpa，分离得到薏苡仁油；从分离柱出来的co2气体先后进入一级、二级解析釜，分别保持压力为5mpa和4mpa，弃去解析得到的水分等杂质，co2气体经冷凝器变成液态co2，循环使用，连续萃取2h，即得。
实施例2薏苡仁提取物的制备
取薏苡仁粉碎成50目，采用超临界co2萃取器萃取，将薏苡仁粉装入萃取釜，用夹套循环热水加热co2预热器、萃取釜和分离柱，使萃取温度和分离温度分别达到40℃和45℃，保持一级解析釜和二级解析釜出口温度分别为50℃和35℃；液态co2流量按所萃取薏苡仁粉末质量计，以7.5kg/h·kg的流量经高压泵加压进入co2预热器，成为超临界状态下的流体，进入萃取釜，保持压力23mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的co2流体进入分离柱，控制分离柱压力10mpa，分离得到薏苡仁油；从分离柱出来的co2气体先后进入一级、二级解析釜，分别保持压力为7mpa和6mpa，弃去解析得到的水分等杂质，co2气体经冷凝器变成液态co2，循环使用，连续萃取3h，即得。
实施例3薏苡仁提取物的制备
超临界二氧化碳萃取：取薏苡仁粉碎成20目，采用超临界co2萃取器萃取，将薏苡仁粉装入萃取釜，用夹套循环热水加热co2预热器、萃取釜和分离柱，使萃取温度和分离温度分别达到35℃和40℃，保持一级解析釜和二级解析釜出口温度分别为30℃和25℃；液态co2流量按所萃取薏苡仁粉末质量计，以4kg/h·kg的流量经高压泵加压进入co2预热器，成为超临界状态下的流体，进入萃取釜，保持压力20mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的co2流体进入分离柱，控制分离柱压力8mpa，分离得到薏苡仁油；从分离柱出来的co2气体先后进入一级、二级解析釜，分别保持压力为6mpa和4mpa，弃去解析得到的水分等杂质，co2气体经冷凝器变成液态co2，循环使用，连续萃取2.5h，即得。
精制：将二氧化碳萃取得到的粗油加入工艺罐中，取样检测酸值，之后加入石油醚及约2％naoh，升温至40℃，混合15分钟，静置至少20小时；弃去底层，加2次纯化水进行水洗，第一次水洗后的静置时间不少于22小时，第二次水洗后的静置时间不少于46小时，弃去废弃物；加入丙酮破乳，乳液静置3小时，弃去底层，得“带溶薏苡仁油”；加入加热活化后的氧化铝脱水，搅拌30分钟以上，之后过滤得“脱水薏苡仁油”；脱水带溶油中加入加热活化的高岭土进行脱色，脱色温度47℃，时间30分钟，然后真空条件下升温至60℃脱溶；加入60～65℃的纯化水，搅拌30分钟，静置至少1小时后弃去下层废水，加热 脱水，操作条件为115℃，真空度≥0.094mpa，处理时间不少于70分钟，得到“精炼薏苡仁油”；精炼油转移至不锈钢桶中，加入油重10％的活化氧化铝，在2～10℃条件下储存；油/氧化铝混合物以一套含3个20μ滤器的初滤器过滤，再经过一个0.2μ过滤器过滤去除氧化铝；过滤后，油在165±5℃加热2小时；冷却至80℃后，经过一个0.2μ过滤器进行终端过滤，之后装瓶，密封。
实施例4薏苡仁提取物的制备
超临界二氧化碳萃取：取薏苡仁粉碎成35目，采用超临界co2萃取器萃取，将薏苡仁粉装入萃取釜，用夹套循环热水加热co2预热器、萃取釜和分离柱，使萃取温度和分离温度分别达到38℃和42℃，保持一级解析釜和二级解析釜出口温度分别为40℃和30℃；液态co2流量按所萃取薏苡仁粉末质量计，以5.5kg/h·kg的流量经高压泵加压进入co2预热器，成为超临界状态下的流体，进入萃取釜，保持压力21mpa，萃取薏苡仁油；溶有薏苡仁油的co2流体进入分离柱，控制分离柱压力9mpa，分离得到薏苡仁油；从分离柱出来的co2气体先后进入一级、二级解析釜，分别保持压力为7mpa和5mpa，弃去解析得到的水分等杂质，co2气体经冷凝器变成液态co2，循环使用，连续萃取2.5h，即得。
精制：将二氧化碳萃取得到的粗油加入工艺罐中，取样检测酸值，之后加入石油醚及约2％naoh，升温至30℃，混合20分钟，静置至少20小时；弃去底层，加2次纯化水进行水洗，第一次水洗后的静置时间不少于22小时，第二次水洗后的静置时间不少于46小时，弃去废弃物；加入丙酮破乳，乳液静置3小时，弃去底层，得“带溶薏苡仁油”；加入加热活化后的氧化铝脱水，搅拌30分钟以上，之后过滤得“脱水薏苡仁油”；脱水带溶油中加入加热活化的高岭土进行脱色，脱色温度41℃，时间35分钟，然后真空条件下升温至65℃脱溶；加入60～65℃的纯化水，搅拌20分钟，静置至少1小时后弃去下层废水，加热脱水，操作条件为100℃，真空度≥0.094mpa，处理时间不少于70分钟，得到“精炼薏苡仁油”；精炼油转移至不锈钢桶中，加入油重10％的活化氧化铝，在2～10℃条件下储存；油/氧化铝混合物以一套含3个20μ滤器的初滤器过滤，再经过一个0.2μ过滤器过滤去除氧化铝；过滤后，油在165±5℃加热2小时；冷却至60℃后，经过一个0.2μ过滤器进行终端过滤，之后装瓶，密封。
以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。
实施例5薏苡仁提取物对埃博拉病毒的抗病毒活性实验。
实验材料：
dmem高糖细胞培养基(hyclone公司)，胎牛血清(fbs)(gibco公司)，青霉素、 链霉素购自华北制药股份有限公司，磷酸生理盐水缓冲液(pbs)购自gibco公司，胰酶以及二甲亚砜(dmso)为sigma公司产品。veroe6细胞系(非洲绿猴肾细胞系)，埃博拉病毒real-timert-pcr试剂盒为深圳普瑞康生物技术有限公司产品。
实验方法：
以每孔5000个细胞的数量接种白壁底透96孔板(costar)，37℃5％co2条件下培养24h后长满80-90％。利用dmso将待测化合物溶解至100mm，作为化合物母液。利用含有2％fbs的dmem培养液稀释化合物，浓度梯度为3，细胞毒性实验浓度范围为100μg/ml～30ng/ml，抗病毒实验浓度为30μg/ml，10μg/ml，3μg/ml。将各稀释度化合物加入培养好的96孔板细胞中，每孔100μl。抗病毒实验中每孔感染100μl的埃博拉病毒替代模型。37℃co2条件下培养12天后，进行定量rt-pcr检测。
结果显示，薏苡仁提取物100μg/ml的浓度对veroe6细胞无细胞毒性。10μg/ml的薏苡仁提取物具有显著抗埃博拉病毒活性(表1)
表1薏苡仁提取物的抗埃博拉病毒活性
经过试验研究，凡是根据本发明方法制备得到的薏苡仁提取物均能达到上述治疗效果，在此不再一一列举。