本发明涉及一种新型苯基脲类化合物及其药学上可接受的盐作为调节雌激素相关受体ERR-alpha（Estrogen-related receptor alpha，ERR-alpha或ERRα）调节剂及其药物组合及其在制备预防和/或治疗乳腺癌、前列腺癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌或子宫内膜癌等肿瘤的药物中的用途。
背景技术：
ERRα于1988年由Giguere等克隆鉴定。作为孤儿核受体（Orphan nuclear receptor），ERRα内源性配体一直未被发现。ERRα在体内广泛表达，从心肌、消化道、大脑、骨骼肌、棕色脂肪以及乳腺癌、卵巢癌等恶性肿瘤等均能检出。ERRα与雌激素受体α（ERα）具有较高的同源性：DNA结合域（DNA binding domain, DBD）氨基酸相似性68%，配体结合域（Ligand binding domain, LBD）相似性33%。与雌激素受体ERα不同，ERRα不能与雌激素结合，但可与ERα竞争结合雌激素反应元件（Estrogen response elemnt, ERE）,识别序列为AGGTCAnnn TGACCT；而ERRα也能以单体或二聚体的形式结合一类I型类固醇生成因子反应元件TnAAGGTCA，也称为雌激素相关受体反应元件（ERR response element, ERRE），表明ERRα与ERα在识别DNA时有交叉重叠。
最近的研究提示，除了参与ER信号通路，ERRα在细胞能量代谢、线粒体氧化和生物合成等有重要生理作用，其功能的发挥影响着组织器官的发育、细胞的衰老、肿瘤的发生和发展等。
肿瘤生物学基础研究表明，孤儿核受体—雌激素相关受体α（ERRα）能促进激素依赖/非依赖的乳腺癌的生长、侵袭，促进血管平滑肌细胞增殖、内皮微管形成及肿瘤血管新生，意味着靶向ERRα的药物兼具抗乳腺癌的效应，为乳腺癌分子靶向治疗提供新策略。
近年来，研究揭示ERRα与雌激素相关的乳腺癌、子宫内膜癌和宫颈癌等雌激素依赖性肿瘤密切相关，更有研究表明众多非雌激素依赖性肿瘤如前列腺癌、胃腺癌和结直肠癌等的发生发展和临床预后也与ERRα的表达相关。临床研究证实，ERRα在乳腺癌、结肠癌、卵巢癌及前列腺癌等肿瘤中表达显著上调，是一个预后不良的独立风险因子。通过上调/下调ERRα表达或使用ERRα抑制剂，可以有效抑制缺氧基因的转录活性，从而降低体内实体瘤的血管生成与增长。这些研究表明，ERRα可能是多种肿瘤潜在的治疗靶点。ERRα反向激动剂XCT790抑制了多种肿瘤细胞的增殖及血管新生。ERRα反向激动剂SR16388有效抑制了裸鼠荷瘤模型中前列腺癌的增长。这些研究表明，靶向ERRα的调节剂有可能作为临床上有效的抗肿瘤药物。
综上所述，雌激素相关受体ERRα可作为多种肿瘤的新型治疗靶点，基于雌激素相关受体ERRα开发出来的小分子调节剂，极有可能成为治疗相关疾病肿瘤的新药物分子。
技术实现要素：
1、本发明的目的在于提供一类具有如下式I 结构的雌激素相关受体ERR-alpha调节剂或其药学上可接受的盐。
2、本发明的又一目的在于提供式I结构的化合物或其药学上可接受的盐。
3、本发明的再一目的在于提供式I所示化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗肿瘤疾病的药物中的应用。优选地，所述肿瘤疾病为乳腺癌、前列腺癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌或子宫内膜癌等肿瘤。
4、一种药物组合物，包括治疗有效量的权利要求1所述的式I化合物或其药学上可接受的盐。
5、根据权利要求4所述的要求组合物，其特征是，该药物组合物进一步含有一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
6、根据权利要求4所述的药物组合物，其特征是，所述的式I化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分占总重量比50%~99.5%。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行详细和具体的介绍，以更好的理解本发明，但下述实施例并不限制本发明范围，以下将详细说明本发明式I化合物的生物活性及药理学评价。
实施列1使用报告基因测试式I化合物对ERR-alpha的转录调节活性
本实施例阐明了本发明涉及的式I化合物可以有效地抑制人胚肾细胞HEK-293中ERR-alpha所调控的报告基因的表达，说明本发明所涉及的式I化合物有效地调控了ERR-alpha的功能。报告基因测试技术是本领域工作人员熟悉的技术。
我们利用GAL4融合受体激活法测试式I化合物对ERRs转录调控活性。GAL4融合受体激活法是基于哺乳动物细胞单杂交原理，即把受体LBD与酵母转录因子DBD构建成融合蛋白表达质粒，使受体的LBD充当活化域( Activation domain ,AD )。当把GAL4融合受体质粒与GAL4DNA反应元件( UAS )驱动的报告基因质粒共同转染细胞时，在受体激动剂的作用下，GAL4融合受体将结合到5×UAS上，驱动报告基因的表达。而在受体反向激动剂或拮抗剂的作用下，GAL4融合受体与5×UAS的结合减少，将抑制报告基因的表达。
在本发明的实验中，我们将Gal4-ERR-alpha质粒与表达5×UAS并偶联了萤火虫荧光素酶报告基因的质粒(以β-gal表达质粒作为内参)瞬时共转染进入哺乳动物HEK-293细胞中，加入不同浓度的式I化合物作用24h，检测荧光素酶和β-gal的活性变化。
1、转染：接种HEK-293细胞于6cm培养皿中，6 .0×104/皿，培养液为10％FBS DMEM，使其生长状态良好。37℃5％CO2培养24小时之后，将每孔6×103的细胞接种于96孔Costar细胞培养板，培养过夜。当细胞密度达到70％时，取50mL的无血清培养液(DMEM)于1.5mL的离心管中，然后加2mL的转染试剂3000Transfection Reagent，用手轻弹几次，混合之后室温放置5min。按重组质粒与3000Transfection Reagent以1:5的比例混匀，取20pmol重组质粒( pGal4-ERRs LBD、p5×UAS-Luc及pβ-gal )加到DMEM中，轻柔混合。将无血清DMEM稀释好的重组质粒再与DMEM稀释的3000Transfection Reagent的混合物轻弹混匀，室温放置20min以便形成DNA/lipofectamine的复合物。将孵育好的DNA/lipofectamine的复合物逐滴加入到含有细胞和培养液的培养皿中去，来回轻柔地摇晃细胞培养皿使细胞转染效率提高，将培养皿放入37℃，5％CO2培养箱中培养6小时，换新鲜培养液( 减少脂质体的细胞毒性)。再次消化细胞，以1×104/孔的细胞接种于96孔Costar细胞培养板中。
2、加入式I化合物及阳性药XCT790：转染8h后，加入式I化合物到96孔板中。将阳性对照XCT790和式I化合物稀释至10×目标浓度加入96孔Costar细胞培养板，体积为10μl，继续培养24小时每个浓度3复孔，培养24小时后，弃去培养板中培养液，加入细胞裂解液100μl，各取50μl分别用MD多功能酶标仪进行萤火虫荧光素酶及β-半乳糖苷酶的活性测定，以相对荧光素酶活性(萤火虫荧光素酶活性/β-半乳糖苷酶活性的比值)计算式I化合物对ERR-alpha的转录调节活性。
实验结果表明，本发明涉及的式I化合物可以剂量依赖性地抑制ERR-alpha的转录激活，(IC50＝21.08±8.9μM)，与阳性对照XCT790趋势一致( IC50＝0 .32±0 .02μM )。
以上所述实施例，描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利为准。