多因子组合试剂盒的制作方法

技术特征：

1.一种试剂盒，其特征在于，包括：外泌体和细胞因子。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述细胞因子包括下列至少之一：

碱性成纤维生长因子；以及

表皮生长因子。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

2～100μg/ml的外泌体；

10～50ng/ml的碱性成纤维生长因子；以及

10～50ng/ml的表皮生长因子。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

2～50μg/ml的外泌体；

10～30ng/ml的碱性成纤维生长因子；以及

10～30ng/ml的表皮生长因子。

5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

5μg/ml外泌体；

10ng/ml的碱性成纤维生长因子；以及

20ng/ml的表皮生长因子。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述外泌体是通过以下步骤所得到的：

将间充质干细胞接种于含有细胞生长培养基的细胞培养皿中，进行培养至所述间充质干细胞处于生长对数期且细胞汇合度达到90％以上，将细胞生长培养基更换为外泌体收集培养基，添加量为6ml/皿，于37℃，5％二氧化碳培养条件下培养细胞48小时，收集培养液；

将所述培养液于4℃，300g离心10分钟，收集第一上清液；

将所述第一上清液于4℃，2000g离心10分钟，收集第二上清液；

将所述第二上清液于4℃，10000g离心30分钟，收集第三上清液；

将所述第三上清液于4℃，110000g离心2小时，收集第一沉淀物；

用35ml PBS缓冲液重悬所述第一沉淀物，并于4℃，110000g离心2小时，收集第二沉淀物；以及

用100～200μl PBS缓冲液重悬所述第二沉淀物，以便得到所述外泌体。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述外泌体及细胞因子是以混合溶液的形式提供的。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述混合溶液的溶剂为生理盐水。

9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述外泌体及细胞因子密封于喷雾瓶。