本发明涉及代谢综合征抑制剂，更详细而言，涉及将大豆胚轴油作为有效成分的代谢综合征抑制剂。
背景技术：
：：由于脂质能量摄取比率的增大(因食材的变化及其过多摄取而导致)和摄取能量的消耗减少(因时常运动不足的生活而导致)的共同作用，导致体脂肪蓄积至必要水平以上、即肥胖的人数正在增加。体脂肪包括蓄积于皮肤下方的皮下脂肪、以及蓄积于肠或腹腔内的内脏周围的内脏脂肪。若内脏脂肪过度蓄积，高血压、糖尿病、脂质异常症等生活习惯病复合性地发病，则诊断为代谢综合征。现在的代谢综合征诊断基准为：(i)为腹围超过基准值(男性85cm、女性90cm)的内脏脂肪型肥胖，并且，(ii)符合以下的至少两种异常情况：(1)中性脂肪值为150mg/dl以上、和/或hdl-胆固醇值低于40mg/dl，(2)收缩期血压为130mmhg以上、和/或舒张期血压为85mmhg以上，以及(3)空腹时血糖为110mg/dl以上。代谢综合征的患者易发展出动脉硬化，其结果是，容易患上心肌梗塞、脑梗塞这样的重度疾病。从预防这些疾病的观点出发，代谢综合征的预防及消除是重要的。要预防代谢综合征时，通常在克服运动不足的同时还应注意降低像脂质能量摄取比率这样的日常饮食的改善，例如控制饮食、摄取脂肪少的食品、尽量不使用脂肪的烹调方法。还提出了通过口服摄取安全的体脂肪降低剂来降低体脂肪、而非改变生活习惯。例如提出了含有二氧杂双环[3.3.0]辛烷衍生物(专利文献1)、茶儿茶素(专利文献2)、儿茶素及可可多酚(专利文献3)、芦笋提取物(专利文献4)等作为有效成分的体脂肪降低剂、体脂肪燃烧剂。已知植物甾醇类抑制消化道中的胆固醇吸收、显示出降低血中胆固醇浓度的作用。胆固醇与胆汁酸形成胶束而变得可溶之后，被摄入小肠上皮细胞中。另外，植物甾醇类也同样地与胆汁酸形成胶束。由于甾醇在胶束中的溶解存在极限，因此，共存的植物甾醇竞争性地抑制胆固醇胶束的形成(非专利文献1及2)。利用该作用机理，提出了将植物甾醇类用作体内胆固醇降低剂的方案。例如在专利文献5中，公开了一种用于对胆固醇合成抑制药具有抗性的高脂血症患者中的脂质代谢改善剂，其将甘油二酯或者将甘油二酯与植物性甾醇类作为有效成分。在专利文献6中公开了一种体内胆固醇降低剂，其含有由胚芽浓度占15重量％以上的大豆原料得到的油脂作为有效成分。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开2000-309533专利文献2：日本特开2005-095186专利文献3：日本特开2012-171916专利文献4：日本特开2007-55951专利文献5：日本特开2015-15425专利文献6：wo01/032032非专利文献非专利文献1：日本食品分析中心，“关于植物甾醇(植物ステロ一ルについて)”，第2卷，第57期，2006年11月非专利文献2：石崎等，“大鼠中来自大豆胚芽的甾醇和大豆甾醇的胆固醇上升抑制效果的比较(ラツトにおける大豆胚芽由来ステロ一ルと大豆ステロ一ルのコレステロール上昇抑制効果の比較)”，日本营养·食粮学会志，第58卷，(2005)第1期，第11-16页技术实现要素：发明欲解决的课题本发明的目的在于提供与上述现有技术同样地可通过口服摄取来抑制代谢综合征的代谢综合征抑制剂。用于解决课题的手段本申请的发明人发现，大豆胚轴油具有抑制体脂肪、特别是内脏脂肪的蓄积的作用以及抑制血中中性脂肪上升的作用，因此可用于代谢综合征的抑制，由此完成了本发明。即，本发明提供包含大豆胚轴油作为有效成分的代谢综合征抑制剂。本发明和专利文献6的发明在将大豆胚轴油作为有效成分这一点上是共通的。然而，专利文献6的发明的用途是降低体内胆固醇浓度。上述降低体内胆固醇的作用机理自然与对体脂肪、内脏脂肪蓄积的抑制或对血中中性脂肪上升的抑制没有关系。因此，仅述及体内胆固醇降低作用的专利文献6没有教导本发明的代谢综合征抑制剂的用途。特别地，前述代谢综合征抑制剂为体脂肪蓄积抑制剂和/或血中中性脂肪上升抑制剂。特别地，前述体脂肪蓄积抑制剂为内脏脂肪蓄积抑制剂。前述代谢综合征抑制剂优选含有1～100重量％的前述大豆胚轴油。本发明还提供用于抑制代谢综合征的油脂组合物，其含有前述代谢综合征抑制剂。本发明还提供用于抑制代谢综合征的食品，所述食品含有前述代谢综合征抑制剂、或者是使用该抑制剂烹调而成的。本发明还提供代谢综合征抑制剂的制造方法，所述代谢综合征抑制剂的制造方法包括添加大豆胚轴油作为有效成分的步骤。本发明还提供用于抑制代谢综合征的食品的制造方法，所述制造方法包括将包含大豆胚轴油作为有效成分的代谢综合征抑制剂添加至食材中并进行烹调的步骤。发明的效果利用将大豆胚轴油作为有效成分的本发明的代谢综合征抑制剂，发挥作为体脂肪蓄积抑制剂(特别是内脏脂肪蓄积抑制剂)和/或血中中性脂肪上升抑制剂的功效，作为其结果，可改善或预防代谢综合征。已知大豆胚轴油具有降低血中胆固醇的作用。本发明的代谢综合征抑制剂从同时改善或防止内脏脂肪型肥胖症、以及与血中的胆固醇和/或中性脂肪相关的脂质异常症的观点来看优于现有的代谢综合征抑制剂。对于本发明的代谢综合征抑制剂，在由代谢综合征的进展引起发病的疾病的预防方面可给予很大的期待，所述疾病例如为动脉硬化症、糖尿病性视网膜症、糖尿病性坏疽、糖尿病性肾病、肾功能不全、肾硬化症、尿毒症、心绞痛、心肌梗塞、脑卒中、脑梗塞等。利用本发明的代谢综合征抑制剂，可以不要求对人进行饮食限制。特别地，油脂是刺激人的味觉的食材，因此若为了削减脂质能量而限制食品中的油脂，则将使人的日常饮食变得乏味。另一方面，本发明的代谢综合征抑制剂由于将油脂作为有效成分，因此可在维持人的日常饮食丰富的同时抑制代谢综合征。附图说明图1：是将根据本发明而配合了大豆胚轴油混合油的食品(饲料)给予小鼠的饲料摄取量与配合有大豆油的饲料进行比较的图。相比于比较例1的配合有大豆油的饲料摄取组，实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组在试验期间的饲料摄取量更高。图2：是显示在图1的两个组中的体重上升抑制效果、即体脂肪蓄积抑制效果的图。通过摄取实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料，显著抑制了体重上升。图3：是由图1及2求出饲料效率(＝体重增加量/饲料摄取量)的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的饲料效率更低。由于试验油组的饲料摄取量更高，因此可以说在等量的饲料摄取量下体重也不易增加。图4：是显示图1的两个组在解剖时的肠道膜脂肪重量的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的肠道膜脂肪相比于比较例1的配合有大豆油的饲料组减少了约50％。图5：是显示图1的两个组在解剖时的附睾脂肪重量的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的附睾脂肪重量相比于比较例1的配合有大豆油的饲料组减少了约37％。图6：是显示图1的两个组在解剖时的肾周围脂肪重量的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的肾周围脂肪重量相比于比较例1的配合有大豆油的饲料组减少了约60％。图7：是显示图1的两个组在解剖时的后腹壁脂肪重量的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的后腹壁脂肪重量相比于比较例1的配合有大豆油的饲料组减少了约34％。图8：是由图4～7求出内脏脂肪重量(上述4个部位的脂肪总和)的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的内脏脂肪重量相比于比较例1的配合有大豆油的饲料组减少了约39％。图9：是由图2及图8求出内脏脂肪率(＝内脏脂肪重量/体重)的图。判定了实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的内脏脂肪率相比于配合有大豆油的饲料组显著减少。图10：是显示图1的两个组在解剖时的肝脏重量的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组与比较例1的配合有大豆油的饲料摄取组之间在肝脏重量方面无显著性差异。图11：是由图2及图10求出肝脏比率(＝肝脏重量/体重)的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组与比较例1的配合有大豆油的饲料摄取组之间在肝脏比率方面无差异。图12：是显示图1的两个组在解剖时的大腿肌肉重量的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的大腿肌肉重量显著高于比较例1的配合有大豆油的饲料摄取组。图13：是由图2及图12求出肌肉率(＝大腿肌肉重量/体重)的图。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的肌肉率显著高于比较例1的配合有大豆油的饲料摄取组。图14：显示图1的两个组的饲养期间的血中中性脂肪(tg)的测定值。实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组(-×-)的tg与比较例1的配合有大豆油的饲料摄取组(-▲-)相比向更低的水平推移。图15：是显示细胞试验中相对于对照组(dmso)的脂肪滴面积值而言的不皂化物组及燕麦甾醇组的脂肪滴面积值的相对值的结果的图。不皂化物组及燕麦甾醇组相比于对照组而言显著抑制了脂肪向脂肪细胞中的蓄积。具体实施方式本发明的代谢综合征抑制剂(以下称为本发明的抑制剂)包含大豆胚轴油作为有效成分。大豆种子(全大豆)由子叶(约90重量％)、种皮(约8重量％)及胚轴(约2重量％)构成。大豆胚轴油是从提高了大豆种子中胚轴比例的原料提取·精制的油脂。提高胚轴比例而得到的原料通常包含15～80重量％的胚轴。从由此得到的原料提取·精制的油脂通常包含1500～6150mg/100g不皂化物，包含100～4000mg/100g总δ7甾醇，包含50～400mg/100g燕麦甾醇。自原料全大豆中筛选胚轴并由其提取·精制大豆胚轴油的方法可基于常用方法实施。其一个实例如以下所概述。首先，将大豆种子加热至例如40～80℃。然后，使用具有冲击作用、剪切作用、压缩·压扁作用及摩擦作用中至少一种功能的通用粉碎装置将干燥物剥离、割碎、粗碎或粉碎，由此分离子叶、种皮及胚轴。冲击手段中可使用冲击式粉碎机、颚式破碎机、捣碎机、喷射式粉碎机、锤式粉碎机、针磨机、旋转式粉碎机、行星式粉碎机等；剪切手段中可使用切碎机、石磨等；压缩·压扁手段中可使用辊磨机、辊式破碎机、压榨辊、环磨机等；并且，摩擦手段中可使用气流磨等。然后，将已被分离的种子、子叶及胚轴的混合物供于振动筛、旋转筛、风力分级机等分离手段，自混合物除去种皮及子叶，由此将胚轴浓缩。例如，分取通过7目筛得到的筛下级分，进而分取被10～14目筛截留的级分。由此得到的级分中，通常含有15～80重量％的胚轴。于例如40～100℃的温度将由上述工序得到的含胚轴的级分加热数秒至约60分钟后，将其压扁成片，使该片与正己烷等有机溶剂接触，得到粗原油。进而，通过常用方法对粗原油进行脱胶、脱酸、脱色及脱臭中的任意一种以上工序、优选进行脱胶、脱酸、脱色、脱臭的工序从而得到大豆胚轴油。上述大豆胚轴油也可以是市售品。大豆胚轴油及大豆油的组成的一个实例如表1所示。[表1]本说明书中，“总甾醇”是指包括β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、δ7-豆甾烯醇、燕麦甾醇及柠檬甾二烯醇的6种甾醇的总和。另一方面，“总δ7甾醇”是指包括δ7-豆甾烯醇、燕麦甾醇及柠檬甾二烯醇的3种甾醇的总和。如上表所示，相比于大豆油，大豆胚轴油的特征在于亚油酸及亚麻酸的比例更高，总甾醇量更高，并且总δ7甾醇的比例更高。根据后述细胞试验的结果，为了使将大豆胚轴油作为有效成分的代谢综合征抑制剂作为体脂肪蓄积抑制剂及内脏脂肪蓄积抑制剂发挥显著的效果，优选包含100～4000mg/100g的总δ7甾醇，特别优选包含50～400mg/100g的燕麦甾醇。本发明的抑制剂中，只要不损害本发明的效果，可以为了稀释大豆胚轴油而添加基础油。基础油只要是食用油脂则没有特别限定。作为基础油的实例，可举出：棕榈仁油、棕榈油、椰子油、玉米油、棉籽油、大豆油、菜籽油、米糠油、葵花籽油、红花油、可可脂、大豆胚轴油以外的胚轴油(例如小麦胚轴油、米胚轴油、及菜籽胚轴油)等植物油脂；猪油、鱼油等动物油脂等。另外，可使用这些油的分馏油(棕榈油的中熔点部分、棕榈油的分馏软质油、棕榈油的分馏硬质油等)、酯交换油、加氢油脂等经加工的油脂。另外，这些食用油脂可使用1种或2种以上。本发明的抑制剂中可以配合各种添加剂。添加剂的实例中可举出：卵磷脂、单甘油脂肪酸酯、有机酸单甘油酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、聚山梨醇酯等乳化剂；牛奶香精、奶油香精(butterflavor)、奶酪香精、酸奶香精、咖啡香精、红茶香精、肉桂香精、甘菊香精(chamomileflavor)等香精类；留兰香油、丁香油、薄荷油等芳香油；包含乙醛、苯甲醛、丁醛、柠檬醛、橙花醛、癸醛、乙基香草醛、香草醛、丁醛、己醛等醛类的香味剂；香辛料；生育酚、l-抗坏血酸类(例如l-抗坏血酸棕榈酸酯)、丁基羟基苯甲醚(bha)、丁基羟基甲苯(bht)、叔丁基氢醌(tbhq)、儿茶素、木脂素、γ-谷维素等抗氧化剂；硅酮等消泡剂；dha、epa等脂肪酸；维生素a、维生素d、辅酶q等生理活性物质等。本发明的抑制剂中的大豆胚轴油的含量通常为1～100重量％、优选3～100重量％、特别优选5～100重量％。本发明的抑制剂中的含油量(大豆胚轴油及基础油的总和)通常为1～100重量％、优选3～100重量％。本发明的抑制剂的形态可为液态、乳剂(油包水(w/o)型或水包油(o/w)型)、固态(粉末、颗粒、片状、块状等)。本发明的抑制剂优选包含液态或乳剂。本发明的抑制剂根据形态可通过适宜的方法进行制备。例如，通过将大豆胚轴油与适宜的基础油及添加剂共同混合，可得到液态或固态的抑制剂。通过选择基础油，可调整为液态或固态。可通过例如将含有大豆胚轴油、食用油脂(基础油)、乳化剂、其他添加剂及水的混合物用乳化机等进行搅拌混合，从而得到乳剂形态的抑制剂。乳剂的含油量通常为10～90重量％。可例如将大豆胚轴油与包含食用油脂(基础油)、乳化剂、粉末化基材及水的混合物搅拌混合而得到乳剂，对该乳剂进一步进行干燥粉末化，从而得到粉末、颗粒状的抑制剂。干燥粉末化例如可举出乳剂的喷雾干燥等。本发明尤其提供包含本发明的代谢综合征抑制剂的、用于抑制代谢综合征的油脂组合物。油脂组合物的基础油只要是用于食品用途的油脂则没有特别限制。这样的油脂与在上述抑制剂的基础油中所例示的油脂相同。油脂组合物的基础油与前述抑制剂的基础油可相同或不同。优选大豆油、菜籽油、玉米油、棕榈油、米糠油、橄榄油及芝麻油。在本发明的油脂组合物中，可配合作为通常用作食用油脂的前述抑制剂的添加剂而例示的物质。关于本发明的油脂组合物中的抑制剂的含量，以大豆胚轴油计通常为1～100重量％、优选3～100重量％、特别优选5～100重量％。本发明的油脂组合物中的含油量(大豆胚轴油及基础油的总和)通常为50～100重量％、优选60～100重量％、更优选80～100重量％、进一步优选90～100重量％。本发明还提供用于抑制代谢综合征的食品(包括饲料)。作为用于抑制代谢综合征的食品，可举出含有该抑制剂的食品(以下称为加工食品)、或使用该抑制剂烹调而成的食品(以下称为经烹调食品)。作为上述加工食品及经烹调食品的具体例，可举出：天妇罗、煎炸食品、日式煎饼、韩式煎饼、热蛋糕(hotcake)、甜甜圈、经调制的奶粉、稠糊性煮物(roux)(咖喱、炖菜(stew)、红烩牛肉饭等)、速食烹调饮食品(方便面、速食汤、速食味噌汤、速溶咖啡、速溶可可等)、蒸煮食品(retortfoods)(咖喱、炖菜、意大利面酱、汤等)、冷藏·冷冻食品(甜甜圈、炸薯条、煎炸食品、可乐饼(croquette)、炸肉饼(mincedmeatfriedcake)、炸猪排、炸鱼、鱿鱼圈、洋葱圈、奶汁烤菜(gratin)、披萨、炒饭、杂烩饭(pilaf)、乌冬面、拉面、肉包子、饺子等)、肉食加工品(火腿、培根、香肠、汉堡、叉烧肉、调味肉、烤牛肉、牛排等)、水产加工品(鱼肉香肠、鱼糕、明太鱼子、葱香金枪鱼、腌制鱼、虾酱等)、调味料(味噌、酱汁、番茄酱、调味酱(seasoningsauce)、蛋黄酱、调味汁(dressing)、ponzu醋、风味油、中餐预混料、鸡汤预混料、高汤、汤锅锅底等)、糕点·面包类(薯片、巧克力、曲奇、蛋糕、馅饼(pie)、饼干、薄脆饼干(crackers)、软糖、口香糖、牛轧糖、太妃糖、焦糖(caramel)、糖果、片状点心(tabletconfectionery)、面包、丹麦式酥皮饼等)、糕点材料(巧克力酱、巧克力包衣剂、杏仁豆腐预混料、布丁预混料、果冻预混料之类的甜点混合料(dessertmix)等)、营养补充剂(片剂、胶囊、固态、液态、粉末等)、健康食品(清凉饮料、叶绿素液、谷物、棒状食品(bar)等)、乳制品(乳饮料、发酵乳饮料、黄油、奶油、加工干酪(processedcheese)、加有奶酪的加工食品等)、乳制品替代品(人造黄油、起酥油、脂质涂抹酱(fatspread)、乳脂末(creamingpowder)、液态乳脂型咖啡伴侣(coffeecream)、发泡鲜奶油(whippedcream)等)、冷冻冷藏型甜点(冰激凌、果冻、布丁等)等。对于上述加工食品而言，除了添加本发明的抑制剂以外，可根据所使用的食材或其形态通过常用方法制造。本发明的抑制剂可添加在例如食材的内部或表面、面糊液内、搅拌液内、腌制液内、滚揉腌制(tumbing)液内等。关于本发明的抑制剂向加工食品中的添加量，以大豆胚轴油的含量计通常可为1～90重量％、优选1～85重量％、更优选1～80重量％、特别优选1～75重量％。上述经烹调食品除了使用本发明的抑制剂进行烹调或制造以外，对使用的原材料、特别的条件没有必须性要求，可以利用常用方法进行制造。作为食品烹调方法的具体实例，可举出：对天妇罗、炸薯条、煎炸食品、可乐饼、炸肉饼、炸猪排、炸鱼、鱿鱼圈、洋葱圈等进行油炸，对牛肉、猪肉、鸡肉、炒饭、杂烩饭、蔬菜、鱼、炒面等进行炒制，对肉、蔬菜、鱼、豆等进行煮制，加入肉、蔬菜、鱼、豆、披萨、拉面、乌冬面等中，涂抹于面包、糕点上，浸入面包、糕点内，等等。上述本发明的代谢综合征抑制剂、包含其的油脂组合物或食品、或使用该抑制剂烹调而成的食品对于代谢综合征的抑制、特别是体脂肪蓄积的抑制、内脏脂肪蓄积的抑制、和/或血中中性脂肪上升的抑制是有效的。实施例以下示出本发明的实施例及比较例，但本发明不受其限制。(试验样品)本实施例中制作了大豆胚轴油及大豆胚轴油混合油，将其作为试验样品。制作方法如以下所示。(大豆胚轴油的制作方法)以80℃对大豆种子加热45分钟，在粗碎机中粉碎至小于1/2的大小，由此得到子叶、种皮及胚轴的混合物。在风力分级机中将所得混合物除去种皮，得到子叶及胚轴的混合物。针对所得的子叶及胚轴的混合物，使用筛分机除去在7目筛上的级分，进而分取被10～14目筛截留的级分，由此得到胚轴级分(大豆胚轴40重量％)。将上述胚轴级分加温至60℃，用压扁机制成片，用正己烷提取油分，得到混合油(miscella)。在60～80℃于减压下从所得混合油中除去残留的正己烷，得到粗原油。向粗原油中添加0.1％磷酸后，在70℃搅拌15分钟，添加蒸馏水，在70℃搅拌30分钟后进行离心分离，除去胶状成分(脱胶)。接着，添加0.1％磷酸后，在75℃搅拌15分钟，添加氢氧化钠水溶液并搅拌20分钟后，离心分离。接下来加入相当于5％的量的蒸馏水，在80℃洗涤1分钟，离心分离(脱酸)。接下来，添加2％活性白土，在80℃于减压下搅拌30分钟后过滤(脱色)。接下来，在180℃进行水蒸气蒸馏(蒸气量2％)30分钟(脱臭)，由此得到大豆胚轴油。(大豆胚轴油混合油的制作方法)将50重量份前述大豆胚轴油与50重量份大豆油(产品名：精制大豆油ns(日文：大豆白絞油ns)，株式会社j-oilmills公司制)混合，得到大豆胚轴油混合油。〔实施例1〕通过动物试验及细胞试验进行代谢综合征抑制剂的有效性评价通过动物试验调查了作为本发明的代谢综合征抑制剂的有效成分的大豆胚轴油的体脂肪蓄积抑制作用、内脏脂肪抑制作用及血中中性脂肪上升抑制作用。进而，通过细胞试验调查了对大豆胚轴油的体脂肪蓄积抑制及内脏脂肪抑制作用有影响的成分。a.动物试验(1)饲料的准备使用大豆胚轴油混合油作为在饲料中配合的代谢综合征抑制剂。另外，为了进行比较，准备了大豆油(不皂化物含量430mg/100g)。对上述两种油脂实施植物甾醇分析。油中的植物甾醇浓度和甾醇组成的结果如表2所示。[表2]按照表3的组成，在家用料理搅拌机(kitchen-aidmixer)(ksm5，株式会社fmi公司制)中混合15分钟，由此制备预备饲养用饲料、配合有大豆油的饲料(比较例1)、及配合有大豆胚轴油混合油的饲料(实施例1)。[表3]酪蛋白：酪蛋白，来源于乳，和光纯药工业株式会社制玉米淀粉：玉米淀粉y，株式会社j-oilmills公司制蔗糖：砂糖，三井制糖株式会社制纤维素：vivapurtype102，jrspharma株式会社制ain-93矿物质混合物：ain-93m-mx，日本clea株式会社制ain-93维生素混合物：ain-93mvx，日本clea株式会社制蛋氨酸：dl-蛋氨酸，和光纯药工业株式会社制重酒石酸胆碱：nacalaitesque株式会社制(2)动物给予试验自日本charlesriver株式会社购入7周龄的雄性c57bl/6j小鼠，使用预备饲养用饲料进行6天的预备饲养。预备饲养后，以每组的平均体重不出现差异的方式以每组6只进行分组。分组后，在12周的时间内摄取由配合有大豆胚轴油混合油的饲料或配合有大豆油的饲料构成的试验食物。在预备饲养期间及试验食物摄取饲养期间内，在温度23℃±2℃、湿度40～60％、明亮期间7:30～19:30、黑暗期间19:30～7:30的环境下饲养。另外，对于饲料，使其自由摄食，并且，对于水，使其自由饮水。在饲养期间内，每周测定体重一次。另外，在饲养期间内，每隔2周测定血中中性脂肪。在试验食物摄取最终日前一天的17点开始禁食。在最终日在用戊巴比妥钠实现的深麻醉下开腹，摘取附睾脂肪、肠系膜脂肪、肾周围脂肪、后腹壁脂肪、肝脏、及大腿肌肉，对其进行重量测定。对于体重、血中中性脂肪值、附睾脂肪、肠系膜脂肪、肾周围脂肪、后腹壁脂肪、内脏脂肪重量(前述4种脂肪的合计值)、内脏脂肪率(＝内脏脂肪重量/体重)、肝脏、肝脏比率(＝肝脏重量/体重)、大腿肌肉、肌肉率(＝大腿肌肉重量/体重)进行统计处理(非配对t检验)。在图1～图13中，*或**表示确认到显著性差异。需要说明的是，*表示风险率(p值)低于0.05，**表示风险率(p值)低于0.01。对试验中的饲料摄取量进行比较的结果如图1所示。黑色柱图表示配合有大豆油的饲料摄取组，另外，白色柱图表示配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组。如图1所示，实施例1的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组在试验期间的饲料摄取量高于比较例1的配合有大豆油的饲料摄取组。图2显示了配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组(-×-)及配合有大豆油的饲料摄取组(-▲-)的体重上升抑制效果。如图2所示，配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组中显著抑制了体重上升。由图1及2求出饲料效率(＝体重增加量/饲料摄取量)的结果示于图3中。如图3所示，配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的饲料效率低于配合有大豆油的饲料摄取组。由于配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的饲料摄取量更多，因此可以说即使以同样的量摄取配合有大豆胚轴油混合油的饲料，体重也难以增加。图4～7显示了解剖时的各种脂肪的重量，且图8显示了解剖时的上述4个部位脂肪的内脏脂肪重量的总和。图9显示了由解剖时的内脏脂肪重量/体重所表示的内脏脂肪率。如图4～9所示，判定了相比于配合有大豆油的饲料摄取组，配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的内脏脂肪重量及内脏脂肪率显著减少。配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组及配合有大豆油的饲料摄取组的解剖时的肝脏重量及肝脏比率(＝肝脏重量/体重)分别示于图10及图11中。肝脏重量和肝脏比率在两个组之间无显著性差异。配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组及配合有大豆油的饲料摄取组的解剖时的大腿肌肉重量及肌肉率(＝大腿肌肉重量/体重)分别示于图12及图13中。配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的大腿肌肉重量和肌肉率显著高于配合有大豆油的饲料摄取组。配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组尽管饲料摄取量高，但相比于配合有大豆油的饲料摄取组，体重的增加得到了抑制(图1～3)。配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组中显著抑制了体脂肪、内脏脂肪的蓄积(图4～9)。另一方面，配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组的器官、肌肉未减少(图10～13)。因此，可以说图2所示的由本发明的抑制剂带来的抑制体重增加的效果是以对体脂肪及内脏脂肪蓄积的抑制为基础的。图14中显示饲养期间的配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组(-×-)及配合有大豆油的饲料摄取组(-▲-)的血中中性脂肪的测定值。配合有大豆胚轴油混合油的饲料摄取组(-×-)的血中中性脂肪值与配合有大豆油的饲料摄取组(-▲-)相比向更低的水平推移。以往，判定了大豆胚轴油的成分具有降低血中胆固醇的作用。而此次，还判定了大豆胚轴油具有抑制血中中性脂肪上升的作用。因此，判定了本发明的代谢综合征抑制剂可以同时改善或防止内脏脂肪型肥胖、以及与血中胆固醇和/或血中中性脂肪的异常相关的脂质异常症。b.细胞试验(1)试验物质的准备对于大豆胚轴油中的植物甾醇成分是否带来内脏脂肪蓄积抑制作用进行试验。以与动物试验中所使用的大豆胚轴油相同的操作，获得大豆胚轴油(不皂化物含量4710mg/100g)。大豆胚轴油的植物甾醇分析结果如表4所示。[表4]按以下的步骤，从上述大豆胚轴油获取不皂化物。首先，精密称量上述大豆胚轴油3g至300ml具塞锥形瓶中，加入2mol/l氢氧化钾/乙醇溶液25ml、及0.05g/ml没食子酸/乙醇溶液25ml。向前述锥形瓶中加入2粒沸石，与有循环冷凝水的索氏提取器冷凝管连接，在由水浴产生的水蒸气上加热1小时，进行皂化反应。将皂化反应液移至500ml容量的分液漏斗中，用热水100ml将前述锥形瓶内残余的皂化反应液共同洗出，移入分液漏斗。加入常温纯水50ml，静置并冷却至成为室温。用100ml乙醚洗涤前述锥形瓶，同时移入分液漏斗中。将分液漏斗加盖，剧烈振荡混合1分钟，静置直至分离为水层和乙醚两层。取出下层(水层)，加入纯水30ml并加盖，以用水层部分洗涤分液漏斗整个内壁面的方式缓慢旋转2～3次并静置，分离为两层后取出下层(水层)。再次向分液漏斗中加入纯水30ml，加盖，以用水层部分洗涤分液漏斗整个内壁面的方式缓慢旋转2～3次并静置，分离为两层后取出下层(水层)。加入纯水30ml，充分振荡混合后静置直至成为两层，取出下层(水层)。重复上述操作直至所取出的下层的水层液不因酚酞溶液而发生着色。一旦下层不发生着色，则将上层(乙醚层)取至烧杯中，用无水硫酸钠进行脱水处理后，将乙醚溶液移入300ml茄形烧瓶中，通过旋转蒸发仪除去乙醚。在25～30kpa的减压条件下于60℃进行30分钟干燥处理。在干燥器内放冷后，将所得提取物作为不皂化物。重复上述的获取步骤，从大豆胚轴油获得细胞试验用不皂化物。14.65mg上述不皂化物中的植物甾醇分析结果如表5所示。[表5]按以下的步骤，从上述不皂化物获取燕麦甾醇级分。首先，将约40mg的上述不皂化物溶解于4ml四氢呋喃中，进行1分钟的超声波处理。向5c18ar柱(20mm(i.d.)×250mm、粒径5μm、waters公司制)中注入不皂化物溶液140μl，利用甲醇∶乙腈∶四氢呋喃＝1∶2∶0.1的溶液以20ml/min的流速进行洗脱，根据210nm的吸光度确认并分离燕麦甾醇，得到燕麦甾醇溶液。将所得燕麦甾醇溶液再次过柱，得到高浓度燕麦甾醇溶液。利用旋转蒸发仪从所得高浓度燕麦甾醇溶液除去溶剂。在真空干燥机中以60℃干燥30分钟，得到燕麦甾醇级分。燕麦甾醇级分的燕麦甾醇纯度为87.2重量％。从燕麦甾醇级分中未检测到柠檬甾二烯醇。(2)被测溶液的制备方法向4.147mg的不皂化物中加入二甲基亚砜(dmso)100μl，或向1.0716mg的燕麦甾醇级分中加入二甲基亚砜(dmso)259.65μl，进行1分钟的超声波处理，得到被测溶液。将不皂化物的被测溶液(燕麦甾醇浓度1.41mg/ml)称为不皂化物组，并且将燕麦甾醇的被测溶液(燕麦甾醇浓度3.60mg/ml)称为燕麦甾醇级分组。进一步地，准备不添加不皂化物及燕麦甾醇级分的dmso(对照组)。用下述细胞试验中记载的培养基将各组的被测溶液分别稀释1000倍，用超声波处理1分钟，得到添加有被测溶液的培养基。(3)细胞试验使用内脏脂肪细胞培养试剂盒(cosmobio株式会社制，vac21)，基于附带的操作规程实施细胞试验。具体地，将在37℃温水浴下溶解的大鼠原代内脏脂肪细胞3.0×106个接种于24孔板中，在试剂盒所附带的培养基中进行4天的预备培养。预备培养后除去培养基，在1ml添加有被测溶液的培养基中培养2天，2天后除去培养基，用1ml添加有被测溶液的培养基再培养2天。(4)油红o染色除去上述培养基，用磷酸缓冲液生理盐水(pbs)0.5ml对孔内进行洗涤。将0.5ml的10％福尔马林溶液添加至各孔中，在室温固定10分钟。除去福尔马林，用0.5ml的pbs对孔内进行洗涤。将0.5ml的60％异丙醇添加至各孔中，在室温静置1分钟。除去60％异丙醇。在0.5ml油红o染色液(0.3g油红/100ml异丙醇)中于室温静置20分钟。除去油红o染色液，将0.5ml的60％异丙醇添加至各孔中，静置1分钟。除去60％异丙醇，用0.5ml的pbs对孔内进行洗涤。以200倍的倍率进行显微镜观察，用计算机的记录装置以图像的形式记录脂肪滴被染色的内脏脂肪细胞。(5)脂肪滴面积值的分析使用图像处理软件imagej(1.48v)(由https：//imagej.nih.gov/ij/获得)，测定上述图像的经油红o染色的脂肪滴面积值。进行三次细胞试验，每次细胞试验对各组记录4张图像。每次细胞试验中，算出对象组的脂肪滴面积值的平均值，算出将对照组的脂肪滴面积值的平均值作为1时的各图像的脂肪滴面积值的相对值(下文记载为“相对值”)。将由此得到的各组12个相对值进行统计处理(tukey-kramer检验)。图15显示相对于对照组而言的不皂化物组及燕麦甾醇组的相对值的结果。另外，**表示风险率(p值)为0.01以下。如图15所示，与对照组相比，不皂化物组及燕麦甾醇组显著抑制了脂肪向脂肪细胞中的蓄积。因此，不皂化物中的有效成分之一为燕麦甾醇的可能性较高。由以上细胞试验的结果可确认，为了使将大豆胚轴油作为有效成分的代谢综合征抑制剂发挥体脂肪蓄积抑制及内脏脂肪蓄积抑制效果，其优选包含δ7甾醇、特别是燕麦甾醇。当前第1页12当前第1页12