作为肽性双重GLP‑1/胰高血糖素受体激动剂的毒蜥外泌肽‑4衍生物的制作方法

发明领域本发明涉及GLP-1/胰高血糖素受体激动剂及其医药用途，例如用于治疗代谢综合征的病症，包括糖尿病和肥胖症，以及用于减少过量的食物摄入。这些GLP-1/胰高血糖素受体双重激动剂在GIP受体上显示出降低的活性，从而降低低血糖症的风险，并且其在结构上衍生自毒蜥外泌肽-4(exendin-4)，一种纯GLP-1受体激动剂。发明背景Pocai等(Obesity2012；20:1566-1571；Diabetes2009,58,2258)和Day等(NatChemBiol2009；5:749)描述了胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和胰高血糖素受体的双重激动剂，例如通过将GLP-1和胰高血糖素的作用组合在一个分子中，其产生具有优越于纯GLP-1激动剂的抗糖尿病作用和显著降重效果的治疗机理，除其他原因外，其是由于胰高血糖素受体介导的增加的饱足及能量消耗所致。Holst(Physiol.Rev.2007,87,1409)和Meier(Nat.Rev.Endocrinol.2012,8,728)描述了GLP-1受体拮抗剂，如GLP-1、利拉鲁肽、和毒蜥外泌肽-4，具有3种主要药理活性，其通过降低空腹和餐后葡萄糖(FPG和PPG)来改善T2DM患者中的血糖控制，所述3种主要药理活性为：(i)增加的葡萄糖依赖性胰岛素分泌(改善的第一阶段和第二阶段)，(ii)在高血糖条件下的抑制胰高血糖素活性，(iii)胃排空速率延缓，其导致进食来源的葡萄糖吸收迟缓。GLP-1(7-36)-酰胺的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-NH2利拉鲁肽是一种市场化的经化学修饰的GLP-1类似物，其中除了其他修饰，将脂肪酸连接至位置20的赖氨酸导致了作用持续期延长(DruckerDJ等,NatureDrugDisc.Rev.9,267-268,2010；Buse,JB等,Lancet,374:39-47,2009)。利拉鲁肽的氨基酸序列如SEQIDNO:4所示。HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-)EFIAWLVRGRG-OH胰高血糖素是一种29个氨基酸的肽，其在循环葡萄糖低的时候释放至血液中。胰高血糖素的氨基酸序列如SEQIDNO:3所示。HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNT-OH在低血糖期间，当血糖水平降低至低于正常时，胰高血糖素向肝提供分解糖原并释放葡萄糖的信号，导致血糖水平升高达到正常水平。近期的文献显示胰高血糖素此外还对减少体脂量、减少食物摄入、和增加能量消耗具有有益效果(KMHeppner,Physiology&Behavior2010,100,545-548)。GIP(葡萄糖依赖性的促胰岛素多肽)是一种42个氨基酸的肽，在食物摄入后从肠K-细胞释放。GIP和GLP-1是两种来源于肠内分泌细胞的激素，其导致肠降血糖素作用，占了胰岛素对口服葡萄糖挑战的响应的超过70％(BaggioLL,DruckerDJ.Biologyofincretins:GLP-1andGIP.Gastroenterology2007；132:2131-2157)。GIP的氨基酸序列如SEQIDNO:5所示。YAEGTFISDYSIAMDKIHQQDFVNWLLAQKGKKNDWKHNITQ-OH基于GLP-1或胰高血糖素的结构、且结合并激活胰高血糖素和GLP-1受体二者(Hjort等JournalofBiologicalChemistry,269,30121-30124,1994；DayJW等,NatureChemBiol,5:749-757,2009)且抑制体重增加和减少食物摄入的肽描述于专利申请WO2008/071972、WO2008/101017、WO2009/155258、WO2010/096052、WO2010/096142、WO2011/075393、WO2008/152403、WO2010/070251、WO2010/070252、WO2010/070253、WO2010/070255、WO2011/160630、WO2011/006497、WO2011/087671、WO2011/087672、WO2011/117415,WO2011/117416、WO2012/177443WO2012/177444、WO2012/150503、WO2013/004983、WO2013/092703、WO2014/041195和WO2014/041375中，其内容再次通过提述并入本文。显示体重降低优于纯GLP-1激动剂。此外，不仅激活GLP-1和胰高血糖素受体、还激活GIP受体的三重共同激动剂肽描述于WO2012/088116中以及描述于VAGault等(BiochemPharmacol,85,16655-16662,2013；Diabetologia,56,1417-1424,2013)。毒蜥外泌肽-4是一种39个氨基酸的肽，其是由吉拉毒蜥(Gilamonster)(Helodermasuspectum)产生的(EngJ.等,J.Biol.Chem.,267:7402-05,1992)。毒蜥外泌肽-4是胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体的激活剂，然而其对GLP受体仅显示出很低的激活作用，并且不激活胰高血糖素受体(参见表1)。表1:毒蜥外泌肽-4在增加的浓度下对人GLP-1、GIP和胰高血糖素受体(以pM表示)的效力，以及如方法中所述测量形成的cAMP毒蜥外泌肽-4的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH2观察到毒蜥外泌肽-4具有许多用GLP-1观察到的葡萄糖调控作用。临床和非临床研究已显示毒蜥外泌肽-4具有若干有益的抗糖尿病特性，包括葡萄糖依赖性的胰岛素合成和分泌增强、葡萄糖依赖性的胰高血糖素分泌抑制、胃排空放慢、食物摄入和体重减少以及β-细胞群和β-细胞功能标记物的增加(GentilellaR等,DiabetesObesMetab.,11:544-56,2009；NorrisSL等,DiabetMed.,26:837-46,2009；BunckMC等,DiabetesCare.,34:2041-7,2011)。这些效果不仅对于糖尿病人是有益的，并且对罹患肥胖症的患者也是有益的。患有肥胖者的患者具有更高的患上糖尿病、高血压、高血脂、心血管疾病和肌肉骨骼疾病的风险。相对于GLP-1，毒蜥外泌肽-4对于由二肽基肽酶-4(DPP4)的切割具有抗性，导致更长的半衰期和体内作用持续期(EngJ.,Diabetes,45(增刊2):152A(摘要554),1996)。与GLP-1、胰高血糖素或胃泌酸调节素相比时，毒蜥外泌肽-4还显示出对于中性内肽酶(NEP)的降解稳定得多(DruceMR等,Endocrinology,150(4),1712-1721,2009)。但是毒蜥外泌肽-4在化学上是不稳定的，这是由于位置14的甲硫氨酸氧化(HargroveDM等,Regul.Pept.,141:113-9,2007)，以及位置28的天冬酰胺的脱酰胺和异构化(WO2004/035623)。本发明的化合物是毒蜥外泌肽-4衍生物，其除了对天然毒蜥外泌肽-4的GLP-1受体的激动性活性之外，还显示出对胰高血糖素受体的激动性活性，并且其除了其他以外还具有如下修饰：位置14处的侧链具有-NH2基团的氨基酸，其进一步由亲脂性残基取代(例如结合接头的脂肪酸)和在位置27处的Aib。Bloom等(WO2006/134340)公开了可从胰高血糖素和毒蜥外泌肽-4构建出结合并激活胰高血糖素和GLP-1受体二者的肽作为杂交分子，其中N末端(例如残基1-14或1-24)来源于胰高血糖素而C末端(例如残基15-39或25-39)来源于毒蜥外泌肽-4。此类肽在位置10-13处包含胰高血糖素的氨基酸基序YSKY。Krstenansky等(Biochemistry,25,3833-3839,1986)显示了胰高血糖素的这些残基10-13对于其受体相互作用和对腺苷酸环化酶的激活的重要性。在本发明所述的毒蜥外泌肽-4衍生物中，一些原有的(underlying)残基与胰高血糖素和WO2006/134340中所述的肽是不同的。特别是残基Tyr10和Tyr13，已知其有助于胰高血糖素的原纤维形成(fibrillation)(DEOtzen,Biochemistry,45,14503-14512,2006)，其在位置10由Leu取代，在位置13由非芳香族极性氨基酸Gln取代。该取代(特别是用位置23的异亮氨酸和位置24的谷氨酸的组合)产生具有潜在提高的生物物理特性(如溶解度或在溶液中的聚集现象)的毒蜥外泌肽-4衍生物。出乎意料地，在毒蜥外泌肽-4类似物的位置13用极性氨基酸对芳香族氨基酸的非保守取代产生了对胰高血糖素受体具有高活性的肽，而其对GLP-1受体的活性保持不变(也参见WO2013/186240)。此外，我们令人惊奇地发现，与在天然毒蜥外泌肽-4的位置27处具有Lys的对应衍生物相比，在位置27具有Aib氨基酸的抗体显示出对GIP受体的降低的活性，如实施例5，表8所示。对GIP受体的降低的激活可能是有益的，因为有文献报道发现糖尿病患者中高水平的GIP有时导致较频繁的低血糖症发作(TMcLaughlin等，JClinEndocrinolMetab,95,1851-1855,2010；AHadji-Georgopoulos,JClinEndocrinolMetab,56,648-652,1983)。此外，本发明的化合物是在位置14处具有脂肪酸酰化残基的毒蜥外泌肽-4衍生物。这种位置14处的脂肪酸官能化产生这样的毒蜥外泌肽-4衍生物，其与对应的非酰化毒蜥外泌肽-4衍生物相比不仅对GLP-1受体有高活性，且对胰高血糖素受体也有高活性，例如实施例5，表7中所示的那些。此外，该修饰产生改进的药代动力学概貌。在文献(MurageEN等,Bioorg.Med.Chem.16(2008),10106-10112)中描述了在位置14处具有乙酰化赖氨酸的GLP-1类似物与天然GLP-1相比显示出显著降低的针对GLP-1受体的效力。本发明的化合物对于由中性内肽酶(NEP)和二肽基肽酶-4(DPP4)的切割更具抗性，导致了与天然GLP-1和胰高血糖素相比更长的体内半衰期和作用持续时间。本发明的化合物优选为不仅在中性pH是可溶的，并且在pH4.5也是可溶的。该特性可能允许用于与胰岛素或胰岛素衍生物以及优选地与基础胰岛素如甘精胰岛素/的组合治疗的共制剂。发明概述天然毒蜥外泌肽-4是一种纯GLP-1受体激动剂，其对胰高血糖素受体没有活性而对GIP受体具有低活性。本文提供了基于天然毒蜥外泌肽-4结构但与SEQIDNO:1相比在10个或更多个位置处不同的毒蜥外泌肽-4衍生物，其中所述不同有助于改进胰高血糖素受体处的激动性活性。除其他取代外，位置14处的甲硫氨酸由侧链中携带-NH2基团的氨基酸取代，其进一步由亲脂性残基(例如与接头组合的脂肪酸)取代。此外，我们令人惊奇地发现用Aib取代位置27处的赖氨酸导致与GLP-1受体活性相比降低的GIP受体活性。对GIP受体的降低的激活可能是有益的，因为有文献报道发现糖尿病患者中高水平的GIP有时导致较频繁的低血糖症发作(TMcLaughlin等，JClinEndocrinolMetab,95,1851-1855,2010；AHadji-Georgopoulos,JClinEndocrinolMetab,56,648-652,1983)。本发明提供具有式(I)的肽化合物或其盐或溶剂合物：H2N-His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-X14-Asp-Glu-Gln-Arg-Ala-Lys-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Aib-X28-X29-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-R1(I)X14代表具有官能化-NH2侧链基团的氨基酸残基，选自下组：Lys、Orn、Dab或Dap，其中-NH2侧链基团由-Z-C(O)-R5官能化，其中Z代表呈所有立体异构形式的接头，且R5是包含至多50个碳原子以及选自N与O的杂原子的部分，X28代表选自Ala、Lys和Ser的氨基酸残基，X29代表选自D-Ala与Gly的氨基酸残基，R1为NH2或OH。本发明的化合物为GLP-1和胰高血糖素受体激动剂，所述GLP-1和胰高血糖素受体激动剂通过在方法部分所述的测定系统中观察到它们能刺激细胞内cAMP形成而得以确定。根据本发明化合物的另一实施方案，特别是在位置14处具有赖氨酸的那些(其进一步由亲脂性残基取代)，与GLP-1(7-36)酰胺的情况相比对于GLP-1受体表现出至少0.1％的相对活性(即EC50<700pM)，更优选为1％(即EC50<70pM)、更优选为5％(即EC50<14pM)，以及更优选为10％(即EC50<7pM)的相对活性。此外，所述化合物与天然胰高血糖素的情况相比对于胰高血糖素受体表现出至少0.09％(即EC50<1111pM)、更优选0.45％(即EC50<222pM)以及又更优选0.9％(即EC50<111pM)的相对活性。本文所用的术语“活性”，优选意指化合物激活人GLP-1受体和人胰高血糖素受体的能力。更优选的是，此处所用的术语“活性”意指化合物刺激细胞内cAMP形成的能力。本文所用的术语“相对活性”理解为意指化合物相较于另一种受体激动剂，或相较于另一种受体，以一定比率激活一种受体的能力。激动剂对受体的激活是按照本文所述来确定的(例如通过测量cAMP水平)，例如按照实施例4中所述。本发明化合物优选对hGLP-1受体具有450pmol或更低、优选200pmol或更低、更优选100pmol或更低、更优选50pmol或更低、更优选25pmol或更低、更优选10pmol或更低、更优选8pmol或更低以及更优选5pmol或更低的EC50，和/或对人胰高血糖素受体具有500pmol或更低，优选300pmol或更低、优选200pmol或更低、更优选150pmol或更低的EC50，和/或对hGIP受体具有750pmol或更高，优选1500pmol或更高；更优选2000pmol或更高的EC50。更优选为对hGLP-1及人胰高血糖素受体的EC50为250pmol或更低、优选200pmol或更低、更优选150pmol或更低。对hGLP-1受体、人胰高血糖素受体与hGIP受体的EC50可如本文方法中所述测定并用于生成实例4、表6中所述结果。本发明的化合物具有降低肠通过率(intestinalpassage)、增加胃内容物和/或减少患者的食物摄入的能力。本发明化合物的这些活性能在本领域技术人员已知的动物模型中进行评估，并且同样描述于本文的方法部分中。本发明的化合物具有降低患者血糖水平和/或降低患者HbA1c水平的能力。本发明化合物的这些活性能在本领域技术人员已知的动物模型中进行评估，并且同样描述于本文的方法部分中。本发明的化合物具有降低患者体重的能力。本发明化合物的这些活性能在本领域技术人员已知的动物模型中进行评估，并且同样描述于本文的方法部分中以及实施例7中。发现式(I)的肽化合物(特别是在位置14处具有赖氨酸且进一步由亲脂性残基取代的那些)显示出与具有初始甲硫氨酸(来自毒蜥外泌肽-4)或位置14处的亮氨酸(参见表7)的衍生物相比增加的胰高血糖素受体激活。此外，甲硫氨酸的氧化(体内或体外)不再是可能的。还发现具有位置27处的Aib氨基酸的化合物显示出与在天然毒蜥外泌肽-4的位置27处具有Lys的对应衍生物相比对GIP受体降低的活性，如实施例5，表8中所示。对GIP受体的降低的激活可能是有益的，因为有文献报道发现糖尿病患者中高水平的GIP有时导致较频繁的低血糖症发作(TMcLaughlin等，JClinEndocrinolMetab,95,1851-1855,2010；AHadji-Georgopoulos,JClinEndocrinolMetab,56,648-652,1983)。在一个实施方案中，本发明化合物在酸性和/或生理pH值具有高溶解度，例如在25℃、pH4.5和/或在pH7.4，在另一个实施方案中，溶解度为至少1mg/ml且在一个特定实施方案中溶解度为至少5mg/ml。此外，本发明的化合物优选地在储存于溶液中时具有高稳定性。用于确定稳定性的优选测定条件是在40℃于溶液中于pH4.5或pH7.4处储存7天。如实施例中所述通过色谱分析来确定剩余的肽量。优选的是，在40℃于溶液中于pH4.5或pH7.4处7天后，剩余的肽是至少75％，更优选至少80％、又更优选至少85％且又更优选至少90％。优选的是，本发明的化合物包含肽模块，所述肽模块是39个氨基羧酸的线性序列，特别是通过肽(即羧酰胺键(carboxamidebond))连接的α-氨基羧酸。在一个实施方案中，R1为NH2且在另一个实施方案中R1为OH。-Z-C(O)-R5基团的特别优选的实例列于下表2中，其选自：(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-十八酰基氨基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基-、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基-十七酰基)氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基。更优选为立体异构物，尤其是这些基团的镜像异构物，S-镜像异构物或R-镜像异构物。术语“R”在表2中意在表示在肽骨架处的-Z-C(O)-R5附接位点，即Lys的ε-氨基基团。表2另一个实施方案涉及一组化合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经基团-Z-C(O)R5官能化，其中Z代表选自γE、γE-γE、AEEAc-AEEAc-γE及AEEAc-AEEAc-AEEAc的基团，且R5代表选自十五酰基、十七酰基或16-羧基-十六酰基的基团。另一个实施方案涉及一组化合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经基团-Z-C(O)R5官能化，其中Z代表选自γE、γE-γE、AEEAc-AEEAc-γE及AEEAc-AEEAc-AEEAc的基团，且R5代表选自十五酰基或十七酰基的基团。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-官能化，X28代表Ala，X29代表选自Gly与D-Ala的氨基酸残基，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-官能化，X28代表Ala，X29代表选自Gly与D-Ala的氨基酸残基，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-官能化，X28代表选自Ala、Ser与Lys的氨基酸残基，X29代表选自Gly与D-Ala的氨基酸残基，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-十八酰基氨基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基-、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基-十七酰基)氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基官能化，X28代表Ala，X29代表选自D-Ala与Gly的氨基酸残基，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-十八酰基氨基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基-官能化，X28代表Ala，X29代表选自D-Ala与Gly的氨基酸残基，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-官能化，X28代表Ser，X29代表选自D-Ala与Gly的氨基酸残基，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-官能化，X28代表Lys，X29代表选自D-Ala与Gly的氨基酸残基，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-官能化，X28代表选自Ala、Lys与Ser的氨基酸残基，X29代表D-Ala，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-十八酰基氨基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基-、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基-十七酰基)氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基官能化，X28代表选自Ala、Lys与Ser的氨基酸残基，X29代表Gly，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、(2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基、[2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-十八酰基氨基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基-官能化，X28代表选自Ala、Lys与Ser的氨基酸残基，X29代表Gly，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-官能化，X28代表Ala，X29代表选自Gly与D-Ala的氨基酸残基，R1代表NH2。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-、(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-官能化。另一个实施方案涉及一组化合物或其盐或溶剂合物，其中X14代表Lys，其中-NH2侧链基团经(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-官能化。式(I)肽化合物的特定实例为SEQIDNO:6-19的化合物，及其盐或溶剂合物。式(I)肽化合物的特定实例为SEQIDNO:6-18的化合物，及其盐或溶剂合物。式(I)肽化合物的特定实例为SEQIDNO:7与8的化合物，及其盐或溶剂合物。在一些实施方案中，即当式(I)的化合物包含遗传学编码的氨基酸残基时，本发明进一步提供编码所述化合物的核酸(其可以是DNA或RNA)、包含这种核酸的载体以及含有这种核酸或表达载体的宿主细胞。在进一步的方面，本发明提供包含本发明化合物与载剂混合的组合物。在优选的实施方案中，组合物是药学上可接受的组合物，而载剂是药学上可接受的载剂。本发明的化合物可以以盐的形式，例如药学上可接受的盐，或以溶剂合物的形式，例如水合物。在再进一步的方面，本发明提供用于在医药治疗方法中，特别是在人的医药中使用的组合物。在一些实施方案中，核酸或表达载体可以用作治疗剂，例如在基因治疗中。式(I)的化合物适于没有额外的治疗有效制剂的治疗应用。然而，在其他实施方案中，所述化合物与至少一种额外的治疗活性剂组合使用，如“组合治疗”中所述。式(I)的化合物具体适于治疗或预防由糖类和/或脂质代谢失调引起的、与糖类和/或脂质代谢失调相关的和/或伴随有糖类和/或脂质代谢失调的疾病或病症，例如用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、葡糖耐量受损、1型糖尿病、肥胖症和代谢综合征。而且，本发明的化合物具体适于治疗或预防退行性疾病，特别是神经退行性疾病。除其他之外，发现了所述化合物在预防增重或促进减重中的用途。“预防”指的是与不治疗相比的抑制或减少，并且并不一定意味着病症的完全停止。本发明的化合物可以引起食物摄入减少和/或能量消耗增加，导致观察到对于体重的效果。与其对体重的效果无关的是，本发明的化合物可以对循环的胆固醇水平具有有益效果，能够提高脂质水平，特别是LDL，以及HDL水平(例如提高HDL/LDL比率)。因此，本发明的化合物能用于任何由体重过量引起的或表征的病况的直接或间接治疗，如对肥胖症、病态性肥胖症、肥胖相关的炎症、肥胖相关的胆囊疾病、肥胖诱导的睡眠呼吸暂停的治疗和/或预防。它们还可以用于治疗和预防代谢综合征、糖尿病、高血压、致动脉粥样硬化的血脂异常、动脉粥样硬化、动脉硬化、冠心病或中风。它们在这些病况中的效果可作为与它们对体重的效果的结果或与所述效果相关，或可以与其无关。优选的医药用途包括延缓或预防2型糖尿病中的疾病进展，治疗代谢综合征，治疗肥胖症或预防超重，用于减少食物摄入，增加能量消耗，降低体重，延缓从葡糖耐量受损(IGT)至2型糖尿病的进展，延缓从2型糖尿病至需要胰岛素的糖尿病的进展，调节食欲，诱导饱足，预防成功减肥后的再次增重，治疗超重或肥胖症相关的疾病或病状，治疗易饿症(bulimia)，治疗暴食，治疗动脉粥样硬化、高血压、2型糖尿病、IGT、血脂异常、冠心病、脂肪肝，治疗β受体阻断剂中毒，用于抑制胃肠道运动的用途，与用如X射线、CT和NMR扫描等的技术的胃肠道研究联用。进一步优选的医药用途包括治疗或预防退行性疾病，特别是神经退行性疾病如阿尔茨海默氏病(Alzheimer'sdisease)、帕金森氏症(Parkinson'sdisease)、亨廷顿氏症(Huntington'sdisease)、共济失调(ataxia)(例如，脊髓小脑共济失调(spinocerebellarataxia))、肯尼迪病(Kennedydisease)、强直型肌肉萎缩症(myotonicdystrophy)、路易体痴呆(Lewybodydementia)、多系统性萎缩(multi-systemicatrophy)、肌萎缩性侧索硬化(amyotrophiclateralsclerosis)、原发性侧索硬化(primarylateralsclerosis)、脊椎肌肉萎缩(spinalmuscularatrophy)、朊病毒相关的疾病(prion-associateddiseases，例如库贾氏病(Creutzfeldt-Jacobdisease))、多发性硬化(multiplesclerosis)、毛细管扩张(telangiectasia)、巴登氏病(Battendisease)、皮质基底核退化(corticobasaldegeneration)、亚急性脊髓联合退化(subacutecombineddegenerationofspinalcord)、脊髓痨(Tabesdorsalis)、泰-萨克斯病(Tay-Sachsdisease)、中毒性脑病变(toxicencephalopathy)、婴儿雷夫叙姆病(infantileRefsumdisease)、雷夫叙姆病(Refsumdisease)、神经棘红细胞增多症(neuroacanthocytosis)、尼曼匹克病(Niemann-Pickdisease)、莱姆病(Lymedisease)、马-约病(Machado-Josephdisease)、山多夫氏病(Sandhoffdisease)、夏伊-德雷格综合征(Shy-Dragersyndrome)、刺猬摇摆不定症(wobblyhedgehogsyndrome)、蛋白质构像病(proteopathy)、大脑β-淀粉样血管病变(cerebralβ-amyloidangiopathy)、青光眼的视网膜神经节细胞退化(retinalganglioncelldegenerationinglaucoma)、共核蛋白病(synucleinopathies)、Tau蛋白病变(tauopathies)、额颞叶退化(frontotemporallobardegeneration,FTLD)、痴呆(dementia)、Cadasil综合征(cadasilsyndrome)、具有淀粉样变性的遗传性脑出血(hereditarycerebralhemorrhagewithamyloidosis)、亚历山大病(Alexanderdisease)、seipinopathies、家族性类淀粉神经病变(familialamyloidoticneuropathy)、老年全身性淀粉样变性(senilesystemicamyloidosis)、丝胺酸蛋白病变(serpinopathies)、AL(轻链)淀粉样变性(AL(lightchain)amyloidosis)(原发性全身性淀粉样变性(primarysystemicamyloidosis))、AH(重链)淀粉样变性(AH(heavychain)amyloidosis)、AA(继发性)淀粉样变性(AA(secondary)amyloidosis)、主动脉中层淀粉样变性(aorticmedialamyloidosis)、ApoAI淀粉样变性(ApoAIamyloidosis)、ApoAII淀粉样变性(ApoAIIamyloidosis)、ApoAIV淀粉样变性(ApoAIVamyloidosis)、芬兰型家族性淀粉样变性(familialamyloidosisoftheFinnishtype,FAF)、溶菌酶淀粉样变性(Lysozymeamyloidosis)、纤维蛋白原淀粉样变性(Fibrinogenamyloidosis)、透析淀粉样变性(Dialysisamyloidosis)、包涵体肌炎/肌病(Inclusionbodymyositis/myopathy)、白内障(Cataracts)、具有视紫质突变的色素性视网膜炎(Retinitispigmentosawithrhodopsinmutations)、髓质性甲状腺癌(medullarythyroidcarcinoma)、心房淀粉样变性(cardiacatrialamyloidosis)、垂体催乳素瘤(pituitaryprolactinoma)、遗传性格子状角膜营养不良(Hereditarylatticecornealdystrophy)、苔藓状皮肤淀粉样变性(Cutaneouslichenamyloidosis)、马洛里小体(Mallorybodies)、角膜乳铁蛋白淀粉样变性(corneallactoferrinamyloidosis)、肺泡蛋白沉积症(pulmonaryalveolarproteinosis)、齿源性(平博氏)肿瘤淀粉样变性(odontogenic(Pindborg)tumoramyloid)、囊肿纤维化(cysticfibrosis)、镰状细胞病(sicklecelldisease)或重病性肌病(criticalillnessmyopathy,CIM)。发明详述定义本发明的氨基酸序列含有用于天然存在的氨基酸的常规单字母或三字母代码，以及用于其他氨基酸的普遍承认的三字母代码，如Aib(α-氨基异丁酸)。术语“天然毒蜥外泌肽-4”意指具有序列HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH2(SEQIDNO:1)的天然毒蜥外泌肽-4。本发明提供如上文定义的肽化合物。本发明的肽化合物包含通过肽键即羧酰胺键连接的氨基羧酸的线性主链。除另有说明外，优选的是，所述氨基羧酸是α-氨基羧酸，并且更优选地是L-α-氨基羧酸。肽化合物优选地包含39个氨基羧酸的主链序列。本发明的肽化合物可以具有未修饰的侧链，但在其中一个侧链处携带至少一个修饰。为了免生疑义，在此处提供的定义中，通常认为肽模块(I)的序列与天然毒蜥外泌肽-4在那些规定允许变异的位置中的至少一个位置处不同。可以认为肽模块(I)内的氨基酸是从1至39以常规的N末端至C末端方向连续编号的。对肽模块(I)内的“位置”的提述应当照此理解，而对天然毒蜥外泌肽-4和其他分子内的位置的提述也应当如此，例如在毒蜥外泌肽-4中，His在位置1处，Gly在位置2处……Met在位置14处……和Ser在位置39处。具有-NH2侧链基团的氨基酸残基(例如Lys、Orn、Dab或Dap)经官能化，所述官能化在于-NH2侧链基团的至少一个H原子由-Z-C(O)-R5取代，其中R5包含亲脂性模块，例如非环状线性或分支的(C8-C30)饱和或不饱和烃基团，其未经取代或经例如卤素、-OH和/或CO2H取代而Z包含呈所有立体异构形式的接头，例如包含一或多个(例如1至5个，优选为1、2或3个)选自下组的氨基酸接头基团的接头：γ-谷氨酸(γE)和AEEAc。优选的基团R5包含亲脂性模块，例如非环状线性或分支的(C12-C20)饱和或不饱和烃基团，例如十五酰基、十六酰基或十七酰基，其未经取代或经CO2H取代，优选为十五酰基、十七酰基或16-羧基-十六酰基。在一些实施方案中，氨基酸接头基团选自γE、γE-γE、AEEAc-AEEAc-γE和AEEAc-AEEAc-AEEAc。在另一个实施方案中，所述氨基酸接头基团是γE。在另一个实施方案中，所述氨基酸接头基团是γE-γE。在另一个实施方案中，所述氨基酸接头基团是AEEAc-AEEAc-γE。在另一个实施方案中，所述氨基酸接头基团是AEEAc-AEEAc-AEEAc。在进一步的方面，本发明提供一种组合物，其包含如本文所述的本发明的化合物，或其盐或溶剂合物，其与载剂混合。本发明还提供了本发明的化合物用作药物的用途，特别是用于治疗如下所述的情况。本发明还提供一种组合物，其中所述组合物是药学上可接受的组合物，且所述载剂是药学上可接受的载剂。肽合成技术人员知道用于制备本发明所述肽的多种不同方法。这些方法包括但不限于合成途径和重组基因表达。因此，制备这些肽的一种办法是在溶液中或在固体支持物上进行合成，以及随后的分离和纯化。制备所述肽的一种不同的方法是在宿主细胞中进行基因表达，所述宿主细胞中引入了编码所述肽的DNA序列。或者，可以不利用细胞系统而实现基因表达。上述方法还可以以任意方式组合。制备本发明的肽的优选方法是在合适的树脂上的固相合成。固相肽合成是一种发展完善的方法学(参见例如：Stewart和Young,SolidPhasePeptideSynthesis,PierceChemicalCo.,Rockford,Ill.,1984；E.Atherton和R.C.Sheppard,SolidPhasePeptideSynthesis.APracticalApproach,Oxford-IRLPress,NewYork,1989)。固相合成是通过如下步骤起始的：将N末端受保护的氨基酸的羧基末端连接到携带可切割接头(cleavablelinker)的惰性固体支持物。这种固体支持物可以是允许起始氨基酸进行偶联的任何聚合物，例如三苯甲基树脂、氯三苯甲基树脂、Wang树脂或Rink树脂，其中羧基基团(或Rink树脂的羧酰胺)对树脂的连接是对酸敏感的(当使用Fmoc策略时)。聚合物支持物在肽合成期间用于对α-氨基基团进行去保护的条件下必须是稳定的。在第一个氨基酸偶联到固体支持物上后，将这个氨基酸的α-氨基保护基团去除。然后用合适的酰胺偶联试剂将剩下的受保护的氨基酸按照肽序列代表的顺序一个接一个地进行偶联，所述偶联试剂例如BOP、HBTU、HATU或DIC(N,N'-二异丙基碳二亚胺)/HOBt(1-羟基苯并三唑)，其中BOP、HBTU和HATU与叔胺碱一起使用。或者，脱去束缚的N末端能用除氨基酸以外的基团进行官能化，例如羧酸等。通常，氨基酸的反应性(reactive)侧链基团是用合适的阻断基团来保护的。在所需要的肽被组装后，除去这些保护基团。在相同条件下伴随着从树脂上切割所需要的产品而将这些保护基团除去。保护基团和引入保护基团的步骤可在ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,第三版,Greene,T.W.和Wuts,P.G.M.,Wiley&Sons(NewYork:1999)中找到。在一些情况下，可能需要具有侧链保护基团，所述基团能在其他侧链保护基团保持完好的条件下被选择性地除去。在这种情况下，可以选择性地将脱去束缚的官能度(functionality)进行官能化。例如，赖氨酸可以用ivDde([1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代环己-1-亚基)-3-甲基丁基([1-(4,4-dimethyl-2,6-dioxocyclohex-1-ylidene)-3-methylbutyl))保护基团(S.R.Chhabra等,TetrahedronLett.39,(1998),1603)来保护，所述保护基团对于非常亲核的碱基是不稳定的，例如4％肼在DMF(二甲基甲酰胺)中。因此，如果N末端氨基基团和所有侧链官能体是用酸不稳定的保护基团来保护的，则ivDde基团可以选择性地用4％肼在DMF中的溶液来除去，并且然后能对相应的游离氨基基团进行进一步修饰，例如通过酰化作用。或者赖氨酸能偶联到受保护的氨基酸，并且随后能够将这个氨基酸的氨基基团去保护，得到另一个游离的氨基基团，所述游离的氨基基团可以被酰化或连接到另一氨基酸。最后，将肽从树脂切下。这能够通过使用King’s混合剂(cocktail)(D.S.King,C.G.Fields,G.B.Fields,Int.J.PeptideProteinRes.36,1990,255-266)来实现。然后能通过色谱法，例如制备型RP-HPLC来纯化原材料，如果必要的话。效力此处所用的“效力”或“体外效力”是对化合物在基于细胞的测定中激活GLP-1、胰高血糖素、或GIP的能力的量度。从数字上来讲，其表示为“EC50值”，这是在剂量响应实验中诱导响应(例如细胞内cAMP的形成)的最大增加的一半所需的化合物有效浓度。治疗用途本发明的化合物是GLP-1受体的激动剂和GIP受体的激动剂，以及选择性地是胰高血糖素受体的激动剂(例如“双重激动剂或三重激动剂”)。这些肽是GIP/GLP-1共同激动剂或GIP/GLP-1/胰高血糖素三重激动剂，其可以提供治疗益处，以通过允许对糖尿病和肥胖症的同时治疗来满足对于靶向代谢综合征的临床需求。代谢综合征是一种医学病症的组合，当这些病症一起发生时，则增加患上2型糖尿病以及动脉粥样硬化血管疾病(例如心脏病和中风)的风险。对代谢综合征的医学参数的定义包括糖尿病、葡糖耐量受损、空腹葡萄糖升高、抗胰岛素性、尿白蛋白分泌、中心性肥胖症、高血压、甘油三酯升高、LDL胆固醇升高和HDL胆固醇降低。肥胖症是一种医学病况，其中过量的体脂肪积累到一定程度，可能对健康和预期寿命有不利影响；并且由于其在成人和儿童中愈发流行，肥胖症成为了当代世界里主要的可预防致死原因中的一种。它增加了多种疾病的可能性，包括心脏病、2型糖尿病、阻塞性睡眠呼吸暂停、一些类型的癌症、以及骨关节炎，并且它通常大多是由食物摄入过量、能量消耗减少以及遗传易感性的组合而引起。糖尿病(Diabetesmellitus)，通常简称为糖尿病(diabetes)，是一组代谢性疾病；在这种疾病中人具有高血糖水平，这或是因为身体不产生足够的胰岛素，或是因为细胞不对产生的胰岛素进行响应。最常见的糖尿病类型是：(1)1型糖尿病，其中身体无法产生胰岛素；(2)2型糖尿病(T2DM)，其中身体无法正确地使用胰岛素，以及随时间增加的胰岛素缺乏；和(3)妊娠糖尿病，其中女性因其妊娠而患上糖尿病。所有形式的糖尿病都增加长期并发症的风险，典型的是在许多年后患上所述并发症。这些长期并发症大多数基于血管的损害，并且能分为两个类别，“大血管”疾病(由较大血管的动脉粥样硬化引起)和“微血管疾病”(由小血管的损害引起)。大血管疾病病况的例子是缺血性心脏病(ischemicheartdisease)、心肌梗塞、中风和周围血管疾病。微血管疾病的例子是糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病以及糖尿病性神经病变。GLP-1和GIP以及胰高血糖素的受体是7次跨膜的异三聚体G蛋白偶联受体家族的成员。它们结构上彼此相关，并且不仅具有显著水平的序列同一性，还具有相似的配体识别机制和细胞内信号传导途径。类似地，GLP-1、GIP和胰高血糖素的肽共享具有高序列同一性/相似性的区域。GLP-1和胰高血糖素产生自共同的前体——前胰高血糖素原(preproglucagon)，其以组织特异性方式差异性地加工，从而在肠内分泌细胞中产出例如GLP-1以及在胰岛的α细胞中产出胰高血糖素。GIP来源于较大的GIP原(proGIP)激素原前体，并从定位于小肠中的K-细胞合成和释放。肽肠降血糖素(incretin)激素GLP-1和GIP是由肠内分泌细胞响应于食物而分泌的，占了多达70％的进餐刺激性的胰岛素分泌。证据说明在患有葡糖耐量受损或2型糖尿病的受试者中GLP-1分泌减少，然而这些患者中依然保留着对GLP-1的响应性。因此，用合适的激动剂靶向GLP-1受体，提供了有吸引力的治疗代谢病症(包括糖尿病)的手段。GLP-1的受体分布广泛，主要在胰岛、脑、心脏、肾脏和胃肠道中发现。在胰腺中，GLP-1以严格的葡萄糖依赖性方式，通过增加来自β细胞的胰岛素分泌来发挥作用。这种葡萄糖依赖性显示GLP-1受体的激活不太可能引起低血糖症。GIP受体也在周围组织中广泛表达，所述组织包括胰岛、脂肪组织、胃、小肠、心脏、骨骼、肺、肾脏、睾丸、肾上腺皮质、垂体、内皮细胞、气管、脾、胸腺、甲状腺和脑。与其作为肠降血糖素激素的生物学功能相一致的是，胰腺的β细胞在人中表达最高水平的GIP受体。有一些临床证据显示，在T2DM患者中GIP受体介导的信号传导可能受到损伤，但显示GIP作用是可逆的并且可以用糖尿病状态的改善来恢复。虽然有许多关于GIP对胰岛素分泌的作用也与葡萄糖无关的报道，但文献中也报道了GIP的高血浆水平可能导致更频繁的低血糖症发作(TMcLaughlin等,JClinEndocrinolMetab,95,1851-1855,2010；AHadji-Georgopoulos,JClinEndocrinolMetab,56,648-652,1983)。此外，据报道肥胖受试者中的血浆GIP水平高于正常，说明GIP可能诱导肥胖症和胰岛素抗性(WCreutzfeldt等，Diabetologia.1978,14,15-24)。这得到了其他报道的支持，其报道GIP受体的消除可能预防这些病况：用高脂饮食饲喂的GIP受体敲除的小鼠实际上显示出与野生型小鼠相比的体重抑制(KMiyawaki等，NatMed.2002,8,738-42)，并且在小鼠中长期施用GIP受体拮抗剂(Pro3)GIP也预防肥胖症和胰岛素抗性(VAGault等，Diabetologia.2007,50,1752-62)。因此，本发明的目标是提供具有降低的对GIP的活性的GLP-1/胰高血糖素受体双重激动剂。胰高血糖素是一种29个氨基酸的肽激素，由胰腺的α细胞产生，并在循环的葡萄糖低时释放到血液中。胰高血糖素的一个重要的生理学作用是在肝中刺激葡萄糖输出，这个过程在维持体内葡萄糖稳态中针对胰岛素提供了主要的反向调节机制。然而胰高血糖素受体也在肝外的组织中表达，如肾脏、心脏、脂肪细胞、淋巴母细胞、脑、视网膜、肾上腺和胃肠道，说明了葡萄糖稳态之外的更广泛的生理学作用。相应地，近期的研究已报道了胰高血糖素对于能量管理具有治疗上的积极效果，包括刺激能量消耗和生热作用，伴随着食物摄入减少和体重减少。总的来说，对胰高血糖素受体的刺激可能在治疗肥胖症和代谢综合征中是有用的。胃泌酸调节素是一种肽激素，由胰高血糖素组成，所述胰高血糖素具有包含8个氨基酸的C末端延伸。像GLP-1和胰高血糖素一样，它以前胰高血糖素原表现，并被被小肠的内分泌细胞以组织特异性的方式切割和分泌。已知胃泌酸调节素刺激GLP-1和胰高血糖素两种受体，并因此是双重激动剂的原型(prototype)。由于GLP-1因其抗糖尿病的效果而为人所知，GLP-1和胰高血糖素都因其食物摄入抑制效果而为人所知，而胰高血糖素还是额外的能量消耗的介导物，因此可以想到这两种激素的活性结合在一个分子中能产生强效的药物，用于对代谢综合征的治疗，特别是对其组分糖尿病和肥胖症的治疗。因此，本发明的化合物可用于治疗葡萄糖不耐症、胰岛素抗性、前驱糖尿病、空腹葡萄糖升高(高血糖症)、2型糖尿病、高血压、血脂异常、动脉硬化、冠心病、外周动脉疾病、中风或这些单个疾病组分的任何组合。此外，它们可用于控制食欲、进食和卡路里摄入、增加能量消耗、防止增重、促进减重、减少多余体重以及整体治疗肥胖症，包括病态肥胖症。本发明的化合物是用于GLP-1受体和胰高血糖素受体的激动剂(例如“双重激动剂”)，其具有降低的对GIP受体的活性且可能提供治疗益处以满足针对代谢综合征的临床需要，其是通过允许对糖尿病和肥胖症的同时治疗来实现。进一步的可用本发明化合物治疗的疾病状态和健康状况是肥胖症相关的炎症、肥胖症相关的胆囊疾病和肥胖症诱发的睡眠呼吸暂停。虽然这些病况可以直接或间接地与肥胖症联系起来，但本发明化合物的效果可以是整体或部分经由对体重的效果介导的，或是与该效果无关的。进一步地，所要治疗的疾病是神经退行性疾病如阿兹海默病或帕金森氏病，或如上所述的其他退行性疾病。在一个实施方案中，所述化合物可用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、肥胖症。与GLP-1、胰高血糖素和胃泌酸调节素相比，毒蜥外泌肽-4具有有益的物理化学特性，如溶液中和生理条件下的溶解度和稳定性(包括对于通过酶(如DPP-4或NEP)降解的酶稳定性)，这导致了更长的体内作用持续时间。因此，纯GLP-1受体激动剂毒蜥外泌肽-4可以充当良好的起始主链来获得具有GLP-1/胰高血糖素受体双重激动作用的毒蜥外泌肽-4类似物。然而，毒蜥外泌肽-4也显示了在化学上不稳定，这是由于其位置14处的甲硫氨酸氧化以及位置28处天冬酰胺的脱酰胺和异构化。因此，可能通过位置14处的甲硫氨酸的取代和对已知易于经由天冬酰胺键的形成(aspartimideformation)而降解的序列(特别是位置28和29处的Asp-Gly或Asn-Gly)的避免，而进一步改善稳定性。药物组合物术语“药物组合物”表示含有在混合时相容的成分并且能够施用的混合物。药物组合物可以包含一种或多种药用的药物。此外，药物组合物可以包含载剂、缓冲剂、酸化剂、碱化剂、溶剂、佐剂、张度调节剂(tonicityadjusters)、软化剂、膨胀剂(expanders)、防腐剂、物理与化学稳定剂例如表面活性剂、抗氧化剂以及其他组分，无论这些被认为是活性还是非活性成分。可以找到供技术人员制备药物组合物的指导，例如在Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,(第20版)A.R.GennaroA.R.编,2000,LippencottWilliams&Wilkins，和R.C.Rowe等(编),HandbookofPharmaceuticalExcipients,PhP，2013年5月更新。本发明的毒蜥外泌肽-4肽衍生物或其盐是连同可接受的药物载剂、稀释剂或赋形剂(其作为药物组合物的一部分)一起施用的。“药学上可接受的载剂”是生理学上可接受(例如生理学上可接受的pH)的载剂，同时所述载剂保持了与其一起施用的物质的治疗特性。标准的可接受的药物载剂及其配制物是本领域技术人员已知的，并且在例如如下文献中描述：Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,(第20版)A.R.GennaroA.R.编,2000,LippencottWilliams&Wilkins，和R.C.Rowe等(编),HandbookofPharmaceuticalExcipients,PhP，2013年5月更新。一种示例性的药学上可接受的载剂是生理盐水溶液。在一个实施方案中，载剂选自下组：缓冲剂(例如柠檬酸盐/柠檬酸)、酸化剂(例如盐酸)、碱化剂(例如氢氧化钠)、防腐剂(例如苯酚)、助溶剂(例如聚乙二醇400)、张度调节剂(例如甘露醇)、稳定剂(例如表面活性剂、抗氧化剂、氨基酸)。使用的浓度在生理学可接受的范围内。可接受的药物载剂或稀释剂包括在适合口服、直肠、鼻或胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、皮内以及透皮)施用的配制物中使用的那些。典型的本发明的化合物是胃肠外施用的。术语“药学上可接受的盐”意指本发明化合物的盐，所述盐在哺乳动物中使用时是安全有效的。药学上可接受的盐可以包括但不限于酸加成盐(acidadditionsalt)和碱式盐。酸加成盐的例子包括氯化物、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸(氢)盐、乙酸盐、柠檬酸盐、甲苯磺酸盐或甲磺酸盐。碱式盐的例子包括具有无机阳离子的盐，例如碱金属或碱土金属的盐，如钠、钾、镁或钙盐；以及具有有机阳离子的盐，如胺盐。药学上可接受的盐的进一步例子在如下文献中描述：Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,(第20版)A.R.GennaroA.R.编,2000,LippencottWilliams&Wilkins，或HandbookofPharmaceuticalSalts,Properties,SelectionandUse,P.H.Stahl,C.G.Wermuth编,2002,VerlagHelveticaChimicaActa,Zurich,Switzerland与Wiley-VCH,Weinheim,Germany组合出版。术语“溶剂合物”意指本发明化合物或其盐与溶剂分子的复合物，所述溶剂分子例如有机溶剂分子和/或水。在药物组合物中，毒蜥外泌肽-4衍生物可以是单体或寡聚体形式的。术语“治疗上有效量”的化合物意指无毒但足以提供所需效果的量的化合物。需要多少量的式(I)的化合物来达到所需的生物学效果取决于一些因素，例如选择的具体化合物、预期用途、施用模式和患者的临床情况。在每个个案中合适的“有效”量是本领域普通技术人员可以用常规实验确定的。例如式(I)的化合物的“治疗上有效量”是约0.01-50mg/剂，优选为0.1-10mg/剂。本发明的药物组合物是适于胃肠外(例如皮下、肌内、皮内和静脉内)、口服、直肠、局部和经口(例如舌下)施用的药物组合物，虽然在每个个案中最适合的施用模式依赖于要治疗的病况的性质和严重程度及每个案例中所用的式(I)化合物的性质。合适的药物组合物可以是分开的单元的形式，例如小瓶或安瓿中的胶囊、片剂和粉剂，其各自含有限定量的化合物；作为粉剂或颗粒；作为水或非水液体中的溶液或悬液(suspension)；或作为水包油或油包水乳剂。它可以以单剂量或多剂量的可注射形式提供，例如以笔的形式。如已经提及的，组合物可以通过任何合适的药学方法来制备，所述方法包括使活性成分和载剂(可由一种或多种额外成分组成)开始接触的步骤。在一些实施方案中，所述药物组合物可以与用于施用的装置一起提供，例如与注射器、注射笔或自动注射器一起提供。这些装置可以与药物组合物分别提供，或是预先装填所述药物组合物。组合治疗本发明的化合物，GLP-1和胰高血糖素受体的双重拮抗剂，能广泛地与其他药理学活性化合物组合，如RoteListe2014中所提及的所有药物，例如RoteListe2014第1章中提及的所有减重剂或食欲抑制剂、RoteListe2014第58章中提及的所有降脂剂、RoteListe2014中提及的所有抗高血压剂和肾保护剂(nephroprotective)、或RoteListe2014第36章中提及的所有利尿剂。活性成分组合特别是可用于在作用上的协同性改善。它们或是能通过分开施用活性成分来应用于患者；或是能以组合产品的形式，其中多数活性成分存在于一个药物制剂中。当通过分开施用来施用所述活性成分时，可以同时或序贯地进行。下文提到的大多数活性成分在USPDictionaryofUSANandInternationalDrugNames,USPharmacopeia,Rockville2011中公开。其他适合这种组合的活性物质特别包括例如这样的活性物质，所述活性物质针对一种提到的适应症加强一种或多种活性物质的治疗效果；和/或这样的活性物质，所述活性物质允许减少一种或多种活性物质的剂量。适于组合的治疗剂包括例如抗糖尿病药，如：胰岛素和胰岛素衍生物，例如：甘精胰岛素270-330U/mL甘精胰岛素(insulinglargine)(EP2387989A)、300U/mL甘精胰岛素(EP2387989A)、赖谷胰岛素地特胰岛素赖脯胰岛素德谷胰岛素(Degludec)/德谷胰岛素Plus(DegludecPlus)、门冬胰岛素(Aspart)、基础胰岛素和类似物(例如LY-2605541、LY2963016、NN1436)、聚乙二醇化的胰岛素Lispro、Linjeta、NN1045、胰岛素加Symlin(InsulinplusSymlin)、PE0139、速效和短效胰岛素(例如Linjeta、PH20、NN1218、HinsBet)、(APC-002)水凝胶、口服、吸入、经皮和舌下胰岛素(例如Afrezza、Tregopil、TPM02、Capsulin、口服胰岛素、ORMD-0801、NN1953、NN1954、NN1956、VIAtab、Oshadi口服胰岛素)。其他还包括与白蛋白或另一蛋白质通过双功能接头键合的那些胰岛素衍生物。GLP-1、GLP-1类似物和GLP-1受体激动剂，例如：利西拉来(Lixisenatide)/AVE0010/ZP10/Lyxumia、艾塞那肽(Exenatide)/毒蜥外泌肽-4/Byetta/Bydureon/ITCA650/AC-2993、利拉鲁肽/Victoza、索马鲁肽(Semaglutide)、他司鲁肽(Taspoglutide)、Syncria/阿必鲁肽(Albiglutide)、度拉糖肽(Dulaglutide)、rExendin-4、CJC-1134-PC、PB-1023、TTP-054、Langlenatide/HM-11260C、CM-3、GLP-1Eligen、ORMD-0901、NN-9924、NN-9926、NN-9927、Nodexen、Viador-GLP-1、CVX-096、ZYOG-1、ZYD-1、GSK-2374697、DA-3091、MAR-701、MAR709、ZP-2929、ZP-3022、TT-401、BHM-034、MOD-6030、CAM-2036、DA-15864、ARI-2651、ARI-2255、艾塞那肽-XTEN和胰高血糖素-Xten。DPP4抑制剂，例如：阿格列汀(Alogliptin)/Nesina、Trajenta/利拉利汀(Linagliptin)/BI-1356/Ondero/Trajenta/Tradjenta/Trayenta/Tradzenta、沙格列汀(Saxagliptin)/Onglyza、西他列汀(Sitagliptin)/捷诺维(Januvia)/Xelevia/Tesave/Janumet/Velmetia、Galvus/维格列汀(Vildagliptin)、阿拉格列汀(Anagliptin)、吉格列汀(Gemigliptin)、特力利汀(Teneligliptin)、美格列汀(Melogliptin)、曲格列汀(Trelagliptin)、DA-1229、奥格列汀(Omarigliptin)/MK-3102、KM-223、艾格列汀(Evogliptin)、ARI-2243、PBL-1427、哌诺沙星(Pinoxacin)。SGLT2抑制剂，例如：Invokana/卡格列净(Canaglifozin)、Forxiga/达格列净(Dapagliflozin)、瑞格列净(Remoglifozin)、舍格列净(Sergliflozin)、依帕列净(Empagliflozin)、伊格列净(Ipragliflozin)、托格列净(Tofogliflozin)、鲁格列净(Luseogliflozin)、LX-4211、Ertuglifozin/PF-04971729、RO-4998452、EGT-0001442、KGA-3235/DSP-3235、LIK066、SBM-TFC-039，双胍类(例如美福明(Metformin)、丁福明(Buformin)、苯乙福明(Phenformin))、噻唑烷二酮类(例如吡格列酮(Pioglitazone)、利格列酮(Rivoglitazone)、罗格列酮(Rosiglitazone)、曲格列酮(Troglitazone))、双重PPAR激动剂(例如阿格列扎(Aleglitazar)、莫格列扎(Muraglitazar)、替格列扎(Tesaglitazar))、磺酰脲类(例如甲苯磺丁脲(Tolbutamide)、格列苯脲(Glibenclamide)、格列美脲(Glimepiride)/亚莫利(Amaryl)、格列吡嗪(Glipizide))、美格列奈类(例如那格列奈(Nateglinide)、瑞格列奈(Repaglinide)、米格列奈(Mitiglinide))、α-葡糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖(Acarbose)、米格列醇(Miglitol)、伏格列波糖(Voglibose))，胰淀素(Amylin)及胰淀素类似物(例如普兰林肽(Pramlintide)、Symlin)。GPR119激动剂(例如GSK-263A、PSN-821、MBX-2982、APD-597、ZYG-19、DS-8500)，GPR40激动剂(例如呋格列泛(Fasiglifam)/TAK-875、TUG-424、P-1736、JTT-851、GW9508)。其他适合的组合伴侣是塞克洛瑟(Cycloset)、11-β-HSD的抑制剂(例如LY2523199、BMS770767、RG-4929、BMS816336、AZD-8329、HSD-016、BI-135585)、葡糖激酶的活化剂(例如TTP-399、AMG-151、TAK-329、GKM-001)、DGAT的抑制剂(例如LCQ-908)、蛋白质酪氨酸磷酸酶1的抑制剂(例如曲度奎明(Trodusquemine))、葡萄糖-6-磷酸酶的抑制剂、果糖-1,6-二磷酸酶的抑制剂、糖原磷酸化酶的抑制剂、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶的抑制剂、糖原合酶激酶的抑制剂、丙酮酸脱氢激酶(pyruvatedehydrokinase)的抑制剂、α2-拮抗剂、CCR-2拮抗剂、SGLT-1抑制剂(例如LX-2761)、双重SGLT2/SGLT1抑制剂。一种或多种脂质降低剂也适于作为组合伴侣，如例如：HMG-CoA-还原酶抑制剂(例如辛伐他汀(Simvastatin)、阿托伐他汀(Atorvastatin))、贝特类(例如苯扎贝特(Bezafibrate)、非诺贝特(Fenofibrate))、烟酸及其衍生物(例如Niacin)、PPAR-(α、γ或α/γ)激动剂或调节剂(例如阿格列扎)、PPAR-δ激动剂、ACAT抑制剂(例如阿伐麦布(Avasimibe))、胆固醇吸收抑制剂(例如依折麦布(Ezetimibe))、胆汁酸结合物质(例如消胆胺/考来烯胺(Cholestyramine))、回肠胆汁酸转运抑制剂、MTP抑制剂或PCSK9调节剂。HDL-升高化合物，如：CETP抑制剂(例如托彻普(Torcetrapib)、安塞曲匹(Anacetrapid)、达塞曲匹(Dalcetrapid)、依塞曲匹(Evacetrapid)、JTT-302、DRL-17822、TA-8995)或ABC1调节剂。其他适合的组合伴侣是一种或多种用于治疗肥胖症的活性物质，如例如：西布曲明(Sibutramine)、特索芬辛(Tesofensine)、奥利司他(Orlistat)、大麻素-1受体的拮抗剂、MCH-1受体拮抗剂、MC4受体激动剂、NPY5或NPY2拮抗剂(例如韦利贝特(Velneperit))、β-3-激动剂、瘦素或瘦素模拟物、5HT2c受体的激动剂(例如氯卡色林(Lorcaserin))，或布普品(bupropione)/那曲酮(naltrexone)、布普品/唑尼沙胺(zonisamide)、布普品/芬特明(phentermine)或普兰林肽/美曲普汀(metreleptin)的组合。其他合适的组合伴侣是：进一步的胃肠肽如肽YY3-36(PYY3-36)或其类似物、胰多肽(PP)或其类似物。胰高血糖素受体激动剂或拮抗剂，GIP受体激动剂或拮抗剂，葛瑞林(ghrelin)拮抗剂或反向激动剂、类爪蟾肽(Xenin)及其类似物。此外，具有影响高血压、慢性心力衰竭或动脉粥样硬化的药物的组合是合适的，如例如：血管紧张素II受体拮抗剂(例如替米沙坦(telmisartan)、坎地沙坦(candesartan)、缬沙坦(valsartan)、氯沙坦(losartan)、依普罗沙坦(eprosartan)、厄贝沙坦(irbesartan)、奥美沙坦(olmesartan)、他索沙坦(tasosartan)、阿齐沙坦(azilsartan))、ACE抑制剂、ECE抑制剂、利尿剂、β-阻断剂、钙拮抗剂、中枢作用高血压药(centrally-actinghypertensives)、α-2-肾上腺素能受体拮抗剂、中性肽链内切酶抑制剂、凝血细胞聚集抑制剂等或其组合。在另一个方面，本发明涉及根据本发明的化合物或其生理学上可接受的盐与至少一种上述作为组合伴侣的活性物质进行组合用于制备适用于治疗或预防疾病或病况的药物的用途，所述疾病或病况能受到对GLP-1和胰高血糖素受体的结合和对它们活性的调节的影响。优选地，这是代谢综合征背景下的疾病，特别是上述列出的疾病或病况中的一种，最特别是糖尿病或肥胖症或其并发症。根据本发明的化合物或其生理学上可接受的盐与一种或多种活性物质的组合使用可以同时、分开或序贯地进行。根据本发明的化合物或其生理学上可接受的盐与另一种活性物质的组合使用可以同时或在错开的时间进行，但特别要在短时间间隔内进行。如果将它们同时施用，则将两种活性物质一起给予患者；如果将它们在错开的时间施用，则将两种活性物质在少于或等于12小时的时期内给予患者，但特别要少于或等于6小时。因而，在另一个方面，本发明涉及一种药物，其包含根据本发明的化合物或其生理学上可接受的盐和作为组合伴侣的上述活性物质中的至少一种，任选地连同一种或多种惰性载剂和/或稀释剂。根据本发明的化合物或其生理学上可接受的盐或溶剂合物以及要与之组合的额外的活性物质，可以一起都存在于一种配制物中，所述配制物例如在小瓶或药匣中，或是分别在两种相同或不同的配制物中，所述配制物例如所谓的试剂盒的部分(kit-of-parts)。附图说明图1.在高脂饲喂的雌性C57BL/6小鼠中用50μg/kg每日两次(bid)的SEQIDNO:7和SEQIDNO:8进行的4周的皮下治疗期间的体重进展。数据为均值+SEM。图2.在高脂饲喂的雌性C57BL/6小鼠中用50μg/kg每日两次的SEQIDNO:7和SEQIDNO:8进行的4周的皮下治疗期间的百分比相对体重变化。数据为均值+SEM。图3.在高脂饲喂的雌性C57BL/6小鼠中用50μg/kg每日两次的SEQIDNO:7和SEQIDNO:8的4周治疗前及后2天的总脂肪量的确定，其通过核磁共振(NMR)测得。数据为均值+SEM。图4.在高脂饲喂的雌性C57BL/6小鼠中皮下施用50μg/kg的化合物SEQIDNO:7和SEQIDNO:8对血糖的急性效果。数据为均值+SEM。图5.在高脂饲喂的雌性C57BL/6小鼠中皮下施用50μg/kg的化合物SEQIDNO:15对血糖的急性效果。数据为均值+SEM。图6.在高脂饲喂的雌性C57BL/6小鼠中用50μg/kg每日的SEQIDNO:15进行的4周的皮下治疗期间的百分比相对体重变化。数据为均值+SEM。图7.在高脂饲喂的雌性C57BL/6小鼠中用50μg/kg每日的SEQIDNO:15的4周治疗前及后2天的总脂肪量的确定，其通过核磁共振(NMR)测得。数据为均值+SEM。方法采用的缩写如下：AA氨基酸AEEAc(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙酰基cAMP环单磷酸腺苷Boc叔丁氧羰基BOP(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲氨基)六氟磷酸鏻BSA牛血清白蛋白tBu叔丁基DCM二氯甲烷Dde1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-乙基ivDde1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)3-甲基-丁基DICN,N'-二异丙基碳二亚胺DIPEAN,N-二异丙基乙胺DMEM杜贝可氏修饰伊格氏培养基(Dulbecco’smodifiedEagle’smedium)DMF二甲基甲酰胺DMS二甲基硫醚(dimethylsulfide)EDT乙二硫醇(ethanedithiol)FA甲酸FBS胎牛血清Fmoc芴基甲基氧基羰基(fluorenylmethyloxycarbonyl)HATUO-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐HBSSHanks’平衡盐溶液HBTU2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基-脲鎓六氟磷酸盐HEPES2-[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]乙磺酸HOBt1-羟基苯并三唑HOSuN-羟基琥珀酰亚胺HPLC高效液相色谱HTRF均相时间分辨荧光IBMX3-异丁基-1-甲基黄嘌呤LC/MS液相色谱/质谱法Mmt单甲氧基-三苯甲基Palm棕榈酰基PBS磷酸盐缓冲盐水PEG聚乙二醇PK药代动力学RP-HPLC反相高效液相色谱Stea硬脂酰基TFA三氟乙酸Trt三苯甲基UV紫外γEγ-谷氨酸肽化合物的一般合成材料不同的Rink-氨基树脂(4-(2’,4’-二甲氧基苯基-Fmoc-氨基甲基)-苯氧基乙酰胺基-正亮氨酰基氨基甲基树脂，MerckBiosciences；4-[(2,4-二甲氧基苯基)(Fmoc-氨基)甲基]苯氧基乙酰胺基甲基树脂，AgilentTechnologies)用于肽酰胺的合成，其负载在0.2-0.7mmol/g范围内。受Fmoc保护的天然氨基酸购自ProteinTechnologiesInc.、SennChemicals、MerckBiosciences、Novabiochem、IrisBiotech、Bachem、Chem-ImpexInternational或MATRIXInnovation。在合成过程中自始至终使用了下列标准氨基酸：Fmoc-L-Ala-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-L-Asn(Trt)-OH、Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-L-Cys(Trt)-OH、Fmoc-L-Gln(Trt)-OH、Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-L-His(Trt)-OH、Fmoc-L-Ile-OH、Fmoc-L-Leu-OH、Fmoc-L-Lys(Boc)-OH、Fmoc-L-Met-OH、Fmoc-L-Phe-OH、Fmoc-L-Pro-OH、Fmoc-L-Ser(tBu)-OH、Fmoc-L-Thr(tBu)-OH、Fmoc-L-Trp(Boc)-OH、Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-L-Val-OH。此外，如下特殊氨基酸购自上述相同的供应商：Fmoc-L-Lys(ivDde)-OH、Fmoc-L-Lys(Mmt)-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-D-Ser(tBu)-OH、Fmoc-D-Ala-OH、Boc-L-His(Boc)-OH(可以作为甲苯溶剂合物获得)和Boc-L-His(Trt)-OH。在例如Prelude肽合成仪(ProteinTechnologiesInc)或类似的自动化合成仪上用标准Fmoc化学法和HBTU/DIPEA激活进行固相肽合成。用DMF作为溶剂。去保护：20％哌啶/DMF，进行2x2.5分钟。洗涤：7xDMF。偶联2:5:10200mMAA/500mMHBTU/2MDIPEA在DMF中进行2x20分钟。洗涤：5xDMF。当Lys侧链经修饰时，将Fmoc-L-Lys(ivDde)-OH或Fmoc-L-Lys(Mmt)-OH用于相应的位置中。合成完成后，根据改良的文献步骤(S.R.Chhabra等,TetrahedronLett.39,(1998),1603)，用4％肼水合物在DMF中的溶液将ivDde基团除去。通过用1％TFA在二氯甲烷中的溶液重复处理，将Mmt基团除去。随后通过用所需酸的N-羟基琥珀酰亚胺酯处理树脂或是通过用偶联试剂如HBTU/DIPEA或HOBt/DIC，以进行酰化。用King’s切割混合剂将所有已合成的肽从树脂切下，所述混合剂由82.5％TFA、5％苯酚、5％水、5％茴香硫醚、2.5％EDT组成。然后将粗制的肽在二乙醚或二异丙醚中沉淀，离心并冻干。通过分析型HPLC来分析所述肽，并通过ESI质谱法进行检查。通过常规制备型RP-HPLC纯化步骤来纯化粗制的肽。或者，通过手动操作合成程序来合成肽：将0.3g经干燥Rink酰胺MBHA树脂(0.66mmol/g)放入装有聚丙烯过滤膜的聚乙烯容器中。在DCM(15ml)中使树脂膨胀1小时并在DMF(15ml)中膨胀1小时。通过以20％(v/v)哌啶/DMF溶液处理两次历时5分钟及15分钟而将树脂上的Fmoc基团去保护。以DMF/DCM/DMF(各6:6:6次)洗涤树脂。使用Kaiser测试(定量法)确认Fmoc从固体支持物的移除。将干燥DMF中的C-端Fmoc-氨基酸(对应于树脂负载为5当量过量)添加至去除保护的树脂并且以DMF中5当量过量的DIC与HOBT来开始偶联。反应混合物中各个反应物的浓度为约0.4M。在转子上于室温旋转混合物2小时。过滤树脂并且以DMF/DCM/DMF(各6:6:6次)洗涤。肽树脂等分试样在偶联完成时进行的Kaiser测试为阴性(树脂上无色)。在第一个氨基酸附接之后，使用乙酸酐/吡啶/DCM(1:8:8)将树脂中的未反应氨基基团(若有的话)封端/加帽(capped)20分钟，以避免任何的序列删除。在封端/加帽之后，用DCM/DMF/DCM/DMF(分别为6/6/6/6次)洗涤。通过以20％(v/v)哌啶/DMF溶液处理两次历时5分钟与15分钟，将附接有C-端氨基酸肽基树脂上的Fmoc基团去保护。用DMF/DCM/DMF(各6:6:6次)洗涤树脂。对肽树脂等分试样在Fmoc-脱除保护完成时进行的Kaiser测试为阳性。使用FmocAA/DIC/HOBt方法利用对应于DMF中的树脂负载的5当量过量，将Rink酰胺MBHA树脂上的靶序列中的其余氨基酸进行偶联。反应混合物中各反应物的浓度为约0.4M。在转子上于室温旋转混合物2小时。过滤树脂并用DMF/DCM/DMF(各6:6:6次)进行洗涤。在每一偶联步骤以及Fmoc去保护步骤之后，进行Kaiser测试以确认反应完成。在线性序列完成之后，用作为分支点或修饰点的赖氨酸的ε-氨基基团通过使用DMF中的2.5％肼水合物去保护15分钟2次，并用DMF/DCM/DMF(各6:6:6次)洗涤。在DMF中，使用Fmoc-Glu(OH)-OtBu用DIC/HOBt方法(相对于树脂负载的5当量过量)将谷氨酸的γ-羧基端附接至Lys的ε-氨基基团。在转子上于室温旋转混合物2小时。过滤树脂并用DMF/DCM/DMF(分别为6x30ml)洗涤。将谷氨酸上的Fmoc基团通过以20％(v/v)哌啶/DMF溶液处理两次历时5及15分钟(分别为25ml)而去保护。用DMF/DCM/DMF(各6:6:6次)洗涤树脂。在Fmoc-脱除保护完成时对肽树脂等分试样进行的Kaiser测试为阳性。若侧链分支还另含有一个γ-谷氨酸，于DMF中用DIC/HOBt方法(相对于树脂负载的5当量过量)使用第二个Fmoc-Glu(OH)-OtBu用以附接至γ-谷氨酸的游离氨基基团。在转子上于室温旋转混合物2小时。过滤树脂并用DMF/DCM/DMF(分别为6x30ml)洗涤。通过以20％(v/v)哌啶/DMF溶液处理两次历时5及15分钟(25mL)而将γ-谷氨酸上的Fmoc基团去保护。用DMF/DCM/DMF(各6:6:6次)洗涤树脂。在Fmoc-去保护完成时对肽树脂等分试样进行的Kaiser测试为阳性。棕榈酸和硬脂酸附接至谷氨酸的侧链：向γ-谷氨酸的游离氨基基团添加溶解于DMF中的棕榈酸或硬脂酸(5当量)，并通过添加DMF中的DIC(5当量)及HOBt(5当量)来起始偶联。用DMF/DCM/DMF(各6:6:6次)洗涤树脂。从树脂最终切割肽：用DMC(6x10ml)、MeOH(6x10ml)及醚(6x10ml)来洗涤通过手动合成所合成的肽基树脂，并在真空烘干箱中干燥过夜。通过用试剂混合物(80.0％TFA/5％硫代苯甲醚/5％苯酚/2.5％EDT，2.5％DMS与5％DCM)在室温处理肽-树脂3小时，从而完成从固体支持物对肽的切割。通过过滤收集切割混合物并用TFA(2ml)与DCM(2x5ml)洗涤树脂。在氮气下将过量TFA及DCM浓缩至少量并添加少量DCM(5-10ml)至残余物中且在氮气下蒸发。重复过程3-4次以去除大部分的挥发性杂质。将残余物冷却至0℃并添加无水醚以将肽沉淀。将沉淀的肽离心并去除上清液醚且添加新鲜的醚至肽中并再次离心。粗制样品经制备型HPLC纯化并冷冻干燥。通过LCMS确认肽的身分。分析型HPLC/UPLC方法A：在210-225nm处检测柱：WatersACQUITYCSHTMC181.7μm(150x2.1mm)于50℃溶剂：H2O+0.5％TFA:ACN+0.35％TFA(流速0.5ml/min)梯度：80:20(0分钟)至80:20(3分钟)至25:75(23分钟)至2:98(23.5分钟)至2:98(30.5分钟)至80:20(31分钟)至80:20(37分钟)任选地使用质量分析仪：LCTPremier，电喷雾阳离子模式方法B：在210-225nm处检测柱：AriesprepXBC18(4.6x250mmx3.6μm)，温度：25℃溶剂：H2O+0.1％TFA:ACN+0.1％TFA(流速1ml/min)梯度：用2％缓冲液B来平衡柱并通过2％至70％缓冲液B的梯度在15分钟过程中进行洗脱。一般制备型HPLC纯化步骤将粗制的肽或者在纯化系统、Jasco半制备型HPLC系统、或Agilent1100HPLC系统上进行纯化。根据要纯化的粗制肽的量，使用不同大小和不同流速的制备型RP-C18-HPLC柱。采用乙腈+0.1％TFA(B)和水+0.1％TFA(A)作为洗脱液。收集含有产物的级分并冻干，以获得纯化的产物，通常是作为TFA盐。毒蜥外泌肽-4衍生物的溶解度和稳定性测试测试一批肽的溶解度和稳定性之前，先确定其纯度(HPLC-UV)。对于溶解度测试，靶浓度为10mg纯化合物/mL。因此，在不同的缓冲体系中，基于之前确定的％纯度以10mg/mL化合物的浓度从固体样品制备溶液。在温和搅拌2小时后，从上清进行HPLC-UV，所述上清通过以4500rpm离心20分钟获得。然后通过用UV峰面积进行的0.2μL-注射的对比来确定溶解度，所述UV峰面积是用DMSO中浓度为1.2mg/mL的肽储液(基于％纯度)，注射范围为0.2-2μl的各种体积而获得的。该分析还起到稳定性测试起点(t0)的作用。对于稳定性测试，为溶解度获得的上清的等分试样在40℃储存7天。在这个时间过程后，将样品在4500rpm离心20分钟，并用HPLC-UV分析0.2μL的上清液。为了进行剩余肽量的确定，按照如下等式将靶化合物在t0和t7的峰面积进行比较，得到“％剩余肽”，其遵循如下等等式：％剩余肽＝[(峰面积肽t7)x100]/峰面积肽t0。稳定性表示为“％剩余肽”。用方法B作为HPLC/UPLC方法，于214nM处检测。GLP-1、胰高血糖素和GIP受体效力的体外细胞测定通过功能测定法来确定化合物对受体的激动作用，所述测定法测量稳定表达人GLP-1、GIP或胰高血糖素受体的HEK-293细胞系的cAMP响应。用来自CisbioCorp.(目录号：62AM4PEC)的试剂盒，基于HTRF(均相时间分辨荧光)来确定细胞的cAMP含量。为了制备，将细胞分入T175培养瓶并在培养基(DMEM/10％FBS)中过夜生长至接近汇合状态(confluency)。然后除去培养基，并用无钙和镁的PBS洗涤细胞，然后用Accutase酶(Sigma-Aldrich，目录号A6964)进行蛋白酶处理。洗涤脱离的细胞并将其重悬于测定缓冲液(1xHBSS；20mMHEPES,0.1％BSA,2mMIBMX)中，并确定细胞密度。然后将其稀释至400000细胞/ml，并将25μl的等分试样分装至96孔板的孔中。为了测量，将25μl的测试化合物在测定缓冲液中的溶液添加到孔中，然后室温温育30分钟。添加稀释于裂解缓冲液(试剂盒组分)中的HTRF试剂后，将平板温育1小时，然后测量665/620nm处的荧光比。通过检测引起最大响应的50％激活的浓度(EC50)来对激动剂的体外效力进行量化。用于在小鼠和猪中量化毒蜥外泌肽-4衍生物的生物分析筛选方法小鼠接受1mg/kg的皮下(s.c.)给药。将小鼠处死(sacrified)并在施用后0.25,0.5、1、2、4、8、16和24小时后收集血样。蛋白质沉淀后经由液相色谱质谱法(LC/MS)分析血浆样品。用5.2.1版WinonLin(非房室模型)计算PK参数和半衰期。雌性小型猪接受0.1mg/kg的皮下(s.c.)给药。在施用后0.25、0.5、1、2、4、8、24、32、48、56和72小时后收集血样。蛋白质沉淀后经由液相色谱质谱法(LC/MS)分析血浆样品。用5.2.1版WinonLin(非房室模型)计算PK参数和半衰期。小鼠中的胃排空和肠通过率使用体重在20-30g的雌性NMRI小鼠。使小鼠适应圈养条件至少1周。使小鼠禁食过夜，而始终保持水的供应。在研究当日将小鼠称重，单独笼养，并允许其能接触500mg的饲料30分钟，而水则被移除。在30分钟饲喂期结束时饲料保持已移除，并进行称重。然后，同时施用测试化合物/参比化合物或其在对照组中的载体(vehicle)。60分钟后，通过强饲法(gavage)将着色的、非热量的食团(bolus)灌输(instilled)到胃中。同时施用测试化合物/参考化合物或其在对照组中的介质，以在施用着色食团时达到Cmax。再过30分钟后，处死动物，并准备好胃和小肠。将已填满的胃称重，排空，小心清洁，并干燥和再次称重。计算的胃内容物说明胃排空的程度。不用力地将小肠缕直，并测量其长度。然后测量从肠的胃开端至肠内容物食团到达的最远端的距离。按照后者距离和小肠总长度的百分比来给出肠通过率。对于雌性和雄性小鼠二者可获得可比较的数据。统计学分析用Everstat6.0通过单因素方差分析，然后用Dunnetts或Newman-Keuls作为事后检验(post-hoctest)分别来进行。在p<0.05水平处，认为差异是统计学显著的。Dunnetts检验仅用于比较与介质对照的对比。Newman-Keul's测试用于所有成对比较(即对比介质和参考组)。小鼠中对食物摄入的自动化评估使用体重在20-30g的雌性NMRI小鼠。使小鼠适应豢养条件至少1周，并且在评估设备中单独笼养至少1天，此时同时记录基本数据。在研究当天，在接近熄灯阶段(lights-offphase)(熄灯12小时)皮下施用测试产品，并且随后立即启动饲料消耗评估。评估包括在22小时内连续的监测(每30分钟)。在数天重复这个操作是可能的。将评估限制至22小时是出于实践上的理由，以允许在操作之间对动物再次称重，再次填喂饲料和施用水和药物。结果可以评估为22小时内的积累数据，或是差别化至30分钟的间隔。对于雌性和雄性小鼠二者可获得可比较的数据。统计学分析是用Everstat6.0通过对重复测量的双因素方差分析和Dunnett's事后分析来进行的。在p<0.05的水平的差异被认为是统计学显著的。在饮食诱导的肥胖(DIO)C57BL/6雌性小鼠中，在皮下治疗后对于血糖和体重的急性和慢性效果使雌性C57BL/6NCrl小鼠以小组养在特定的无病原体屏障设施中，进行12h光照/黑暗循环，其能自由接触水和标准或高脂肪饮食。在预先饲喂的高脂肪饮食后，将小鼠分层至治疗组(n＝8)，以使每组具有相似的均值体重。包括了年龄一致、能任意接触标准食物的组作为标准对照组。在实验之前，用介质溶液皮下注射小鼠并称重，进行3天，以使其适应该程序。1)在饲养的DIO小鼠中对于血糖的急性效果：在即将首次施用(s.c.)介质(磷酸盐缓冲溶液)或毒蜥外泌肽-4衍生物(溶于磷酸盐缓冲液中)之前分别取得初始血样。施用体积为5mL/kg。动物在实验期间能接触到水和它们各自对应的饮食。在t＝0小时、t＝1小时、t＝2小时、t＝3小时、t＝4小时、t＝6小时和t＝24小时处测量血糖水平(方法：Accu-Check血糖仪)。血液采样通过无麻醉尾部切口进行。2)在雌性DIO小鼠中对于体重的慢性效果：小鼠每天一次(皮下在夜晚时间)或每天两次分别在早晨与晚上，在光照阶段开始与结束时利用介质或毒蜥外泌肽-4衍生物处理4周。每天记录体重。在治疗开始前两天与第26天，通过核磁共振(NMR)来测量总脂肪量。使用Everstat6.0通过对重复量测量的双因素方差分析与Dunnetts事后检验分析(葡萄糖概貌)，以及单因素方差分析然后是Dunnetts事后检验(体重、体脂肪)来进行统计分析。在p<0.05水平处，与经介质处理的DIO对照小鼠相比的差异被认为是统计学显著的。在雌性糖尿病dbdb小鼠中的4周处理对于葡萄糖、HbA1c以及口服葡萄糖耐量的效果使用具有平均非空腹葡萄糖值为14.5mmol/l以及体重为37-40g的8周龄雌性糖尿病dbdb小鼠。小鼠被分别标记并使小鼠适应豢养条件至少一周。在研究开始前7天，测量非空腹葡萄糖以及HbA1c的基线值，研究开始前5天，依据其HbA1c值将小鼠分配至数组与数个鼠笼(每个鼠笼5只小鼠，每组10只)以确保组间的较低与较高值平均分布(分层)。通过在早晨与下午每天两次皮下施用来处理小鼠4周。在研究第21天由尾尖获得血液样品供HbA1c之用，并在第4周中评估口服葡萄糖耐量。口服葡萄糖耐量测试是在早晨没有在先额外化合物施用的情况下完成的，主要是评估长期处理以及较少的急性化合物施用的效果。小鼠在口服葡萄糖施用之前禁食4小时(2g/kg，t＝0分钟)。在葡萄糖施用之前以及在15、30、60、90、120与180分钟抽取血液样品。在最后一次血液取样之后恢复饲喂。结果表示为相对于基线的变化，葡萄糖以mmol/l计而HbA1c以％计。使用Everstat6.0版基于SAS通过单因素方差分析，然后是Dunnett’s事后检验相对于介质对照来进行统计分析。在p<0.05水平处，差异被认为是统计学显著的。在非空腹雌性糖尿病dbdb-小鼠中的葡萄糖降低使用均值非空腹葡萄糖数值为20-22mmol/l且体重为42g+/-0.6g(SEM)的雌性糖尿病dbdb-小鼠。将小鼠分别标记并使小鼠适应豢养条件至少一周。在研究开始前3-5天，依据小鼠的非空腹葡萄糖值将小鼠分配至数组与数个鼠笼(每个鼠笼4只小鼠，每组8只)以确保组间的较低与较高值平均分布(分层)。在研究当天，将小鼠称重并给药(t＝0)。在即将施用化合物之前移除饲料，但水保持为可取用，且在尾部切割处抽取第一个血液样品(基线)。在30、60、90、120、240、360以及480分钟处于尾部切割处抽取进一步的血液样品。使用Everstat6.0版基于SAS通过双因素方差分析对重复测量值进行统计分析，然后是Dunnett’s事后检验相对于介质对照来进行统计分析。在p<0.05水平处，差异被认为是统计学显著的。实施例本发明通过如下实施例来进一步阐述。实施例1：合成SEQIDNO:7如方法中所述，在经干燥Rink-酰胺MBHA树脂(0.66mmol/g)上进行手动合成程序。以DIC/HOBt-活化来实施Fmoc-合成策略。在位置14使用Fmoc-Lys(ivDde)-OH并在位置1使用Boc-His(Boc)-OH。依据经修饰的文献方法(S.R.Chhabra等,TetrahedronLett.39,(1998),1603)使用于DMF中的4％肼水合物从树脂上的肽切下ivDde-基团。使用金氏混合物(D.S.King,C.G.Fields,G.B.Fields,Int.J.PeptideProteinRes.36,1990,255-266)将肽从树脂切下。经由制备型HPLC使用乙腈/水梯度(两种缓冲液均有0.1％TFA)来纯化粗产物。经纯化的肽通过LCMS(方法B)进行分析。在峰下发现的保留时间14.29min的质量信号的解卷积揭示肽质量为4649.20，其与预期值4649.29相符。实施例2：合成SEQIDNO:8如方法中所述，在经干燥Rink酰胺MBHA树脂(0.66mmol/g)上进行手动合成程序。以DIC/HOBT-活化来实施Fmoc-合成策略。在位置14使用Fmoc-Lys(ivDde)-OH并在位置1使用Boc-His(Boc)-OH。依据经修改的文献方法(S.R.Chhabra等,TetrahedronLett.39,(1998),1603)使用4％于DMF中的肼水合物从树脂上的肽切下ivDde-基团。使用金氏混合物(D.S.King,C.G.Fields,G.B.Fields,Int.J.PeptideProteinRes.36,1990,255-266)将肽从树脂切下。经由制备型HPLC使用乙腈/水梯度(两种缓冲液均有0.1％TFA)来纯化粗产物。经纯化的肽通过LCMS(方法B)进行分析。在峰下发现的滞留时间14.05min的质量信号的解卷积揭示肽质量为4634.80，其与预期值4635.27相符。以类似的方式合成表3中所示的肽并进行表征。表3:合成肽的列表及计算分子量与实验分子量的对比SEQIDNO计算的质量实验质量单同位素或平均质量64545.44546.0单同位素74649.34649.2平均84635.34634.8平均94534.24533.0平均104506.14504.8平均114520.24518.3平均124662.44662.2单同位素134648.44648.4单同位素144703.54703.6单同位素154689.54689.5单同位素164793.54793.6单同位素174821.64821.6单同位素184837.64837.6单同位素204150.14150.2单同位素214675.54675.4单同位素224689.54689.5单同位素234138.64139.4平均244123.64122.6平均254164.14164.1单同位素以类似的方式可合成表4中的下列肽。表4.可以类似方式合成的肽的列表SEQIDNO19实施例3：稳定性及溶解度肽化合物的溶解度及稳定性是如方法中所述来进行评估。结果提供于表5中。表5:稳定性和溶解度实施例4：关于GLP-1、胰高血糖素及GIP受体的体外数据如方法部分所述，通过将表达人胰高血糖素受体(人胰高血糖素R)、人GIP受体(hGIP-R)或人GLP-1受体(hGLP-1R)的细胞暴露于浓度增加的列出的化合物以及测量形成的cAMP，确定了肽化合物在GLP-1、胰高血糖素和GIP受体处的效力。结果示于表6中：表6.毒蜥外泌肽-4衍生物对GLP-1、胰高血糖素及GIP受体的EC50值(以pM表示)SEQIDNOEC50hGLP-1REC50人胰高血糖素-REC50hGIP-R10.4>1000000012500.0614.1136.02760.073.4101.37617.582.328.12140.096.415.41160.0103.552.4890.01110.3261.013400.0123.7130.08290.0131.822.82390.0144.1194.06530.0152.442.61855.0162.042.01870.0172.816.2906.0188.38.62160.0实施例5：比对测试测试了一组选择的在位置14处包含官能化的氨基酸的创造性的毒蜥外泌肽-4衍生物对比在该位置14处具有非官能化的氨基酸的对应化合物或相同氨基酸序列。参考对化合物和在GLP-1、胰高血糖素和GIP受体处的对应的EC50值(以pM表示)示于表7中。如其所示，创造性的毒蜥外泌肽-4衍生物显示出相比于在位置14处具有非官能化氨基酸的化合物更为优越的活性。此外，测试了一组选择的在位置27处包含Aib的创造性的毒蜥外泌肽-4衍生物的选择对比在位置27处具有赖氨酸的对应化合物(其作为非天然毒蜥外泌肽-4)或相同氨基酸序列。参考对化合物和在GLP-1、胰高血糖素和GIP受体处的对应的EC50值(以pM表示)示于表8中。如其所示，创造性的毒蜥外泌肽-4衍生物显示出相比于在位置27处具有Lys的非天然毒蜥外泌肽-4的对应衍生物降低的对GIP受体的活性。表7：包含在位置14处的非官能化氨基酸的毒蜥外泌肽-4衍生物对比包含在位置14处的官能化氨基酸的毒蜥外泌肽-4衍生物或相同氨基酸序列的比较。对GLP-1、胰高血糖素和GIP受体的EC50值以pM表示。(K＝赖氨酸，L＝亮氨酸，γE-x53＝(S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基-，γE-x70＝(S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基-，γE-γE-x53＝(S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基-))表8：包含在位置27处的Aib的毒蜥外泌肽-4衍生物对比包含在位置27处的Lys的毒蜥外泌肽-4衍生物或相同氨基酸序列的比较。在GLP-1、胰高血糖素和GIP受体处的EC50值以pM表示。实施例6：药代动力学测试如方法中所述测定药代动力学概貌。计算出的T1/2以及Cmax值显示于表9中。表9.毒蜥外泌肽-4衍生物的药代动力学概貌实例7：饮食诱导的肥胖(DIO)C57BL/6雌性小鼠中SEQIDNO:7和SEQIDNO:8在每日两次皮下处理后对血糖和体重的急性及慢性效果1)葡萄糖概貌在血液取样以确定血糖基线水平之后，对喂养饮食诱导的肥胖雌性C57BL/6小鼠皮下施用50μg/kg的SEQIDNO:7、50μg/kg的SEQIDNO:8或磷酸盐缓冲溶液(标准或高脂饮食的介质对照)。在预定的时间点，取得更多血液样品来测量血糖并产生24小时的血糖概貌。SEQIDNO:7和SEQIDNO:8证明，相比DIO对照小鼠，在化合物给药后时间点t＝1、2、3、4、6和24小时血糖显著降低(p<0.0001，双因子ANOVA-RM，事后Dunnett检验；平均值±SEM；参见图4)。2)体重肥胖的C57BL/6雌性小鼠经每天两次以50μg/kgSEQIDNO:7、50μg/kgSEQIDNO:8或介质皮下处理4周。每天记录体重，并在4周的处理开始之前及之后确定了体脂含量。以50μg/kgSEQIDNO:7处理显示与媒剂DIO对照小鼠相比，于第7天开始在每日体重方面有统计学显著下降，并持续到研究结束(研究结束为p>0.0001)。以50μg/kgSEQIDNO:8处理显示当与媒剂DIO对照小鼠相比，于第5天开始在每日体重方面显著下降，并持续到研究结束(研究结束为p>0.0001，表10，图1与2)。这些变化是因为体脂降低，如体脂含量的绝对变化所示(表10，图3)。表10.DIO小鼠在4周处理期内的体重变化(平均值±SEM)样品(剂量)整体体重变化(g)体脂变化(g)对照标准饮食+0.94±0.4+2.56±0.4对照高脂饮食+3.83±0.5+5.00±0.5SEQIDNO:7(50μg/kg每日两次)-5.49±0.9-3.73±0.8SEQIDNO:8(50μg/kg每日两次)-5.38±0.5-3.81±0.6实施例8：饮食诱导的肥胖(DIO)C57BL/6雌性小鼠中SEQIDNO:15在每日一次皮下处理后对血糖和体重的急性及慢性效果1)葡萄糖概貌在血液取样以确定血糖基线水平之后，对喂养饮食诱导的肥胖雌性C57BL/6小鼠皮下施用50μg/kg的SEQIDNO:15或磷酸盐缓冲溶液(标准或高脂饮食的介质对照)。在预定的时间点，取得更多血液样品来测量血糖并产生24小时的血糖概貌。SEQIDNO:15证明与DIO对照小鼠相比，在化合物给药后时间点t＝1、2、3、4、6及24小时血糖显著降低(p<0.001，2-W-ANOVA-RM，事后Dunnett氏检验；平均值±SEM)(参见图5)。2)体重肥胖的C57BL/6雌性小鼠经每天一次以50μg/kgSEQIDNO:15或媒剂皮下处理4周。每天记录体重，并在4周的处理开始之前及之后确定了体脂含量。以50μg/kgSEQIDNO:15处理显示当与媒剂DIO对照小鼠相比，于第4天开始在每日体重方面有统计学显著下降，并持续到研究结束(研究结束为p>0.001，表11，图6)。这些变化是因为体脂降低，如体脂含量的绝对变化所示(表11，图7)。表11.DIO小鼠在4周处理期内的体重变化(平均值±SEM)实例(剂量)整体体重变化(g)体脂变化(g)对照标准饮食+1.71±0.3+0.71±0.4对照高脂饮食+5.41±0.5+3.26±0.4SEQIDNO:15(50μg/kg每日一次)-4.59±1.1-4.01±0.68表12.序列序列表<110>赛诺菲(SANOFI)<120>作为肽性双重GLP-1/胰高血糖素受体激动剂的毒蜥外泌肽-4衍生物<130>DE2014/029<150>EP14305501.0<151>2014-04-07<160>25<170>PatentInversion3.5<210>1<211>39<212>PRT<213>吉拉毒蜥(Helodermasuspectum)<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>1HisGlyGluGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnMetGluGlu151015GluAlaValArgLeuPheIleGluTrpLeuLysAsnGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>2<211>30<212>PRT<213>人(Homosapiens)<220><221>MOD_RES<222>(30)..(30)<223>酰胺化的C-末端<400>2HisAlaGluGlyThrPheThrSerAspValSerSerTyrLeuGluGly151015GlnAlaAlaLysGluPheIleAlaTrpLeuValLysGlyArg202530<210>3<211>29<212>PRT<213>人(Homosapiens)<400>3HisSerGlnGlyThrPheThrSerAspTyrSerLysTyrLeuAspSer151015ArgArgAlaGlnAspPheValGlnTrpLeuMetAsnThr2025<210>4<211>31<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(20)..(20)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基)<400>4HisAlaGluGlyThrPheThrSerAspValSerSerTyrLeuGluGly151015GlnAlaAlaLysGluPheIleAlaTrpLeuValArgGlyArgGly202530<210>5<211>42<212>PRT<213>人(Homosapiens)<400>5TyrAlaGluGlyThrPheIleSerAspTyrSerIleAlaMetAspLys151015IleHisGlnGlnAspPheValAsnTrpLeuLeuAlaGlnLysGlyLys202530LysAsnAspTrpLysHisAsnIleThrGln3540<210>6<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(29)..(29)<223>Xaa是D-Ala<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>6HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaXaaGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>7<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(29)..(29)<223>Xaa是D-Ala<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>7HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaXaaGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>8<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>8HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>9<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>9HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>10<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>10HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>11<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(29)..(29)<223>Xaa是D-Ala<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>11HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaXaaGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>12<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(29)..(29)<223>Xaa是D-Ala<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>12HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaSerXaaGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>13<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>13HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaSerGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>14<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(29)..(29)<223>Xaa是D-Ala<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>14HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaLysXaaGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>15<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>15HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaLysGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>16<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>16HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>17<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-十八酰基氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>17HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>18<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys([2-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(2-十八酰基氨基-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基氨基}-乙氧基)-乙氧基]-乙酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>18HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>19<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((2-{2-[2-(2-{2-[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基-十七酰基)氨基-丁酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基氨基]-乙氧基}-乙氧基)-乙酰基)<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>19HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>20<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(29)..(29)<223>Xaa是D-Ala<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>20HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaXaaGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>21<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>21HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuLysAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>22<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(14)..(14)<223>Lys在氨基侧链基团官能化为Lys((S)-4-羧基-4-((S)-4-羧基-4-十六酰基氨基-丁酰基氨基)-丁酰基)<220><221>MOD_RES<222>(29)..(29)<223>Xaa是D-Ala<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>22HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuLysAlaXaaGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>23<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>23HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLysAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>24<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(27)..(27)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>24HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLeuAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuXaaAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>25<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>人工多肽<220><221>MOD_RES<222>(2)..(2)<223>Xaa是Aib<220><221>MOD_RES<222>(39)..(39)<223>酰胺化的C-末端<400>25HisXaaGlnGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnLeuAspGlu151015GlnArgAlaLysLeuPheIleGluTrpLeuLysAlaGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35当前第1页1 2 3