一种多肽在制备治疗或预防代谢综合征的药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种多肽在制备治疗和/或预防代谢综合征的药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 代谢综合征及其并发症，是一种复杂的代谢紊乱症候群，具有极高的发病率与致 死率，严重威胁全球人口的健康。代谢综合征与II型糖尿病、非酒精性脂肪肝、胰岛素抵 抗、肥胖或者超重、动脉粥样硬化、高血压、高胰岛素血症、葡萄糖耐量损伤、糖尿病性心肌 病、血脂异常、肿瘤发生发展有关。其中，每年至少280万人死于肥胖或者超重。高热量饮食 的摄入可诱发多器官炎症反应，打乱细胞代谢的动态平衡，是代谢综合征的首要诱发因素。
[0003] TRB3(TribblesHomologue3)是Tribbles同源蛋白家族成员之一，最早在果蝇中 被鉴定到，并发现该蛋白能抑制有丝分裂，调节发育过程中细胞的增殖、迁移及形态形成。 在哺乳动物中，有三种Tribbles同源蛋白：TRB1，TRB2和TRB3,它们都是假激酶蛋白家族 成员。这三种蛋白都含有Ser/Thr蛋白激酶样结构域（Kinaselikedomain,KD)，但却缺乏 ATP的结合位点和催化残基，因此没有激酶活性。尽管如此，Tribbles蛋白却具有接头蛋 白样的功能，参与多种蛋白复合体的组装。在哺乳动物Tribbles家族成员中，TRB3的研究 最为深入，其相互作用蛋白包括转录因子、泛素连接酶、细胞膜上II型BMP受体以及MAPK、 PI3K信号通路成员。通过与这些蛋白相互作用，TRB3参与了糖脂代谢、脂肪细胞分化、凋 亡、应激和胶原表达等的调控。近来，多种证据表明，TRB3在代谢综合征及其相关疾病的发 生发展过程中都具有重要的调节作用。高糖诱导的代谢综合征大鼠脂肪组织中检测到TRB3 基因的高度表达；在小鼠中TRB3被证明可调控脂质代谢过程；在小鼠糖尿病性心肌病模型 中，沉默TRB3基因可改善胰岛素抵抗以及代谢相关的心脏损伤；在高脂饮食诱导的肥胖小 鼠模型中，基因敲除TRB3可以维持肝脏的胰岛素、血糖稳定。TRB3在肿瘤的发展过程中发 挥重要的促进作用。这些结果提示TRB3可能是治疗代谢综合征及其相关性疾病的潜在靶 点。
[0004] 近年来，众多研究证明自噬可调控代谢综合征及其相关性疾病。经典的自噬被定 义为通过溶酶体途径清除细胞内冗余、错误折叠蛋白以及损伤细胞器，防止氧自由基堆积 与炎症。近年来，自噬被证明可调控脂类的代谢，称为"脂自噬"。P62是自噬过程中重要 的"货车蛋白"。P62蛋白结构域中含有泛素相关结构域（Ubiquitinassociateddomain, UBA)，与泛素化蛋白（Ubiquitin，Ub)结合，作为"货车"将受损细胞器或蛋白募集于自噬小 体膜上的LC3,这个过程主要通过P62蛋白的LIR(LC3_InteractingRegion，LIR)结构域 实现，介导泛素化蛋白的降解，同时，P62的表达水平也随之降低。当自噬受到抑制或自噬 流被阻断时，P62与其结合的泛素化蛋白不能及时降解，在胞浆内堆积而表达升高。因此， 研究和开发TRB3蛋白的抑制剂，或者阻断其与P62蛋白结合的物质，具有很好的恢复自噬 流，治疗代谢综合征及其相关性疾病发生和发展的成药前景。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题是针对目前缺乏能有效利用的TRB3蛋白抑制剂的现 状，而提供一种能特异性结合TRB3的多肽及其衍生物在制备治疗和/或预防代谢综合征的 药物中的应用。
[0006] 本发明的发明人在研究的过程中发现，在高脂饮食诱导的小鼠肝脏中，发现自噬 相关指标LC3、Becline-1、PI3K3C受到抑制，发明人还进一步发现TRB3的表达量升高，同 时，P62蛋白水平增加，其机制为TRB3与p62发生相互作用，阻断了自噬流，造成蛋白与脂 质的堆积。基于发明人的研究工作，本发明提供下述技术方案。
[0007] 本发明提供的技术方案是：一种可特异性结合TRB3的多肽或所述多肽的衍生物 在制备治疗和/或预防代谢综合征的药物中的应用；
[0008] 所述的多肽的氨基酸序列为如SEQ ID NO :1、SEQ ID NO :2和SEQ ID NO :3所示 序列中的任一种；
[0009] 所述多肽的衍生物为所述多肽与细胞穿膜肽接连所形成的嵌合肽。
[0010] 本发明中，所述的如SEQ ID NO :1、SEQ ID NO :2和SEQ ID NO :3所示的氨基酸 序列中，可适当引入氨基酸替换，缺失或添加，只要改变后的氨基酸序列仍然能够形成能与 TRB3特异性结合的多肽且该多肽仍然保持改变前的活性即可。
[0011] 本发明中，所述的细胞穿膜肽为本领域常规所述的细胞穿膜肽，只要其能辅 助将所述多肽送入细胞以发挥作用即可，一般而言，所述的细胞穿膜肽为由10~30 个氨基酸组成的短肽分子。所述的细胞穿膜肽较佳地为Pep2多肽，其氨基酸序列 如SEQ ID NO :4所示；即在本发明中，所述的多肽衍生物较佳地为以P印2多肽连接 如SEQ ID NO :1、SEQ ID NO :2和SEQ ID NO :3所示序列中的任一种多肽后所形成的 嵌合多肽。所述的细胞穿膜肽还可以为HIV-I病毒反转录激活因子（Trans-activator transcription，Tat)蛋白的 TAT 肽（YGRKKRRQRRR，其氨基酸序列如 SEQ ID :5 所示)、 果蝇触角同源异型蛋白的转录因子Antp肽（RQIKIWFQNRRMKWKK，其氨基酸序列如SEQ ID :6 所示）、P印-1 肽（KETWWETffffTEWSQPKKKRKV，其氨基酸序列如 SEQ ID :7 所示）、MPG 肽（GALFLGFLGAAGSTMGAWSQPKSKRKV，其氨基酸序列如 SEQ ID :8 所示）和 RGD 肽（Ar g-Gly-Asp，其氨基酸序列如SEQ ID N0:9所示）中的任一种或多种。所述细胞穿膜肽较佳 地连接在所述多肽的N端或者C端，更佳的是N端。
[0012] 本发明所述的多肽及其衍生物可以作为活性成分用于制备预防和/或治疗代谢 综合征的药物。所述的"活性成分"是指具有预防和/或治疗代谢综合征功能的化合物，即 所述多肽或所述多肽的衍生物用于制备预防和/或治疗代谢综合征的药物。在该药物中， 所述多肽或所述多肽的衍生物可以单独作为活性成分，也可以和其他化合物一起作为活性 成分。
[0013] 本发明中，所述的药物可以包含生理学或药学上可接受的载体，所述的载体可以 为任意合适的生理学或药学上可接受的药物辅料，较佳地选自壳聚糖及其衍生物、卡波姆 和脂质体中的一种或多种。因此，在本发明中，所述的多肽或所述多肽的衍生物较佳地与所 述药物辅料组成药物组合物。所述的药物组合物可以为本领域常规所述的各种剂型，较佳 地是固体、半固体或液体的形式，可以是水溶液、非水溶液或混悬液，更佳地是片剂、胶囊、 颗粒剂、注射剂或输注剂等。所述药物组合物的给药途径较佳地为注射给药或口服给药，所 述注射给药较佳地包括：静脉注射、肌肉注射、腹腔注射、皮内注射或皮下注射途径给药。
[0014] 本发明所述的药物组合物在治疗时的使用剂量根据患者的年龄和病情而定，使用 剂量较佳地为0. 1~15mg/kg，更佳地为5~10mg/kg，最优选为5mg/kg，给药次数较佳地为 一天一次或数次。
[0015] 本发明中，所述的代谢综合征为本领域常规所指，一般指多种代谢成分异常聚集 的病理状态，包括：（1)腹部肥胖或超重，（2)致动脉粥样硬化血脂异常(高甘油三酯（TG)血 症及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C)低下，（3)高血压及（4)胰岛素抗性和/葡萄糖耐量异 常。所述的代谢综合征较佳地包括非酒精性脂肪肝、糖尿病性心肌炎、糖尿病性肾炎、主动 脉炎症、胰岛素抵抗、糖耐量损伤和高胰岛素血症。
[0016] 所述非酒精性脂肪肝为本领域常规所指，一般是指除外酒精和其他明确的损肝因 素所致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征，与胰岛素抵抗和遗传易感 性密切相关的获得性代谢应激性肝损伤，一般包括单纯性脂肪肝（simplefattyliver, SFL)、非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholicsteatohepatitis，NASH)及其相关肝硬化。 [0017] 所述的主动脉炎症为本领域常规所指，一般指主动脉壁的炎症性疾病，可以由