专利名称：15-脱氧精胍林类似物、其制备方法及其治疗应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及与15-脱氧精胍林(15-deoxyspergualin)结构相关的新颖化合物。本发明还涉及该化合物的制备方法及其治疗应用，特别是用作免疫抑制剂。
已知15-脱氧精胍林在免疫抑制方面具有良好的活性，最初是对其抗肿瘤活性进行研究。有许多有关该活性的公开出版物，特别是“Deoxyspergualin in lethal murine graft-versus-hostdisease”，transplantation，vol.51，712-715，no.3(1991年3月)和“15-DeoxyspergualinFron Cytostasis to Immunosuppress-ion，Behring Inst.Mitt.，no.82，231-239(1988)。
但是，15-脱氧精胍林不具有令人满意的化学稳定性，并且人们曾经试图得到更稳定的衍生物，例如用各种α-或ω-氨基酸取代15-脱氧精胍林的α-羟基甘氨酸残基，或者修饰带有胍基团的链片段。这种修饰可参见例如EP-A-0181592或EP-A-0105193。
本发明涉及新的产物，这些产物的总的结构仍与15-脱氧精胍林相关，它们是化学稳定的，并且比现有技术已知的产物具有更大的免疫抑制活性。
本发明产物与现有技术已知产物的化学结构上值得注意的差别是将胍基己基残基连结的酰胺键反转到该分子的中心链片段，中心链片段的性质以及将含手性中心的支链引入该分子的精脒部分中。
本发明的15-脱氧精胍林类似化合物选自(i)式I化合物 其中A是单键、-CH2-、-CH2O-、-CH2NH-、-CH(OH)-、CHF-或-CH(OCH3)-，并且n等于6或8；以及(ii)其加成盐。
式I及下列其它结构式(即II、IV、VI、XI、XI′和XII)中，*C是不对称碳原子(另一种命名为“手性碳原子”)。
本发明还涉及式I化合物及其加成盐的制备方法，所述方法包括通过一种或多种本领域专业人员已知的反应处理使式II化合物脱保护，从而用氢原子置换全部R1、R2和R3基团 其中A和n如上所定义，并且R1、R2和R3可以相同或不同，它们各自为氨基保护基。
本发明还涉及使用选自式I化合物及其无毒性加成盐的物质制备药物以用于治疗以对抗免疫疾病，或对抗疟疾，以及作为药学试剂。
加成盐是指由无机酸或有机酸与式I化合物反应而得到的酸加成盐。用于成盐作用的优选无机酸是盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸。用于成盐作用的优选有机酸是富马酸、马来酸、甲磺酸、草酸、柠檬酸和三氟乙酸。
由于存在上述*C所示的不对称碳原子，以及基团A的性质，式I化合物可以有一个或两个手性碳原子。当A是-CH2-、-CH2O-或-CH2NH-基时，本发明式I化合物中包括外消旋体(其中*C具有(R，S)构型)和对映体(其中*C具有(R)或(S)构型)。当A是-CH(OH)-、-CHF-或-CH(OCH3)-基时，本发明式I化合物有2个手性位点，包括基本上四种非对映异构体的等分子混合物，“半外消旋体”(R，S)-A-(R)-*C、(R，S)-A-(S)-*C，(R)-A-(S，R)-*C和(S)-A-(S，R)-*C，以及四种非对映异构体中的每一种。
实际上，以*C所示的不对称碳原子优选的具有(R，S)或(R)构型。
式I化合物可以通过采用常规反应机制(例如酰胺键形成)、特别是采用肽化学方法而按本身已知的方法制备。
如上所述，本发明涉及的制备方法包括将式II化合物脱保护。
实际上，可以被氢原子置换的保护基R1、R2和R3是肽化学领域中已知的、用于临时保护没有被全部取代的“氨基”的氨基保护基。
下列基团适用于此目的(α)氧羰基类，例如烷氧羰基和苄氧羰基Boc叔丁氧羰基[或(1，1-二甲基乙氧基)-羰基]，Fmoc9-芴基甲氧羰基，Foc糠基氧羰基，Z苄氧羰基，Z(p-Cl)4-氯苄氧羰基，或Z(p-OMe)4-甲氧基苄氧羰基；和(β)苄基类，例如Bn苯甲基。
在这些氨基保护基中，优选的基团是Boc和Bn。
实际上，制备式I化合物或一种其加成盐的方法包括以下步骤(i)根据氨基保护基的性质，采用一种或多种处理方法使式II化合物脱保护 其中A是单键、CH2、CHF、CH(OCH3)、CH(OH)、CH(OCH2C6H5)、CH2O，或CH2NH基团，
n等于6或8，并且R1、R2和R3相同或不同，它们各自为烷氧羰基、苄氧羰基或苄基类的氨基保护基，例如如果R1、R2或R3中至少一个基团是氧羰基，则与强酸(例如尤其是三氟乙酸)反应，或者如果R1、R2或R3中至少一个基团是苄基或A是CH(OCH2C6H5)，则在披钯炭或钯盐存在下催化氢化，由此得到游离碱形式的式I化合物或一种其加成盐；以及(ii)如果需要，从步骤(i)制备的加成盐开始，通过与强碱反应，而得到游离碱形式的式I化合物，然后由所述游离碱得到其它的加成盐。
式II化合物可以通过选自下列的各种方法制备(a)方法A，包括下列步骤或者在有亲核试剂(例如1-羟基苯并三唑)存在下，在有机溶剂、特别是氯化溶剂(如氯仿或二氯甲烷)中，在0℃～40℃之间，用碳化二亚胺类偶合剂(特别是1，3-二环己基碳化二亚胺)，或者在碱性试剂例如特别是N-甲基吗啉存在下，在有机溶剂(特别是四氢呋喃)中，在-35℃至+20℃，与例如氯甲酸异丁酯之类形成混合酸酐，而活化式(III)的酸，从而使式(III)化合物与式(IV)化合物按1mol式III化合物与约1mol式IV化合物的比例进行缩合，以得到式II化合物 其中n等于6或8，A是CH2、CH(OCH3)、CH(OCH2C6H5)或CHF或单键，并且R1是氨基保护基，例如Boc基团， 其中R2和R3相同或不同，它们各自为氨基保护基，例如Boc或苄基(Bn)基团， 其中n、A、R1、R2和R3定义如前；(b)方法B，包括以下步骤(i)在有机溶剂(特别是氯化溶剂，例如二氯甲烷或氯仿)中，在羧基活化剂(例如碳化二亚胺，特别是1，3-二环乙基碳化二亚胺或羰基二咪唑)存在下，以及如果X是OH基时，则在亲核试剂(特别是1-羟基苯并三唑)存在下，或者如果X是氯原子时，则在叔胺(例如三乙胺)存在下，在0℃～40℃之间，使式IV化合物与式V的酸或酰氯按1mol式IV对约1mol式V的比例反应，而得到式VI化合物 其中R2和R3相同或不同，它们各自为氧羰基或苄基类的氨基保护基， 其中X是氯原子或OH基，A是单键、CH2、CHF、CH(OCH3)或CH(OCH2C6H5)基团，并且R4是直链或支链C1-C3-烷基或苯甲基， 其中A、R2、R3和R4如前所定义；(ii)在有机溶剂中，在强碱存在下，将所得的式VI化合物皂化，而得到式(VII)化合物 其中A、R2和R3如前所定义；以及(iii)在上述方法A中所述的相同条件下，将所得到的式VII化合物与式VIII的胺缩合，得到式II化合物 其中n等于6或8，并且R1是氨基保护基，例如Boc基团， 其中A、n、R1、R2和R3如前所定义；(C)方法C，包括以下步骤(i)在惰性溶剂(例如二氯甲烷)中，在室温(15～25℃)下，用氯甲酸酯或对称碳酸酯[特别是碳酸二(4-硝基苯基)酯]将式IX碱的末端NH2基酰化 其中R1是氨基保护基，特别是Boc基，n等于6或8；以及(ii)在惰性溶剂例如特别是二氯甲烷中，用式IV的胺将所得化合物氨基化，得到式II化合物 其中R2和R3相同或不同，它们各自为氨基保护基，特别是Boc基或苯甲基， 其中n、R1、R2和R3如前所定义，并且A是-CH2-NH-；以及(d)方法D，包括以下步骤(i)在惰性溶剂(特别是芳族溶剂，例如甲苯)中，在室温至反应介质的回流温度之间，使式IV的胺与式X的碳酸酯按1mol IV对约1mol X的比例进行反应，而得到式XI化合物或式XI′化合物， 其中R2和R3相同或不同，它们各自为氨基保护基， 其中R5是C1-C3-烷基或苯甲基， 其中R2、R3和R5如前所定义， 其中R2和R3如前所定义；(ii)在有机溶剂中，在强碱存在下，将所得化合物XI或XI′皂化而得到式XII化合物 其中R2和R3如前所定义；以及(iii)在上述方法A中的相同条件下，使所得到的式XII化合物与式VIII的胺缩合，而得到式II化合物 其中n等于6或8，并且R1是氨基保护基，特别是Boc基， 其中n、R1、 R2和R3如前所定义，并且A是CH2O基。
从下面实施例的描述，以及用本发明化合物与本领域已知化合物所得的比较的药理学试验结果，可以更清楚地理解本发明。实施例中所用的命名均是按化学文摘(Chemical Abstracts)中所提出的；按照该命名法，链烷二酸与叔丁醇的单酯在本文中是指“链烷二酸1，1-二甲基乙酯”，而链烷二酸叔丁基乙基酯的二酯是指“链烷二酸1，1-二甲基乙基乙基酯”。
在实验部分，制备涉及中间体，而实施例涉及本发明产物。
如果化合物的结构中含有不对称碳原子，那么没有具体说明的就是指该化合物基本上是两种对映体(外消旋体)的等分子混合物。
如果这些相同的化合物在取代基的同一位置直接标出符号(R)或(S)，则意味着根据Cahn-Ingold-Prelog规则定义为载有该取代基的碳具有(R)或(S)构型。
如果该化合物的结构中含有2个不对称中心，那么在没有具体说明下意味着它们是四种非对映异构体的混合物。
对于质子(1H)或碳13同位素(13C)给出了核磁共振(NMR)信号的图谱特征。对其说明如下化学迁移是相对于TMS的信号，给出了信号峰形状(s单峰，d双峰，t三峰，q四峰，m多峰，bs宽单峰)以及信号提供的质子数。作为说明，1H-NMR谱在300MHz进行。
制备14-[N-(3-羟基丁基)-N-(苯甲基)氨基]丁腈将5g(28·10-3mol)3-[N-(苯甲基)氨基]-1-甲基丙醇溶于60ml丁醇中，加入3.56g(34·10-3mol)碳酸钠、1.06g(7·10-3mol)碘化钾，然后加入7.4g(70·10-3mol)4-氯丁腈在10ml丁醇中的溶液。使该反应混合物搅拌回流20小时。冷却后，过滤，用60ml乙醚洗涤不溶物。减压浓缩合并的滤液，将所得残留物溶于100ml二氯甲烷中。
用50ml 1M HCl萃取所得到的溶液；用50ml二氯甲烷洗涤所得到的酸水相两次，然后缓缓加入50ml 5N氢氧化钠溶液将其调至碱性。用每次50ml二氯甲烷从水相中萃取产物三次。在碳酸钾上干燥所得到的有机相，然后减压浓缩。真空蒸馏所得的黄色液体(7g)而得到6.02g(产率＝87％)所需产物。
沸点＝160～170℃/0.05mmHg。(0.05mmHg相当于约0.066帕)。
制备23-[N-(3-氰基丙基)-N-(苯甲基)氨基]-1-甲基-丙基甲磺酸酯将9.11g(37·10-3mol)按制备1所得的产物制成在150ml无水乙醚中的溶液，并将其冷却至0℃。加入11.23g(111·10-3mol)三乙胺，然后滴加4.66g(40·10-3mol)甲磺酰氯。加完后，于0℃搅拌该混合物1小时，然后在室温搅拌15小时。缓缓加入120ml饱和碳酸氢钠溶液，然后每次用50ml乙醚萃取该反应介质3次。合并有机相，用碳酸钾干燥，然后减压浓缩，得到11.7g(产率＝98％粗产物)的所需产物，它呈粘稠的黄色油。不需进一步纯化即可将该产物用于下一反应步骤。但也可以用正庚烷/乙醚混合物(7/3v/v)作洗脱剂，而在二氧化硅上经色谱以得到纯化的产物。1H NMR(CDCl3)1.33(d，3H)；1.76(m，3H)；1.86(m，1H)；2.37(t，2H)；2.53(m，4H)；2.89(s，3H)；3.48(d，1H)；3.57(d，1H)；4.84(m，1H)；7.28(m，5H).
制备33-[N-(3-氰基丙基)-N-(苯甲基)氨基]-1-甲基-1-叠氮丙烷将10.59g(33·10-3mol)由制备2所得产物制成在70ml二甲基亚砜中的溶液，加入6.43g(100·10-3mol)一氮化三钠。在45～50℃搅拌该反应混合物15小时，然后冷却；加入100ml水，然后用100ml乙醚萃取该混合物。倾析出的水相用乙醚萃取三次，每次30ml，用50ml饱和氯化钠水溶液洗涤合并的有机相，然后用硫酸镁干燥。减压除去溶剂后，用正庚烷/乙醚混合物(7/3v/v)作洗脱剂，将残留的液体在二氧化硅上经色谱纯化，得到7.8g(产率＝78％)所需产物，呈粘稠的无色油。1H NMR(CDCl3)1.22(d，3H)；1.58(m，2H)；1.77(m，2H)；2.34(t，2H)；2.52(m，4H)；3.50(m，3H)；7.26(m，5H).
制备49-氰基-3-甲基-6-(苯甲基)-2，6-二氮杂壬酸1，1-二甲基乙酯将在30ml无水乙酸乙酯中的3.00g(11·10-3mol)按制备3所得产物和2.85g(13·10-3mol)二碳酸二叔丁酯(结构为O[CO2(CH3)3])的产物溶液加到250ml氢化瓶中，加入0.3g10％披钯碳。在室温和2·105Pa压力下，于搅拌下将该混合物氢化15小时。滤出催化剂，然后减压浓缩滤液。
用正庚烷/乙醚混合物(45/55v/v)作洗脱剂，将残留产物在硅胶上经色谱纯化，得到3.47g(产率＝91％)所需产物，呈粘稠的无色油。1H NMR(CDCl3)1.06(d，3H)；1.44(s，9H)；1.45-1.80(m，4H)；2.33(t，1H)；2.48(m，3H)；3.50(q，2H)；3.70(bs，1H)；5.08(bs，1H)；7.27(m，5H).
制备510-氨基-3-甲基-6-(苯甲基)-2，6-二氮杂癸酸1，1-二甲基乙酯将2g阮内镍在180ml无水乙醇中的悬浮液装入氢化装置中。通入氨气10分钟使该悬浮液饱和，然后加入2.95g(8·10-3mol)在制备4中所得产物在20ml无水乙醇中的溶液。在40℃和106Pa压力下，将该反应混合物氢化15小时。
冷却后，滤掉催化剂，并减压浓缩滤液。用甲醇/32％氨水混合物(100/1v/v)作洗脱剂，将残留的油在硅胶上经色谱纯化，得到2.7g(产率＝91％)所需产物，呈无色粘稠的油状。1H NMR(CDCl3)1.04(d，3H)；1.31(s，2H)；1.44(s，9H)；1.30-1.75(m，6H)；2.63(t，2H)；2.25-2.70(m，4H)；3.43(d，1H)；3.60(d，1H)；3.60-3.75(m，1H)；5.74(bs，1H)；7.30(m，5H).
制备63-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-12-氧代-2，4，11-三氮杂十四碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)14-乙基酯将1.05g(8·10-3mol)丙二酸单乙酯溶于15ml无水氯仿中，然后将此溶液冷却至0℃，加入1.65g(8·10-3mol)l，3-二环己基碳化二亚胺和0.108g(0.8·10-3mol)1-羟基苯并三唑水合物。在0℃搅拌0.5小时后，加入1.5g(4.19·10-3mol)[[(6-氨基-乙基)亚氨基]亚甲基]二氨基甲酸二(1，1-二甲基乙基)酯在5ml无水氯仿中的溶液。在室温搅拌该混合物48小时，然后减压浓缩反应介质。用己烷/乙酸乙酯混合物(1/1v/v)作洗脱剂，将所得到的粗产物在二氧化硅上经中压色谱纯化，得到1.95g(产率＝99％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.30(t，3H)；1.35-1.65(m，26H)；3.2-3.35(m，4H)；3.4(td，2H)；4.2(q，2H)；7.1-7.2(bs，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备73-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-12-氧代-2，4，11-三氮杂十四碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯将1.95g(4.15·10-3mol)制备6所得产物溶于15ml二甲氧基乙烷中，加入8.5ml 1N NaOH水溶液。在室温搅拌该混合物15分钟，然后加入25ml水和25ml氯仿，并用1NHCl水溶液将该混合物慢慢地酸化至pH2。将其用氯仿萃取几次，然后干燥有机相并减压浓缩，得到1.8g(产率＝100％所需产物，呈黄色稠油状。1H NMR(CDCl3)1.35-1.65(m，26H)；3.3-3.45(m，6H)；7.05(bs，1H)；8.3(t，1H)；9-11.5(bs，2H).
制备83-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-23-甲基-12，14-二氧代-20-(苯甲基)-2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备6相似的方法，不同的是用6.21g(14·10-3mol)制备7所得产物和4.7g(13.5·10-3mol)10-氨基-3-甲基-6-(苯甲基)-2，6-二氮杂癸酸1，1-二甲基乙酯作为原料，用乙酸乙酯/乙醇混合物(9/1v/v)作洗脱剂在二氧化硅上经色谱纯化后，得到8.5g(产率＝81％)所需产物，呈橙色油状。1H NMR(CDCl3)1.01-1.03(d，3H)；1.23-1.70(m，41H)；2.4-2.7(m，4H)；3.05-3.3(m，6H)；3.35-3.45(td，2H)；3.6-3.8(m，3H)；5.1-5.4(bs，1H)；7.1-7.4(m，5H)；7.55(bs，1H)；7.75(bs，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备93-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-23-甲基-12，14-二氧代-2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲乙基)酯盐酸盐将8.5g(10.9·10-3mol)按制备8所得产物溶于100ml乙醇中，加入0.57g氯化钯和0.7ml浓盐酸。然后在大气压下将该混合物氢化8小时。滤掉催化剂，并用少量乙醇淋洗，将所得滤液减压浓缩，得到7.8g(产率＝98％)所需产物，呈无色油状。1H NMR(CDCl3)1.20(d，3H)；1.25-1.9(m，41H)；2.55-2.80(m，2H)；2.80-3.55(m，10H)；3.75(bs，1H)；4.9(d，1H)；7.9(m，1H)；8.23(bs，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
实施例1三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-N′-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]丙二酰胺将7.8g(10.8·10-3mol)按制备9所得产物溶于40ml二氯甲烷中，加入40ml三氟乙酸。在室温搅拌反应混合物5小时，然后减压浓缩。用水/乙腈/三氟乙酸混合物(8/1/1v/v)作洗脱剂，将残留的油于RP18接枝的二氧化硅(粒度5～20微米)上经中压色谱纯化。将所得的纯馏分合并并冻干。将冻干物溶于100ml水中，每次用100ml乙酸乙酯洗涤该溶液两次，然后将水相再冻干。重复两次该操作以除去三氟乙酸。得到4.5g(产率＝57％)所需产物，呈非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.15-1.20(d，3H)；1.25-1.5(m，8H)；1.5-1.85(m，4H)；1.85-2.0(m，2H)；2.85-3.2(m，12H)；3.25-3.35(m，1H)；6.8-7.55(bs，3H)；7.6(t，1H)；7.9-8.1(m，5H)；8.5-8.75(bs，3H).13C NMR (D2O)18.01；23.71；26.21；26.24；26.35；28.56；28.84；31.22；39.51；40.31；41.88；44.30；44.60；46.10；48.14；57.55；170.01；170.34.
制备103-甲基-10-[2，4，-二氧代噁唑烷-3-基]-6-(苯甲基)-2，6-二氮杂癸酸1，1-二甲基乙酯制备3g(8.6·10-3mol)10-氨基-3-甲基-6-苯甲基-2，6-二氮杂癸酸1，1-二甲基乙酯在50ml无水甲苯中的溶液，加入1.8g(8.6·10-3mol)苯氧基羰基氧基乙酸甲酯在10ml无水甲苯中的溶液，然后加入1.08g(10.7·10-3mol)三乙胺。将该混合物加热至60℃，并在该温度搅拌48小时。减压浓缩反应介质，用甲基环己烷/乙酸乙酯混合物(1/1v/v)作洗脱剂，将所得残留物在二氧化硅上经色谱纯化，得到3.1g(产率82％)黄色粘稠油状产物。1H NMR(CDCl3)1.0-1.1(d，3H)；1.4-1.7(m，15H)；2.35-2.50(m，3H)；2.50-2.65(m，1H)；3.40-3.60(m，4H)；3.60-3.75(m，1H)；4.65(s，2H)；5.35(bs，1H)；7.2-7.3(m，5H).
制备113-甲基-6-(苯甲基)-13-氧杂-12-氧代-2，6，11-三氮杂十五烷二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯将3.1g(7.1·10-3mol)按制备10所得产物溶于20ml二甲氧基乙烷中，加入21ml 1N NaOH水溶液。在室温搅拌该混合物4小时，然后加入75ml水和75ml二氯甲烷。用1N盐酸溶液将该混合物酸化至pH2，并用二氯甲烷萃取。有机相用氯化钠溶液洗涤一次，用硫酸镁干燥，然后减压浓缩，得到3g(产率＝93％)所需产物，呈黄色稠油状。1H NMR(CDCl3)1.15(d，3H)；1.2-2.2(m，15H)；2.35-2.55(t，2H)；2.7-2.9(t，2H)；2.9-3.3(m，4H)；3.5-3.75(m，1H)；4.0-4.3(m，2H)；4.9(d，1H)；5.1(d，1H)；7.4-7.8(m，5H)；12.3(bs，1H).
制备123-[[(1，1-二甲基乙氧基羰基]氨基]-24-甲基-21-(苯甲基)-14-氧杂-12，15-二氧代-2，4，11，16，21，25-六氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备6类似的方法，不同的是，用二氯甲烷作溶剂，用3g(6.65·10-3mol)按制备11所得到的酸和2.61g(6.65·10-3mol)[[(6-氨基己基)亚氨基]亚甲基]二氨基甲酸二(1，1-二甲基乙基)酯作原料，用甲基环己烷/乙酸乙酯混合物(3/7v/v)作洗脱剂在二氧化硅上经色谱纯化后，得到4g(产率＝76％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)0.9-1.1(d，3H)；1.25-1.75(m，41H)；2.3-2.5(m，3H)；2.6(m，1H)；3.1-3.2(bs，2H)；3.2-3.35(q，2H)；3.35-3.45(t，2H)；3.5(q，2H)；3.7(m，1H)；4.5(s，2H)；5.3-5.6(bs，2H)；6.3(bs，1H)；7.2-7.3(m，5H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备13三(三氟乙酸)2-[[[4-[N′[3-(氨基)丁基]-N′-[苯甲基]氨基]-丁基]氨基]羰基氧基]-N-[6-[(氨基亚氨基甲基)-氨基]己基]乙酰胺采用与实施例1类似的方法，不同的是，用4g按制备12所得产物作原料，用水/乙腈/三氟乙酸混合物(7.5/2/0.5v/v)，作洗脱剂在RP18接枝的二氧化硅柱上经色谱纯化后，得到4.2g(产率＝99％)所需产物，呈稠油状。1H NMR(CDCl3)1.1-1.2(d，3H)；1.2-1.6(m，10H)；1.65-2.2(m，4H)；2.9-3.2(m，12H)；3.2-3.35(m，1H)；4.35(s，2H)；6.8-7.3(bs，1H)；7.35(t，1H)；7.45-7.65(m，5H)；7.8 5-8.1(m，3H)；9.8(s，1H).
实施例2三(三氟乙酸)2-[[[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]氨基]羰基氧基]-N-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]乙酰胺将4.2g(5.05·10-3mol)上面制备13所得产物溶于275ml甲醇中，加入0.25ml浓盐酸，然后加入0.25g氯化钯。在室温和大气压下将该混合物氢化14小时。将反应介质过滤并减压浓缩。将所得油溶于100ml水和1ml三氟乙酸中，然后每次用75ml乙酸乙酯洗涤该溶液3次，并冻干，得到3.9g(产率＝99％)所需产物，呈非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.2(d，3H)；1.25-1.70(m，12H)；1.70-1.9(m，1H)；1.9-2.05(m，1H)；2.85-3.15(m，11H)；4.3(s，2H)；6.8-7.5(m，5H)；7.6-7.75(t，1H)；7.8 5-7.95(t，1H)；7.95-8.20(bs，3H)；8.70-8.90(bs，2H).13C NMR9(D2O)18.02；23.65；26.19；26.28；26.76；28.56；28.93；31.22；39.77；40.59；41.88；44.61；46.11；48.22；63.76；157.54；158.21；171.45.
制备143-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-25-甲基-22-苯甲基-14，16-二氧代-2，4，13，17，22，26-六氮杂二十七碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备6相似的方法，不同的是，用2.1g(4.45·10-3mol)3-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-14-氧代-2，14，13-三氮杂二十六碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯和1.55g(4.45·10-3mol)制备5所得化合物作为原料，用乙酸乙酯/乙醇/氨水混合物(7/3/0.1v/v)作洗脱剂在硅胶上经色谱纯化后，得到3.26g(产率＝93％)所需产物，呈黄色非晶形固体。1H NMR(CDCl3)1.02(d，3H)；1.2-1.8(m，45H)；2.55-2.8(m，4H)；3.1-3.3(m，6H)；3.38(td，2H)；3.5-3.7(m，1H)；3.7-3.9(m，2H)；5-5.3(bs，1H)；7.1-7.45(m，5H)；7.5-7.6(bs，1H)；7.7-7.8(bs，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备153-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-25-甲基-14，16-二氧代-2，4，13，17，22，26-六氮杂二十七碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯将3.2g(4.6·10-3mol)制备14所得化合物溶于75ml乙醇中，加入0.25g5％披钯碳。在室温和大气压下将该混合物氢化12小时。滤掉催化剂，将滤液减压浓缩，得到2.15g(产率＝74％)所需产物，呈非晶形固体。1H NMR(CDCl3)1.15(d，3H)；1.25-1.8(m，45H)；2.55-2.7(m，4H)；3.11(s，2H)；3.2-3.3(m，4H)；3.39(td，4H)；3.65-3.8(m，1H)；4.8-4.9(m，1H)；7.05(bs，1H)；7.55(bs，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
实施例3三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-N′-[8-[(氨基亚氨基甲基)氨基]辛基]丙二酰胺采用与实施例1相似的方法，不同的是用2.15g(3.01·10-3mol)按制备15所得到的化合物作为原料，用水/乙腈/三氟乙酸混合物(7.5/2/0.5v/v)作洗脱剂在RP18硅胶上纯化后，得到2.05g(产率＝90％)所需产物，呈非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.18(d，3H)；1.2-1.65(m，16H)；1.65-1.8(m，1H)；1.8-2(m，1H)；2.8-3.1(m，12H)；3.25-3.3(m，1H)；6.8-7.5(bs，3H)；7.55(t，1H)；7.85-8.1(m，5H)；8.45-8.65(m，3H).13C NMR(D2O)18.01；23.69；26.24；26.51；26.69；28.60；28.92；28.96；32.21；39.49；40.46；41.97；44.31；44.59；46.10；48.14；157.89；169.96；170.34.
制备163-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-23-甲基-20-(苯甲基)-13-(苯基甲氧基)-12，14-二氧代-2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯将2.78g(5.05·10-3mol)3-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-13-(苯基甲氧基)-12-氧代-2，4，11-三氮杂十四碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯溶于50ml无水四氢呋喃(THF)中。将该溶液冷却到-25℃，加入1.02g(10.1·10-3mol)N-甲基吗啉和0.69g(5.05·10-3mol)氯甲酸异丁酯。立即形成白色沉淀。将该混合物搅拌0.5小时，然后加入1.76g(5.05·10-3mol)按制备5所得化合物在10ml THF中的溶液。将该混合物搅拌1小时后减压浓缩。用甲基环己烷/乙酸乙酯混合物(7.5/2.5v/v)作洗脱剂，将该产物在硅胶上经色谱纯化，得到3.76g(产率＝86％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.04(dd，3H)；1.2-1.8(m，41H)；2.3-2.7(m，4H)；3.1-3.3(m，4H)；3.3-3.5(m，3H)；3.5-3.75(m，2H)；4.28(s，1H)；4.79(s，2H)；5.3-5.5(bs，1H)；6.95(bs，1H)；7.2-7.4(m，10H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备173-[[(1，1-二甲基乙氧基)-羰基]氨基]-13-羟基-23-甲基-12，14-二氧代-2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备15类似的方法，不同的是用3.76g(4.35·10-3mol)按制备16所得产物作为原料，得到3.05g(定量产率)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.15(d，3H)；1.25-1.75(m，42H)；2.55-2.7(m，4H)；3.1-3.35(m，4H)；3.35-3.45(td，2H)；3.6-3.8(m，1H)；4.42(s，1H)；4.75-4.85(m，1H)；7.2-7.45(m，3H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
实施例4三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-N′[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]-2-羟基丙二酰胺采用与实施例1类似的方法，用3.03g(4.32·10-3mol)按制备17所得的化合物作为原料，用水/乙腈/三氟乙酸混合物(8/1/1 V/v)作洗脱剂、在RP18硅胶上经色谱纯化后，得到1.89g(产率＝60％)非晶形白色固体。1H NMR(DMSO-d6)1.18(d，3H)；1.2-1.65(m，12H)；1.65-1.85(m，1H)；1.85-2(m，1H)；2.8-3.15(m，10H)；3.2-3.35(m，1H)；4.31(s，1H)；6.7-7.4(m，3H)；7.6(t，1H)；7.85-8.05(m，5H)；8.45-8.65(m，3H).13C NMR(D2O)18.01；23.66；26.19；26.28；26.31；28.55；28.94；31.21；39.22；40.00；41.87；44.59；46.09；48.12；73.13；157.23；171.20；171.53.
制备183-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-苯基甲氧基-14-氧代-2，4，13-三氮杂十六碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)16-乙基酯将2.6g(10.9·10-3mol)2-苯基甲氧基丙二酸乙酯溶于50ml二氯甲烷中，并将该混合物冷却至0℃。加入4.34g(22·10-3mol)N，N′-二环己基碳化二亚胺和0.57g(4·10-3mol)1-羟基苯并三唑，搅拌该混合物0.5小时，然后加入4.21g(10.9·10-3mol)[[(8-氨基辛基)-亚氨基]亚甲基]二氨基甲酸二(1，1-二甲基乙基)酯在15ml二氯甲烷中的溶液，在室温搅拌该混合物48小时。减压浓缩反应介质，并用甲基环己烷/乙酸乙酯混合物(7/3)作洗脱剂，将残留物在二氧化硅上经色谱纯化，得到2.7g(产率＝40.8％)所需产物，呈淡黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.25-1.6(m，33H)；3.25(td，2H)；3.39(td，2H)；4.25(q，2H)；4.44(s，1H)；4.54(d，1H)；4.70(d，1H)；6.62(t，1H)；7.3-7.45(m，5H)；8.28(t，1H)；11.5(s，1H).
制备193-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-苯基甲氧基-14-氧代-2，4，13-三氮杂十六碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备7类似的方法，用2.7g(4.45·10-3mol)按制备18所得化合物作为原料，得到2.55g(产率＝99％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.2-1.7(m，30H)；3.2-3.4(m，4H)；4.41(s，1H)；4.71(d，1H)；5.11(d，1H)；6.99(t，1H)；7.35-7.5(m，5H)；8.3(t，1H)；11.3-11.8(bs，1H).
制备203-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-苯基甲氧基-25-甲基-22-苯甲基-14，16-二氧代-2，4，13，17，22，16-六氮杂二十七碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备16类似的方法，用2.55g(4.4·10-3mol)按制备19所得产物和1.54g(4.4·10-3mol)按制备5所得化合物作为原料，得到3.5g(产率＝8.9％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.04(dd，3H)；1.2-1.7(m，45H)；2.3-2.65(m，4H)；3.1-3.3(m，4H)；3.39(td，2H)；3.44(d，1H)；3.57(d，1H)；3.6-3.75(m，1H)；4.28(s，1H)；4.79(s，2H)；5.35-5.5(bs，1H)；6.85-7.1(bs，2H)；7.2-7.4(m，10H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备213-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-羟基-25-甲基-14，16-二氧代-2，4，13，17，22，26-六氮杂二十七碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备15类似的方法，用3.5g(3.92·10-3mol)按制备20所得化合物作为原料，得到2.4g(产率＝85％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.15(d，3H)；1.2-1.8(m，46H)；2.55-2.75(m，4H)；3.2-3.45(m，6H)；3.65-3.8(m，1H)；4.42(s，1H)；4.75-4.9(d，1H)；7.2(t，1H)；7.4(t，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
实施例5三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-2-羟基-N′-[8-[(氨基亚氨甲基)氨基]辛基]丙二酰胺采用与制备1类似的方法，用2.4g(3.29·10-3mol)按制备21所得化合物作为原料，用水/乙腈/三氟乙酸混合物(8/1.5/0.5)作洗涤剂、在RP18硅胶上经色谱纯化后，得到非晶形白色固体。1H NMR(DMSO-d6)1.15-1.65(m，19H)；1.65-1.85(m，1H)；1.85-2(m，1H)；2.85-3.2(m，10H)；3.2-3.35(m，1H)；4.31(s，1H)；6.7-7.5(bs，3H)；7.59(t，1H)；7.8-8.05(m，6H)；8.45-8.7(m，2H).13C NMR(D2O)18.01；23.65；26.32；26.49；26.61；28.60；28.95；29.04；31.21；39.20；40.15；41.97；44.59；46.09；48.12；73.14；157.56；171.15；171.53.
制备223-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-13-甲氧基-23-甲基-20-苯甲基-12，14二氧代-2，4，11，15，20，24，-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备16类似的方法，用3g(6.3g·10-3mol)3-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-13-甲氧基-12-氧代-2，4，11-三氮杂十四碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯和2.2g(6.3g·10-3mol)按制备5所得化合物作为原料，得到3.6g(产率＝68％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.05(dd，3H)；1.2-1.8(m，41H)；2.3-2.7(m，4H)；3.1-3.8(m，12H)；4.1(s，1H)；5.5(m，1H)；6.9(m，2H)；7.29(m，5H)；8.29(t，1H)；11.5(s，1H).
制备233-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-13-甲氧基-23-甲基-12，14-二氧代-2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯盐酸盐将3.3g(4.1·10-3mol)按制备22所得化合物制成100ml乙醇中的溶液，加入0.2ml浓盐酸和300mg 10％披钯炭。在室温和大气压下将该混合物氢化2小时。滤掉催化剂，将滤液减压浓缩，得到2.92g(产率＝94.8％)所需产物，呈白色固体。1H MMR(CDCl3)1.1-2.3(m，44H)；2.8-3.6(m，11H)；3.4-3.6(s，3H)； 4.4(s，1H)；4.9(m，1H)；7.6(m，1H)；7.9(t，1H)；9.3(m，1H)；9.9(m，1H)；11.4(s，1H).
实施例6三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-N′-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]-2-甲氧基丙二酰胺采用与实施例1类似的方法，用2.7g(3.6·10-3mol)按制备23所得化合物作为原料，用水/乙腈/三氟乙酸混合物(8/1.5/0.5v/v)作洗脱剂、在RP18硅胶上经色谱纯化后，得到2.11g(产率＝78％)所需产物，呈非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.2(d，3H)；1.4(m，12H)；1.75-1.95(2m，1H)；3.0(m，11H)；3.3(s，3H)；4.1(s，1H)；7.1(bs，3H)；7.6(t，1H)；8.0(m，4H)；8.6(m，2H).13C NMR(D2O)18.01；23.68；26.18；26.29；26.32；28.55；28.92；31.21；39.21；39.99；41.87；44.60；46.10；48.11；58.65；82.43；157.54；165.65；169.96.
制备243-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-甲氧基-14-氧代-2，4，13，-三氮杂十六碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备18类似的方法，用3.5g(23.65·10-3mol)2-甲氧基丙二酸甲酯和7g(18.1·10-3mol)[[(8-氨基辛基)亚氨基]-亚甲基]二氨基甲酸二(1，1-二甲基乙基)酯作为原料，得到8.6g(产率＝95％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.2-1.65(m，30H)；3.2-3.35(m，2H)；3.38(td，2H)；3.47(s，3H)；3.82(s，3H)；4.30(s，1H)；6.6(t，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备253-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-甲氧基-14-氧代-2，4，13，-三氮杂十六碳-2-烯二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备7类似的方法，用8.6g(16.7·10-3mol)按制备24所得化合物作为原料，得到8.2g(产率＝98％)所需产物，呈黄色非晶形固体。1H NMR(CDCl3)1.25-1.7(m，30H)；3.2-3.45(m，4H)；3.69(s，3H)；4.26(s，1H)；6.9-7.1(bs，1H)；8.25-8.45(bs，1H)；11.3-11.9(bs，1H).
制备263-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-甲氧基-25-甲基-22-苯甲基-14，16-二氧代-2，4，13，17，22，26-六氮杂二十七碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备16类似的方法，用4g(8·10-3mol)按制备25所得化合物作为原料，得到4.8g(产率＝72％)所需产物，呈淡黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.05(dd，3H)；1.2-1.8(m，45H)；2.3-2.7(m，4H)；3.1-3.3(m，4H)；3.3-3.6(m，7H)；3.6-3.75(m，1H)；4.09(s，1H)；5.35-5.55(bs，1H)；6.75-7(m，2H)；7.2-7.35(m，5H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备273-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-甲氧基-25-甲基-14，16-二氧代-2，4，13，17，22，26-六氮杂二十七碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备23类似的方法，用4.8g(5.76·10-3mol)按制备26所得化合物作为原料，得到4.15g(产率＝97％)所需产物，呈油状。1H NMR(CDCl3)1.15(d，3H)；1.25-1.8(m，45H)；1.9-2.1(bs，1H)；2.6-2.75(m，4H)；3.2-3.35(m，4H)；3.35-3.45(m，2H)；3.57(s，3H)；3.65-3.8(m，1H)；4.12(s，1H)；4.8-4.9(bs，1H)；6.85(t，1H)；7.2-7.35(m，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
实施例7三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-2-甲氧基-N′-[8-[(氨基亚氨基甲基)氨基]辛基]丙二酰胺采用与实施例1类似的方洗用4.15g(5.58·10-3mol)按制备27所得化合物作为原料，得到3.8g(产率＝86.5％)所需产物，呈白色非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.18(d，3H)；1.2-1.35(m，8H)；1.35-1.65(m，8H)；1.65-1.85(m，1H)；1.85-2(m，1H)；2.8-3.2(m，10H)；3.25-3.4(m，4H)；4.08(s，1H)；6.6-7.5(bs，3H)；7.62(t，1H)；7.9-8.1(m，6H)；8.5-8.7(bs，2H).13C NMR(D3O)18.01；23.67；26.33；26.50；26.63；28.60；28.94；28.93；29.01；31.21；39.18；40.14；41.97；44.59；46.09；48.11；58.68；82.44；157.54；169.60；169.97.
制备2813-氟-6-苯甲基-12-氧代2，6，11-三氮杂十四烷二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯将1.3g(8.7·10-3mol)2-氟丙二酸乙酯制成在30ml二氯甲烷和3ml二甲基甲酰胺中的溶液，加入2.2g(13.5·10-3mol)1，1-羰基二咪唑。在室温搅拌该混合物3小时，加入3g(8.7·10-3mol)按制备5所得化合物在10ml二氯甲烷中的溶液。在室温继续搅拌48小时。减压浓缩反应介质，用乙酸乙酯/环己烷混合物(6/4v/v)作洗脱剂，于硅胶上经色谱纯化，得到2.3g(产率＝55.6％)的所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.04(d，3H)；1.2-1.7(m，18H)；2.3-2.5(m，2H)；2.5-2.65(m，2H)；3.4-3.8(m，5H)；4.25-4.4(m，2H)；5.25(d，2H)；6.7(bs，1H)；7.3(m，5H).
制备2913-氟-6-苯甲基-12-氧代2，6，11-三氮杂十四烷二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备7类似的方法，用2.25g(4.17·10-3mol)按制备28所得化合物作为原料，得到1.14g(产率＝68％)所需产物，呈白色粉末。M.p.＝50℃.1H NMR(CDCl3)1.1(d，3H)；1.4-2.1(m，15H)；2.7-3.5(m，7H)；4.0-4.3(m，2H)；4.8(m，1H)；5.4(m，1H)；6.3-6.8(m，1H)；7.4(m，5H).
制备303-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-13-氟-23-甲基-20-苯甲基-12，14-二氧代-2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳- 2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备16类似的方法，用670mg(1.5·10-3mol)按制备29所得化合物和530mg(1.5·10-3mol)[[(6-氨基己基)亚氨基]亚甲基]二氨基甲酸二(1，1-二甲基乙基)酯作为原料，得到570mg(产率＝49％)所需产物，呈淡黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.0-1.1(d，3H)；1.2-1.7(m，41H)；2.3-2.7(m，4H)；3.2-3.8(m，9H)；5.07-5.2(dd，1H)；6.8-7.1(m，2H)；7.2-7.4(m，5H)；8.29(t，1H)；11.5(s，1H).
制备313-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-13-氟-23-甲基-12，14-二氧代-2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯盐酸盐采用与制备23类似的方法，用560mg(0.7·10-3mol)按制备30所得化合物作为原料，得到484mg(产率＝93％)所需产物，呈白色固体。1H NMR(CDCl3)1.1-2.1(m，44H)；3.0-3.8(m，11H)；4.8(m，1H)；5.4-5.6(d，1H)；8(m，1H)；8.5(m，1H)；9.7(m，1H)；10.7(m，1H)；11.3(s，1H).
实施例8三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-2-氟-N′-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]丙二酰胺采用与实施例1类似的方法，用460mg(0.62·10-3mol)按制备31所得化合物作为原料，得到350mg(产率＝67％)所需产物，呈白色非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.1(d，3H)；1.2-1.6(m，12H)；1.7-1.9(2m，2H)；2.8-3.2(m，10H)；3.27(m，1H)；5.1-5.28(d，1H)；7.1(m，4H)；7.6(t，1H)；7.95(s，3H)；8.35-8.65(m，4H).13C NMR(DMSO-d6)17.89；22.83；25.67；25.81；25.86；28.34；28.68；30.40；37.87；38.45；40.64；43.17；44.38；46.43；86.46；156.51；170.12；170.14.
制备323-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-氟-25-甲基-22-苯甲基-14，16-二氧代-2，4，13，17，22，26-六氮杂二十七碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备16类似的方法，用670mg(1.5·10-3mol)按制备29所得化合物和571mg(1.5·10-3mol)[[(8-氨基辛基)亚氨基]亚甲基]二氨基甲酸二(1，1-二甲基乙基)酯作为原料，得到1g(产率＝83.3％)所需产物，呈淡黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.06(d，3H)；1.2-1.8(m，45H)；2.5(m，4H)；3.2-3.8(m，9H)；5.1-5.2(d，1H)；5.2(m，1H)；6.9(m，2H)；7.3(m，5H)；8.23(t，1H)；11.5(s，1H).
制备333-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-15-氟-25-甲基-14，16-二氧代-2，4，13，17，22，26-六氮杂二十七碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯盐酸盐采用与制备23类似的方法，用1g(1.2·10-3mol)按制备32所得化合物为原料，得到746mg(产率＝81％)所需产物，呈白色吸湿性固体。1H NMR(CDCl3)1.1-2.1(m，48H)；2.8-3.5(m，9H)；3.6-3.8(m，2H)；4.9(bs，1H)；5.6(d，2H)；7.9(bs，1H)；8.5(m，1H)；11.4(m，1H).
实施例9三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-2-氟-N′-[8-[(氨基亚氨基甲基)氨基]辛基]丙二酰胺采用与实施例1类似的方法，用740mg(0.96·10-3mol)按制备33所得化合物作为原料，得到400mg(产率＝54％)所需产物，呈白色非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.1-1.6(m，19H)；1.75-1.95(2m，2H)；2.8-3.2(m，10H)；3.3(m，1H)；5.12-5.28(d，1H)；7.1(bs，1H)；7.6(t，1H)；7.94(s，3H)；8.3-8.6(m，4H).13C NMR(D2O)18.01；23.65；26.19；26.48；26.57；28.59；28.88；28.91；28.94；31.21；39.30；40.22；41.97；44.59；46.10；48.09；87.27；89.87；156.81；170.12；170.14.
制备343-甲基-6-苯甲基-12-氧代-2，6，11-三氮杂十三烷二酸1-(1，1-二甲基乙基)-13-乙基酯将7g(20·10-3mol)按制备5所得化合物溶于100ml无水二氯甲烷中，加入5.25g(52·10-3mol)三乙胺，然后慢慢加入3.56g(26·10-3mol)乙草酰基氯，在水浴中将混合物冷却至10℃。加完料后，将其搅拌15分钟，然后减压浓缩。用甲基环己烷/乙酸乙酯混合物(4/6，然后是1/9v/v)作洗脱剂，将残留物在硅胶上经色谱纯化，得到6.8g(产率＝75.7％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.0(d，3H)；1.3-1.8(m，18H)；2.3-2.65(m，4H)；3.2-3.35(m，2H)；3.4(d，1H)；3.58(d，1H)；3.6-3.8(m，1H)；4.3(q，2H)；5.2-5.4(bs，1H)；7.2-7.5(m，6H).
制备353-甲基-6-苯甲基-12-氧代-2，6，11-三氮杂十三烷二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备7类似的方法，用6.8g(15.14·10-3mol)按制备34所得化合物作为原料，得到6.4g(定量产率)所需产物，呈白色非晶形固体。1H NMR(CDCl3)1.1(d，3H)；1.3-1.9(m，15H)；2.5-3.45(m，8H)；3.5-3.7(m，1H)；5.3-5.6(bs，1H)；7.25-7.6(m，5H)；7.7-8(bs，1H).
制备363-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-22-甲基-19-苯甲基-12，13-二氧代-2，4，11，14，19，23-六氮杂二十四碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备18类似的方法，用4g(9.5·10-3mol)按制备35所得化合物和3.4g(9.5·10-3mol)[[(6-氨基己基)亚氨基]亚甲基]二氨基甲酸二(1，1-二甲基乙基)酯作为原料，得到1.46g(产率＝20％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.05(d，3H)；1.3-1.8(m，41H)；2.3-2.6(m，4H)；3.1-3.35(m，4H)；3.40(td，1H)；3.45(d，1H)；3.6(d，1H)；3.6-3.8(m，1H)；5.3-5.5(bs，1H)；7.2-7.35(m，5H)；7.4-7.6(m，2H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备373-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-22-甲基-12，13-二氧代-2，4，11，14，19，23-六氮杂二十四碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备15类似的方法，用1.46g按制备36所得化合物作为原料，得到1.25g(产率＝97.5％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.2(d，3H)；1.3-1.8(m，41H)；2.6-2.8(m，4H)；3.25-3.85(m，8H)；4.85(d，1H)；7.45(t，1H)；7.85(t，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
实施例10三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-N′-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]乙二酰胺采用与实施例1类似的方法，用1.25g按制备37所得化合物作为原料，得到580mg(产率＝43％)所需产物，呈白色非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.2(d，3H)；1.2 5-1.65(m，12H)；1.65-1.85(m，1H)；1.85-2.0(m，1H)；2.8-3.2(m，10H)；3.2-3.4(m，1H)；6.8-7.5(bs，3H)；7.65(t，1H)；7.9-8.1(bs，4H)；8.5-8.7(bs，2H)；8.71(t，1H)；8.77(t，1H).13C NMR(D2O)18.00；23.77；26.13；26.23；26.41；28.54；28.82；31.21；39.54；40.31；41.88；44.61；46.09；48.12；157.55；161.65；161.98.
制备383-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-24-甲基-21-苯甲基-14，15-二氧代-2，4，13，16，21，25-六氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备18类似的方法，用2.73g(6.47·10-3mol)按制备35所得化合物和2.5g(6.47·10-3mol)[[(8-氨基辛基)亚氨基]亚甲基]二氨基甲酸二(1，1-二甲基乙基)酯作为原料，得到2g(产率＝39％)所需产物，呈黄色油状。1H NMR(CDCl3)1.05(d，3H)；1.1-1.8(m，45H)；2.3-2.7(m，4H)；3.15-3.30(m，4H)；3.4(td，2H)；3.45(d，1H)；3.6(d，1H)；3.6-3.75(m，1H)；5.3-5.5(bs，1H)；7.2-7.35(m，5H)；7.35-7.6(m，2H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备393-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-24-甲基-14，15-二氧代-2，4，13，16，21，25-六氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备15类似的方法，用2g(2.53·10-3mol)按制备38所得化合物作为原料，得到1.75g(产率＝99％)所需产物，呈无色油状。1H NMR(CDCl3)1.2(dd，3H)；1.2-1.8(m，45H)；2.45-2.9(m，4H)；3.1-3.8(m，8H)；4.7-4.85(bs，1H)；7.4-7.5(bs，1H)；7.7-7.85(bs，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
实施例11三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-N′-[8-[(氨基亚氨基甲基)氨基]辛基]乙二酰胺采用与实施例1类似的方法，用1.75g(2.5·10-3mol)按制备39所得化合物作为原料，得到250mg(产率＝13.5％)所需产物，呈白色非晶形固体。1H NMR(DMsO-d6)1.2(d，3H)；1.2-1.6(m，16H)；1.6-1.8(m，1H)；1.8-2.0(m，1H)；2.8-3.2(m，10H)；3.2-3.35(m，1H)；6.7-7.4(bs，3H)；7.55(t，1H)；7.85-8.05(bs，4H)；8.4-8.6(bs，2H)；8.7(t，1H)；8.77(t，1H).13C NMR(D2O)15.00；20.77；23.12；23.51；23.74；25.60；25.91；25.94；25.98；28.20；36.53；37.45；38.97；41.60；43.09；45.11；157.45；161.55；161.88.
制备403-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-24-甲基-21-苯甲基-12，15-二氧代-2，4，11，14，16，21，25-七氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯将2g(4.8·10-3mol)13-氨基-3-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-12-氧代-2，4，11-三氮杂十三碳-2-烯酸1，1-二甲基乙酯溶于50ml二氯甲烷中，在室温分批加入1.6g(5.3·10-3mol)碳酸二(4-硝基苯基)酯。在室温搅拌该混合物5小时，然后加入1.68g(4.8·10-3mol)按制备5所得化合物在15ml二氯甲烷中的溶液。将反应介质在室温搅16拌小时，然后减压浓缩。用乙酸乙酯/环己烷混合物(4/6v/v)、然后用乙酸乙酯/乙醇混合物(9/1v/v)作洗脱剂，将残留物在硅胶上经色谱纯化，得到2.59g(产率＝68％)所需产物，呈黄色固体。1H NMR(CDCl3)1.0-1.1(d，3H)；1.2-1.8(m，41H)；2.3-2.7(2m，4H)；3.1-3.4(m，8H)；3.5-3.6(m，1H)；3.9(m，2H)；5.2(m，1H)；5.7(m，1H)；6.4(m，1H)；6.8(m，1H)；7.3(m，5H)；8.3(t，1H)；11.45(s，1H).
制备413-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-24-甲基-12，15-二氧代-2，4，11，14，16，21，25-七氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯盐酸盐在200mg 10％披钯炭和0.1ml盐酸存在下，在大气压下，将2.52g(3.2·10-3mol)按制备40所得化合物在40ml乙醇中的溶液氢化。反应5小时后，滤掉催化剂，并减压浓缩该溶液。将残留物溶于水和二氯甲烷中，并酸化至pH2。用水萃取二次后，将合并的水相冻干。不需进一步纯化，即可在下一制备步骤中处理所得到的非晶形固体(2.2g)。1H NMR(CDCl3)1.0-1.1(d，3H)；1.15-1.7(m，39H)；1.8(m，1H)；2.1(m，1H)；2.8-3.1(m，9H)；3.2-3.4(2m，2H)；3.6(s，2H)；7.3(m，2H)；8.2(t，2H)；7.8(t，1H)；9(m，1H)；11(s，1H).
实施例12三(三氟乙酸)N-[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]-N′-[[[[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]氨基]羰基]甲基]脲采用与实施例1类似的方法，用2.2g按制备41所得化合物作为原料，得到1g(产率＝43％)所需化合物，呈白色非晶形固体。1H NMR(DMSO-d6)1.1-1.65(m，15H)；1.7(m，1H)；1.9(m，1H)；3.0(m，10H)；3.3(m，1H)；3.6(s，2H)；4.5-5.5(bs，3H)；6.0-6.4(m，2H)；6.9-7.5(m，2H)；7.6(t，1H)；7.8(t，1H)；8(s，2H)；8.6(m，2H).13C NMR(D2O)18.01；23.69 ；26.20；26.31；27.20；28.56；29.02；31.22；39.85；39.95；41.87；43.98；44.59；46.10；48.26；157.90；161.07；173.72.
制备42(2-羟基-1-(R)-甲基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙酯将24.3g(0.323mol)2(R)-氨基丙醇制成在450ml四氢呋喃和8ml水中的溶液。加入32.6g(0.323mol)三乙胺，然后缓缓加入70.5mg(0.323mol)二碳酸二叔丁酯(即O[CO2(CH3)3])在150ml四氢呋喃中的溶液。在室温搅拌反应介质1小时，并减压浓缩。将油状残留物溶于400ml乙醚中，并用各100ml 0.1N含氯化钠的盐酸溶液洗涤2次，然后用碳酸氢钠溶液洗涤。有机相用硫酸镁干燥，并减压浓缩。将残留物溶于200ml环己烷中并使其结晶。最后从350ml环己烷中将粗产物重结晶，得到49.3g(产率＝87％)所需产物，呈白色晶体。
M.p.＝60℃[α]D22＝+12.1°(c＝1.00；CHCl3)。
制备43[2-(甲基磺酰氧基)-1(R)-甲基-乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙酯将55g(0.314mol)按制备42所得产物溶于600ml二氯甲烷中，并加入90g(0.89mol)三乙胺。将该混合物冷却至-5℃，并缓缓加入51g(0.445mol)甲磺酰氯在100ml二氯甲烷中的溶液。然后使该混合物回复至室温并搅拌15小时。然后将反应介质倒入200ml冰水中。用氯化钠溶液洗涤有机相，然后用硫酸镁干燥，并减压浓缩，得到79g(定量产率)所需粗产物，呈橙色晶体，将其就此用于下一步操作。该产物可以从庚烷中经重结晶而纯化。
M.p.＝76℃。D23＝+29.7°(c＝1.02；CHCl3)。
制备44(2-氰基)-1(R)-甲基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙酯将79g(0.31mol)制备43所得化合物溶于600ml二甲基亚砜中，并加入40.5g(0.62mol)氰化钾。在50℃搅拌该反应介质15小时。将其冷却并在600ml冰水中水解。用各500ml乙醚萃取反应混合物四次，用硫酸镁干燥有机相。减压浓缩后，用甲基环己烷/乙酸乙酯混合物(8/2v/v)作洗脱剂，将粗产物在硅胶上经色谱纯化，得到42g油状物，使其结晶。从甲基环己烷和异丙醚的混合物中重结晶后，得到33g(产率＝57％)所需产物，呈白色晶体。
M.p.＝70℃。D23＝+93.2°(c＝1.00；CHCl3)。
制备45(3-氰基)-1(R)-甲基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙酯将23.64g(0.128mol)按制备44所得化合物制成在500ml乙醇中的溶液，加入10ml1NNaOH溶液和7g阮内镍。在20·105帕氢气压下搅拌该混合物48小时。滤掉催化剂后，通过加入1N盐酸而中和滤液，并减压浓缩。用甲基环己烷/乙酸乙酯/氨水混合物(7.5/2/0.5v/v)作洗脱剂，将残留物在硅胶上经色谱纯化，得到22.1g(产率＝91.5％)所需纯产物，使其结晶。
M.p.＝73℃。D23.5＝+12.0°(c＝1.00；CHCl3)。
制备46[3-(苯甲基氨基)-1(R)-甲基-丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙酯将22.1g(0.117mol)按制备45所得化合物制成在300ml乙醚中的溶液，并加入20g 3分子筛，然后加入12.47g(0.117mol)苯甲醛。在室温搅拌该混合物15小时，滤掉分子筛，并减压浓缩滤液得到32.6g中间体亚胺，将其溶于350ml乙醇中。向该溶液中分批加入6.7g(0.177mol)硼氢化钠，保持温度在约10℃。然后搅拌该混合物3小时，并减压浓缩。将残留物溶于500ml乙醚中，用水洗涤有机相，用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物从环己烷中重结晶得到32.5g(产率＝98％)所需产物，呈黄色晶体。
M.p.＝79℃。D23＝-5.2°(c＝2.00；CHCl3)。
制备479-氰基-3(R)-甲基-6-苯甲基-2，6-二氮杂壬酸1，1-二甲基乙酯将32g(0.115mol)按制备46所得化合物和18.2g(175mol)四氯丁腈制成在300ml丁醇中的溶液。加入14.6g(0.138mol)碳酸钠和4.8g碘化钾，并将该混合物搅拌回流15小时。将其减压浓缩，用甲基环己烷/乙酸乙酯混合物(8/2，然后1/1v/v)作洗脱剂，将残留物在硅胶上经色谱纯化，得到39g(产率＝98％)所需产物，呈非常粘稠的黄色油状。D23＝-6.9°(c＝2.00；CHCl3)。
制备4810-氨基-3(R)-甲基-6-苯甲基-2，6-二氮杂癸酸1，1-二甲基乙酯采用与制备45类似的方法，在3.5·105帕氢气压下，用32.8g(95·10-3mol)按制备45所得化合物作为原料，得到33g(产率＝99％)所需产物，呈无色粘稠油状。[α]D23＝-1.9°(c＝1.00；CHCl3).1H NMR(CDCl3)1.04(d，3H)；1.35-1.8(m，17H)；2.3-2.5(m，4H)；2.64(t，2H)；3.44(d，1H)；3.61(d，1H)；3.62-3.8(m，1H)；5.6-5.8(bs，1H)；7.2-7.35(m，5H).
制备4910-氨基-3(S)-甲基-6-苯甲基-2，6-二氮杂癸酸1，1-二甲基乙酯采用与制备42～48类似的反应步骤，用2(S)-氨基丙醇作为原料，得到具有S构型的所需手性衍生物。D23＝+1.6°(c＝1.20；CHCl3)。
制备503(R)-甲基-10-[2，4-二氧代噁唑烷-3-基]-6-苯甲基-2，6-二氮杂癸酸1，1-二甲基乙酯采用与制备10类似的方法，用1.8g(5.15·10-3mol)按制备48所得化合物作为原料，得到所需产物，呈白色晶体，产率＝90％。
M.p.＝62℃。D22＝-1°(c＝1.00；CHCl3)。
制备513(S)-甲基-10[2，4-二氧代噁唑烷-3-基]-6-苯甲基-2，6-二氮杂癸酸1，1-二甲基乙酯采用与制备50类似的方法，用制备49的化合物作为原料，得到所需产物，呈无色油状。[α]D22＝+0.5°(c＝1.00；CHCl3)。1H NMR(CDCl3)1.05(d，3H)；1.35-1.65(m，15H)；2.35-2.65(m，4H)；3.4-3.75(m，5H)；4.67(s，2H)；5.2-5.4(bs，1H)；7.2-7.4(m，5H).
制备523(R)-甲基-6-苯甲基-13-氧杂-12-氧代-2，6，11-三氮杂戊二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备11类似的方法，用2g(4.6·10-3mol)按制备50所得化合物作为原料，得到2.1g(产率＝99％)所需产物，呈白色非晶形固体。[α]D22＝-3.9°(c＝1.00；CHCl3).1H NMR(CDCl3)1.17(d，3H)；1.25-2.1(m，15H)；2.35-3.3(m，8H)；3.45-3.7(m，1H)；4-4.35(m，2H)；4.8-5.2(m，1H)；7.15-7.8(m，6H)；12.1-12.7(bs，1H).
制备533(S)-甲基-6-苯甲基-13-氧杂-12-氧代-2，6，11-三氮杂戊二酸1-(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备52类似的方法，用按制备51所得化合物作为原料，得到所需化合物，呈白色非晶形固体。D22＝+6.0°(c＝0.41；CHCl3)。
制备543-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-24(R)-甲基-21-苯甲基-14-氧杂-12，15-二氧代-2，4，11，16，21，25-六氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备16类似的方法，用2.08g(4.61·10-3mol)按备52所得化合物作为原料，得到3.6g(产率＝99％)所需产物，呈无色油状。[α]D22＝-2.3°(c＝1.00；CHCl3).1H NMR(CDCl3)1.01(d，3H)；1.3-1.8(m，41H)；2.3-2.5(m，3H)；2.5-2.65(m，1H)；3.05-3.2(m，2H)；3.2-3.3(m，2H)；3.35-3.5(m，3H)；3.6(d，1H)；3.65-3.8(m，1H)；4.5(s，2H)；5.35-5.6(m，2H)；6.25-6.4(bs，1H)；7.2-7.35(m，5H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备553-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-24(S)-甲基-21-苯甲基-14-氧杂-12，15-二氧代-2，4，11，16，21，25-六氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备54类似的方法，用1.56g按备53所得化合物作为原料，得到2.02g(产率＝74％)所需产物，呈无色油状。D22＝+1.8°(c＝100；CHCl3)。
制备563-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-24(R)-甲基-14-氧杂-12，15-二氧代-2，4，11，16，21，25-六氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备15类似的方法，用3.6g(4.5·10-3mol)按制备54所得化合物作为原料，得到3.2g(产率＝99％)所需产物，呈淡黄色油状。[α]D22＝-4.4°(c＝1.00；CHCl3).1H NMR(CDCl3)1.18(d，3H)；1.25-1.95(m，42H)；2.6-2.8(m，4H)；3.1-3.45(m，6H)；3.7-3.9(m，1H)；4.54(s，2H)；4.65-4.8(bs，1H)；5.8-6.1(bs，1H)；6.4-6.6(bs，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备573-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-24(S)-甲基-14-氧杂-12，15-二氧代-2，4，11，16，21，25-六氮杂二十六碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备56类似的方法，用2.0g(2.5·10-3mol)按制备55所得化合物作为原料，得到所需产物，呈黄色油状。D22＝+5.8°(c＝1.00；CHCl3)。
实施例13三(三氟乙酸)2-[[[4-[[3(R)-(氨基)丁基]氨基]丁基]氨基]羰基氧基]-N-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]乙酰胺采用与实施例1类似的方法，用3.2g(4.56·10-3mol)按制备56所得化合物作为原料，得到2.48g(产率＝73％)所需化合物，呈白色非晶形固体。[α]D22＝+1.1°(c＝2.00；CH3OH).1H NMR(DMSO-d6)1.18(d，3H)；1.25-1.65(m，12H)；1.65-1.85(m，1H)；1.85-2.0(m，1H)；2.85-3.15(m，10H)；3.2-3.35(m，1H)；4.33(s，2H)；6.8-7.3(bs，3H)；7.32(t，1H)；7.62(t，1H)；7.86(t，1H)；7.9-8.05(bs，4H)；8.5-8.7(bs，2H).13C NMR(D2O)18.01；23.64；26.19；26.28；26.76；28.56；28.93；31.21；39.77；40.58；41.87；44.60；46.10；48.21；63.75；157.55；157.89；171.44.
实施例14三(三氟乙酸)2-[[[4-[[3(S)-(氨基)丁基]氨基]丁基]氨基]羰基氧基]-N-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]乙酰胺采用与实施例13类似的方法，用1.75g(2.5·10-3mol)按制备57所得化合物作为原料，得到15g(产率＝82％)所需化合物，呈非晶形固体。D22＝-0.95°(c＝2.00；CHCl3)。
制备583-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-23(R)-甲基-12，14-二氧代-20-苯甲基2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备18类似的方法，用4.88g(11·10-3mol)按制备7所得化合物和2.75g(7.88·10-3mol)在制备48所得化合物作为原料，得到4.9g(产率＝80％)所需产物，呈粘稠的油状。[α]D23＝-4.1°(c＝1.00；CHCl3)。1H NMR(CDCl3)1.02(d，3H)；1.25-1.85(m，41H)；2.25-2.7(m，4H)；3.05-3.8(m，11H)；5.2-5.4(bs，1H)；7-7.15(bs，1H)；7.15-7.4(m，6H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
制备593-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-23(R)-甲基-12，14-二氧代-2，4，11，15，20，24-六氮杂二十五碳-2-烯二酸二(1，1-二甲基乙基)酯采用与制备15类似的方法，用4.9g(6.32·10-3mol)按制备58所得化合物作为原料，得到4.32g(产率＝99％)所需产物，呈油状。[α]D23＝-2.8°(c＝1.00；CHCl3).1H NMR(CDCl3)1.2(d，3H)；1.25-2.0(m，42H)；2.6-2.8(m，4H)；3.16(s，2H)；3.2-3.55(m，6H)；3.6-3.85(m，1H)；4.75-4.95(bs，1H)；7.1-7.35(bs，1H)；7.65-7.8(bs，1H)；8.3(t，1H)；11.5(s，1H).
实施例15三(三氟乙酸)N-[4-[[3(R)-(氨基)丁基]氨基]丁基]-N′-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基]丙二酰胺采用与实施例1类似的方法，用4.3g(6.27·10-3mol)按制备59所得化合物作为原料，用水/乙腈/三氟乙酸混合物(8/1/1v/v)作洗脱剂、于RP18硅胶上经色谱纯化后，得到2.1g(产率＝46％)所需产物，呈透明的非晶形固体。[α]D23＝+1.1°(c＝1.00；CH3OH).1H NMR(DMSO-d6)1.2(d，3H)；1.2-1.65(m，12H)；1.65-1.85(m，1H)；1.85-2(m，1H)；2.8-3.15(m，12H)；3.2-3.35(m，1H)；6.7-7.5(bs，3H)；7.62(t，1H)；7.7-8.2(m，6H)；8.3-8.8(bs，2H).13C NMR(D2O)18.02；23.71；26.23；26.35；28.56；28.74；28.84；31.23；39.50；40.31；41.88；44.30；44.61；46.10；48.15；115.25；119.11；158.30；170.02；170.34.
借助移植物对宿主反应(graft-versus-host)试验证明本发明产物的免疫抑制活性。给B6D2F1雌性小鼠(C57B1/6×DBA/2第一代杂交体)腹膜内注射环磷酰胺进行免疫抑制。3天后(试验的第0天；DO)给其静脉注射4×107C57B1/6小鼠脾细胞。然后将动物分成至少8组，并从D1～D5和D7～D10每天经腹膜内注射进行治疗。对照组动物只接受赋形剂。随访60天死亡率。结果按在指定剂量存活天数的平均值表示，并列于表I中，其中所列出的值根据Logrank试验具有显著性(概率小于或等于5％)。为了进行比较，表I还列出了用下列现有技术已知产物所得的数值15-脱氧精胍林(15-DSG)、环孢菌素A(目前治疗使用的参照免疫抑制剂)和EP-A-0105193中所述实施例1的产物。该比较表明本发明产物比现有技术已知产物的活性高达100倍。尤其是，由0.3mg/kg剂量(最低试验剂量)本发明产物具有显著的活性，而作为比较的EP-A-0105193中实施例1的产物只在1mg/Kg剂量时、环孢菌素A在25mg/kg剂量时才具有显著活性。
再者。本发明化合物的溶液稳定性明显大于现有技术已知的产物，特别是15-脱氧精胍林。
本发明产物适于作为治疗或预防性免疫抑制剂而用于治疗，特别是防止血管性或非血管性同种或异种器官排斥、或防止血管性或非血管性移植后移植物对宿主反应，用于治疗遗传学定义的或获得性自免疫疾病(例如系统性红斑狼疮、多发性硬化症、类风湿性多关节炎)或慢性炎性疾病，例如关节性风湿病，以及许多病理状态，这些免疫疾病是对持续临床退化状态应答的起因或因素。
本发明产物还可以与细胞毒素抗癌药物结合使用以限制其副作用，以及与生物技术来源的产物、特别是重组体细胞激动素或单克隆抗体或多克隆抗体结合给药，以减少患者产生的保护性抗体出现。
本发明产物可用于治疗寄生虫病，特别是治疗疟疾。
本发明产物可以口服、注射(特别是肌内或静脉内注射)、局部给药(特别是用于局部的乳膏剂、或滴眼剂)、透皮给药，以栓剂形式经直肠给药、或吸入给药。
本发明产物还适于用作药学试剂，特别是用于自免疫疾病研究。
表I中列出的所有本发明实施例的产物都是三(三氟乙酸)盐形成。表1
表1(续)
权利要求
1.属于15-脱氧精胍林类似物一类的化合物，选自(i)式I化合物 其中A是单键、-CH2-、-CH2O-、-CH2NH-、-CH(OH)-、CHF-或-CH(OCH3)-基团，并且n等于6或8；以及(ii)其加成盐。
2.权利要求1的化合物及其加成盐，其中A是CH2、CH2O基团。
3.权利要求1的化合物及其加成盐，其中*C是具有(R)或(R，S)构型的碳原子。
4.三(三氟乙酸)2-[[[4-[[3-(氨基)丁基]氨基]丁基]氨基]羰基氧基]-N-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基乙酰胺。
5.三(三氟乙酸)2-[[[4-[[3(R)-(氨基)丁基]氨基]丁基]氨基]羰基氧基]-N-[6-[(氨基亚氨基甲基)氨基]己基乙酰胺。
6.制备按权利要求1的式I化合物或一种其加成盐的方法，所述方法包括将式II化合物脱保护，得到相应的游离碱形式的式I化合物或一种其加成盐 其中A是单键、CH2、CHF、CH(OCH3)、CH(OH)、CH(OCH2C6H5)、CH2O或CH2NH基团，n等于6或8，并且R1、R2和R3相同或不同，它们各自为烷氧羰基、苄氧羰基或苄基类的氨基保护基，所述脱保护尤其包括(α)当R1、R2或R3中至少一个基团为氧羰基时，用强酸处理所述式II化合物，和/或(β)当R1、R2或R3中至少一个基团为苄基时，或者当A是CH(OCH2C6H5)基时，将所述式II化合物催化氢化。
7.权利要求6的方法，所述方法涉及制备所述II化合物，该方法选自(a)方法A，包括下列步骤(i)或者在有亲核试剂存在下，在有机溶剂中，在0℃～40℃，用碳化二亚胺类偶合剂，或者在碱性试剂存在下，在有机溶剂中，在-35℃至+20℃，通过形成混合酸酐，特别是与氯甲酸异丁酯的混合酸酐，而以活化式(III)的酸按1mol式III化合物对约1mol式IV化合物的比例将式(III)化合物与式(IV)化合物进行缩合，以得到式II化合物 其中n等于6或8，A是CH2、CH(OCH3)、CH(OCH2C6H5)或CHF基团或单键，并且R1是氨基保护基， 其中R2和R3相同或不同，它们各自为氨基保护基， 其中n、A、R1、R2和R3定义如前；(ii)通过用强酸进行一次或多次处理和/或通过催化氢化将步骤(i)所得式II化合物脱保护，从而用氢原子替换R1、R2和R3，得到式I化合物，其中A是单键、CH2、CHF、CHOCH3、或CH(OH)基团，并且n等于6或8；以及(iii)如果需要，通过与强碱反应，得到游离碱形式的式I化合物，然后由所述游离碱得到其它的加成盐；(b)方法B，包括以下步骤(i)在有机溶剂中，在羧基活化剂以及如果X是OH基时则在亲核试剂存在下，或者如果X是氯原子时，则在叔胺存在下，在0℃～40℃之间，使式IV化合物与式V的酸或酰氯按1mol IV对约1mol V的比例反应，而得到式VI化合物 其中R2和R3相同或不同，它们各自为氧羰基或苄基类的氨基保护基， 其中X是氯原子或OH基，A是单键、CH2、CHF、CH(OCH3)或CH(OCH2C6H5)基团，并且R4是直链或支链C1-C3-烷基或苯甲基， 其中A、R2、R3和R4如前所定义；(ii)在有机溶剂中，在强碱存在下，将所得的式VI化合物皂化，而得到式(VII)化合物 其中A、R2、R3和R4如前所定义；以及(iii)在与上述方法A中所述相同条件下，将所得到的式VII化合物与式VIII的胺缩合，得到式II化合物 其中n等于6或8，并且R1是氨基保护基， 其中A、n、R1、R2和R3如前所定义；(iv)通过用强酸进行一次或多次处理和/或通过催化氢化将步骤(iii)所得式II化合物脱保护，从而用氢原子替换R1、R2和R3，得到式I化合物，其中A是单键、CH2、CHF、CHOCH3或CH(OH)基团，并且n等于6或8；以及(V)如果需要，通过与强碱反应，得到游离碱形式的式I化合物，然后由所述游离碱得到其它的加成盐；(C)方法C，包括以下步骤(i)在惰性溶剂中，在室温(15～25℃)下，用氯甲酸酯或对称碳酸酯将式IX碱的末端NH2基酰化 其中R1是氨基保护基，n等于6或8；以及(ii)在惰性溶剂中，用式IV的胺将所得化合物氨基化，得到式II化合物 其中R2和R3相同或不同，它们各自为氨基保护基， 其中n、R1、R2和R3如前所定义；并且A是-CH2-NH-基；以及(iii)通过用强酸进行一次或多次处理和/或通过催化氢化将步骤(ii)所得式II化合物脱保护，从而用氢原子替换R1、R2和R3，得到式I化合物，其中A是CH2NH，并且n等于6或8；以及(iv)如果需要，通过与强碱反应，得到游离碱形式的式I化合物，然后由所述游离碱得到其它的加成盐；(d)方法D，包括以下步骤(i)在惰性溶剂中，在室温至反应介质的回流温度之间，使式IV的胺与式X的碳酸酯按1mol IV对约1mol X的比例进行反应，而得到式XI化合物或式XI′化合物 其中R2和R3相同或不同，它们各自为氨基保护基， 其中R5是C1-C3-烷基或苯甲基， 其中R2、R3或R5如前所定义， 其中R2和R3如前所定义，(ii)在有机溶剂中，在强碱存在下，使所得化合物XI或XI′皂化，得到式XII化合物 其中R2和R3如前所定义；以及(iii)在上述方法A中所述的相同条件下，使所得到的式XII化合物与式VIII的胺缩合，而得到式II化合物 其中n等于6或8，并且R1是氨基保护基， 其中n、R1、 R2和R3如前所定义；并且A是CH2O；(iv)通过用强酸进行一次或多次处理和/或通过催化氢化将步骤(iii)所得式II化合物脱保护，从而用氢原子替换R1、R2和R3，得到式I化物，其中A是CH2O，并且n等于6或8；以及(V)如果需要，通过与强碱反应，得到游离碱形式的式I化合物，然后由所述游离碱得到其它的加成盐。
8.治疗组合物，它含有与生理可接受赋形剂相结合的至少一种选自权利要求1的式I化合物及其无毒加成盐的化合物。
9.适用于合成权利要求1的式I化合物的中间体，它选自式II化合物 其中A是单键、CH2、CHF、CH(OCH3)、CH(OH)、CH(OCH2C6H5)、CH2O或CH2NH基团，n等于6或8，并且R1、R2和R3相同或不同，它们各自为烷氧羰基、苄氧羰基或苄基类氨基保护基。
10.使用选自权利要求1的式I化合物及其无毒加成盐的免疫抑制物质以制备用于治疗以对抗免疫疾病的药物。
11.使用选自权利要求1的式I化合物及其无毒加成盐的物质以制备用于治疗以对抗疟疾的药物。
12.选自权利要求1的式I化合物及其无毒加成盐的物质作为药学试剂的用途。
全文摘要
本发明涉及新工业产品，即与15-脱氧精胍林结构相关的、式(I)结构的化合物及其加成盐其中A是单键、-CHn等于6或8。这些新化合物特别适合于用作免疫抑制剂。本发明还涉及制备所述化合物的方法。
文档编号A61P37/06GK1119191SQ9510216
公开日1996年3月27日 申请日期1995年2月22日 优先权日1994年2月24日
发明者帕特里斯·雷诺特, 卢克·勒布雷顿, 帕特里斯·达塔特里, 菲利普·德里帕斯, 索思·萨姆里斯 申请人:弗尼亚工业和卫生