通过具有组氨酸的水性制剂在弱酸性至中性pH稳定的免疫球蛋白的制作方法
【专利说明】通过具有组氨酸的水性制剂在弱酸性至中性pH稳定的免 疫球蛋白
[0001] 本申请是申请日为2011年09月16日、申请号为201180044452. 4 (国际申请号为 PCT/US2011/052053)、名称为通过具有组氨酸的水性制剂在弱酸性至中性pH稳定的免疫 球蛋白的发明专利申请的分案申请。
[0002] 相关申请的交叉引用
[0003] 本申请要求美国临时申请号61/384,209(其于2010年9月17日提交，并为所有 目的将其申请的内容以其整体通过引用的方式明确地纳入本文）的权益。
【背景技术】
[0004] 生物学通过生物过程创造医药产品，包括从天然来源（例如人类血浆）分 离配制品和重组DNA技术。在医疗保健和制药行业内，对患者的治疗和整体收入增 长，生物学产品正变得越来越重要（GoodmanM.NatRevDrugDiscov. (2009)Nov; 8(11) :837)。一类重要的生物药物是治疗性蛋白质，无论是从天然来源分离的，还是重 组产生的。例如，通过从汇集的人类血浆中分离，制备血浆蛋白质，用于治疗性地给药， (例如GAMMAGARDLIQUID?[IVIG，ImmuneGlobulinIntravenous(Human) 10 % ]; BaxterInternational,Deerfield,IL)和重组的方式（例如ADVATE?[AntihemophilicFactor(Recombinant)，Plasma/Albumin-FreeMethod]；Baxter International,Deerfield,IL)〇
[0005]治疗性蛋白质的给药主要通过静脉（IV)、皮下（S?和肌肉内给药，但是也可以根 据所述治疗性蛋白质和待治疗的病情，使用其它给药途径。大多数免疫球蛋白按照较大体 积静脉给药，可以通过所述静脉途径迅速递送，以提供需要的IgG生理水平，以便有效地 治疗各种疾病，如原发性免疫缺陷（PID)、免疫（先天的）血小板减少性紫癜（ITP)和川崎 综合征。由于IV给药的性质，通过这条路线的治疗过程是缓慢的、及时的过程，导致患者依 从性的问题。
[0006] 治疗性蛋白质的皮下（S?给药是静脉给药的替代途径。与静脉注射相比，SQ给 药有以下几个优点。例如，它可以降低全身性反应的发生率，不要求有时困难的IV途径，并 给出了患者更大的独立性。
[0007] 为了提高患者依从性，提供在液体中蛋白质（准备用于制剂），是方便的。然而， 当在中性或接近中性的pH值时配制，许多人或人源化治疗性蛋白质是不稳定的。蛋白质 存在的各种降解途径，尤其是在液体制剂中，意味着化学和物理性质的不稳定。化学不稳 定性，包括脱氨、聚集、剪切的肽骨架和蛋氨酸残基的抗氧化。物理性质的不稳定现象，包 括，例如，聚合。蛋白质不稳定性，特别是在弱酸性至中性pH值不稳定蛋白质的问题尤其严 重。为了解决这些问题，静脉给药的免疫球蛋白都已经被配制成酸性pH，有效地提高他们 在所述制剂中的稳定性（配制成酸性pH值的产品，例如，Gamunex(Talecris)，Gammagard Liquid(Baxter)或Privigen(CSL)。
[0008] 为了解决这些问题，治疗性蛋白质通常配制成在酸性pH，这有效地增加了它们在 所述制剂中的稳定性。不幸的，科学类出版物已经报道，例如，酸性水性配制物的肌肉内给 药能导致疼痛感，并且潜在地导致组织损伤（Steenetal.，2001;Slukaetal.，2000,为 所有目的，其公开以其整体通过参考的方式并入本文）。在其他情况下，其中水性制剂已被 发现不能充分地稳定所述治疗性蛋白质，使用冻干制剂（其在在给药前必须再生）。在这两 种情况下，这些因素给患者可以导致不太满意的药物给药经验和/或不便，导致患者的依 从性降低。
[0009] 美国专利号6, 267, 958描述了冻干单克隆抗体的制剂，所述单克隆抗体制剂具有 低浓度的、pH6. 0或7. 0的组氨酸缓冲剂（例如5-10mM)，和二糖（即蔗糖或者海藻糖）； 所述二糖摩尔浓度为所述单克隆抗体摩尔浓度100至1500的倍。然而，所述单克隆抗体制 剂在缺乏所述二糖时是不稳定的，如被在再生期间高水平的聚集（当与单独的组氨酸配制 时，）证明的。
[0010] 美国专利申请出版号2010/0015157描述了具有pH5. 5或6. 5、低浓度组氨酸乙酸 盐缓冲剂（即10_20mM)，以及非离子表面活性剂和/或二糖（蔗糖或海藻糖）的单克隆抗 体制剂。然而，所述单克隆抗体制剂在缺乏非离子表面活性剂和/或二糖类时是不稳定的， 如通过高浊度和水平的抗体聚集（在与组氨酸单独配制时的组合物中观察到）所证明的。
[0011] 因此，有需要一种技术，开发制剂和配制方法，以使这些易变的治疗性蛋白质在水 性组合物（在弱酸性至中性pH)中稳定。本发明满足这些和其他需要，在其他方面，提供免 疫球蛋白组合物，与组氨酸在弱酸性至中性pH配制时使所述易变的治疗性蛋白质稳定。
[0012] 发明概述
[0013] 本发明部分地是基于以下意外发现：在免疫球蛋白组合物中包括组氨酸，并配制 成弱酸性至中性，使所述制剂显著地稳定。
[0014] 有利的是，本文提供的所述储存稳定的水性免疫球蛋白组合物，在不同温度下长 期保持稳定（例如一年或更久），而没有将额外的赋形剂和糖类纳入作为包含物。
[0015] 与先前描述的单克隆抗体组合物相反，所述单克隆抗体组合物使用低浓度的组氨 酸（即，从5mM至20mM)在弱酸性到中性pH配制，本发明所提供的所述水性免疫球蛋白组 合物用中度到高浓度的组氨酸（即从50mM到500mM)配制；本发明所述的水性免疫球蛋白 组合物在弱酸性到中性pH值、缺乏表面活性剂（例如，非离子表面活性剂等，例如聚山梨酯 80)和糖类（例如，二糖类，如蔗糖和海藻糖）的情况下是稳定的。使用更少的成分配制所述 免疫球蛋白制剂可能是有益的，因为急性肾功能衰竭或不足已经与使用IVIG与蔗糖、麦芽 糖和葡萄糖一起配制相联系（MMWRMorbMortalWklyR印.1999Jun25 ;48 (24): 518-21 ; Kwanetal.HongKongMedJ.2005Feb; 11(1): 45-9)。相似地，严重的过敏性反应可能会 在患者中发生，所述患者给药与聚山梨酯80配制的IVIG。事实上，Hizentrak(1臟?6 GlobulinSubcutaneous(Human), 20 % 液体；CSLBehringAG,Bern,Switzerland)在 这种患者中是禁忌的，所述患者对给药人免疫球蛋白或者Hizentra(例如聚山梨酯 80(HizentraPrescribingInformation)的成分是过敏的。进一步地，稳定地配制在弱酸 性至中性的免疫球蛋白的能力，允许制备药物组合物，所述药物组合物可以皮下地或肌肉 内给药，而没有疼痛和潜在的组织损伤（其与在酸性pH配制的组合物的SQ和IM给药相 关）。
[0016] 在一个方面中，本发明提供储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物，其包含：（a)免 疫球蛋白；（b)从50mM至500mM的组氨酸；（c)从OmM至10mM的碱金属阳离子；以及（d)从 5. 5 至 7. 0 的pH。
[0017] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物含有从150mM至350mM的组氨酸。
[0018] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物含有从225mM至275mM的组氨酸。
[0019] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物含有从OmM至ImM的碱金属阳离子。
[0020] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物含有从10mM至400mM的氯离子。
[0021] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物含有从l〇〇mM至200mM的氯离子。
[0022] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物的pH为从5. 5至6. 5。
[0023] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物的pH为6. 1±0. 2。
[0024] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物进一步包含抗氧化剂。
[0025] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物不含有表面活性剂或者糖。
[0026] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物在惰性气体中储存。
[0027] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物在惰性气体中储存，所述惰性气体选自：氮气、氩气、二氧化碳、氦气、氪气和氙气。
[0028] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物储存在氮气中。
[0029] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 组合物储存在氩气中。
[0030] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白为多克隆免疫球蛋白。
[0031] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白为单克隆免疫球蛋白。
[0032] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白为IgG免疫球蛋白。
[0033] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白从汇集的人类血浆富集。
[0034] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白为重组免疫球蛋白。
[0035] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度为50±5g/L。
[0036] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度小于50g/L。
[0037] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度至少50g/L。
[0038] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度为从50g/L至150g/L。
[0039] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度为l〇〇±l〇g/L。
[0040] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度至少为l〇〇g/L。
[0041] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度为150±15g/L。
[0042] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度为从150g/L至250g/L。
[0043] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度为200±20g/L。
[0044] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，所述 免疫球蛋白的浓度至少为200g/L。
[0045] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，其中 当所述组合物储存在从38°C至42°C下，其稳定为期至少一个月。
[0046] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，当所 述组合物储存在从38°C至42°C下，其稳定为期至少三个月。
[0047] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，当所 述组合物储存在从38°C至42°C下，其稳定为期至少6个月。
[0048] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，当所 述组合物储存在从28°C至32°C下，其稳定为期至少6个月。
[0049] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，当所 述组合物储存在从28°C至32°C下，其稳定为期至少1年。
[0050] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，当所 述组合物储存在从28°C至32°C下，其稳定为期至少2年。
[0051] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，只要 所述免疫球蛋白在聚集态中的百分比保持低于2| %，所述组合物被认为是稳定的。
[0052] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，只要 所述免疫球蛋白在所述聚集态中的百分比为从〇%至2%并且所述免疫球蛋白在所述单体 状态中的百分比为从85%至100%，那么所述组合物被认为是稳定的。
[0053] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，具有 所述相同成分的组合物，但其配制为PH4. 8,当其储存在从38°C至42°C下，其是稳定的为期 小于1个月。
[0054] 在上文提供的所述储存稳定的、水性免疫球蛋白组合物的具体实施方案中，具有 所述相同成分的组合物，但其配制为PH4. 8,当其储存在从28°C至32°C下，其是稳定的为 期小于6个月。
[0055] 在一个方面中，本发明提供稳定免疫球蛋白组合物的方法，所述方法包括配制pH 为在5. 5和7.0之间的所述组合物，其中所述配制的组合物包含：(a)免疫球蛋白；(b)从 50mM至500mM的组氨酸；以及（c)从OmM至10mM的碱金属阳离子。
[0056] 在上文提供的所述方法的具体实施方案中，所述配制的组合物含有从150mM至 350mM的组氨酸。
[0057] 在上文提供的所述方法的具体实施方案中，所述配制的组合物含有从225mM至 275mM的组氨酸。
[0058] 在上文提供的所述方法的具体实施方案中，所述配制的组合物含有从OmM至ImM 的碱金属阳离子。
[0059] 在上文提供的所述方法的具体实施方案中，所述配制的组合物含有从10mM至 400mM的氯离子。
[0060] 在上文提供的所述方法的具体实施方案中，所述配制的组合物含有从100mM至 200mM的氯离子。
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