抗hiv病毒的jb蛋白直肠凝胶制剂配方及制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体涉及一种预防艾滋病的凝胶产品及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 艾滋病（Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)是由人类免疫缺陷病毒 (Human immunodeficiency virus，HIV)感染引起的以全身免疫系统严重损害为特征的传 染性疾病，自其被发现以来，已严重威胁人类的生存，对全球人口健康和社会经济的发展产 生巨大的影响。HIV的传播途径主要是不安全的性接触、静脉注射、输血、分娩、哺乳等。最 初HIV仅在吸毒和同性恋人群中传播，而现在性传播，尤其是异性间性传播已成为艾滋病 传播的主要途径，其比例达80%，在非洲一些国家更高达90%，其中女性感染者比例呈逐渐 增加的趋势。我国自1985年发现第一例艾滋病患者开始，HIV感染人数不断上升，尤以近 年来发展势头迅猛。随着我国艾滋病传播模式的转变，性接触己逐渐成为我国HIV / AIDS 的主要传播途径。因此，对于我们这样一个人口基数巨大的国家，为了有效地控制艾滋病， 需要加大预防方面的投入，尤其是要注意HIV性传播的预防。
[0003] 为降低HIV性传播或性传播疾病采取了很多预防措施，包括禁欲、一夫一妻制、常 规使用安全套以及男性包皮环切术。但是对于HIV高致病地区的人群，由于社会、经济和文 化因素不能有效利用上述预防措施。联合国艾滋病规划署和世界卫生组织提出开发具有预 防功能的新技术来保护人群免受感染。各种新技术中，又以局部使用的杀微生物剂最受关 注，局部使用的杀微生物剂能使性伙伴即使在不使用安全套的情况下避免感染HIV，但遗憾 的是目前所开发杀微生物剂大多是由于安全性、有效性和可接受性问题导致开发失败。因 此，开发有效的杀微生物剂来预防HIV的性接触传播是目前全球艾滋病预防的首要任务和 重要课题。最近的临床试验显示，一种含有1% TDF (核苷类逆转录酶抑制剂，NRTI)的阴道 凝胶可显著降低HIV性传播的风险。在性交前和后使用该凝胶的妇女HIV感染率平均减少 了 39%。在那些用药高依从性（即在>80%情况下都坚持使用该凝胶）的女性中，HIV的感染 率可减少54%，而在那些用药低依从性（即在〈50%情况下坚持使用该凝胶)的女性中，HIV的 感染率只减少了 28%。这些研宄成果为杀微生物剂的凝胶制剂的研发又点燃了新的希望。
[0004] 杀微生物剂是一种含有抗HIV成分的制剂，包括凝胶、乳脂等不同剂型，可阻止 HIV黏附或侵入阴道或直肠黏膜内的靶细胞或抑制病毒在细胞内的复制，从而起到预防艾 滋病的作用。研发具有长期或短期缓释功能的杀微生物剂剂型，并使用比NRTI活性更好 的非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI)或HIV进入抑制剂（EI)成为当前国际杀微生物剂研 宄的热点和最前沿。早在1996年，国际著名病毒学家姜世勃教授就发现从牛奶中提取的、 经化学修饰后的一个蛋白质（现称"JB蛋白"）具有很强的抗HIV活性，后续研宄不断证实， JB蛋白是研制预防HIV性传播的最佳杀微生物剂成分。JB蛋白的杀微生物剂活性可以参 考以下专利：名称：一种预防和控制人乳头瘤病毒感染的生物制剂的制备方法，专利号：ZL 201210066696. 9。JB蛋白的杀微生剂生物活性主要来源于其蛋白表面分布的强负电荷，这 种电荷分布使其极易结合病毒粒子表面的正电荷密集区，从而阻挡病毒粒子结合人体受体 进行感染，达到抗病毒的效果。JB蛋白来源于天然蛋白，对人体亲和性高，副作用小。
[0005] 因此，研发具有长期或短期缓释功能的杀微生物剂剂型，并使用比NRTI活性更好 的非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI)或HIV进入抑制剂（EI)成为当前国际杀微生物剂研宄 的热点和最前沿。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种抗HIV病毒的新型直肠凝胶产品及其制备方法，这种 凝胶制品以JB蛋白为主要的杀微生物剂活性物质，以卡波姆为主要基质成分。
[0007] 本发明是采用如下技术方案实现的： 一种抗HIV病毒的JB蛋白直肠凝胶制剂配方，包括如下重量比例的组分： JB蛋白 （XI~5%， 卡波姆 0. 1~10%， 丙二醇 0. 5~10%， 甘油 5~15%， 羟乙基纤维素 0. 1~3%， 尼泊金甲酯 0. 1~1%， 尼泊金丙酯 0. 1~1%， 水 余量。
[0008] 优选的，包括如下重量比例的组分： JB蛋白 0.5~L5%， 卡波姆 2~5%， 丙二醇 2~5%， 甘油 8~10%， 羟乙基纤维素 1~3%， 尼泊金甲酯 0.1~0.5%， 尼泊金丙酯 0. 5~1%， 水 余量。
[0009] 上述的抗HIV病毒的JB蛋白直肠凝胶制剂的制备方法，包括如下步骤： 先将甘油、丙二醇、羟乙基纤维素溶解到纯水中，然后加入卡波姆，使其充分溶解，再加 入尼泊金甲醋和尼泊金丙醋，充分搅拌均勾后，115°C灭菌30分钟，最后加入用0. 22 μπι的 膜过滤过的JB蛋白，继续搅拌，然后用纯水将余量补足，搅拌均匀，最后用NaOH溶液将得到 的凝胶调节PH值至6. 5到7. 5之间，即得成品。
[0010] 卡波姆（Carbomer)是含有聚烯基聚醚交联的丙烯酸聚合物，是一类非常重要的流 变调节剂，中和后的卡波姆是优秀的凝胶基质，有增稠、悬浮等重要用途，工艺简单，稳定性 好，很低的用量下就能产生高效的增稠作用，从而制备出很宽粘度范围和不同流变性的喷 剂、乳液、膏霜、凝胶和透皮制剂。且具水溶性基质的特点，外观透明美观，搽于皮肤上有特 别的细腻滑爽感，与皮肤组织藕合效果很好。本发明配方中，通过胶状卡波姆可将失活的 HIV吸附、包裹排出体外，并加快受损、糜烂组织快速修复与再生，促进愈合。
[0011] 甘油为无色澄清黏稠液体，无臭，有暖甜味。广泛应用于医药、食品、烟草、化妆品、 牙膏、油墨、涂料、国防、皮革、印染、合成树脂、农药等行业。在本发明配方中用于调节直肠 凝胶的性状。
[0012] 丙二醇为一种化学试剂，与水、乙醇及多种有机溶剂混溶。丙二醇可用作不饱和聚 酯树脂的原料，在化妆品、牙膏和香皂中可与甘油或山梨醇等配合用作润湿剂。在本发明配 方中用于调节直肠凝胶的性状。
[0013] 羟乙基纤维素是一种白色或淡黄色、无味、无毒的纤维状或粉末状固体，由碱性纤 维素和环氧乙烷(或氯乙醇）经醚化反应制备，属非离子型可溶纤维素醚类。由于羟乙基纤 维素具有良好的增稠、悬浮、分散、乳化、粘合、成膜、保护水分和提供保护胶体等特性，已被 广泛应用在石油开采、涂料、建筑、医药食品、纺织、造纸以及高分子聚合反应等领域。在本 发明配方中用于配合调节直肠凝胶的性状。
[0014] 尼泊金酯类是国际上公认的广谱性高效食品防腐剂，抑菌范围广，对霉菌、酵母菌 和革兰氏阴性菌的抑制效果好。目前尼泊金酯已广泛应用于食品、饮料、化妆品、医药等领 域。在本发明配方中用尼泊金甲酯和尼泊金丙酯作为抑菌防腐剂。
[0015] 本发明中的抗HIV病毒的JB蛋白直肠凝胶制剂中的主要活性成分为JB蛋白，这 是由国际著名病毒学家姜世勃教授发现的。后续研宄不断证实，JB蛋白是研制预防HIV性 传播的最佳杀微生物剂成分。JB蛋白的杀微生剂生物活性主要来源于其蛋白表面分布的 强负电荷，这种电荷分布使其极易结合病毒粒子表面的正电荷密集区，从而阻挡病毒粒子 结合人体受体进行感染，达到抗病毒的效果。同时，配方中的其它凝胶基质成分可以辅助将 失活的HIV病毒排出体外。本发明的核心体现在利用JB蛋白，通过甘油、丙二醇、羟乙基纤 维素和卡波姆的合理配合，制备出用于直肠部位的抗HIV病毒制剂，采用优选配方，效果更 佳。
[0016] 本发明中的抗HIV病毒的JB蛋白直肠凝胶制剂具有非常强的抗HIV感染的作用， 如表1所述，这种凝胶对目前比较流行的HIV-I的两种亚型HIV-I IIIB和HIV-I Bal都有 很强的抑制效果，IC5tl均