至少包含氢分子的液体/气体在制备抗神经胶质瘤的药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于抗神经胶质瘤的药，其包含氢分子作为活性成分。
【背景技术】
[0002] 神经胶质瘤（glioma)主要来源于神经上皮，是最常见的原发性颅内肿瘤，其占中 枢神经系统肿瘤的30 %和所有恶性颅内肿瘤的80%，其年发病率为十万分之六。常见分类 有：星形细胞瘤、星形母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、少枝胶质细胞瘤等。好发生于男性， 不同年龄均可发病。多数为浸润性生长，预后较差。临床表现为颅内压升高症状，如头痛、 呕吐、视乳头水肿及局限性神经损害等症状。
[0003] 目前神经胶质瘤的治疗手段多为外科手术集合化疗和放疗的联合疗法。外科手术 最为有效，但其对正常脑组织的损伤也最为严重。同时，多数神经胶质瘤呈浸润性生长，外 科手术无法将其完全切除，因而手术后复发率极高。放疗对神经胶质瘤的作用有限，并且 放疗还可能引起正常组织的癌变，因而放疗在神经胶质瘤的治疗过程中通常都作为辅助手 段。由于血脑屏障的存在，限制了很多化疗药物的应用。替莫唑胺是目前最好的化疗药物 之一，其能高效穿过血脑屏障并且对肿瘤细胞进行有效杀伤。遗憾的是MGMT阳性表达的肿 瘤细胞对替莫唑胺有极强的抵抗能力，所以其应用也相当有限。尽管近30年来在胶质瘤手 术、化疗与放疗方面取得很大的进步，但神经胶质瘤患者的中位生存期仅有14. 6个月。因 此，神经胶质瘤的临床治疗仍是一个需要研宄和探索的难题，目前当务之急是找到疗效更 佳、特异性更好的药物。
[0004] 氢分子是自然界中最小的分子，长期以来，生物学家误认为它是生理学上的惰性 气体。2007 年日本学者Ohsawa等（Ohsawaetal.，2007)在NatureMedicine的报道发 现，呼吸2%的氢气即可有效治疗脑缺血再灌注损伤，并提出了氢可以通过选择性清除羟自 由基和亚硝酸阴离子来发挥其抗氧化作用。该研宄迅速引起广泛关注，并掀起了氢分子医 学研宄的热潮。研宄表明，氢不仅具有抗氧化作用，还具有抗炎症和抗凋亡作用，对于缺血 再灌注损伤、电离辐射损伤、炎症性疾病、代谢性疾病等方面均有很好的防治作用。同时，作 为一种新型抗氧化剂，氢还具有无毒、无残留、制备简单、给药方便等诸多优点，具有很好的 临床应用前景。然而，目前尚未报道氢分子在神经胶质瘤防治方面的应用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是将至少包含氢分子的液体/气体用在抗神经胶质瘤的药物的制 备中，从而提高药物的抗神经胶质瘤效果。其特点在于所制备的抗神经胶质瘤的药中包含 氢分子作为活性成分。
[0006] 本发明的发明人首次发现，将含有氢分子的液态或气态的组合物用在抗神经胶质 瘤的药的制备中，可以抑制神经胶质瘤细胞的生长、浸润和迀移。在下文中详细描述了本发 明。
[0007] (1)-种至少包含氢分子的液体在制备抗神经胶质瘤的药物中的应用。
[0008] (2) (1)所述的应用，其特征在于，其特征在于所述至少包含氢分子的液体的溶剂 可以是纯水、去离子水、蒸馏水、生理盐水或有机酸的酸性水溶液等。
[0009] (3) (2)所述的应用，其特征在于，至少包含氢分子的液体包含0.Ippm以上即 0. 05mM以上的氢分子。
[0010] (4) (2)或（3)所述的应用，其特征在于，至少包含氢分子的液体还包含氧分子。
[0011] (5) (2)-⑷所述的应用，其特征在于，至少包含氢分子的液体可以通过口服、注 射或洗浴的方式施用。
[0012] (6) -种至少包含氢分子的气体在制备抗神经胶质瘤的药物中的应用。
[0013] (7) (6)所述的应用，其特征在于，其中至少含有氢分子的气体是氢气和氧气的混 合物。
[0014] (8) (6)所述的应用，其特征在于，其中至少含有氢分子的气体是氢气、氧气和惰 性气体的混合物。
[0015] (9) (6)所述的应用，其特征在于，其中至少含有氢分子的气体是氢和空气的混合 物。
[0016] (10) (6)-(9)中任何一项所述的应用，其特征在于，至少包含氢分子的液体包含 浓度为1. 〇% -4. 5 % (v/v)的氢气。
[0017](11) (I)-(IO)中任何一项所述的应用，其特征在于，所制备抗神经胶质瘤的药物 用于抑制神经胶质瘤细胞的生长、或者抑制神经胶质瘤细胞的浸润、或者抑制神经胶质瘤 细胞的迀移。
【附图说明】
[0018] 图1显示给予富氢生理盐水和氢气对大鼠神经胶质瘤肿瘤体积的影响。
[0019] 图2显示氢处理对大鼠神经胶质瘤细胞C6生长速率的影响。
[0020] 图3显示氢处理对大鼠神经胶质瘤细胞C6浸润能力的影响。
[0021] 图4显示氢处理对大鼠神经胶质瘤细胞C6迀移能力的影响。
【具体实施方式】
[0022] 虽然下文将参考以下实施例更详细地描述本发明，但本发明的技术范围不仅限于 此，可在不脱离本发明主题和范围的情况下以同等方式对本发明进行各种改变和修饰。
[0023] 氢浓度的测宙
[0024] 用氢电极（UnisenseA/S,Aarhus,Denmark)测定溶液中的氢浓度，通过气体层析 测定氢气浓度（TeramecsCo.，Kyoto)。
[0025] 富氢牛理盐水（或富氢细朐培养液）的制各
[0026] 制备饱和氢水时，将1升生理盐水（或细胞培养液）注入5升体积的耐压瓶中，然 后将氢气引入其中以便产生〇. 4兆帕的压力。2小时后，减压除去瓶内的氢化生理盐水（或 细胞培养液）。通过以上过程获得约〇. 8mM的含饱和氢的生理盐水（或细胞培养液），溶液 中的氢浓度可以用"氢浓度的测定"的方法测定。
[0027] 将氢气给予大鼠
[0028] 为了让每只大鼠都连续吸入氢气，使纯氢气与浓度为2% (I. 5% -2. 5%体积/体 积）的用泵递送的空气混合，将所得气体送入气密塑料容器内。将含氢气的气体混合体以 每分钟2-5升的速率供应其中。用上文中"氢浓度的测定"方法测定氢气浓度。将大鼠的 笼子置于所述容器内，以便将氢气稳定地给予大鼠。
[0029] 实施例1:给予富氢牛理盐水或氢气对大鼠神经胶质瘤具有很好的抑制作用
[0030] 将雄性Wistar大鼠（200-250g)分为3组，每组8只大鼠，其中第一组为富氢生理 盐水组，即通过腹腔注射（5ml/kg)的方法给予富氢生理盐水；第二组为氢气组，即按照上 文中的方法将