丝素蛋白防粘连膜及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医用材料技术领域，尤其涉及一种以丝素蛋白为原料制备，用于外科 手术后隔离不同器官的丝素蛋白防粘连膜及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 组织粘连是由炎症、摩擦、手术等引起的伤口，在治疗过程中产生过量纤维组织或 者出血形成血块，使周边脏器与组织产生粘连的现象。从理论上讲，几乎所有的手术都涉及 到组织之间粘连的问题。全国每年有近千万的各种类型的手术病例，而几乎所有手术都涉 及到组织之间防粘连和局部抗炎症问题。它不仅可以引起严重并发症，如：腹部、盆腔手术 后可引起粘连性肠梗阻，开颅手术后可致术后癫痫，甲状腺术后可致继发性唯通经损伤等， 而且也是再次手术时并发症明显增高的最主要原因，如肠道腺管损伤，限通神经及甲状旁 腺损伤等。
[0003] 在术后防粘连的各种方法中，采用防粘连材料作为隔离物是目前主要采用的方 法。理想的防粘连材料应具有良好的生物相容性、适宜的组织粘附性（不需缝合）；能完全 覆盖创伤表面并且具有足够的体内存留时间；能够降解吸收而不需二次手术将其取出。既 能有效防止粘连形成又不影响伤口的正常愈合，还应具有一定的机械强度而便于实施操作 等。
[0004] 目前，作为防粘连膜，被实际使用的有例如聚乳酸膜、透明质酸膜、壳聚糖膜和氧 化纤维素膜等几种。聚乳酸膜包括聚乳酸与乙醇酸共聚物，或聚乳酸均聚物的膜，质脆，柔 韧性、拉伸性差，与组织难以很好地贴合在一起。透明质酸膜、壳聚糖膜和氧化纤维素膜降 解时间太短，不能在要求的时间内保持物理屏障作用，从而不能较好地完成防粘连功能，不 适于需要长期（例如，约2周以上）与周边组织隔离的情况。其他的例如水凝胶、电纺丝方 法制备的防粘连膜强度不够，合成高分子的提纯与降解有问题。因此，临床上期待着一种方 便、安全、有效的防粘连的新材料问世。
[0005] 透明质酸是细胞外基质的主要的蛋白多糖GAG成份，在人体中广泛分布。它是构 成人体细胞间质、眼玻璃体、关节滑液等结缔组织的主要成分，在体内发挥保水、维持细胞 外空间、调节渗透压、润滑、促进细胞修复的重要生理功能。透明质酸分子中含有大量的羧 基和羟基，在水溶液中形成分子内和分子间的氢键，这使其具有强大的保水作用，可结合自 身400倍以上的水。透明质酸在医疗应用方面具有很多优点：透明质酸的重复二糖单元在 所有物种和组织中都是一致的，因此不会导致透明质酸分子自身的免疫排斥；透明质酸的 聚阴离子，大分子量和线性无分支结构等物理化学特性，使得透明质酸溶液具有高度的粘 弹性；人体各系统都存在对透明质酸代谢的有效途径，具有生物降解性。但是单一的透明质 酸（盐）在体内降解很快，一般体内代谢时间为3天，而腹膜术后14天粘连达到高峰，椎板 术后三周是胶原纤维形成的高峰，所以使用单纯的透明质酸（盐）与粘连形成的时间不符， 故抗粘连效果不佳。
[0006] 丝素蛋白无毒、无刺激性，具有良好的生物相容性，能够促进人体细胞的生长，具 有一定的生物可降解性，通过对多种生物材料的对比研究表明，丝素蛋白具有与胶原同等 的体内、体外生物相容性（8丨〇111&七61^&18,2003,24(3) :401 - 416)，因此，丝素蛋白具有能 够作为生物医用材料的应用潜能。
[0007] 中国发明专利申请CN102847194A公开了一种难溶于水的支架型丝素蛋白膜，该 膜为支架型多孔膜，有利于细胞的进入与生长，甚至可能诱导组织的再生，造成组织之间 的粘连，不利于防粘连的应用。中国发明专利申请CN102847198A公开了一种难溶于水的 丝素蛋白膜，先将丝素蛋白溶液干燥，然后用水蒸气处理，再用乙醇水溶液、纯化水充分浸 沉，获得难溶于水的丝素蛋白膜。该丝素蛋白膜采用了乙醇浸泡的方式，使丝素蛋白膜形 成β_折叠结构，膜比较硬而脆，在作为防粘连膜达不到柔性的要求。中国发明专利申请 CN101669964A公开了一种外科手术防粘连剂，该防粘连剂采用透明质酸和羟基淀粉为原料 混合而成，是液体的防粘连剂。在使用过程中由于液体的流动性，难以起到长期防粘连的效 果。中国发明专利申请CN102380121A公开了一种降解可控的医用防粘连材料及其制备方 法，所述膜材料采用透明质酸钠与魔芋葡甘聚糖共混，乳酸作为改性添加剂，氨水与无水乙 醇的混合溶液作为交联剂的制备方式，制备方法复杂，化学添加剂较多且有毒副作用。中国 发明专利申请CN102836465A公开了一种注射用丝素蛋白透明质酸复合凝胶，以透明质酸 盐为主要成分，加入化学交联剂形成水凝胶，并加入丝素蛋白颗粒降低透明质酸钠的降解， 同样存在化学交联后的毒性残留问题，并且水凝胶的强度不够，起不到防粘连膜的效果。
【发明内容】
[0008] 为解决上述问题，本发明提供了一种丝素蛋白防粘连膜及其制备方法，该防粘连 膜具有极佳的柔韧性，强度高，可生物降解，降解产物为氨基酸，不会产生免疫原性，具有吸 收性，具有良好的组织相容性和血液相容性，可用于外科手术后隔离不同器官防止粘连，可 有效地减少手术并发症，提高手术疗效，减少病人痛苦。
[0009] 为了达到上述的发明目的，本发明采用了如下的技术方案：
[0010] 一种丝素蛋白防粘连膜，所述丝素蛋白防粘连膜中包含丝素蛋白、透明质酸盐和 小分子糖类物质；其中，以质量百分比计算，丝素蛋白的含量为60~90%，透明质酸盐的含 量为1~10%，余量为小分子糖类物质。
[0011] 优选地,所述丝素蛋白的含量为69~75%,透明质酸盐的含量为5~6%,余量为小 分子糖类物质。
[0012] 优选地，所述丝素蛋白的含量为62~67%，透明质酸盐的含量为3~8%，余量为小 分子糖类物质。
[0013] 优选地，所述小分子糖类物质为单糖或二糖或单糖与二糖的任意组合。
[0014] 优选地，所述透明质酸盐为透明质酸钠或透明质酸钾。
[0015] 优选地，所述单糖类选自葡萄糖、乳糖、半乳糖、甘露糖、木糖、核糖、阿卓糖、阿洛 糖、山梨糖、岩藻糖、来苏糖、赤藓糖、艾杜糖、阿洛酮糖、葡萄庚糖、阿拉伯糖、鼠李糖、古洛 糖和塔罗糖中的一种或它们的任意组合。
[0016] 优选地，所述二糖选自蔗糖、果糖、麦芽糖、纤维二糖、龙胆二糖、海藻糖、松二糖、 槐糖和密二糖中的一种或它们的任意组合。
[0017] 本发明还提供了如上丝素蛋白防粘连膜的制备方法，包括步骤：
[0018] (a)、以家蚕丝为原料，配制质量浓度为1~30%的丝素蛋白溶液；
[0019] (b)、配制质量浓度为0. 1~2%的透明质酸盐溶液；
[0020] (c)、配制质量浓度为1~20%的糖溶液；
[0021] (d)、将步骤（a)配制的丝素蛋白溶液在水浴中升温到25~30°C，然后加入步骤 (b)和步骤（c)配制的透明质酸盐和糖溶液搅拌混合均匀，再将混合溶液注入模具中；
[0022] (e)、将步骤（d)注入有混合溶液的模具放入恒温恒湿箱中，在相对湿度为60~ 90%，温度为30~55°C的环境中干燥10~24小时，去除模具，得到所述丝素蛋白防粘连膜。
[0023] 优选地，所述透明质酸盐为透明质酸钠或透明质酸钾。
[0024] 优选地，所述糖溶液中的糖为小分子糖类物质；所述小分子糖类物质为单糖或二 糖或单糖与二糖的任意组合。
[0025] 优选地，所述单糖类选自葡萄糖、乳糖、半乳糖、甘露糖、木糖、核糖、阿卓糖、阿洛 糖、山梨糖、岩藻糖、来苏糖、赤藓糖、艾杜糖、阿洛酮糖、葡萄庚糖、阿拉伯糖、鼠李糖、古洛 糖和塔罗糖中的一种或它们的任意组合；所述二糖选自蔗糖、果糖、麦芽糖、纤维二糖、龙胆 二糖、海藻糖、松二糖、槐糖和密二糖中的一种或它们的任意组合。
[0026] 有益效果：本发明提供的丝素蛋白防粘连膜，以丝素蛋白为基体材料，以聚多糖透 明质酸为柔性水合材料，以小分子糖为增塑剂，制备获得防粘连膜。该防粘连膜具有极佳的 柔韧性、强度高、可生物降解，降解产物为氨基酸，不会产生免疫原性，具有吸收性，具有良 好的组织相容性和血液相容性，可用于防止肝脏脏面、肝门肝、十二指肠、韧带的粘连，甲状 腺术的食道粘连，开颅手术的蛛网膜下腔粘连，盆腔脏器的粘连等，可有效地减少手术并发 症，提1?手术疗效，减少病人痛苦。
【附图说明】
[0027] 图1是本发明实施例中的丝素蛋白防粘连膜的制备方法的工艺流程图。
【具体实施方式】
[0028] 如前所述，为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种丝素蛋白防粘连膜 及其制备方法。本发明是以丝素蛋白为基体材料，以聚多糖透明质酸为柔性水合材料，以小 分子糖为增塑剂，