局部用的维生素d口腔补充组合物的制作方法
【技术领域】
[0001]本申请的主题涉及在治疗口腔炎症中使用的局部用的(topical)维生素D 口腔补充组合物。
【背景技术】
[0002]最近的研宄已表明，人类牙龈上皮细胞(GEC)产生的肽，如防御素(defensins)和导管素(cathelicidin)LL-37，这两者都是抗菌的并且调制固有免疫应答。参见:Diamond,G等人，2008年，“在口腔和肺中保持防御蛋白:相似性和差异性”(“Hold defensepeptides in the oral cavity and the lung: similarities and differences,，，)，牙科研宄杂志(T.Dent.Res.),第87卷:915-927页。研宄还表明这些抗菌肽在细菌性牙周疾病的预防和控制中至关重要。具体地说，在牙周病原菌伴放线杆菌(Aggregaitbacterac tinomyce temcomi tans)存在时，这些肽已被证明会引发增加免疫应答和表现出抗菌活性。还已证实，在辅助性治疗存在时如维生素D补充剂即维生素D3[l，25 (0H)2D3]和它的前体以及衍生物，负责产生这些抗菌肽的基因可以被上调(up-regulated)或诱导产生保护剂的表达提高。参见:McMahone，L等人，2011年6月，“在牙龈上皮细胞中维生素D调制诱导的固有免疫，，(“Vitamin D-mediated induct1n of innate immunity in gingivalepithelial cel I s.”)，传染与免疮杂去(Tnfect.TmMin.),笛 79 卷 6 期:2250-7 页。
【发明内容】
[0003]本发明提供了用于治疗口腔炎症的局部用维生素D 口腔补充组合物。满足本发明目的合适的维生素D包括:
维生素D，
在1，3，和25号碳位置具有羟基的维生素D化合物，
I α，25- 二羟基维生素03的酯类，
1，25-二羟基维生素队的酯类，
1，25 (OH) 2D3，1，25 (OH) 2D3的类似物，
骨化三醇、25 (OH)D^ 25 (OH)D 3的类似物以及它们的组合。
[0004]维生素D补充剂与口腔粘膜穿透吸收促进剂一起被包含在无水乳剂中。
[0005]本发明提供的用于治疗口腔炎症的局部用维生素D补充组合物包括:
可溶于唾液的无水乳剂载体；
达到有效水平的维生素D补充剂；和透口腔粘膜吸收促进剂；其中:
当应用至口腔黏膜时，所述组合物形成附着于所述口腔黏膜上的可溶于唾液的粘膜粘附凝胶；
当所述可溶于唾液的黏膜粘附凝胶持续性地暴露在唾液流体时，所述黏膜粘附凝胶逐渐溶解，以控制所述维生素D补充剂和所述透口腔粘膜吸收促进剂释放到所述口腔黏膜；和
当与所述口腔黏膜接触时，所述维生素D补充剂和透口腔粘膜吸收促进剂被动扩散透过所述口腔黏膜:
(a)调制维生素D在体内的利用度和免疫应答；
(b)维持循环的维生素D在充足的水平；和 (C)最小化尚血1?的风险。
[0006]本发明的维生素D补充组合物，当以无水乳剂组合物的形式局部地应用在口腔黏膜上时，形成附着于口腔黏膜上的凝胶。这些凝胶在唾液存在下逐渐溶解，释放维生素D和透口腔粘膜吸收促进剂，这两者的组合物使维生素D有效地被动扩散透过黏膜。
[0007]初期的牙周炎症、牙龈炎被认为是由牙齿结构的常规部位的细菌生物膜存在下释放的内毒素所引起的炎症反应。如果不进行治疗，这种状况经常发展到更严重的病理状况而被称为牙周炎。研宄认为，频繁使用本发明的维生素D局部用补充组合物通过形成的粘膜粘附凝胶而提供保护，粘膜粘附凝胶在发炎部位持续性地释放维生素D组合物；由此诱导维生素D的被动扩散到黏膜内，这个过程相应地提高了抗菌肽的产量并且激发了公认的治疗免疫调制应答。
[0008]维生素D补充剂的扩散维持体内循环的维生素D在充足的水平，并且调制维生素D在体内的利用度和免疫应答，同时最小化高血钙的风险。
[0009]本发明的组合物中的维生素D在维护牙周健康中的作用
牙周疾病是由口腔细菌种群引起的，这些细菌引发局部炎症反应，导致探诊出血，牙周附属物的流失以及骨骼和牙齿的损伤。它们与人体的系统状况是相关的，包括心脏疾病、糖尿病、肥胖症和代谢综合征。牙周疾病与这些系统状况之间的联系似乎是由于轻微的炎症负荷使得它们通过共同的病理生理机制而联系起来。可以设想，局部分泌的细胞因子和牙周致病菌可以进入血液，进而造成身体其它部位的损害，并且已出现了一些这种炎症负荷的证据。
[0010]肿瘤坏死因子α (TNF-α )和白细胞介素-6 (IL-6)是引起和维持系统性炎症的关键细胞因子，其与牙周炎的发展和严重性密切相关。此外，牙周炎患者相比于牙周健康的个体，观察到这些细胞因子的血清水平较高。
[0011]瘦蛋白、脂联素和抵抗素主要是由脂肪组织分泌的脂肪细胞因子，但是还由单核细胞和巨噬细胞产生，并能直接影响炎症。
[0012]参见:Teles等人，牙周病学杂志(.Tournal of Per1dontology) , 2011 年。
[0013]维生素D在骨的生长和维护中具有重要作用，这可能对维护牙周健康是有益的。最近，有研宄认为，其不是通过对骨代谢的影响而是通过抗炎机制，向牙周疾病、牙质流失和牙龈炎症施加正面影响。因此，通过局部用的、辅助性维生素D补充组合物维持充足的维生素D的血清值，这可能在牙周疾病的预防和治疗中非常重要。
[0014]维生素D在钙稳态、骨生长和维护中具有重要的作用。已证明抗原诱导T细胞增殖的抑制和细胞因子的产生，能够作为免疫调制剂。
[0015]最近，已经有人提出维生素D还具有抗炎性能。通过分析6700个样本(参见:Dietrich等人，美国临床营养学杂志(Am.T.Clin.Nutr.)，2005年，第82卷:575-580页)，发现在血清维生素D最高的五分之一的个体中表现出显著地出血较少、较低的平均牙周袋深度和临床附着物的流失、较少的牙齿缺失数量和BMI数值。还已经提出，维生素D(和钙)补充剂可能对牙周健康产生积极的影响，特别是对探诊出血、牙龈指数和H)。
[0016]参见:Garcia等人，牙周病学杂志(丄Per1dontol.),第82卷:25-32页:和Miley 等人，牙周病学杂志(T.Per1dontol.),2009年,第 80卷:1433-1439页。
[0017]有趣的是，维生素D受体的多态性与广泛性侵袭性牙周炎(GAGP)(参见:Park等人，临床牙周病学杂志(T.Clin.Per1dontol.) 2006年，第33卷:524-528页)和重度慢性牙周炎相关(参见:Wang等人，牙周病学杂志(T.Per1dontol.)，2009年，第80卷:603至608页)。在表现出探诊出血较少、较低平均H)值、CAL和牙齿缺失数量以及较低水平致病菌的个体中，检测到循环的维生素D的水平最高。此外，原先设想的维生素D的抗炎作用，通过其与脂联蛋白的正相关性以及与IL-6和瘦蛋白的负相关性而被证实。
[0018]维生素D的活性形式，即1，25- 二羟基维生素D3[l，25 (OH) 2D3]，是一种调制钙与骨代谢的开环留类化合物激素，控制细胞增殖和分化并发挥免疫调制活性。这些范围内的功能临床上已被开发，用于治疗各种各样的状况，从继发性甲状旁腺功能亢进到骨质疏松、自身免疫性疾病如牛皮癣。最近，在理解1，25 (OH) 2D3功能的新进展和在免疫调制性能的机制中的新观点表明，这种激素在口腔炎症的治疗中有更广泛的应用性。
[0019]维生素D3的二羟基化的生物活性形式也被称为骨化三醇，在钙稳态和骨代谢中是一种核心激素，但还具有一些其它的功能和显著的强力免疫调制性能，这对于辅助性、局部用的补充剂是有吸引力的。
[0020]美国专利号5952317讨论了骨化三醇衍生物及其使用。通过改变或修饰可水解的基团，经过对骨化三醇的调制实现维生素D在体内随着时间变化的控制释放。在结构上，具有理想的生物特性的改进的维生素D化合物的关键特征是:它们是25-二羟基维生素D3的衍生物，或25- 二羟基维生素D衍生物的类似物，其中可水解基团连接在25号碳的羟基上并且可选择性地连接至分子中存在的任何其它的羟基。依赖于各种各样的结构上的因素，例如附加基团的类型、大小、结构复杂性，这些衍生物被认为在体内以不同的速率水解成25- 二羟基维生素D3或形成25- 二羟基维生素D3类似物，从而提供了生物活性维生素D化合物(如1，25- 二羟基维生素D3或其类似物)在体内的“缓慢释放”。这些化合物在体内的“缓慢释放”活性曲线可以通过使用衍生物的混合物(如1，25-二羟基维生素D3的不同衍生物或1，25- 二羟基维生素类似物的不同衍生物的混合物)或使用一种或多种维生素D衍生物连同1，25 (OH) 2D3衍生出的化学修饰性分子组成的混合物而进一步调节。为获得所期望性能的类似物，已经对整个分子进行了修饰。超过1000种不同的维生素D类似物已经在世界范围内合成出来。所有这些类似物落入本发明所讨论和要求保护的维生素D中。
[0021]维生素D受体(VDR)是用于类固醇激素和类维生素A酸的核受体超家族的一个成员。将VDR用作为1，25 (OH) 2D3激活的转录因子，其最终影响RNA聚合酶介导的转录的速率。VDRs不仅仅在通常涉及钙和骨代谢的细胞中存在，而且还存在于其它类型的细胞，如免疫系统的细胞。参见:Chantal Mathieu和Luc