一种将水溶性光甘草定与内皮素拮抗剂复合使用的美白添加剂的制作方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种将水溶性光甘草定与内皮素拮抗剂复合使用的美白添加剂。
【背景技术】
[0002] 研宄表明，在黑色素的生物合成中，酪氨酸酶、多巴色素互变酶（Dopachrome tautomerase)和DHICA氧化酶（DHICA oxidase)同时参与了反应。因此在开发美白剂和美 白化妆品的时候，必须同时考虑这三种酶。
[0003] 上世纪90年代初，日本的Imokawa等人发现，在紫外线照射下，角质细胞释放一种 细胞分裂素，当它被黑色素细胞的受体接受后，会刺激黑色素细胞增殖、分化，并且激活酪 氨酸酶的活性，提高了黑色素的合成量（江志洁，朱育新，吴奇英，张凤翔.黑色素形成 机理的新概念及复合美白剂的应用[J].日用化学品科学.1998 (04):3-5)。
[0004] 光甘草定从特定品种的甘草中提取，是目前世界上公认最有效的天然美白剂。它 不仅抑制酪氨酸酶的活性，同时又能抑制多巴色素互变酶和DHICA氧化酶的活性，是一种 快速、高效、绿色的美白祛斑化妆品添加剂，具有与SOD (过氧化物歧化酶）相似的清除氧自 由基的能力，以及与维生素 E相近的抗氧自由基能力，还具有抗菌消炎、抗氧化、抗衰老、吸 收紫外线、美白亮肤、祛斑的作用。文献报导0.0002%的光甘草定能抑制促黑激素对黑色素 细胞的激活作用，其抑制力达41 % (周梅，肖军，徐艺钊，曾日红.复配"三酶一素"抑制 剂的美白功效评价.中国洗涤用品工业.2011 (2) :71-74)。
[0005] 具有内皮素拮抗作用的天然蛋白的酶解混合肽进入表皮与黑色素细胞的受体结 合后，使得黑色素细胞不再受内皮素的影响，而让每个黑色素细胞内黑色素的合成速度都 降低到该生物体本身的遗传因子和调节因子所规定的正常水平。
[0006] 朱育新、孙东海等人报道将光果甘草经或不经水浸取或提取，用有机溶剂萃 取或回流提取、浓缩，所获浓缩物或<40%纯度的光甘草定，用超滤膜超滤、或不经超 滤直接用高分子树脂吸附，用水、乙醇、丙酮或他们的混合液淋洗，浓缩溶解重结晶， 获得纯度大于90 %的高纯度光甘草定（朱育新，孙东海.高纯度光甘草定的生产方 法· ZL200510023860.8)。
[0007] 崔照云、江志洁等人，将各种纯度的甘草黄酮和环糊精溶解于无水乙醇中，使环糊 精包接甘草黄酮，再真空除去乙醇后，将包接物溶于水中，过滤出去杂质，得到水溶性甘草 黄酮（崔照云，江志洁，姚卫.水溶性甘草黄酮的生产方法，CN 102140144 A)。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的是根据黑色素形成机理，提供一种同时抑制三种酶活性、促黑激素 和内皮素作用的美白添加剂。
[0009] 本发明所涉及的美白添加剂是一种将水溶性光甘草定、内皮素拮抗剂与防腐剂按 照90~99 :10~I :0-50的重量比的混合物，推荐重量比依次为96. 7 :3. 3 :5的复合使用 的美白产品。
[0010] 上述的水溶性光甘草定为其含有2. 0% -2. 5%重量的环糊精包裹光甘草定水溶 液，水溶性光甘草为环糊精包裹光甘草定使其能溶解于水中。
[0011] 本发明所涉及的内皮素拮抗剂其含氮量为8% -15%，分子量< 2000的酶解混合 肽干粉，其是由珍珠蛋白经过木瓜蛋白酶酶解后冻干所得。经B16黑色素瘤细胞模型筛选， 获得的具内皮素拮抗作用的酶解混合肽.
[0012] 所述的防腐剂是戊二醇、苯氧乙醇或己二醇。
[0013] 本发明所涉及的内皮素拮抗剂是一种将珍珠蛋白经过木瓜蛋白酶进行酶解，获得 具有内皮素拮抗作用的酶解混合肽。
[0014] 本发明的上述美白添加剂制备方法，系由混合肽干粉和含有2. 0% -2. 5 %重量的 环糊精包裹的光甘草定的水溶液混合，过滤或加入活性炭过滤，去除杂质，加入或不加入防 腐剂；其中光甘草定水溶液、天然蛋白的酶解混合肽和防腐剂的重量比为90~99 :10~1 : 0 ~50〇
[0015] 所述的酶解混合肽由下述方法获得：在10_80°C和pH值为2-10时，将珍珠蛋白用 木瓜蛋白酶进行酶解10分钟-12小时，超滤膜超滤或者再经干燥成粉，酶解时蛋白和水之 比为1:5-1:120,所述的酶和蛋白的比例为1:10至1:1000。
[0016] 本发明的美白添加剂可以用于美白用品。是一种有效的皮肤美白和防晒产品，能 有效降低UVB照射后皮肤色素的沉着，能够保护皮肤和改善皮肤白度。
【具体实施方式】
[0017] 通过下述实施例将有助于理解本发明，但并不能限制本发明的内容。
[0018] 实施例1 :
[0019] 去88 %乳酸0. 3L搅拌加入纯化水I. 2L，混合均匀，将100g珍珠粉分次加入到乳 酸溶液中，待反应完成后过滤，除去滤液留滤饼，将滤饼取下放入IL蒸馏水水中，加入I. 5g 木瓜蛋白酶、Ig半胱氨酸盐酸盐、IgEDTA二钠盐搅拌混合均匀，在40°C水浴中酶解5小时， 过滤除去滤饼，留酶解液。将此酶解液以2000截留分子量的膜进行超滤，超滤液浓缩至 100mL，随后进行冷冻干燥得到干粉6. 3g，含氮量为10. 55%，即为所需要的内皮素拮抗剂。
[0020] 实施例2 :
[0021] 取90g含量为2. 0%的水溶性光甘草定水溶液，搅拌下加入IOg内皮素拮抗剂，待 完全溶解后加入Ig活性炭助滤，滤去少量不溶物。滤清的溶液中加入5g戊二醇作为防腐 剂，即得复合美白剂。
[0022] 实施例3 :
[0023] 取93g含量为2. 0%的水溶性光甘草定水溶液，搅拌下加入7g内皮素拮抗剂，待完 全溶解后加入Ig活性炭助滤，滤去少量不溶物。滤清的溶液中加入5g戊二醇作为防腐剂， 即得复合美白剂。
[0024] 实施例4 :
[0025] 取97g含量为2. 0%的水溶性光甘草定水溶液，搅拌下加入3g内皮素拮抗剂，待完 全溶解后加入Ig活性炭助滤，滤去少量不溶物。滤清的溶液中加入5g戊二醇作为防腐剂， 即得复合美白剂。
[0026] 实施例5 :
[0027] 去离子水99g加热煮沸30分钟后静置冷却至室温，取0.1 g内皮素拮抗剂搅拌溶 解，滤去少量不溶物。滤清的溶液中加入5g戊二醇作为防腐剂，即得内皮素拮抗剂测试液。
[0028] 实施例6 :
[0029] 取实施例4制得的复合美白剂3g(含有水溶性光甘草定0. 0582g，内皮素拮抗剂 0. 09g)，加入97g煮沸灭菌后的冷却纯化水中混合均匀，制得复合美白剂含量为3%的美白 测试液。
[0030] 实施例7 :
[0031] 去离子水97. Ig加热煮沸30分钟后静置冷却至室温，取2. 9g含量为2.0 %的水溶 性光甘草定水溶液搅拌溶解，滤去少量不溶物。滤清的溶液中加入5g戊二醇作为防腐剂， 即得水溶性光甘草定测试液。
[0032] 实施例8 :
[0033] 美国AMA测试结果：通过在30位Fitzpatrickm型皮肤志愿者背部皮肤表面选取 三块区域分别进行空白对照、UV照射不治疗处理以及UV照射后涂抹美白测试液处理。经 过56天测试证明，实施例5所得复合美白剂是一种有效的皮肤美白产品，同时能有效降低 UVB照射后皮肤色素的沉着。皮肤白度的改善和两个实验区一一未经照射的和涂抹复合美 白剂治疗处理的实验区的色素的降低是有统计学意义的，进一步的统计学分析指出，在测 试区涂抹复合美白剂治疗处理后，与未经照射治疗处理的测试区数据相比也是具有统计学 意义的。
[0034] 表一：
[0038] 实施例9 :
[0039] 取实施例4所得内皮素拮抗剂测试液，通过在30位Fitzpatrickm型皮肤志愿者 背部皮肤表面进行色素沉着的降低测试，测试结果与实施例8所得复合美白剂测试结果对 照表明：复合美白剂对于皮肤色素沉着降低的效果要远好于单一内皮素拮抗剂。
[0040] 表三：
[0041]
[0042] 实施例10 :
[0043] 取实施例7所得水溶性光甘草定测试液，通过在30位FitzpatricktO型皮肤志愿 者背部皮肤表面进行皮肤亮度改善测试，测试结果与实施例8所得复合美白剂测试结果对 照表明：复合美白剂对于皮肤亮度的改善效果要远好于单一水溶性光甘草定测试液。
[0044] 表四：
【主权项】
1. 一种水溶性光甘草定与内皮素拮抗剂复合使用的美白添加剂，其特征是光甘草定水 溶液、天然蛋白的酶解混合肽与防腐剂按照90~99 :10~I :0-50的重量比到混合物； 所述的光甘草定水溶液为含有2. 0% -2. 5%重量的水溶性光甘草定的水溶液； 所述的天然蛋白的酶解混合肽是由珍珠蛋白经过木瓜蛋白酶酶解后冻干所得的内皮 素拮抗剂； 所述的防腐剂是戊二醇、苯氧乙醇、或己二醇。2. 如权利要求1所述的美白添加剂，其特征是所述的水溶性光甘草定为环糊精包裹的 光甘草定。3. 如权利要求1所述的美白添加剂，其特征是所述的酶解混合肽为含氮量为 8% -15%、分子量< 2000的内皮素诘抗剂干粉。4. 一种如权利要求1所述的美白添加剂制备方法，其特征是如权利要求1混合肽干 粉和含有2. 0% -2. 5%重量的环糊精包裹的光甘草定的水溶液混合，过滤或加入活性炭过 滤，加入或不加入防腐剂；其中光甘草定水溶液、天然蛋白的酶解混合肽和防腐剂的重量比 为 90 ~99 :10 ~1 :0 ~50。5. 如权利要求41所述的美白添加剂制备方法，其特征是所述的酶解混合肽由下述方 法获得：在10-80°C和pH值为2-10时，将珍珠蛋白用木瓜蛋白酶进行酶解10分钟-12小 时，超滤膜超滤或者再经干燥成粉，酶解时蛋白和水之比为1:5~1:120,所述的酶和蛋白 的比例为1:10至1:1000。6. 如权利要求1所述的美白添加剂用于美白和防晒用品。
【专利摘要】本发明涉及一种将水溶性光甘草定与内皮素拮抗剂复合使用的美白添加剂，将具有抑制黑色素合成过程中三种酶即酪氨酸酶、多巴色素互变酶和DHICA氧化酶的活性以及能抑制促黑激素对黑色素细胞的激活作用的水溶性光甘草定与具有抑制内皮素对黑色素细胞分化和酪氨酸酶活性的激活作用的天然蛋白的酶解混合肽复合起来使用，提高了美白效果，用于美白和防晒用品。
【IPC分类】A61Q19/02, A61K8/73, A61K8/64, A61K8/49, A61Q17/04
【公开号】CN104983602
【申请号】CN201510487946
【发明人】江晔, 袁明, 江志洁
【申请人】上海奥利实业有限公司
【公开日】2015年10月21日
【申请日】2015年8月11日