液流动减少、视网膜病变、心血管 紊乱、外周动脉疾病、下肢坏疽性炎症及其组合。
[0053] 在一些实施方案中，药物组合物用于治疗疾病、状况或并发症，所述疾病、症状或 并发症选自由以下组成的组：糖尿病、代谢疾病或状况、糖尿病相关的并发症及其组合。在 可选的实施方案中，本发明提供了药物组合物用于治疗疾病、状况或并发症的用途，所述疾 病、况状或并发症选自由以下组成的组：糖尿病、代谢疾病或者状况、糖尿病相关的并发症 及其组合。每一个可能性代表本发明的独立的实施方案。
[0054] 根据又一个实施方案，本发明提供了用于治疗需要其的受试者中的糖尿病的方 法，包括对所述受试者口服施用本发明的药物组合物。根据另一个实施方案，本发明提供了 本发明的药物组合物用于治疗受试者中的糖尿病的用途。根据又一个实施方案，本发明提 供了用于治疗需要其的受试者中的一种或更多种糖尿病相关并发症的方法，包括对所述受 试者口服施用本发明的药物组合物。根据又一个实施方案，本发明提供了本发明的药物组 合物用于治疗需要其的受试者中的一种或更多种糖尿病相关并发症的用途。
[0055] 根据一些实施方案，所述糖尿病选自由以下组成的组：1型糖尿病、II型糖尿病和 妊娠期糖尿病。每一个可能性代表本发明的独立的实施方案。
[0056] 根据另外的实施方案，本发明提供了用于治疗需要其的受试者中的代谢疾病或者 状况的方法，包括对所述受试者口服施用本发明的药物组合物。根据另外的实施方案，本发 明提供了用于治疗需要其的受试者中的肥胖症和/或肥胖相关的状况的方法，包括对所述 受试者口服施用本发明的药物组合物。根据仍然另外的实施方案，本发明提供了用于治疗 需要其的受试者中的除了糖尿病或肥胖症之外的代谢疾病或者状况的方法，包括给所述受 试者口服施用本发明的药物组合物。根据一些实施方案，代谢疾病或状况选自由以下组成 的组：代谢综合症、尚血脂症、尚胆固醇血症、尚甘油二酯血症、尚血糖症、膜岛素抵抗、肝脂 肪变性、脂肪肝病和非酒精性脂肪肝炎。每一个可能性代表本发明的独立的实施方案。根 据又一个实施方案，本发明提供了本发明的药物组合物用于治疗需要其的受试者中的代谢 疾病或者状况的用途。
[0057] 根据另外的实施方案，治疗糖尿病的方法包括施用本发明的药物组合物代替胃肠 外施用的胰岛素。根据其他的实施方案，该方法包括与胃肠外施用的胰岛素联合施用药物 组合物。
[0058] 根据仍然另外的实施方案，与无在合适的递送媒介物中口服施用的与葡萄糖代谢 相关的至少两种分子的组合的情况下所需的剂量相比，药物组合物与较低治疗剂量的注射 胰岛素联合施用。根据仍然另外的实施方案，与在合适的递送媒介物中口服施用胰岛素的 情况下所需的剂量相比，药物组合物与较低治疗剂量的注射胰岛素联合施用。
[0059] 根据一些实施方案，受试者是人。根据又一个实施方案，受试者是非人哺乳动物。 根据又一个实施方案，所述受试者是怀孕的。
[0060] 本发明的其他目标、特点和优势将由以下描述变的清晰。
[0061] 附图简述
[0062] 图1显示了通过HPLC得到的制剂A的色谱图。
[0063] 图2显示了在24小时溶解测试后制剂A的HPLC色谱图，表明大部分API保持完 整。
[0064] 图3显示了在第三个施用日日间（7:00-24:00)针对Oshadi ICP (Oshadi GC，灰色 实线）和胰岛素调节的安慰剂GC(aGC，黑色实线）的平均葡萄糖浓度（GC)。黑色虚线指示 GC 为 180mg/dL。
[0065] 图 4 显示了平均日间 AUCGC〉180mg/dL。
[0066] 发明详述
[0067] 本发明包括药物组合物，所述药物组合物在适合于蛋白药物的口服施用的递送媒 介物中含有至少两种剂的组合，所述剂选自与胰岛素内源合成相关的蛋白和肽，包括胰岛 素、胰岛素原和C肽，在本文中也被称为药物活性成分，所述口服施用适合于提供所述蛋白 的门静脉递送。
[0068] 胰岛素、胰岛素原和C肽
[0069] 天然胰岛素源自在体内分泌、带有A链、C肽、B链和信号序列的前胰岛素原蛋白。 最初，信号序列被去除，留下剩余的A链、C肽和B链，剩余的A链、C肽和B链也被称为"胰 岛素原"。在C肽被切除以后，留下A链和B链以形成胰岛素。
[0070] 本文使用的术语"胰岛素蛋白"和"胰岛素"包括速效胰岛素、非常速效胰岛素、中 效胰岛素和长效胰岛素。速效胰岛素的非限制性实例为赖脯胰岛素（赖氨酸-脯氨酸胰 岛素，由Eli Lilly作为Humalog?销售）、谷赖胰岛素（由Sanofi-Aventis作为Apidra ? 销售）、Actrapid?和NovoRapid ??(均是从Novo Nordisk可得的）、天冬膜岛素（由Novo Nordisk作为Novolog?销售）。非常速效胰岛素的非限制性实例为Viaject ?，由Biodel销 售。中效胰岛素的非限制性实例为NPH(中性鱼精蛋白锌胰岛素）和Lente胰岛素。长效 胰岛素的非限制性实例为Lantus? (甘精胰岛素）。在一些优选的实施方案中，胰岛素是来 自Biocon?的Insugen?。胰岛素还包括不同类型胰岛素的混合物。如此的混合物的一些 非限制性实例为MixtaixT 30、Mixtard" 4〇和Mixtard"「)〇,他们是不同比例的短效胰岛 素和NPH(中效）胰岛素的混合物。胰岛素可选自自然存在的胰岛素和修饰形式的胰岛素。 由本公开内容将清楚的是，本发明的方法和组合物适合于本领域已知的每种类型的自然和 修饰的胰岛素。
[0071] 本发明的药物组合物中的胰岛素：胰岛素原的比以及胰岛素：C肽的比可依据所 治疗的糖尿病的类型而变化。
[0072] 健康个体的胰腺相对于所释放的胰岛素的分子浓度释放从约5-7%到约30%的 胰岛素原以及约52%的C肽-相当于等分子浓度的胰岛素和C肽以及2. 7%到18. 6%的 胰岛素原的量。因此，根据一些实施方案，胰岛素与胰岛素原的重量比从25:1到1:2变化。 可选地，胰岛素与胰岛素原的重量比从2:1到1:2变化。可选地，胰岛素与胰岛素原的重量 比从2:1到1:1. 5变化。可选地，胰岛素与胰岛素原的重量比从2:1到1:1变化。根据一 些实施方案，胰岛素与C肽的重量比从3:1到1:2变化。可选地，胰岛素与C肽的重量比从 3:1到1:1. 5变化。可选地，胰岛素与胰岛素原的重量比从2:1到1:1. 5变化。可选地，胰 岛素与胰岛素原的重量比从2:1到1:1变化。
[0073] 根据另外的实施方案，胰岛素原与C肽的重量比从约1:10到约2:1变化。对于不 同类型的糖尿病或者代谢疾病，可使用不同的C肽：胰岛素以及胰岛素原：胰岛素的比。对 于不同类型的糖尿病或者代谢疾病，可使用不同的胰岛素原：C肽的比。
[0074] 不希望受制于任何理论或者机制，由于胰岛素、胰岛素原和/或C肽的特殊代谢， 用这些化合物的组合治疗糖尿病与单独用胰岛素治疗相比是有优势的。在健康个体中，约 5%的内源胰岛素与血液葡萄糖水平的调控有关。大多数的胰岛素被用于其它的体内平衡 途径，诸如除其他之外氨基酸和神经递质代谢。大多数胰岛素保留在肝中并参与各种影响 神经系统和整个身体的代谢途径。肝使用了约75-85%由胰腺分泌的胰岛素，而90-95%的 胰岛素原和约100%的C肽几乎没有延迟地通过肝脏。而且，实验数据显示，在门静脉和系 统循环之间在胰岛素峰浓度上的差异为约4-5个级（order)。还已知，在胰腺中和在门静 脉中，胰岛素处于胰岛素单体、胰岛素二聚体、胰岛素四聚体、胰岛素六聚体和胰岛素原与C 肽之间的动态平衡中。相应地，本发明的制剂包括以下活性药剂的天然组合：胰岛素、C肽 和/或者胰岛素原，从而使模仿在包括血液葡萄糖水平的调控的不同代谢途径中的胰腺功 能的宽范围的生理活性成为可能。
[0075] 根据一些实施方案，药物组合物包含胰岛素和胰岛素原的组合。根据其他的实施 方案，药物组合物包含胰岛素和C肽的组合。根据其他的另外的实施方案，药物组合物包含 胰岛素原和C肽的组合。根据示例性实施方案，药物组合物包含胰岛素、胰岛素原和C肽的 组合。
[0076] 根据一些实施方案，药学上的活性成分经由非共价键缔合。根据另外的实施方案， 胰岛素与胰岛素原和/或C肽非共价缔合。根据仍然另外的实施方案，胰岛素原与C肽非 共价缔合。不希望被任何特定的反应理论或机制所束缚，生物活性蛋白之间的非共价缔合 确保了每一种活性成分的释放，而无可能干扰每种生物活性蛋白的已知活性的任何化学修 饰。根据另外的实施方案，非共价结合的生物活性蛋白在其从递送媒介物释放后保持完整。
[0077] 另外的组分
[0078] 包含胰岛素、胰岛素原和C肽中的至少两种的混合物的药物组合物还可包含另外 的组分，所述另外的组分选自由以下组成的组：抗氧化剂、氨基酸、多肽、胰岛素增强剂、吸 收增强剂、非胰岛素降葡萄糖药物、降血压药物及其组合。
[0079] 根据一些实施方案，药物组合物包含至少一种抗氧化剂。本文所称的抗氧化剂指 平衡在糖尿病期间可能受损的内源抗氧化防御系统的分子。抗氧化剂通过破坏参与氧化应 激的自由基或氧化剂来减少糖尿病并发症，并增强胰岛素分泌和胰岛素敏感性。根据一些 实施方案，抗氧化剂是超氧化物歧化酶（S0D)。根据一些实施方案，抗氧化剂是谷胱甘肽过 氧化物酶。根据一些实施方案，抗氧化剂是维生素。根据多种实施方案，维生素可以选自维 生素A、维生素C、维生素E或其任何组合。可包括于根据本发明的一些实施方案的药物组 合物中的另外的抗氧化剂包括：谷胱甘肽、a-硫辛酸、《-3、类胡萝卜素、生物类黄酮、多 酚类、辅酶Q 1D、抗氧化矿物质（例如铜、锌、锰、铬和硒）和辅酶因子（例如叶酸、维生素队、 维生素B2、维生素维生素B 12)。
[0080] 抗氧化矿物质可包括锌的有机盐、铬的有机盐、铜的有机盐、锰的有机盐和硒代氨 基酸。锌的有机盐的非限制性实例包括乙酸锌、丁酸锌、柠檬酸锌、葡萄糖酸锌、甘油酸锌、 乙醇酸锌、甲酸锌、乳酸锌、吡啶甲酸锌、丙酸锌、酒石酸锌和十一烯酸锌。铬的有机盐的非 限制性实例包括柠檬酸铬、乙酸铬、丙酸铬和丙二酸铬。根据一些实施方案，硒代氨基酸选 自由硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸组成的组。
[0081] 根据一些实施方案，药物组合物包含至少一种游离氨基酸。根据一些实施方案，游 离氨基酸选自由以下组成的组：精氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天 冬酰胺、组氨酸、苯丙氨酸及其任何组合和衍生物。每一个可能性代表本发明的独立的实施 方案。不希望受限于反应的理论或机制，认为胰岛素响应可被游离氨基酸的共摄食所增强。 [0082] 根据一些实施方案，组合物包含一种或更多种增强剂，诸如胰岛素蛋白的增强剂。 胰岛素增强剂的非限制性实例包括：十二烷基麦芽糖苷、辛基葡萄糖苷和磺基琥珀酸二辛 基钠。增强剂可以是胰岛素蛋白的辅因子。胰岛素辅因子的非限制性实例是铬。
[0083] 根据一些实施方案，组合物包含一种或更多种葡萄糖代谢相关的治疗剂。
[0084] 根据一些实施方案，组合物包含一种或更多种另外的多肽，诸如，但不限于降钙 素、胰高血糖素样肽（GLP)、胰高血糖素样肽类似物、瘦素（leptin)或胰淀素（amylin)。 每一个可能性代表本发明的独立的实施方案。胰高血糖素样肽及其类似物在本领域 是被熟知的，特别的被描述于Eleftheriadou I等人，（The effects of medication used for the management of diabetes and obesity on postprandial lipid metabolism. Curr. Diabetes Rev4(4):340-56, 2008 和 Vaidya HB 等人，Glucagon like peptides-lmodulators as newer target for diabetes and metabolic related disorders. Curr. Drug Targets9 (10) : 911-20, 2008中。每一个可能性代表本发明的独立的 实施方案。
[0085] 根据一些实施方案，组合物包含与碳水化合物代谢途径有关的非胰岛素治疗剂。 这类药物的非限制性实例包括格列齐特、磺酰脲、二甲双胍、罗格列酮和格列美脲。每一个 可能性代表本发明的独立的实施方案。根据另外的实施方案，药物组合物包括降血压药物， 诸如，但不限于血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素受体阻断剂、钙通道阻断剂、0阻断 剂、肾素拮抗剂、醛固酮阻断剂和利尿剂。
[0086] 通常地，本发明的组合物和方法中的另外的组分的选择取决于所需要的治疗。例 如，对于治疗伴随脂质过氧化的妊娠期糖尿病（gestational diabete)(妊娠期糖尿病 (pregnancy diabete))，将考虑以下抗氧化剂：谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶以及包括叶 酸、维生素E的维生素和硒代氨基酸。
[0087] 对于治疗伴随细胞因子的过度活跃和肾脏氧化应激的与肥胖相关的II型糖尿 病，可添加以下抗氧化剂中的一种或更多种：Zn的有机盐、co-3和S0D。另外，至少一种游 离氨基酸和/或生物素可被加入用于治疗与肥胖相关的II型糖尿病的组合物。
[0088] 对于治疗伴随氨基酸失衡的I型糖尿病，加入以下中的一种或更多种会是有用 的：氨基酸；抗氧化剂诸如维生素K和/或Zn的有机盐、铬的有机盐、硒代氨基酸；以及辅 因子诸如B族维生素（帮助神经系统和神经递质的形成），所述B族维生素包括但不限于维 生素B1 (硫胺素）、维生素B2 (核黄素）、维生素B3 (烟酸或者烟酰胺）、维生素B5 (泛酸）、 维生素B6 (吡哆醇，吡哆醛，或者吡哆胺，或者盐酸吡哆醇）、维生素B7 (生物素）、维生素 B9(叶酸）、维生素B12(各种钴胺素）、维生素B复合体及其组合中的任何一种或更多种。 每一个可能性代表本发明的独立的实施方案。
[0089] 对于代谢紊乱的治疗，可将果胶和/或胰淀素加入至包含胰岛素、胰岛素原和/或 C肽的组合物中。
[0090] 递送媒介物
[0091] 活性成分的口服递送借助实现生物活性蛋白的组合的门静脉递送的合适的蛋白 递送媒介物提供。如本文使用的，术语"门静脉递送"指物质的口服施用路径，施用的物质 随后通过肠胃道吸收。合适的递送媒介物将提供药学上的活性成分的释放，以及其从肠胃 道的吸收，从而达到在所期望的时间段内在血流中维持其有效水平以提供所期望的治疗效 果。根据示例性实施方案，递送媒介物包括基于油的基质，所述基于油的基质包含悬浮于其 中的固体干燥的颗粒物质，其中颗粒物质包含活性成分。根据另外的实施方案，选自由胰岛 素、胰岛素原和C肽组成的组的至少两种生物活性蛋白构成了所述递送媒介物的颗粒物质 的一部分。
[0092] 根据其他的实施方案，递送媒介物是本领域已知的适合于蛋白的口服施用的任何 药学上可接受的载体，所述口服施用使蛋白能够被门静脉递送。所述递送媒介物的非限制 性实例包括渗透增强剂、脂质递送媒介物、脂质体、聚合物基质、聚合物微球、自乳化药物递 送系统（SEDDS)、包含烷氧基的分子、非离子型表面活性剂、纳米颗粒递送系统及其组合。渗 透增强剂可包括除其他之外表面活性剂，优选地阴离子表面活性剂、烷基麦芽糖苷、中链脂 肪酸及其盐，诸如但不限于癸酸、癸酸盐/酯、辛酸和辛酸盐/酯。包含烷氧基、适合于蛋白 口服递送的分子包括例如甘油或聚乙二醇。适合于蛋白的口服递送的专用媒介物制剂的某 些非限制性实例包括G1PET?和EL1GEN?。用于口服胰岛素的递送媒介物的实例包括 Chiasma' s 瞬时渗透增强剂（Chiasma' s Transient Permeability Enhancer, TPE)。
[0093] 包含悬浮的颗粒物质的基于油的基质组合物
[0094] 根据一些实施方案，口服递送媒介物包含基于油的基质中的固体干燥颗粒成分的 紧密混合物。在这些实施方案中，基质载体组合物，也称为"药物组合物"，包含具有疏水 表面的药理学惰性二氧化硅纳米颗粒、多糖和选自由胰岛素、胰岛素原和C肽组成的组的 至少两种生物活性蛋白的颗粒状非共价缔合的混合物，所述颗粒状非共价缔合的混合物悬 浮、包埋或分散在油或油的混合物中。
[0095] 根据一些实施方案，选自由胰岛素、胰岛素原和C肽组成的组的至少两种生物活 性蛋白被并入在包含油的递送媒介物中，所述油具有颗粒物质悬浮于其中，其中颗粒物质 包含与具有疏水表面的二氧化硅纳米颗粒紧密非共价缔合的多糖。相应的，本发明的一些 实施方案的药物组合物在递送媒介物中包含与葡萄糖代谢有关的至少两种生物活性蛋白， 所述至少两种生物活性蛋白选自由胰岛素、胰岛素原和C肽组成的组，所述递送媒介物适 合于提供生物活性蛋白的门静脉蛋白递送的口服施用，所述递送媒介物包括基于油的基 质，所述基于油的基质包含悬浮于其中的固体颗粒物质，其中所述颗粒物质包含与具有疏 水表面的二氧化硅颗粒非共价缔合的多糖，其中所述多糖和二氧化硅颗粒与所述至少两种 生物活性蛋白非共价缔合，并且其中胰岛素和胰岛素原的重量比为从约25:1到约1:2,胰 岛素和C肽的重量比为从约3:1到约1:2,并且二氧化硅和生物活性蛋白的重量比为从约 100:1到约1:1。根据示例性实施方案，本发明提供了用于口服使用的药物组合物，所述药 物组合物在递送媒介物中包含胰岛素、胰岛素原和C肽，所述递送媒介物适合于提供生物 活性蛋白的门静脉蛋白递送的口服施用，所述递送媒介物包含基于油的基质，所述基于油 的基质包含悬浮于其中的固体颗粒物质，其中所述颗粒物质包含与具有疏水表面的二氧化 硅颗粒非共价缔合的多糖，其中所述多糖和二氧化硅颗粒与胰岛素、胰岛素原与C肽非共 价缔合，并且其中胰岛素与胰岛素原的重量比为从约25:1到约1:2,胰岛素与C肽的重量比 为从约3:1到约1:2并且二氧化硅与胰岛素、胰岛素原和C肽的重量比为从约100:1到约 1:1〇
[0096]由二氧化硅纳米颗粒、多糖以及胰岛素、C肽和/或胰岛素原的组合所形成的基质 悬浮、包埋或分散在油中。根据一些实施方案，胰岛素、C肽和/或胰岛素原被非共价地连 接至二氧化娃纳米颗粒的疏水表面并被非共价地连接至多糖的亲水和疏水部分、区域或斑 块（patch)。根据一些实施方案，胰岛素、胰岛素原和C肽的疏水部分经由非共价力与二氧 化硅纳米颗粒和多糖的疏水表面连接。根据一些实施方案，胰岛素、胰岛素原和C肽的疏水 部分经由非共价键与二氧化硅纳米颗粒和多糖的疏水表面连接。根据一些实施方案，胰岛 素蛋白的亲水部分也与多糖的亲水部分非共价连接。
[0097]根据一些实施方案，本发明的药物组合物通过非共价力保持在一起。根据一些实 施方案，本发明的药物组合物通过非共价键保持在一起。
[0098]不希望于被任何理论或者反应机制所束缚，基质组合物的组分之间的非共价力使 基质组合物在组分混合在一起时能够自我组装，如本文所描述的。另外，或可选地，非共价 力导致二氧化硅纳米颗粒、多糖、胰岛素、胰岛素原和/或C肽形成紧密的混合物，并且任选 地形成表现出有序结构的基质。而且，该结构，另外称为二氧化硅纳米颗粒、多糖、胰岛素、 胰岛素原和/或者C肽的复合体，被分散、包埋或者悬浮于基质组合物的油相中。如本文提 供的，本发明提供了组合物，其中二氧化硅纳米颗粒、多糖、胰岛素、胰岛素原和/或C肽形 成基质，所述基质被油相浸渍和完全环绕。每一个可能性代表本发明的独立的实施方案。
[0099] 不希望被任何特定的反应理论或机制所束缚，生物活性蛋白和递送媒介物的颗粒 物质之间的非共价缔合允许了每种生物活性蛋白从递送媒介物释放到肝门静脉。在另外的 实施方案中，生物活性蛋白被释放而无可能干扰每种生物活性蛋白的已知活性的任何化学 修饰。根据另外的实施方案，非共价结合的生物活性蛋白在其从递送媒介物释放后保持完 整。
[0100] 本发明的药物组合物包括具有层次结构和结合能的结构化的、自有序的复合体。 这种独特的层次结构对于包含于有序的复合体内的生物活性蛋白的组合的生物活性和生 物利用度是关键的。根据一个实施方案，该有序结构提供了对基本单位免受胃肠道中的崩 解和溶解的保护并使它们能够作为一个整体运输通过粘膜。
[0101] 不希望被反应理论或机制所束缚，本发明的组合物的层次结构和结合能促进微 (20-200nm)油滴的形成，微油滴具有颗粒物质悬浮于其中。这些微油滴保持其内部结构 并保护药学上的活性成分免于小肠中的崩解和溶解。根据一些实施方案，与葡萄糖代谢有 关的生物活性蛋白，诸如胰岛素、胰岛素原和C肽，在消化蛋白酶胃蛋白酶的存在下保持完 整、有活性和未受损害。根据一些实施方案，药物组合物在消化蛋白酶胃蛋白酶的存在下是 稳定的。
[0102] 根据一些实施方案，二氧化硅颗粒和胰岛素的重量比在100:1到1:1的范围内。 根据另外的实施方案，二氧化硅颗粒和胰岛素的重量比在75:1到25:1的范围内。根据其 他的实施方案，二氧化硅颗粒和胰岛素的重量比在20:1到3:1的范围内。根据一些实施方 案，二氧化硅颗粒和胰岛素原的重量比在200:1到2:1的范围内。根据另外的实施方案，二 氧化硅颗粒和胰岛素原的重量比在150:1到50:1的范围内。根据仍然另外的实施方案，二 氧化硅颗粒和胰岛素原的重量比在