其之间的关系以及胰岛素抵抗发生发展的分子机制仍不清楚。临床上，首先预 防和纠正血脂代谢紊乱，无论是对糖尿病的一级预防还是早期治疗都有积极意义。
【发明内容】
[0009] 现有技术中，还没有药物用于促进IRS-1和IRS-2表达。本发明人建立由高脂喂 养引起脂代谢紊乱辅以STZ部分破坏胰岛b细胞的经典2型糖尿病动物模型，观察虾青素 对高脂喂养大鼠血糖和血脂的影响，以及虾青素对胰岛素敏感性的影响，惊喜地发现虾青 素能够促进IRS-1和IRS-2表达，进而增加胰岛素的敏感性，达到降低血糖的目的，从而完 成了本发明。
[0010] 本发明所涉及的虾青素，又名虾黄质、龙虾壳色素，是一种类胡萝卜素，也是类胡 萝卜素合成的最高级别产物，呈深粉红色，化学结构类似于胡萝卜素。而胡萝卜 素、叶黄素、角黄素、番茄红素等都是类胡萝卜素合成的中间产物，因此在自然界，虾青素具 有最强的抗氧化性。广泛存在于生物界，特别是虾、蟹、鱼、藻体、酵母和鸟类的羽毛中含量 较高，是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一。
[0011] 虾青素化学名称：3,3< -二羟基-4W-二酮基0 -胡萝卜素，色素Aj067-69CAS No:472-61-7,分子式C40H5204,分子量为596. 86。由于两端的羟基（-0H)旋光性原因，虾青 素具有3S-3'S、3R-3'S、3R-3'R(也称为左旋、内消旋、右旋）这3种异构型态，其中人 工合成虾青素为3种结构虾青素的混合物（左旋占25%、右旋占25%，内消旋50%左右）， 极少抗氧化活性，与鲑鱼等养殖生物体内的虾青素（以反式结构一一3S-3S型为主）截然不 同.酵母菌源的虾青素是100%右旋（3R-3'R)，有部分抗氧化活性；上述两种来源虾青素 主要用在非食用动物和物资的着色上。只有藻源的虾青素是100%左旋（3S-3'S)结构， 具有最强的生物学活性。
【附图说明】
[0012] 图1 :本发明实施例的实验流程图。
[0013] 图2 :虾青素对2型糖尿病大鼠血糖的影响
[0014] 图3 :虾青素对2型糖尿病大鼠血胰岛素的影响
[0015] 图4 :虾青素对2型糖尿病大鼠0GTT的影响
[0016] 图5 :奸青素对2型糖尿病大鼠0GTT曲线下面积的影响
[0017] 图6 :虾青素对2型糖尿病大鼠肝脏IRS-1表达的影响
[0018] 图7 :虾青素对2型糖尿病大鼠肝脏IRS-2表达的影响
【具体实施方式】
[0019] 材料与方法
[0020] 1. 1实验动物
[0021] 健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，鼠龄一个月，体重100_120g，由浙江省实验 动物中心提供。动物分笼饲养，实验动物于动物中心适应环境一周后再开始实验，自由饮 水标准大鼠饲料喂养，保持笼内清洁，室温控制在24°C，自然光源，通风良好，相对湿度为 60%。动物实验在宁波大学实验动物中心完成。
[0022] 1. 2实验仪器与试剂
[0023] 1. 2. 1主要实验仪器
[0024] 表1实验仪器名称和生产厂家
[0025] _咖6」
[0027] L2. 2实验药品和试剂
[0028] 表2实验药品名称和生产厂家
[0029]
[0030]
[0031] 实验方法
[0032] 1. 2. 3 2型糖尿病发病前状态模型成功的标准
[0033] 实验大鼠先喂以高脂饲料（每100g中各成分比例为粗蛋白：脂肪：碳水化合物 =20 : 40 : 40)6周，进行造模，剪尾取血测随机血糖，以确保实验大鼠处于糖尿病发病前 状态，每天观察大鼠的精神状况，保证充足的食物和饮水。
[0034] 1. 2. 4药物干预
[0035] 预防组给药时间为4周和6周，灌胃剂量为25mg/kg，其余组同步给予等量的生理 盐水，自由饮食饮水。
[0036] 1. 2. 5随机血糖测定与口服葡萄糖耐量试验
[0037] 药物预防处理过程中，各组每只大鼠每隔3天在同一时刻测一次随机血糖，用自 动血糖仪从大鼠尾静脉取血测定，即刻做好相关记录，待实验结束后统计血糖值变化。
[0038] 在动物实验进行中，各组大鼠分别在药物干预4周后行口服葡萄糖耐量试验。具 体方法为：大鼠禁食12h后，用50%葡萄糖的溶液进行灌胃（灌胃剂量是2g/kg)。于灌胃 0h、0. 5h、lh和2h后剪尾取尾静脉血测血糖值。实验结束后绘制各组大鼠葡萄糖耐量曲线， 并计算葡萄糖耐量曲线下面积。
[0039] 1. 2. 6血液采集、标本固定与石蜡切片、H&E染色
[0040] 1. 2. 6. 1血标本采集
[0041] 血液采集：治疗结束后，每只大鼠选内眦静脉取血，具体方法为：提前备好真空采 血管并做好标记，左手固定大鼠，右手用直径1_长度5cm左右的毛细玻璃管在大鼠眼球内 侧旋转插入，调整好深度后静脉血随即流出，用采血管接取血液，待血液静置2-3h后，用低 速离心机离心2000rpm，lOmin，取上清，用自动生化仪器检测血脂指标。
[0042] 1. 2. 7Westernblot方法分析肝脏抗氧化因子Nrf2、HM0X-l、S0D-l蛋白的表达量
[0043] 表 3Westernblot操作过程
[0044]
[0045]【实施例】
[0046] 虾青素对2型糖尿病的治疗作用
[0047] 该实验如实验流程图（见图1)所示：取雄性健康SD大鼠20只，先随机选取4只 作为正常对照组，喂以普通大鼠饲料6周。其余组大鼠同步喂以高脂饲料6周后以25mg/kg 的剂量一次性腹腔注射1 %STZ柠檬酸缓冲液。随后剪尾取血测随机血糖值，选取8只随机 血糖值多11.lmol/L的动物为实验大鼠，并随机分为糖尿病组和治疗组各4只大鼠。治疗组 给予虾青素的剂量是25mg/kg;其余组同时给予等量的生理盐水，各鼠每天灌胃1次，时间 周期为6周，自由饮食饮水。待治疗结束后，各组大鼠进行0GTT试验。随后大鼠处死，取大 鼠血清摘取肝脏样本，进行后续血糖值变化分析，提取新鲜肝组织RNA和蛋白，用RT-qPCR 方法在mRNA水平上检测肝脏脂代谢和胰岛素信号通路相关因子表达量。
[0048] 表4说明书中英文缩略词对照表
[0049]
【主权项】
1. 虾青素在制备治疗胰岛素敏感性降低中促进IRS-I和IRS-2表达的药物组合物中的 应用。2. 如权利要求1所述的应用，其中，所述虾青素为天然虾青素。3. 如权利要求1或2所述的应用，其中，所述胰岛素敏感性降低选自肝脂肪变性，肥胖 和糖尿病中的1种或多种。4. 如权利要求1或2所述的应用，其中，所述胰岛素敏感性降低可引起2型糖尿病。5. 如权利要求1或2所述的应用，其中，所述胰岛素敏感性降低来自2型糖尿病大鼠糖 尿病发病前和发病时。6. -种治疗胰岛素敏感性降低的药物组合物，其特征在于，含有虾青素。7. 如权利要求7所述的药物组合物，其中，所述虾青素是天然虾青素。8. 如权利要求6或7所述的要去组合物，其中，所述胰岛素敏感性降低选自肝脂肪变 性，肥胖和糖尿病中的1种或多种。9. 如权利要求6或7所述的要去组合物，其中，所述胰岛素敏感性降低可引起2型糖尿 病。10. 如权利要求6或7所述的要去组合物，其中，所述胰岛素敏感性降低来自2型糖尿 病大鼠发病前和发病时。
【专利摘要】本发明公开了虾青素在制备治疗胰岛素敏感性降低中促进IRS-1和IRS-2表达的药物组合物中的应用；以及一种治疗胰岛素抵抗的药物组合物，其特征在于，含有虾青素。
【IPC分类】A61P3/10, A61K31/122, A61P5/50
【公开号】CN105106184
【申请号】CN201510631814
【发明人】邹欣荣, 步世忠, 刘琼
【申请人】宁波大学
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年9月25日