ck，NJ。挫来麟酸购于Novartis化armaSchweizAG。油红染料购自SIGMA-ALDRICH 中国。组织TG检测试剂盒购于普莱特生物工程有限公司。
[0032] 方法1肝脏组织TG的测量 阳03引取小鼠肝组织右叶50mg左右，并记录准确重量。PBS水洗置于1ml裂解液中，机 械匀浆。将裂解好的组织匀浆分成两部分。其中一部分500 置于70°C金属浴中，加热 lOmin，并在2, 000X；rpm下离屯、5min。取l-lOyl用于组织TG试剂盒检测。另外SOOjil用于BCA法检测蛋白浓度。
[0034]方法2石蜡切片的制备
[0035] 取肝组织右叶适量，用4%的多聚甲醒固定24-4化，逐级乙醇脱水，二甲苯透明， 浸蜡，石蜡包埋，切片，厚度为5ym。
[0036] 方法3石蜡切片的肥染色
[0037] 将切片分别浸于二甲苯中lOmin和5min脱蜡，之后于梯度乙醇中附水。苏木精染 色4min后单蒸水稍洗。用0. 25%畑3?&0泛蓝30s后单蒸水洗。用梯度浓度乙醇脱水至 95%乙醇脱水后，0. 5 %伊红液染色2-3S，之后100%乙醇中脱水，并在二甲苯中浸泡2min。 最后用中性树胶封片。 阳03引 方法4冰冻切片的制备
[0039] 在各组实验鼠肝右叶相同部位取适量组织，多聚甲醒固定化，30%薦糖脱水 8-1化，OCT包埋。放在-70°C冰箱保存。冰冻切片机切片，切片厚度为15ym。
[0040] 方法5油红染色
[0041] 冰冻切片室溫稍干，60%乙醇稍洗，浸染于油红0染液工作液中染色（60%油红0 原液加40%单蒸水）10-15111111，60%乙醇分化，水洗，苏木精染核1111111，水洗1111111，吸干水 分，甘油封片。
[0042] 方法6ALT和AST水平检测
[0043] 小鼠麻醉后，通过眼窝静脉取血，并置于室溫30min，待血清析出，离屯、。取10y1 血清用于ALT和AST试剂盒检测。
[0044] 发明人首先利用食源性诱导的非酒精性脂肪肝模型鼠，即高脂饲料（含有60%的 脂肪）诱导C57BL/6J小鼠12周，诱导其产生脂肪肝。通过实验检测发现高脂饲料的喂养 可W导致小鼠肝脏的脂肪堆积变性。
[0045] 非酒精性脂肪肝小鼠模型的建立及分组
[0046] 选取8周龄巧7BL/6J小鼠共40只，随机分配为4组，每组10只。分别称重后喂 W正常饲料（含4%脂肪）和高脂饲料（含60%脂肪），并饲养12周。小鼠每周称重并记 录，绘制生成曲线。并于12周后开始对正常饲料和高脂饲料喂养的脂肪肝小鼠进行挫来麟 酸和安慰剂给药，W了解缓解脂肪堆积的功能，同时观察其对于小鼠生理指标的改变，记录 不同体重及各项生理指标，数据如表1所示。
[0047] 表1给药后小鼠的体重及各项生理指标
[0048]
[0049] RC组为正常饲料组，H抑组为高脂饲料组，PBS为安慰剂，Z化为挫来麟酸，给药剂 量为 50yg/kg。
[0050] 由表1可知，H抑组和RC组小鼠在Z化给药后，体重均出现明显的下降，同时其肝 脏重量与附睾脂肪垫重量也显著性的降低。其中，RC组，Z化给药与PBS给药相比，平均体 重下降，降幅为13% ;H抑组，Z化给药与PBS给药相比，平均体重下降，降幅为16%，可见 Z化给药能明显减少体重，Z化给药对H抑组的减小体重的作用较RC组更为显著，更能减少 脂质堆积。RC组，Z化给药与PBS给药相比，平均肝脏重量下降，降幅为17% ;H抑组，Z化 给药与PBS给药相比，平均肝脏重量下降，降幅为29%，可见Z化给药能明显降低肝脏重量， 且Z化给药对H抑组的作用较RC组更为显著。RC组，Z化给药与PBS给药相比，平均附睾 脂肪垫重量下降，降幅为39% ;H抑组，Z化给药与PBS给药相比，平均肝脏重量下降，降幅 为30%，可见Z化给药能明显降低附睾脂肪垫重量。
[0051] 图1为挫来麟酸给药后小鼠体重及主要脂质代谢器官的变化图，*和#表示两者 相比具有统计学显著差异，**和##表示具有统计学极显著差异。图1A显示体重出现明显 的降低；图1B显示肝脏重量出现显著性的降低；图1C显示附睾脂肪垫重量出现显著性的 下降。由此可见挫来麟酸处理能够显著的抑制高脂食物导致的小鼠体重增加，即说明挫来 麟酸能够显著的促进肥胖小鼠的体重增加，检测发现小鼠的附睾脂肪垫的重量显著下降， 说明挫来麟酸能够抑制脂肪的产生，具有较强的减少个体脂肪积累，促进体重降低的减肥 功效。
[0052] 实施例1挫来麟酸对食源性非酒精性脂肪肝的作用
[0053] 临床上病人发生脂肪肝，其肝脏从外观上呈现肿胀，但究其主要原因是由于脂质 的堆积所致。而运种脂质的堆积通过活体穿刺取得肝脏组织，并通过肥染色和油红染色， 即可看到脂质的堆积，故此直接检测肥和油红是观察脂质堆积的更好办法。
[0054] 根据前述一般材料与方法，首先用挫来麟酸及安慰剂对高脂饲料组小鼠进行给 药。在本实施例中，挫来麟酸主要是通过尾静脉注射给药，药物主要的作用部位是肝脏，两 天注射一次。给药剂量为50yg/kg挫来麟酸。对给药后的小鼠进行组织甘油S醋水平检 巧师肥染色，实验数据如表2中所示，结果如图2和图3所示。
[00W] 表2给药后小鼠的肝脏甘油S醋含量
[0056]
[0057]
[0058] H抑组为高脂饲料组，RC组为正常饲料组，PBS为安慰剂，Z化为挫来麟酸，给药剂 量为 50yg/kg。
[0059] 由表2可知，H抑组和RC组小鼠在Z化给药后，肝脏甘油立醋出现明显下降。其 中，RC组，Z化给药与PBS给药相比，肝脏甘油S醋下降幅度为12. 5% ;H抑组，Z化给药与 PBS给药相比，肝脏甘油S醋明显下降，降幅为44. 9%，可见Z化给药能使甘油S醋明显降 低。
[0060] 图2为挫来麟酸给药后小鼠肝脏内的肝脏甘油=醋含量的变化图，定量分析肝脏 内脂质的含量。**和##表示具有统计学极显著差异。由实验结果可知，高脂的诱导可W导 致TG的堆积增加，安慰剂组TG含量升高，而挫来麟酸组TG的含量降低，表明在注射挫来麟 酸后，肝脏的脂质堆积有明显的下降。由此可知挫来麟酸制剂可W有效地降低食源性诱导 的肝脏脂质堆积，有效治疗食源性非酒精性脂肪肝。图3为挫来麟酸给药后小鼠的肝脏石 蜡切片及肥染色后光镜图，显示注射挫来麟酸后，肝脏的大泡型脂肪变性有明显的缓解， 即降低了高脂诱导产生的肝脏脂质变性。成年型肥胖人分中屯、型肥胖和周围型肥胖。根据 脂肪堆积部位的不同又分为体脂型肥胖和内脏型肥胖。而内脏型脂肪增多往往多发屯、血管 疾病、膜岛素抵抗。本发明挫来麟酸制剂有效的抑制了肝脏内脂质积累，降低了机体内甘油 =醋的含量，缓解了肝脏内的脂肪变性，可W有效的、特异性降低个体的内脏的脂肪积累， 可预见性的降低患者产生屯、血管疾病的发生概率。
[0061] 实施例2挫来麟酸对食源性脂肪性肝功能损伤的作用
[0062]与实施例1类似，根据前述一般材料与方法，首先用挫来麟酸及安慰剂对高脂诱 导小鼠进行给药，检测给药后小鼠血液中谷丙转氨酶（ALT)和谷草转氨酶（AST)的水平，实 验数据如表3所示，结果如图4A和4B所示。
[0063]表3给药后小鼠血液中谷丙转氨酶（ALT)和谷草转氨酶（AST)的水平
[0064] 阳0化]
[0066] H抑组为高脂饲料组，RC组为正常饲料组，PBS为安慰剂，Z化为挫来麟酸，给药剂 量为 50yg/kg。
[0067] 由表3可知，对于H抑组，在Z化给药后，ALT和AST水平明显降低。其中，RC组， Z化给药与PBS给药相比，ALT和AST无显著变化。RC组所测得的数值在正常范围内，