，合并有机相。依次用水和 饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:1. 0,v/V)，收集棕色集 中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物III的黄色粉末（131. 6mg，65% )。
[0043] 4匪1?(5001抱，0150-(16)5 6.57(8，1!1)，6.29(8，1!1)，5.82(8，1!1)，4.25(8,2!1)，3· 86 (s, 1H), 3. 10 (s, 2H), 2. 55 (s, 4H), 2. 16 (s, 1H), 2. 07 (s, 1H), 1. 893 (s, 1H), 1. 73 (s, 4H), 1 .70 (s, 1H), 1. 38 (s, 3H), 1. 09 (s, 6H), 1. 02 (s, 6H).
[0044]13CMMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.10(s)，183.71(s)，154.37(s)，147.57(s)，140· 19 (s), 136. 41 (s), 134. 73 (s), 131. 25 (s), 128. 38 (s), 118. 82(s), 69. 23(s), 54. 54 (d,J= 16. 6Hz), 45. 51 (s), 37. 54 (s), 33. 56 (s), 26. 16 (s), 25. 19 (d,J= 10. 3Hz), 24. 73 (s), 23. 5 8(s), 23. 24(s), 22. 69 (s).
[0045]HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC26H36N03:4 1 0 . 26 9 5 ;found:410. 2693。
[0046]
[0047] 实施例4SalviskinoneA的0-(哌啶基）乙基衍生物（IV)的合成
[0048] 将化合物II(209mg，0. 5mmol)溶于20mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾 (345mg，2. 5mmol)，鹏化钾（84mg，0. 5mmol)和哌啶（852mg，lOmmol)，混合物加热回流 10h。 反应结束后将反应液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有机相。依次用水 和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物 粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油醚/丙酮=100:0. 5,v/v)，收集黄色 集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物IV的黄色粉末（116. 3mg，55% )。
[0049] NMR(500MHz,Chloroform-dl)δ6. 44(d,J= 95. 3Hz, 1H),6. 31(s, 1H), 5. 73 (s, 1H), 4. 20 (s, 2H), 3. 74 (s, 1H), 3. 01 (s, 2H), 2. 39 (s, 4H), 2. 07 (s, 1H),L96 (s, 1H), 1. 86 (s, 1H),1. 60 (s, 1H),1. 44 (s, 4H),1. 33 (d,J= 15. 0Hz, 5H),1. 00 (s, 6H),0. 91 (s, 6H).
[0050] 13CNMR(125MHz,DMS〇-d6)δ188. 16 (s), 183. 79 (s), 154. 48 (s), 147. 63 (s), 140. 27 (s), 136. 51 (s), 134. 79 (s), 131. 33 (s), 128. 47 (s), 118. 88(s), 69. 31 (s), 54. 6 9(d,J= 16.2Hz) ,45.56 (s), 37.61 (s), 33.62 (s), 26.21 (s), 25.21 (s), 24.65 (d,J= 19. 1Hz), 23. 50 (d,J= 17. 2Hz), 23. 23 (s), 22. 68 (s).
[0051] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC27H3SN03:424. 28 5 2 ;found:424. 2856。
[0052]
[0053] 实施例4组合物抗红细胞低下性贫血实验
[0054] 实验1组合物对失血小鼠的治疗作用
[0055]ICR小鼠30只，早&各半，均分成5组（η= 10)。除生理盐水组外，其它组每只小 鼠从眼眶静脉放血0. 5ml，24h后再取血测全部各组指标，然后连续灌胃给药1周且给药之 后每天放血0. 5ml，末次给药lh后，从眼眶静脉丛取血用F-800全血小板分析仪进行红细胞 计数（1012/L)。
[0056] 组合物的制备：将研磨之后过200目网的55mg化合物III的粉末和研磨之后过 200目网的45mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用涡轮搅拌仪混合即得到100mg组 合物，使用时用水溶解这l〇〇mg的组合物即得到组合物的溶液。
[0057] 表1组合物对因失血所致红细胞减少的治疗作用
[0058]
[0059] 与模型组比较：*ρ〈0· 05
[0060] 结果表明，放血小鼠经服用组合物治疗7天后，与模型组比较，其红细胞显著高于 模型组，接近生理盐水组。而化合物III和化合物IV无此作用。
[0061] 二、组合物对环磷酰胺致红细胞减少的治疗作用
[0062] 对小鼠骨髓造血功能损伤的防治作用ICR小鼠50只，早?兼用，均分成5组（η =10)，即生理盐水组、造模组、组合物1. 2mg/kg组、化合物III1. 2mg/kg组和化合物IV 1. 2mg/kg组，口服给药，每天1次。第0、5、10日除生理盐水组外，其它各组小鼠分别腹腔注 射环磷酸胺80mg/kg，然后继续给药3天。于末次给药后lh，从眼眶静脉丛取血，测红细胞 数（1012/L)。
[0063] 表2组合物对环磷酰胺所致红细胞的影响
[0064]
[0065] 与模型组比较：林ρ〈0· 01
[0066] 结果表明，与生理盐水组比较，环磷酸胺能使小鼠骨髓损伤，造成外周血细胞下 降，组合物组与模型组比较，可明显对抗环磷酸胺所致小鼠红细胞下降。而化合物III和化 合物IV无此作用。
[0067] 三、组合物对苯所致红细胞减少的治疗作用
[0068] 对再生障碍性贫血小鼠的影响：昆明种小鼠50只，早?兼用，均分成5组（η= 10)，除生理盐水组外，其它组小鼠皮下注射苯0. 5ml/kg，连续12天，造模的当日，同时口服 给药，每天1次，共18天，末次给药后lh，眼眶静脉丛取血，测红细胞。
[0069] 表3组合物对苯所致红细胞减少的治疗作用
[0070]
[0071] 与模型组比较：#ρ〈0· 01
[0072] 结果表明，组合物组与模型组比较，可明显对抗苯所致再生障碍性贫血小鼠红细 胞的下降。而化合物III和化合物IV无此作用。
[0073] 结论：组合物能够显著升高红细胞，可以用来制备治疗贫血的药物。而化合物III 和化合物IV不能够显著升高红细胞，不能用来制备治疗贫血的药物。
[0074] 实施例6本发明所涉及组合物片剂的制备
[0075] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0076] 实施例7本发明所涉及组合物胶囊的制备
[0077] 取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100 粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为55%和45%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为：将化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照质量百分数分别为55 %和45 %充分混合。3. -种如权利要求1所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用。4. 如权利要求3所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用，其特征为：所 述红细胞低下性贫血是由失血所引起的。5. 如权利要求3所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用，其特征为：所 述红细胞低下性贫血是由化学物质所引起的红细胞低下。6. 如权利要求5所述的组合物在治疗红细胞低下性贫血药物中的应用，其特征为：所
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物、制备方法及其在制备抗红细胞低下性贫血药物上的用途。本发明公开了一种组合物及其制备方法。药理学实验表明，本发明的组合物具有抗红细胞低下性贫血的作用，具有开发抗红细胞低下性贫血药物的价值。
【IPC分类】A61K31/4453, A61K31/40, A61P7/06
【公开号】CN105250293
【申请号】CN201510742200
【发明人】王卓婷
【申请人】南京赋海澳赛医药科技有限公司
【公开日】2016年1月20日
【申请日】2015年11月4日