一种等离子体促凝血辅助剂的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种等离子体促凝血辅助剂。
【背景技术】
[0002]凝血是指血液凝固，由流体状态变为不能流动凝胶状态的过程。一般凝血机制包括产生凝血酶以稳定血小板血栓，以及形成纤维蛋白凝块。血液凝固过程大致分为凝血酶原激活物形成、凝血酶形成、纤维蛋白形成三个阶段。纤维蛋白形成一般是凝血酶形成后可催化血楽中可溶性纤维蛋白原(Fibrinogen，Fg)转变为纤维蛋白，形成不可溶性的纤维蛋白多聚体(血纤维)，并网罗血细胞形成凝胶状的血凝块。显然，对于凝血机制的研究有助于医学上止血处理。医学上为达到更好的止血效果，往往还使用辅助止血剂进行配合使用，比如较普遍的止血敷料有藻酸盐、明胶海绵/粉末、胶原海绵/粉末/纤维/薄片、氧化纤维素、凝血酶等，现在多用胶原复合物，包括结合有抑肽酶、凝血酶、纤维蛋白封闭剂等止血剂的胶原，还有结合抑肽酶的明胶、纤维蛋白胶、壳聚糖和沸石等，其中，胶原、壳聚糖和淀粉类止血材料应用越来越普遍。
[0003]同时，人们还在发明和发展一些新的凝血技术，如等离子体凝血技术。等离体子具有物理、化学复合作用的优势，已经用于医疗器械的除垢消毒、皮肤病的治疗、牙齿根管治疗和手术伤口消毒等。最近，研究人员发现等离子体可以应用于凝血处理，但低温等离子体凝血效率还有待提高。但据了解，目前在利用低温等离子体技术凝血中加入高铁血红素作为促凝血辅助剂却未有报道。
【发明内容】
[0004]本发明要提供一种等离子体促凝血辅助剂，以克服现有低温等离子体凝血技术凝血效果不理想的问题。
[0005]本发明所采取的技术方案为:
[0006]—种等离子体促凝血辅助剂，其活性成分为高铁血红素。
[0007]优选的，所述促凝血辅助剂用以下步骤配制而成:将高铁血红素放于超纯水，用氢氧化钠溶液调节pH至12使高铁血红素充分溶解；然后，用磷酸钠缓冲液配制成pH值为7.4、高铁血红素浓度为0.01mol/L高铁血红素母液。
[0008]优选的，在用低温等离子体处理血液时，滴加所述高铁血红素母液至血液中，血液中高铁血红素浓度在10 5?10 3mol/Lo
[0009]优选的，所述所述氢氧化钠溶液浓度为0.lmol/Lo
[0010]本发明还提供了一种上述等离子体促凝血辅助剂的制备方法，包括下列步骤:将高铁血红素放于超纯水，用氢氧化钠溶液调节pH至12，待高铁血红素充分溶解后，用磷酸钠缓冲液配制pH = 7.4、高铁血红素浓度为0.01mol/L高铁血红素母液。
[0011]与现有技术相比本发明所取得的有益效果为:本发明首次提出在等离子体凝血处理中加入促凝血辅助剂的设想，并将高铁血红素作为促凝血辅助剂的活性成分配制成促凝血辅助剂，在低温等离子体作用下进行模拟凝血实验，结果表明，添加促凝血辅助剂的血液在30秒内，可以使血液中纤维蛋白原聚合，从而使血液迅速凝固，与不加该促凝血辅助剂的血液样品相比较，凝血效果等到显著提高。由此可见，利用该发明进行低温等离子体凝血具有易操作、成本低、耗时短、凝血效果好等优势，因而有极好的潜在应用前景。
【附图说明】
[0012]图1为等离子体射流装置和电源部分原理示意图。
[0013]图2为模拟等离子体促凝血辅助剂作用下的凝血实验效果比较图。
[0014]图3等离子体促凝血辅助剂可促使纤维蛋白原聚合的荧光法验证结果。
【具体实施方式】
[0015]下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步具体说明。
[0016]—种等离子体促凝血辅助剂，其活性成分为高铁血红素，主要通过以下步骤配制:称取适量高铁血红素放于超纯水中，用一定浓度的NaOH溶液调节pH至12，最好用0.lmol/L的NaOH溶液调节pH，高铁血红素在碱性溶液中可以快速溶解。待高铁血红素充分溶解，用磷酸钠缓冲液配制制成pH值为7.4、高铁血红素浓度为0.01mol/L高铁血红素母液。在用低温等离子体处理血液时，滴加上述高铁血红素母液至血液中，血液中高铁血红素浓度在 10 5?10 3mol/L0
[0017]凝血实验的主要装置为等离子体子射流装置。图1为等离体子射流装置和电源部分原理示意图:一根长为15cm的不锈钢电极，它放在一根直径为5_的石英管中，电极和石英管固定在绝缘外套中，绝缘外套上方有进气口和电源接线端，绝缘外套下方有出气口，放电时在出口处产生等离子体射流。放电电极下端被石英管封闭，上面则连接电源，电源输出电压为8?10万伏，放电频率约为8?10kHZ。放电射流的流速流量可以通过气阀控制，放电气体为He气，流量大约为1升/分钟。等离子体辐照样品时，射流出口和样品溶液之间的保持距离约1?5毫米，处理时间几秒到几分钟，样品初始温度为室温，样品处理后温度基本不变。
[0018]利用上述等离子体装置对模拟血液样品进行凝血实验。模拟血液样品的pH值范围为7.35?7.45，纤维蛋白原在在血浆中浓度范围为2?4克/升。取4份模拟血液样品，每个样品溶液200 yL，暴露表面积为1cm2’同时做四个平行凝血实验:(a)为对照样品:未添加高铁血红素、未进行等离子体处理样品；(b)为未添加高铁血红素、等离子体处理30秒的样品；(c)为添加高铁血红素浓度为10 4mol/L、等离子体处理30秒的样品；(d)为添加高铁血红素浓度为10 3mol/L、等离子体处理30秒的样品。实验结果如图2所示，由图可以清楚看到，等离子体处理可以促凝血，加入高铁血红素，则凝血效果显著提高，并且随着浓度升高，凝血效果进一步增强。
[0019]为了进一步验证以上实验效果，我们用含有纤维蛋白原的样品进行测试，即将含有纤维蛋白原的溶液(浓度为2?4克/升)进行等离子体辐照处理，并与加入含高铁血红素10 5M的等离子体促凝血辅助剂的纤维蛋白原的样品进行比较，结果如3所示，由图可知，等离子体处理前加入促凝血辅助剂处理后的样品蛋白质荧光增强幅度最大(图3中的曲线4)，说明添加促凝血辅助剂可以促使纤维蛋白原聚合形成纤维蛋白，而且进一步说明添加促凝血辅助剂的样品中纤维蛋白原转化为纤维蛋白的效率更高，即凝血效果更好。
[0020]除此以外，由于考虑到一般血液中还含有其它盐分，在实验中还比较了促凝血辅助剂在氯化钠存在下的凝血效果，结果表明，样品溶液中NaCl(0.9% )的存在对纤维蛋白原聚合影响不大，由此也证明了我们专利方案的实用性和普适性。
[0021]最后所应说明的是，以上【具体实施方式】仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
【主权项】
1.一种等离子体促凝血辅助剂，其特征在于:所述等离子体促凝血辅助剂的活性成分为尚铁血红素。2.根据权利要求1所述的等离子体促凝血辅助剂，其特征在于用以下步骤配制而成:将高铁血红素放于超纯水，用氢氧化钠溶液调节pH至12，使高铁血红素充分溶解；然后，用磷酸钠缓冲液配制成pH值为7.4、高铁血红素浓度为0.01mol/L高铁血红素母液。3.根据权利要求2所述的等离子体促凝血辅助剂，其特征在于:在用低温等离子体处理血液时，滴加所述高铁血红素母液至血液中，血液中高铁血红素浓度在10 5?10 3mol/Lo4.根据权利要求2所述的等离子体促凝血辅助剂，其特征在于:所述氢氧化钠溶液浓度为 0.lmol/Lo5.一种根据权利要求1?4所述的等离子体促凝血辅助剂的制备方法，其特征在于包括下列步骤:将高铁血红素放于超纯水，用氢氧化钠溶液调节pH至12，待高铁血红素充分溶解后，用磷酸钠缓冲液配制pH = 7.4、高铁血红素浓度为0.01mol/L高铁血红素母液。
【专利摘要】本发明涉及一种等离子体促凝血辅助剂，其活性成分为高铁血红素。将配制的促凝血辅助剂滴加在血液中，在低温等离子体处理下，可以使血液中纤维蛋白原聚合，从而使血液迅速凝固。利用该发明进行低温等离子体凝血具有易操作、成本低、耗时短、凝血效果好等优势，因而有极好的潜在应用前景。
【IPC分类】A61B18/12, A61K31/555, A61P7/04
【公开号】CN105267223
【申请号】CN201510652226
【发明人】黄青, 柯志刚
【申请人】中国科学院合肥物质科学研究院
【公开日】2016年1月27日
【申请日】2015年10月8日