酯的分离与鉴定
[0291] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行分离，流动相A :乙腈，流动相B :乙腈-四 氢呋喃（I: 1)，用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液，每次分离进样体积I. 5mL ;色 谱柱：Superstar Benetnach? C18(20mmX 150πιπι，5μ m);梯度条件：流动相 B :0 ~27min : 50%~60%，27~35111丨11:90%，35~45111丨11:100%;流速 ：1811117111丨11;紫外检测波长：20811111; 收集保留时间为12. 6~14. 2min的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减压浓 缩，用氯仿转移至IOmL小瓶，在真空干燥箱中35°C干燥6h后，充入氮气，干燥好的样品于冰 箱中冷冻保存，即得三亚油酸甘油酯。
[0292] HR-EI-MS :m/z = 878. 7344 (Calcd. = 878. 7363, C57H98O6)，不饱和度=9。
[0293] IR(KBr film) :1746、1170、1098 ;2928、2856、724 ;3008、1655cm 1(弱）。
[0294] 1H-NMR 数据见表 8。
[0295] 13C-NMR 数据见表 9。
[0296] 表8实施例11-18所述化合物的1H-NMR图谱数据
[0298] 其中，A :三亚油酸甘油酯，B :1_油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯，C :1_棕榈酸-2, 3-二 亚油酸甘油酯，D : 1，3_二油酸-2-亚油酸甘油酯，E :1_棕榈酸-2-亚油酸-3-油酸甘油酯， F :1，3-二棕榈酸-2-亚油酸甘油酯，G :三油酸甘油酯，H :1-棕榈酸-2, 3-二油酸甘油酯。
[0299] 表9实施例11-18所述化合物的13C-NMR图谱数据
[0300]
[0301] 其中，A :三亚油酸甘油酯，B :1-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯，C :1-棕榈酸-2, 3-二 亚油酸甘油酯，D : 1，3_二油酸-2-亚油酸甘油酯，E :1_棕榈酸-2-亚油酸-3-油酸甘油酯， F :1，3-二棕榈酸-2-亚油酸甘油酯，G :三油酸甘油酯，H :1-棕榈酸-2, 3-二油酸甘油酯。
[0302] 实施例121-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯的分离与鉴定
[0303] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行分离，流动相A :乙腈，流动相B :乙腈-四 氢呋喃（I: 1)，用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液，每次分离进样体积I. 5mL ;色 谱柱：Superstar Benetnach? C18(20mmX 150πιπι，5μ m);梯度条件：流动相 B :0 ~27min : 50%~60%，27~35111丨11:90%，35~45111丨11:100% ;流速：1811117111丨11;紫外检测波长：20811111 ; 收集保留时间为15. 4~17. 3min的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减压浓 缩，用氯仿转移至IOmL小瓶，在真空干燥箱中35°C干燥6h后，充入氮气，干燥好的样品于冰 箱中冷冻保存，即得1-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯。
[0304] HR-EI-MS :m/z = 880. 7518 (Calcd. = 880. 7520, C55H98O6)，不饱和度=7。
[0305] IR(KBr film) : 1747,1164,1098 ;2925, 2854, 723 ;3008,1655cm 1(弱）。
[0306] 1H-NMR 数据见表 8。
[0307] 13C-NMR 数据见表 9。
[0308] 实施例131-棕榈酸-2, 3-二亚油酸甘油酯的分离与鉴定
[0309] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行初步分离，流动相A :乙腈，流动相B :乙 腈-四氢呋喃（1:1)，用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液，每次分离进样体积 I. 5mL ;色谱柱：Superstar Benetnach? C18(20mmX 150mm，5 μ m);梯度条件：流动相 B :0 ~ 2711^11:50%~60%，27~35111丨11:90%，35~45111丨11，100% ;流速：1811117111丨11;紫外检测波长： 208nm ;收集保留时间为17. 4~18. Imin的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减 压浓缩，得粗品。
[0310] 二次纯化时流动相A :乙腈，流动相B :乙腈-四氢呋喃（I: 1)，将上述粗品用流动 相B配制成20mg/mL的溶液，每次分离进样体积I. 5mL ;色谱柱：Superstar Benetnach? (：18(1011111^250臟，5 4 111);梯度条件：流动相8:0~2311^11:50%~60%，32~4311^11 :60%~ 90%，43~60min :100% ;流速：3mL/min ;紫外检测波长：208nm，收集保留时间为31. 2~ 34. 7min的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减压浓缩，用氯仿转移至IOmL小 瓶，在真空干燥箱中35°C干燥6h后，充入氮气，干燥好的样品于冰箱中冷冻保存，即得1-棕 榈酸-2, 3-二亚油酸甘油酯单体。
[0311] HR-EI-MS :m/z = 854. 7370 (Calcd. = 854. 7363, C55H98O6)，不饱和度=7。
[0312] IR(KBr Flim) :1746,1165,1095 ;2926, 2854, 722 ;3009,1648cm 1(弱）。
[0313] 1H-NMR 数据见表 8。
[0314] 13C-NMR 数据见表 9。
[0315] 实施例141，3-二油酸-2-亚油酸甘油酯的分离与鉴定
[0316] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行分离，流动相A :乙腈，流动相B :乙腈-四 氢呋喃（I: 1)，用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液，每次分离进样体积I. 5mL ;色 谱柱：Superstar Benetnach? C18(20mmX 150πιπι，5μ m);梯度条件：流动相 B :0 ~27min : 50%~60%，27~35111丨11:90%，35~45111丨11:100% ;流速：1811117111丨11;紫外检测波长：20811111 ; 收集保留时间为18. 4~20. 2min的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减压浓 缩，用氯仿转移至IOmL小瓶，在真空干燥箱中35°C干燥6h后，充入氮气，干燥好的样品于冰 箱中冷冻保存，即得1-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯。
[0317] HR-EI-MS :m/z = 882. 7678 (Calcd. = 882. 7672, C57H102O6)，不饱和度=7。
[0318] IR(KBr Flim) :1747、1163、1097 ;2925、2855、723 ;3007、1655cm 1(弱）。
[0319] 1H-NMR 数据见表 8。
[0320] 13C-NMR 数据见表 9。
[0321] 实施例151-棕榈酸-2-亚油酸-3-油酸甘油酯的分离与鉴定
[0322] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行初步分离。流动相A :乙腈，流动相B :乙 腈-四氢呋喃（1:1)，用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液，每次分离进样体积 I. 5mL ;色谱柱：Superstar Benetnach? C18(20mmX 150mm，5 μ m);梯度条件：流动相 B :0 ~ 2711^11:50%~60%，27~35111丨11:90%，35~45111丨11 :100%;流速：1811117111丨11;紫外检测波长 ： 208nm ;收集保留时间为20. 3~21. 4min的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减 压浓缩，用氯仿转移至IOmL小瓶，在真空干燥箱中35°C干燥6h后，充入氮气，干燥好的样品 于冰箱中冷冻保存，即得1-棕榈酸-2-亚油酸-3-油酸甘油酯。
[0323] HR-EI-MS :m/z = 856. 7519 (Calcd. = 856. 7513, C55H100O6)，不饱和度=6。
[0324] IR(KBr Flim) :1747、1164、1098 ;2925、2854、723 ;3008、1655cm 1(弱）。
[0325] 1H-NMR 数据见表 8。
[0326] 13C-NMR 数据见表 9。
[0327] 实施例161，3-二棕榈酸-2-亚油酸甘油酯的分离与鉴定
[0328] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行初步分离，流动相A :乙腈，流动相B :乙 腈-四氢呋喃（1:1)，用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液，每次分离进样体积 I. 5mL ;色谱柱：Superstar Benetnach? C18 (20mmX 150mm，5 μ m);梯度条件：流动相 B :0 ~ 2711^11:50%~60%，27~35111丨11:90%，35~45111丨11 :100%;流速：1811117111丨11;紫外检测波长 ： 208nm ;收集保留时间为25. 7~26. 2min的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减 压浓缩，用氯仿转移至IOmL小瓶，在真空干燥箱中35°C干燥6h后，充入氮气，干燥好的样品 于冰箱中冷冻保存，即得1，3-二棕榈酸-2-亚油酸甘油酯。
[0329] HR-EI-MS :m/z = 830. 7371 (Calcd. = 830. 7363, C53H98O6)，不饱和度=5。
[0330] IR(KBr film) :1747、1164、1098 ;2925、2854、723 ;3008、1655cm 1(弱）。
[0331] 1H-NMR 数据见表 8。
[0332] 13C-NMR 数据见表 9。
[0333] 实施例17三油酸甘油酯的分离与鉴定
[0334] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行初步分离，流动相A :乙腈，流动相B :乙 腈-四氢呋喃（1:1)，用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液，每次分离进样体积 I. 5mL ;色谱柱：Superstar Benetnach? C18(20mmX 150mm，5 μ m);梯度条件：流动相 B :0 ~ 2711^11:50%~60%，27~35111丨11:90%，35~45111丨11 :100%;流速：1811117111丨11;紫外检测波长 ： 208nm ;收集保留时间为26. 6~27. 7min的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减 压浓缩，用氯仿转移至IOmL小瓶，在真空干燥箱中35°C干燥6h后，充入氮气，干燥好的样品 于冰箱中冷冻保存，即得三油酸甘油酯。
[0335] HR-EI-MS :m/z = 884. 7851 (Calcd. = 884. 7833, C57H104O6)，不饱和度=6。
[0336] IR(KBr film) : 1749,1165,1095 ;2925, 2854, 723 ;3004,1654cm 1(弱）。
[0337] 1H-NMR 数据见表 8。
[0338] 13C-NMR 数据见表 9。
[0339] 实施例181-棕榈酸-2, 3-二油酸甘油酯的分离与鉴定
[0340] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行初步分离，流动相A :乙腈，流动相B :乙 腈-四氢呋喃（1:1)，用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液，每次分离进样体积 I. 5mL ;色谱柱：Superstar Benetnach? C18 (20mmX 150mm，5 μ m);梯度条件：流动相 B :0 ~ 2711^11:50%~60%，27~35111丨11:90%，35~45111丨11 :100%;流速：1811117111丨11;紫外检测波长 ： 208nm ;收集保留时间为28. 2~29. 3min的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减 压浓缩，得粗品。
[0341] 二次纯化时流动相A :乙腈，流动相B :乙腈-四氢呋喃（I: 1)，将上述粗品用流动 相B配制成20mg/mL的溶液，每次分离进样体积I. 5mL ;色谱柱：Superstar Benetnach? (：18(1011111^250臟，5 4 111);梯度条件：流动相8:0~2311^11:50%~60%，32~4311^11 :60%~ 90%，43~60min :100% ;流速：3mL/min ;紫外检测波长：208nm，收集保留时间为32. 9~ 35. Imin的色谱峰流分，在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减压浓缩，用氯仿转移至IOmL小 瓶，在真空干燥箱中35°C干燥6h后，充入氮气，干燥好的样品于冰箱中冷冻保存，即得1-棕 榈酸-2, 3-二油酸甘油酯。
[0342] HR-EI-MS :m/z = 858. 7672 (Calcd. = 858. 7676, C55H102O6)，不饱和度=5。
[0343] IR (KBr film) : 1747,1166,1095 ;2926, 2854, 722 ;3003,1654cm 1(弱）。
[0344] 1H-NMR 数据见表 8。
[0345] 13C-NMR 数据见表 9。
[0346] 实施例19本发明薏苡仁油注射液的制备
[0347] 处方：
[0348] 薏该仁油100g 注射用大豆磷脂IOg 注射用甘油15 g 注射用水加至1000 ml
[0349] 其中，薏苡仁油含有以下成分：
[0350] 1，3-二油酸甘油二酯 0· 50%
[0351] 1-亚油酸-3-油酸甘油二酯L 31%
[0352] 1，2-二油酸甘油二酯 0· 30%
[0353] 1-油酸-2-亚油酸甘油二酯(λ 95%
[0354] 1，2-二亚油酸甘油酯(λ 41%
[0355] 三亚油酸甘油酯6. 10%
[0356] 1-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯16. 18%
[0357] 1-棕榈酸-2, 3-二亚油酸甘油酯6. 56%
[0358] 1，3-二油酸-2-亚油酸甘油酯16. 69%
[0359] 1-棕榈酸-2-亚油酸-3-油酸甘油酯12. 96%
[0360] 1，3-二棕榈酸-2-亚油酸甘油酯2. 88%
[0361] 三油酸甘油酯18.30%
[0362] 1-棕榈酸-2, 3-二油酸甘油酯10. 18%
[0363] 工艺：
[0364] 称取处方配制量的注射用大豆磷脂，加适量的注射用水后，用高剪切分散乳化机 分散至无块状及颗粒状固体，加入按配方量称取的注射用甘油，并加注射用水至规定量，搅 拌均匀备用；
[0365] 另称取薏苡仁油，将称取的油脂与水相分别加热至60°C后，置高压均质机进行高 压乳化，乳化时均质机低压为6MPa，高压为30MPa，再循环均质4遍，至2 μ m以下颗粒应不 少于95 %，5 μ m以上颗粒不得检出，必要时用NaOH或HCl调节pH至8. 5 ;
[0366] 将制得均匀乳剂氮气加压通过< 3μπι的微孔滤芯过滤器过滤，充氮灌装灭菌，冷 却即得。
[0367] 实施例20本发明薏苡仁油注射液的制备
[0368] 处方：
[0369] 薏苡仁油300 g 可供注射用大豆磷脂40 g 可供注射用甘油50 g 注射用水加至1000 ml
[0370] 其中，薏苡仁油含有以下成分：
[0371] 1，3-二油酸甘油二酯 0· 40%
[0372] 1-亚油酸-3-油酸甘油二酯L 05%
[0373] 1，2-二油酸甘油二酯 0· 24%
[0374] 1-油酸-2-亚油酸甘油二酯0· 76%
[0375] 1，2-二亚油酸甘油酯0· 33%
[0376] 三亚油酸甘油酯4. 87%
[0377] 1-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯13.00%
[0378] 1-棕榈酸-2, 3-二亚油酸甘油酯5. 25%
[0379] 1，3_二油酸-2-亚油酸甘油酯15. 13%
[0380] 1-棕榈酸-2-亚油酸-3-油酸甘油酯10. 26%
[0381] 1，3-二棕榈酸-2-亚油酸甘油酯3. 05%
[0382] 三油酸甘油酯20. 46%
[0383] 1-棕榈酸_2, 3-二油酸甘油酯11. 50%
[0384] 工艺：
[0385] 称取处方配制量的注射用大豆磷脂，加适量的注射用水后，用高剪切分散乳化机 分散至无块状及颗粒状固体，加入按配方量称取的注射用甘油，并加注射用水至规定量，搅 拌均匀备用；
[0386] 另称取薏苡仁油，将称取的油酯与水相分别加热至70°C后，置高压均质机进行高 压乳化，乳化时均质机低压为12MPa，高压为45MPa，再循环均质3遍，至2 μ m以下颗粒应不 少于95 %，5 μ m以上颗粒不得检出，必要时用NaOH或HCl调节pH至7. 1 ;
[0387] 将制得均匀乳剂氮气加压通过< 3μπι的微孔滤芯过滤器过滤，充氮灌装灭菌，冷 却即得。
[0388] 实施例21本发明薏苡仁油注射液的制备
[0389] 处方：
[0390] 薏苡仁油200 g 注射用大豆磷脂25 g 可供注射用甘油30 g 注射用水加至1000 ml
[0391] 其中，薏苡仁油含有以下