15g/L、20g/L 或 30g/L。
[0020] 上述方法中，所述氯化钙-壳聚糖液体中氯化钙的浓度可为40g/L_100g/L，具体 可为40g/L、50g/L、60g/L、80g/L或100g/L ;所述氯化钙-壳聚糖液体中壳聚糖的浓度可为 10g/L-20g/L，具体可为 10g/L。
[0021] 本发明所提供的活性成分为所述饲喂型微生态制剂的产品，其特征在于：所述产 品具有下述4种功能中的任意3种或少于下述4种功能中的任意3种且大于等于1种：
[0022] 1)增加瘤胃液中乙酸的含量；
[0023] 2)增加瘤胃液中丙酸的含量；
[0024] 3)增加瘤胃液中丁酸的含量；
[0025] 4)增加瘤胃液中纤毛虫的数量。
[0026] 为解决上述技术问题，本发明还提供了所述饲喂型微生态制剂在制备具有下述4 种功能中的任意3种或少于下述4种功能中的任意3种且大于等于1种的产品中的应用：
[0027] 1)增加瘤胃液中乙酸的含量；
[0028] 2)增加瘤胃液中丙酸的含量；
[0029] 3)增加瘤胃液中丁酸的含量；
[0030] 4)增加瘤胃液中纤毛虫的数量。
[0031] 实验证明，采用本发明的方法制备的饲喂型微生态制剂载菌量大，每克饲喂 型微生态制剂中干酪乳杆菌、热带假丝酵母和枯草芽孢杆菌这三株菌株的含量之和为 4. 56X 105cfu/g，结构稳定，能够有效缓解山羊瘤胃酸中毒症状，在微生态制剂应用的第2 天微生态制剂组山羊瘤胃液中纤毛虫的数量已显著高于对照组（t = 10.613, P〈0. 05)，说 明微生态制剂能够促进瘤胃酸中毒后纤毛虫的快速繁殖，恢复了山羊对纤维素类饲料的消 化能力而且缩短了恢复进程。对山羊瘤胃液中挥发性脂肪酸含量的测定结果表明实验组山 羊瘤胃液中乙酸在给予饲喂型微生态制剂的第4天已显著高于对照组
[0032] (七=9.281，卩〈0.05)，丙酸（七=5.574，？〈0.05)和丁酸（七=5.568，卩〈0.05)的 含量在给予饲喂型微生态制剂的第2天已显著高于对照组，且试验期间呈现出持续升高的 趋势。本发明的方法微生态制剂能够快速重建山羊瘤胃内环境，恢复其生理功能，对于畜牧 业生产具有重要的意义。
【附图说明】
[0033] 图1为乙酸、丙酸和丁酸的HPLC的图谱。其中，A为乙酸、丙酸、丁酸的混合标准 液的色谱图；B为山羊瘤胃液的色谱图；1代表乙酸、2代表丙酸、3代表丁酸。
【具体实施方式】
[0034] 下面结合【具体实施方式】对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐 明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
[0035] 下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0036] 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0037] 下述实施例中的海藻酸钠，壳聚糖和氯化钙均为国药集团化学试剂有限公司的产 品；乙酸（P = 1. 04g/L)，丙酸（P = 0· 993g/L)和丁酸（P = 0· 959g/L)均为色谱纯，均 为美国J. T. Baker公司的产品；磷酸二氢钾为色谱纯，为美国ACS恩科化学公司的产品；磷 酸为色谱纯，为美国Fisher公司的产品。
[0038] 下述实施例中的Agilent 1100系列液相色谱仪系统为安捷伦公司的产品（配有 G1379A型自动脱气机，G1311A型四元栗，G1313A型自动进样器，G1316型柱温箱，G1312A 型可变波长紫外检测器和色谱工作站）；BSA224S分析天平为赛多利斯科学仪器有限公司 的产品；Genpure UV-WC实验室超纯水系统为Thermo公司的产品；EYEL4MG-2200氮吹仪为 Tokyo RIKAKIKAL公司的产品；XH-D涡旋振荡器为无锡沃信仪器有限公司的产品。
[0039] 下述实施例中的干酪乳杆菌（Lactobacillus casei)ACCC10640 (下文简称干酪乳 杆菌），于本申请的申请日前收藏于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心，又称 中国农业微生物菌种保藏管理中心（Agricultural Culture Collection of China，简称 ACCC，地址：北京市海淀区中关村南大街12号，中国农业科学院农业资源与农业区划研究 所，邮编100081)，收藏日为2008年01月01日，自收藏之日起，公众可从中国微生物菌种保 藏管理委员会农业微生物中心获得该菌株。
[0040] 下述实施例中的热带假丝酵母（Candida tropicalis)ACCC21161 (下文简称热带 假丝酵母），于本申请的申请日前收藏于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心， 又称中国农业微生物菌种保藏管理中心（Agricultural Culture Collection of China，简 称ACCC，地址：北京市海淀区中关村南大街12号，中国农业科学院农业资源与农业区划研 究所，邮编100081)，收藏日为2008年01月01日，自收藏之日起，公众可从中国微生物菌种 保藏管理委员会农业微生物中心获得该菌株。
[0041] 下述实施例中的枯草芽抱杆菌（Bacillus subtilis)ACCC02157(下文简称枯草芽 孢杆菌），于本申请的申请日前收藏于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心，又 称中国农业微生物菌种保藏管理中心（Agricultural Culture Collection of China，简 称ACCC，地址：北京市海淀区中关村南大街12号，中国农业科学院农业资源与农业区划研 究所，邮编100081)，收藏日为2007年07月20日，自收藏之日起，公众可从中国微生物菌种 保藏管理委员会农业微生物中心获得该菌株。
[0042] 实施例1、饲喂型微生态制剂的制备
[0043] 本实施例提供的饲喂型微生态制剂，由活性成分和辅料组成；活性成分由干酪乳 杆菌、热带假丝酵母和枯草芽孢杆菌组成；辅料由海藻酸钠、氯化钙和壳聚糖制成。
[0044] 本实施例提供的饲喂型微生态制剂按照如下方法制备：将干酪乳杆菌菌剂、热带 假丝酵母菌剂和枯草芽孢杆菌菌剂进行混合得到饲喂型微生态制剂；干酪乳杆菌菌剂的活 性成分为干酪乳杆菌（Lactobacillus casei)ACCC10640 ;热带假丝酵母菌剂的活性成分为 热带假丝酵母（Candida tropicaliS)ACCC21161 ;枯草芽孢杆菌菌剂的活性成分为枯草芽 抱杆菌（Bacillus subtil is) ACCC02157 〇
[0045] 干酪乳杆菌菌剂由以下方法制备：将干酪乳杆菌-海藻酸钠液体滴加到氯化 钙-壳聚糖液体中得到干酪乳杆菌菌剂，干酪乳杆菌-海藻酸钠液体是由海藻酸钠水溶液 和干酪乳杆菌的菌液混合得到的。
[0046] 热带假丝酵母菌剂由以下方法制备：将热带假丝酵母-海藻酸钠液体滴加到氯化 钙-壳聚糖液体中得到热带假丝酵母菌剂，热带假丝酵母-海藻酸钠液体是由海藻酸钠水 溶液和热带假丝酵母的菌液混合得到的。
[0047] 枯草芽孢杆菌菌剂由以下方法制备：将枯草芽孢杆菌-海藻酸钠液体滴加到氯化 钙-壳聚糖液体中得到枯草芽孢杆菌菌剂，枯草芽孢杆菌-海藻酸钠液体是由海藻酸钠水 溶液和枯草芽孢杆菌的菌液混合得到的。
[0048] 具体实验操作如下：
[0049] 其中，下述实验中的干酪乳杆菌的液体菌种制备方法如下：用发酵培养基A在 35-37°C培养46h-54h得到的培养物（培养容器内的所有物质）。具体制备方法如下：将 活化好的干酪乳杆菌接种于装有l〇〇mL的发酵培养基A的500mL三角瓶中，35-37°C、摇床 160rpm(旋转半径20mm)培养48小时，三角瓶内的所有物质（培养物）即为干酪乳杆菌的 液体菌种。该干酪乳杆菌的液体菌种中干酪乳杆菌含量为8. 6X 109cfu/mL。
[0050] 下述实验中的热带假丝酵母的液体菌种制备方法如下：用发酵培养基A在 28-30°C培养32h-40h得到的培养物（培养容器内的所有物质）。具体制备方法如下：将 活化好的热带假丝酵母接种于装有l〇〇mL的发酵培养基A的500mL三角瓶中，28-30°C、 180rpm(旋转半径20mm)振荡培养36小时，三角瓶内的所有物质（培养物）即为热带假丝 酵母的液体菌种。该热带假丝酵母的液体菌种中热带假丝酵母含量为7. 8X K^cfu/mL。
[0051] 下述实验中的枯草芽孢杆菌的液体菌种制备方法如下：用发酵培养基A在 30-32°C培养18h-24h得到的培养物（培养容器内的所有物质）。具体制备方法如下：