一种组合物及其在升高白细胞的药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及有机合成和药物化学领域，具体设及组合物、制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 白细胞减少症是由于原因不明和继发于其他疾病之后而引起的疾病，分为原发性 和继发性两大类。原发性者原因不明；继发性者认为其病因可由急性感染，物理、化学因素， 血液系统疾病，伴脾肿大的疾病，结缔组织疾病，过敏性疾病，遗传性疾病等，获得性或原因 不明性粒细胞减少等。
[0003] 白细胞减少的治疗目前已有的药物存在毒性大、安全性低的问题，从天然产物中 寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物有 重要价值。 W04] 本发明设及的化合物I是一个2011年发表（AyumiOhsakietal.，2011.SalviskinoneA,aditerpenewithanewskeletonfromSalviaprzewalskii. Tetr址e化onLetters52(2011) 1375 - 1377)的化合物，我们对化合物I进行了结构修饰， 获得了两个新的衍生物即化合物HI和化合物IV，并用化合物HI和化合物IV制备了组合 物并对该组合物升高白细胞活性进行了评价，其具有升高白细胞活性。
【发明内容】
阳0化]本发明公开了一个新的组合物，该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合 物中化合物III和化合物IV的质量百分数分别为40%和60%。
[0006]
[0007] 本发明公开的组合物可W制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0008] 本发明的目的是提供组合物在制备升高白细胞药物中的应用。本发明组合物可W 显著升高失血和化学物品引起的白细胞降低。
[0009] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加W限定。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1化合物SalviskinoneA的制备
[0011] 化合物SalviskinoneA(I)的制备方法参照Ayumi化saki等人发表的文献 (AyumiOhsakietal. , 2011.SalviskinoneA,aditerpenewithanewskeletonfrom Salviaprzewalskii.TetrahedronLetters52 (2011) 1375 - 1377)的方法。
[0012]
[0013] 实施例2SalviskinoneA的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0014] 将化合物I(312mg，1.OOmmol)溶于15血苯，向溶液中加入四下基漠化锭灯BAB) (0. 08g)，1，2-二漠乙烧化760g，20.OOmmol)和6血的50 %氨氧化钢溶液。混合物在35 摄氏度揽拌12h。1化之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烧萃取两次，合并有机相 溶液。然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涂4次，再用无水硫酸钢干燥，最后减 压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬 =100:1.5,v/v)，收集栋色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的栋色粉末（327mg， 78% )O
[0015] 咱NMR巧00MHz，DMS0-de) 56. 63(s, 1H)，6. 3^s, 1H)，5. 81(s, 1H)，4. 51(s，2H)，3. 84 (s,IH), 3. 79 (s, 2H), 2. 15 (s,IH), 2. 04 (s,IH) ,1-91 (s,IH),I. 65 (s,IH),I. 39 (s, 3H),I. 08(s，6H)，0. 99(s，6H). 阳016]"cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 07 (S)，183. 70 (S)，154. 38 (S)，147. 57 (S)，140. 2I(S)，136. 40 (S)，134. 71 (S)，131. 25 (S)，128. 40 (S)，118. 83 (S)，72. 12 (S)，45. 49 (S)，37. 5 4 (S)，33. 58 (S)，31. 78 (S)，26. 17 (S)，25. 12 (S)，24. 66 (S)，23. 51 (S)，23. 17 (S)，22. 65 (S).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcdforCzzHzsBrCV419. 1222;found419. 1220.
[0018]
[0019] 实施例3SalviskinoneA的0-(赃嗦基）乙基衍生物（III)的合成
[0020] 将化合物II(209mg，0. 5mmol)溶于25血乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟 (690mg，5.Ommol),舰化钟（168mg，l.Ommol)和无水赃嗦（3446mg，40mmol)，混合物加热回 流化。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烧萃取3次，合并有机相。依次用水 和饱和食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物 粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:1. 5,v/v)，收集栋色 集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物III的淡栋色固体（154. 8mg，73% )。
[0021] 电NMR巧00MHz，DMS0-d6) 56. 57(s, 1H)，6. 37(s, 1H)，5. 81(s, 1H)，4. 27(s，2H)，3. 84 (s,IH), 3. 12 (s, 2H), 2. 69 (s, 4H), 2. 36 (s, 4H), 2. 14 (s,IH), 2. 05 (s,IH),I. 94 (s,IH),I. 70 (s,IH)，I. 35 (s, 3H)，I. 15 (s,IH)，I. 07 (s,6H)，I. 00 (s,6H).
[0022]"cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 23 (S)，183. 96 (S)，154. 74 (S)，148. 03 (S)，140. 7 7 (S)，136. 56 (S)，134. 97 (S)，131. 61 (S)，128. 86 (S)，119. 35 (S)，69. 37 (S)，54. 95 (S)，54. 5 2 (S)，45. 97 (S)，45. 84 (S)，37. 68 (S)，33. 82 (S)，26. 51 (S)，25. 61 (S)，25. 25 (S)，23. 65 (S)， 23. 41 (S)，22. 99 (S).
[0023] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdfor[26?术203:425. 2804 ;found:425. 2801。
[0024]
[0025] 实施例4SalviskinoneA的0-(lH-四氮挫基）乙基衍生物（IV)的合成
[0026] 将化合物II(209mg，0. 5mmol)溶于20血乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟 (345mg，2.Smmol)，舰化钟（84mg，0.Smmo1)和IH-四氮挫（1401mg，20mmol)，混合物加热 回流lOh。反应结束后将反应液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烧萃取2次，合并有机 相。依次用水和饱和食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除 溶剂得到产物粗品。因为互变异构作用，在反应条件下会生成IH-四氮挫基和甜-四氮挫 基两种取代产物。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:1，v/v)， 收集黄色集中洗脱带，再将洗脱带浓缩，用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬= 100:0. 5,v/v)，依次收集两个淡黄色的洗脱带，浓缩前1个洗脱带即得到化合物IV的黄色 粉末（85. 7mg，42% )。
[0027] 咱NMR巧00MHz，Chloroform-dl) 5 10. 21(s, 1H)，6. 53化J= 95. 4Hz, 1H)，6. 31(s ，IH)，5. 73 (s,IH)，4. 41 (t,J= 7.8Hz, 4H)，4. 04 (s,IH)，2. 09 (s,IH)，I. 98 (s,IH)，I. 85 (s, IH)，I. 59 (s,IH)，I. 33 (s, 3H)，I. 02 (s,6H)，0. 93 (s,6H).
[0028] "cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188.Ol(S)，183. 52 (S)，154. 09 (S)，147. 15 (S)，144.6 O(S), 140.Il(S), 136. 23 (S)，134. 42 (S)，130. 84 (S)，127.86(S)，118. 73 (S) ,66. 79 (S) ,46. 45 (S)，45. 42 (S)，37. 35 (S)，33. 27 (S)，25. 74 (S)，24. 62 (S)，24. 60 (S)，23. 32 (S)，22.86(S) ，22. 22 (S).
[0029] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC23H29N403:409. 2 2 40 ;found:409. 2245。
[0030]
[0031] 实施例5组合物升高白细胞活性
[0032] 一、组合物对失血小鼠的治疗作用 阳03引对失血小鼠的影响ICR小鼠50只，毕S各半，均分成5组（n= 10)。除生理盐水 组外，其它组每只小鼠从眼眶静脉放血0. 5ml，2地后再取血测全部各组白细胞指标，然后 连续灌胃给药1周，末次给药Ih后，从眼眶静脉丛取血用F-800全血小板分析仪测白细胞 指标。
[0034] 组合物的制备：将研磨之后过200目网的40mg化合物III的粉末和研磨之后过 200目网的60mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用满轮揽拌仪混合即得到IOOmg组 合物，使用时用水溶解运IOOmg的组合物即得到组合物的溶液。
[003引表1组合物对因失血所致白细胞减少的治疗作用（i07l)
[0037] 与模型组比较：卸<0. 05
[0038] 结果表明，放血小鼠经服用组合物治疗7天后，组合物给药组与模型组比较，白细 胞显著高于模型组，接近生理盐水组。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0039] 二、组合物对环憐酷胺致白细胞减少的治疗作用
[0040] 对小鼠骨髓造血功能损伤的防治作用ICR小鼠50只，毕S兼用，均分成5组（n =10)，即生理盐水组、造模组、组合物1. 2mg/kg组、化合物III1. 2mg/kg组和化合物IV I. 2mg/kg组，口服给药，每天I次。第0、5、10日除生理盐水组外，其它各组小鼠分别腹腔注 射环憐酸胺80mg/kg，然后继续给药3天。于末次给药后比，从眼眶静脉丛取血，测白细胞。
[0041] 表2组合物对环憐酷胺所致白细胞减少的治疗作用（i〇7l)
[0043] 与模型组比较：卸<0. 05
[0044] 结果表明，与生理盐水组比较，环憐酸胺能使小鼠骨髓损伤，造成外周血细胞下 降，组合物组与模型组比较，均可明显对抗环憐酸胺所致小鼠白细胞下降。而化合物HI和 化合物IV不具有此活性。
[0045] =、组合物对苯所致白细胞减少的治疗作用
[0046] 对再生障碍性贫血小鼠的影响：昆明种小鼠50只，毕S兼用，均分成5组（n= 10)，除生理盐水组外，其它组小鼠皮下注射苯0. 5ml/kg，连续12天，造模的当日，同时口服 给药，每天1次，共18天，末次给药后比，眼眶静脉丛取血，测白细胞。
[0047] 表3组合物对苯所致血细胞减少的治疗作用（107L)
[0049] 与模型组比较：卸<0. 05
[0050] 结果表明，组合物组与模型组比较，可明显对抗苯所致再生障碍性贫血小鼠白细 胞的下降。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0051] 结论：组合物能够显著升高白细胞，可W用来制备抗白细胞降低药物。而化合物 III和化合物IV不具有显著升高白细胞的活性，不可W用来制备抗白细胞降低药物。
[0052] 实施例6本发明所设及组合物片剂的制备
[0053] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0054] 实施例7本发明所设及组合物胶囊的制备 阳化5] 取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100 粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为40%和60%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为：将化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照质量百分数分别为40%和60%充分混合。3. -种如权利要求1所述的组合物在升高白细胞药物中的应用。4. 如权利要求3所述的组合物在升高白细胞药物中的应用，其特征在于所述组合物升 高失血所致白细胞的降低。5. 如权利要求3所述的组合物在升高白细胞药物中的应用，其特征在于所述组合物升 高化学品所致白细胞的降低。6. 如权利要求5所述的组合物在升高白细胞药物中的应用，其特征在于所述化学品为 环磷酰胺。7. 如权利要求5所述的组合物在升高白细胞药物中的应用，其特征在于所述化学品为 苯D
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物、制备方法及其在制备升高白细胞药物上的用途。本发明公开了一种组合物及其制备方法。药理学实验表明，本发明的组合物具有升高白细胞的作用，具有开发升高白细胞药物的价值。
【IPC分类】C07D257/04, A61P7/00, A61K31/41, C07D295/088, A61K31/495
【公开号】CN105343075
【申请号】CN201510742134
【发明人】王卓婷
【申请人】南京赋海澳赛医药科技有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年11月4日