一类倍半萜类抗溃疡药物，制备方法及用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及倍半祗衍生物类抗胃癌药物的合成方法、结构鉴定及其H7IT-ATP酶 抑制活性，可作为抑酸药物用于治疗胃溃瘍和十二指肠溃瘍等相关疾病。
【背景技术】
[0002] 胃溃瘍是一种常见病、多发病、呈世界性分布，我国的发病率约占人口的10%W 上。目前认为粘膜攻击性因素与防御性因素失衡是消化性溃瘍的发病基础，胃酸已被确认 为消化性溃瘍的最主要致病因素之一。减少胃酸分泌已成为最常用的促进溃瘍愈合的手段 于皆平.胃部疾病的诊断和治疗[M].北京：人民卫生出版社.2004, 14-35.。
[0003] 胃壁细胞的主要功能是分泌肥1使胃腔酸化，它是通过壁细胞顶部分泌小管膜 上的质子累（即H7IT-ATP酶）的质子转运而实现的。H7IT-ATP酶定位于胃粘膜壁细 胞（parietallell)上，属于第二类质子累，它通过自身的憐酸化（E1 -E2)与去憐酸化 脱一E1)完成的H7IT电中性跨膜离子转运，不断将壁细胞内的质子运输到膜外行使泌酸 的功能，因此抑制H7IT-ATP酶，可发挥强大的抑制胃液分泌作用。H7IT-ATP酶是设及胃酸 分泌的一种重要的蛋白酶，也是调控胃酸分泌环节中的关键步骤和最后环节。由于质子累 抑制剂是抑制胃酸分泌的最后步骤，因此它也是最强的抑酸药。从1988年第一个质子累抑 制剂"奥美拉挫"上市W来，质子累抑制剂已成为治疗胃酸分泌相关疾病的主要药物，质 子累抑制剂+阿莫西林+克拉霉素"的"Ξ联疗法"已成为中国消化性溃瘍病治疗的常规疗 法。W奥美拉挫为代表的质子累抑制剂能特异性地作用于胃粘膜壁细胞，降低壁细胞中质 子累（H7IT-ATP酶）的活性，从而显著抑制因各种刺激导致的胃酸分泌，缓解并治疗消化性 溃瘍。
[0004] 在胃溃瘍的西医治疗中，采用化学药物的治愈率高，但停药后复发率也较高，往往 溃瘍愈合越快，停药后复发率越高。西米替下正规治疗疗程结束后，溃瘍于半年内复发率达 30-50%，有报道甚至高60~90%。临床常用的抗溃瘍药物如组胺受体掉抗剂，H7K+-ATP 酶抑制剂，虽然疗效好，但因不良反应严重而停止治疗的病例也常有发生。而中药治疗不 仅控制症状较理想，药后病情较易稳定，而且复发率较化，后遗症较少。邓天魁，汪一平， 李春等.消化性泼瘍的药物治疗进展[J].医药导报.2005, 24巧）：513.。同类研究表明， 一些天然来源的聰类化合物也对胃粘膜细胞具有较好的保护作用，其作用机制可能与分子 中的α，β-不饱和鑛基有关。例如，从植物FabianaimbricataR.中分离的兰聰类化合 物oleanolicacid【Tundis,民.；Loizzo，M.民.；Bonesi，M. ;Menichini,F. ;Conforti，F.; Statti,G. ;Menichini,F.Naturalproductsasgastroprotectiveandantiulcer agents:recentdevelopments[J].Natu.Prod.Commun. 2008, 3, 2129-2144.】，从Araucaria araucana.中分离的二聰类化合物Imbricatolicacid和 15-Hydroxyimbricatolal，从 ArtemisiadouglasianaBesser中得到的内醋型倍半聰Dehydroleucodine【Favier，L S. ;Maria,A. 0.M. ;Wendel,G.H. ;Borkowski，E.J. ;Giordano, 0.S. ;Pelzer,L.; Tonn,C.E.Anti-ulcerogenicactivityofxanthanolidesesquiterpenesfrom Xanthiumcavanillesiiinrats[J].J.Ethnopharm. 2005, 100, 260-267.】、从Xanthium cavanillesiiSchouw中分离得到的黄原胶内醋型倍半祗Xanthatin【化nissi,A.B.; Vera,Μ.E. ;Mariani,Μ.L. ；Rudolph,M.I. ；Cenal,J.P. ；Rosas,J.C. ；Fogal,T.H. ；Tonn,C. E. ;Favier,L.S. ；Giordano, 0.S. ；Piezzi,R.S.Novelanti-ulcera,β-unsaturated lactonesinhibitcompound48/8〇-inducedmastcelldegranulation[J].Eur. J.化arm. 2009, 612, 122-130.】等都对肠胃粘膜细胞都具有较好的保护作用。
[0005] 紫金砂为伞形科当归属植物拐芹（Angelicapolymo巧haMaxim.)的根。民间应用 疗效确切，在我省应用范围较广，已被《湖北省中药材质量标准》(2009年版）收录为正式品 种，但是国内外学者对其药理活性和所含有化学成分仅进行了初步研究，所获得科学资料 较少，不足W支撑紫金砂药用资源的开发利用和保护。本实验室前期研究表明，紫金砂乙酸 乙醋部位具有较强的抗胃溃瘍作用【蔡正军，但飞君，程凡，汪塞植，邹坤.白根独活抗菌 有效部位的化学成分研究.中药材.2008, 31，1160-1162.】，而从乙酸乙醋部位分离得到的 倍半祗类化合物没药烧吉酬具有很强的抗阿司匹林-乙醇所致的胃溃瘍作用【但飞君，蔡 正军，朱烈彬，汪塞植等.中药白根独活抗胃溃瘍有效部位研究[J].Ξ峡大学学报（自然 科学版）.2008,30(3) :92.Wang，J. ;ZhuL. ;ZouK.;Chen评.；DanF. ;GuoZ. ;CaiZ. ;YangJ. Theanti-ulceractivitiesofbisabolangelonefromAngelicapolymorpha[J].J.Eth no地arma. 2009, 123, ；343-；346.】。
【发明内容】
[0006] 本专利m十算化学为指导【国冬.抑制胃酸分泌药物的设计和化/K+-ATP酶Ξ维 结构的模建巧].沈阳药科大学博±学位论文2004年】，根据没药烧吉酬与Η7ΙΤ-ΑΤΡ酶的 作用特点对其进行结构修饰，制备并分离了系列没药烧吉酬衍生物，通过体外药理实验测 定产物的Η7ΙΤ-ΑΤΡ酶抑制活性，利用计算化学手段研究了活性化合物的抗溃瘍作用机制， 为研发新型高效低毒的抗胃溃瘍药物奠定基础，为紫金砂的倍半祗活性成分的开发研究提 供依据，并为抑酸药物的开发提供了新型参考药物。
[0007] 1没药烧吉酬的快速提取与分离纯化
[0008] 将拐芹干燥根茎20kg用大粉碎机粉碎，得到的药渣用渗漉提取罐提取（提取液： 无水乙醇50以提取溫度：70°C，提取次数：Ξ次，每次提取时间：2小时），合并提取液，减压 浓缩得到浸膏，经快速柱层析分离（色谱柱直径20畑1，吸附剂：硅胶200~300目2. 0kg，浸 膏上样量：500g，洗脱剂：乙酸乙醋/石油酸=1:1)，得到的流分合并，浓缩得到粗产品。将 粗产品用乙酸乙醋重结晶，得到没药烧吉酬72. 2g，状态为白色固体，提取率0.361%。
[0009] 2没药烧吉酬衍生物的制备
[0010] 2.1仪器及药品
[0011] 实验仪器
[0012]
[0015]
[0016] 2. 2合成部分
[0017] 在50mlΞ颈瓶中，将没药烧吉酬（1. 00g，4.Ommol)于l〇-15°C溶于30ml绝对无水 甲醇中，加入Pd/"0. 10g，10%w/w)。先通入高纯氮气排走里面空气，然后于剧烈揽拌条件 下通入99%氨气，TLC监测直至没药烧吉酬点消失。抽滤除去Pd/C，负压条件下浓缩滤液 得混合物，经柱层析石油酸：乙酸乙醋（l〇:l，V/V)至石油酸：乙酸乙醋巧：1，V/V)变梯度 洗脱，依次得到：B01 (白色固体，0.45g)、B53(白色固体，0.05g)、B02(白色固体，0. 15g)和 B15(白色固体，0. 30g)。
[0018]
[001引在50ml圆底瓶中，将化合物化253g，ImmoU和；水乙酸钢（0. 163g，1. 2mm0U溶 于（20ml)无水乙醇中，向瓶里滴加蒸馈水至无固体颗粒，分批加入化084g，1. 2mmol)盐酸 径锭，揽拌直至TLC监测无原料。将反应液倒入50ml冰水中，揽拌析出白色固体，抽滤得B14(白色固体，0. 254g)。参照化合物B14合成方法，同理合成出化合物B20及B68。合成 路线如下：
[0020]
[0021] 在50mlS口瓶中，将B14(0. 268g，1.0mmol)溶于20ml二氯甲烧中，加入Ξ乙胺 (0. 202g，2.Ommol)，再在冰水浴（0~5°C)下缓慢滴加乙酷氯化157g，2.Ommol)，冰水浴 中反应化，再在25°C下反应12h，TLC监测反应进程。反应完毕，减压旋转蒸出溶剂，粗品经 硅胶柱层析分离石油酸：乙酸乙醋（4 :1，V/V)洗脱得B3U无色油，0. 163g)。参照化合物 B31合成方法，同理合成出化合物B62、B84、B85及B86。合成路线如下：
[0022]
[002引在50ml圆底瓶中，将B14(0. 268g，1.0mm0u溶于无水乙腊（20血）中，加入碳酸钟 (0. 138g，1.Ommol)，在冰水浴（0~5°C)下缓慢滴加氯乙酸乙醋（1.Ommol)，在60°C油浴 中揽拌反应地，TLC监测反应进程，反应完毕，冷却，过滤除去碳酸钟固体，减压旋转蒸出溶 剂，粗品经硅胶柱层析分离石油酸：乙酸乙醋（4 :1，V/V)洗脱得B33。参照化合物B33的 合成方法，同理合成得到B30、B34及B63。合成路线如下：
[0024]
[00巧]在50ml圆底瓶中加入B14(0. 268g，1.Ommol)，加入二氯甲烧20ml加热至溶解， 室溫下缓慢滴加苯异氯酸醋化131g，l.Immol)，TLC监测反应进程。反应完毕，减压旋转 蒸出溶剂，粗品经硅胶柱层析分离石油酸：乙酸乙醋（4:1，V/V)洗脱得B35(白色固体， 0. 317g)。参照化合物B35合成方法，同理合成出化合物B61。合成路线如下：
[0026]
[0027] 2. 3结构表征
[0028] (3R, 3aR,6R, 7aS, Z)-3-hydroxy-3, 6-dimethyl-2-(3-methyl butylidene)hexahydrobenzofu ran-4 (2H)-one(BO 1) :white solids；Yield 45 94-95 °C;MS化SI)m/z:275.16 (M+Nar;IR:Vmax/cmi(K Br) 3393, 2959, 1688, 1455, 1408, 1382, 1359, 1271, 11 34, 1111, 1019, 950；'H NMR(CDCl3,400MHz) 5:4.69-4.56(m，lH，CH)，4.47(t，J = 14.8Hz，lH, = CH)，2.71(d，J =8. OHz, IH, CH)，2. 44-2. 39 (m, IH, CH)，2. 17-2. 09 (m, 2H, 2 X CH)，1. 99化rs, IH, OH)， l. 95(t，J = 7. 2Hz，2H，CH2)，1.82-1.56(m，3H，3XCH)，1.51(s，3H，CH3)，1.05(d，J = 6. OHz, 3H, C册），0. 89(d, J =6. 4Hz,6H,2XCH3) ;1化NMR(CDCl3, lOOMHz) δ :209. 5, 159. 9, 9 5. 3, 79. 1，78. 1，58. 4, 49. 5, 37. 4, 33. 7, 28. 7, 26. 5, 26. 1，22. 3, 22. 2, 21.