生物标志物，如P1NP。骨转换减少被证实与 骨矿物质密度(BMD)增加相对应。克罗米芬被认为通过特异性刺激促性腺激素 LH和FSH的分 泌而在下丘脑-垂体轴水平上发挥它的作用。在男性中，促性腺激素增加与睾酮水平升高有 关。继而是雌激素水平的相应升高，这是因为一定量的睾酮被芳构化。雌激素对骨矿物质密 度(BMD)的作用是公认的;雄激素对BMD的作用仍存在争议。惊人的是，反式克罗米芬似乎经 由与睾酮不同的机制抑制骨转换，这是因为施用外源性睾酮对骨形成标志物的水平没有影 响，而在使用反式克罗米芬治疗后观测到同一种标志物的显著减少。反式克罗米芬抑制骨 再吸收和骨转换的活性与BMD的增加有关并且因此使得本发明的组合物可用于治疗多种骨 相关病症。
[0022] 在多个实施方案中，本发明提供了用于抑制受试者的骨再吸收的方法，所述方法 是通过施用有效量的组合物来实现的，所述量有效降低一种或多种骨再吸收生物标志物， 如CTX的血清水平，所述组合物包含一定量的反式克罗米芬或其三苯基亚烷基类似物或盐。 优选地，所述组合物基本上不含顺式异构体并且包含选自（E)-4_0H-克罗米芬（图4)和(E)-4-OH-脱乙基-克罗米芬（图5)的反式克罗米芬或代谢物。所述受试者可以是人类男性或女 性。
[0023] 可以测量指示骨再吸收的生物标志物水平以衡量受试者对反式克罗米芬或其类 似物或盐的生理反应。这些标志物包括但不限于1型胶原C末端端肽(CTX)、1型胶原N末端端 肽(NTX)、脱氧吡啶啉(DTO)、吡啶啉、尿羟脯氨酸、半乳糖基羟赖氨酸、以及抗酒石酸酸性磷 酸酶。优选地，测量CTX的血清水平。反式克罗米芬(或其类似物或盐）的量优选地有效地使 一种或多种骨再吸收标志物(如CTX)的水平与在施用反式克罗米芬(或其类似物或盐)之前 骨再吸收标志物的水平相比降低至少约5%、约10%、约15%、约20%或更多。
[0024] 在其它实施方案中，本发明提供了用于抑制受试者的骨转换的方法，所述方法是 通过施用有效量的组合物来实现的，所述量(i)有效降低一种或多种骨再吸收生物标志物， 如CTX的血清水平；以及(ii)有效降低一种或多种骨形成生物标志物，如1型前胶原N末端延 长肽(PlNP)的血清水平，所述组合物包含一定量的反式克罗米芬或其类似物或盐。优选地， 所述组合物包含反式克罗米芬并且基本上不含顺式异构体。PlNP是由成骨细胞产生的并且 度量了骨形成，其中更低的PlNP水平表明更低的骨转换。骨转换减少似乎允许整个身体内 骨矿化的机会增加(Meunier和Boivin，Bone 21:373-377(1997))以及骨折的风险减小。
[0025] 可以测量指示骨形成的生物标志物水平以衡量受试者对反式克罗米芬或其类似 物或盐的反应。这些标志物包括但不限于P1NP、骨特异性碱性磷酸酶(BSAP)以及骨钙素 (OstCa)。优选地，测量PlNP的血清水平。反式克罗米芬(或其类似物或盐）的量优选地有效 地使一种或多种骨形成标志物(如PlNP)的水平与在施用反式克罗米芬(或其类似物或盐） 之前骨形成标志物的水平相比降低至少约10%、约15%、约20%、约25%、约30%或更多。
[0026] 在其它方面，本发明提供了一种用于提高受试者的骨矿物质密度(BMD)的方法，所 述方法包括向所述受试者施用有效提高所述受试者的BMD的量的组合物，所述组合物包含 反式克罗米芬或其类似物或盐。在相关实施方案中，所述量有效降低骨再吸收标志物的水 平并且任选地还降低骨形成标志物的水平。优选地，所述组合物基本上不含顺式异构体并 且包含反式克罗米芬。BMD可以被测量为"全身"（头、躯干、手臂以及腿)BMD或髋部(例如全 髋和/或股骨颈）、脊椎、腕部、手指、胫骨和/或脚跟处的BMD，但是优选地被测量为髋部BMD。 BMD通常与30岁健康成人的峰值密度相比较，从而产生所谓的"T分数"。受试者的BMD分数还 可以与年龄匹配的骨密度相比较。受试者的BMD与健康年轻成人的BMD之间的差异在常规上 是用"标准差"的倍数来提及的，所述标准差通常等于骨密度降低约10%至约12%。与年轻 成人参考平均值相差1倍标准差以内的BMD值(至少-1的T分数)是"正常的"。骨质减少是由 低于年轻成人平均值超过1倍标准差，但是少于2倍标准差的BMD值(T分数是-1至-2.5)来指 示的。低于标准超过2.5倍标准差的t分数指示骨质疏松症的诊断。（世界卫生组织骨质疏松 症预防和管理科学组（World Health Organization Scientific Group on the Prevention and Management of Osteoporosis)，WH0技术报告系列（WHO Technical Report Series);921，瑞士的日内瓦(Geneva,Switzerland) (2000))。可以向受试者施用本 发明的组合物以提高BMD而与受试者的T分数无关。优选地，与治疗前测量结果相比，反式克 罗米芬或其类似物或盐的量有效地将髋部BMD提高至少约1 %，更优选地至少约1.2%』MD 的这种增加可以对应于在同一个治疗时间段内与同一个患者群体中未经过治疗的受试者 相比增加了至少约1.5%、约1.6%或约1.75%或更多。
[0027] 在临床上可以使用例如双能X射线吸收测定术(DXA)，例如对髋部来测定人类受试 者的BMD。其它合适的技术包括但不限于超声波检查法、单能X射线吸收测定术(SXA)以及定 量计算机断层摄影术(OCT)。可以测量中轴骨骼部位，如脊椎和髋部和/或可以测量外周部 位，如前臂、手指、腕部或脚跟。这些技术涉及将所获得的结果与一种或多种规范数据库比 较。
[0028] 在其它实施方案中，本发明提供了一种用于预防或治疗受试者的骨相关病症的方 法，所述方法是通过施用有效预防或治疗所述病症的量的组合物来实现的，所述组合物包 含一定量的反式克罗米芬或其类似物或盐。在一个方面，向患有选自由以下各项组成的组 的骨相关病症的人类受试者施用所述组合物:软骨发育不全、锁骨颅骨发育不全、软骨发育 异常、纤维异常增殖症、高雪氏病(Gaucher ' s Disease)、低磷血症性佝偻病、马凡氏综合征 (Marfan's syndrome)、多发性遗传性外生骨疏、神经纤维瘤病、成骨不全症、骨硬化病、脆 弱性骨硬化、硬化损伤、假关节形成、化脓性骨髓炎、牙周病、抗癫痫药物诱发的骨质流失、 原发性和继发性甲状旁腺功能亢进症、家族性甲状旁腺功能亢进综合征、失重诱发的骨质 流失、男性骨质疏松症、经绝后骨质流失、骨关节炎、肾性骨营养不良、骨浸润性病症、口腔 骨质流失、颚骨坏死、青少年佩吉特氏病（juvenile Paget's disease)、肢骨纹状肥大、代 谢性骨病、肥大细胞增多症、镰状细胞性贫血/疾病、器官移植相关的骨质流失、肾脏移植相 关的骨质流失、全身性红斑狼疮、强直性脊柱炎、癫痫症、青少年关节炎性皮疹、地中海贫 血、粘多糖IC积症、法布里病(Fabry Disease)、特纳综合征(Turner Syndrome)、唐氏综合 征（Down Syndrome)、克氏综合征(Klinefelter Syndrome)、麻风病、佩氏病（Perthe ' s Disease)、青少年特发性脊柱侧凸、婴儿期发病的多系统炎症性疾病、温彻斯特综合征 (Winchester Syndrome)、门克斯病(Menkes Disease)、威尔逊氏病(Wilson's Disease)、 缺血性骨病（如累-卡-佩三氏病(Legg-Calve-Perthes disease)和局限性移行性骨质疏松 症）、贫血状态、由类固醇所引起的病况、糖皮质激素诱发的骨质流失、肝素诱发的骨质流 失、骨髓病症、坏血病、营养不良、钙缺乏症、骨质疏松症、骨质减少、酒精中毒、慢性肝病、经 绝后状态、慢性炎症性病况、类风湿性关节炎、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、炎症性结肠炎、 克罗恩氏病(Crohn's disease)、月经过少、闭经、妊娠、糖尿病、甲状腺功能亢进症、甲状腺 病症、甲状芳腺病症、库兴氏病、肢端肥大症、性腺功能减退、制动状态或废用、反射性交感 神经营养不良综合征、局限性骨质疏松症、骨软化症、与关节置换相关的骨质流失、HIV相关 的骨质流失、与生长激素丧失相关的骨质流失、与囊性纤维化相关的骨质流失、化学疗法相 关的骨质流失、肿瘤诱发的骨质流失、癌症相关的骨质流失、激素消融性骨质流失、多发性 骨髓瘤、药物诱发的骨质流失、神经性厌食症、疾病相关的面部骨质流失、疾病相关的颅骨 骨质流失、疾病相关的颚骨骨质流失、疾病相关的头骨骨质流失、与衰老相关的骨质流失、 与衰老相关的面部骨质流失、与衰老相关的颅骨骨质流失、与衰老相关的颚骨骨质流失、以 及与衰老相关的头骨骨质流失。在优选的实施方案中，向人类施用所述组合物以治疗或预 防骨质疏松症或骨质减少。在相关实施方案中，所述人类是具有低的或低而正常的睾酮的 人类男性，如继发性的性腺功能减退的男性。在相关方面，与在不存在治疗的情况下的血清 水平相比，反式克罗米芬或其类似物或盐的量有效地使骨再吸收标志物(如CTX)的水平降 低至少5%，更优选地至少10%，最优选地至少15%。
[0029] 应当了解的是，本发明的方法不需要治愈患有骨相关病症的受试者或完全防止骨 相关病症的发病以实现治疗上有益的反应。可以预防性地使用所述方法，意图是完全或部 分防止骨相关病症或其症状。还可以治疗性地使用所述方法以完全或部分缓解骨相关病症 或其症状，或者完全或部分防止骨相关病症或症状的进一步进展。本发明的方法可用于随 时间推移提高BMD以及维持升高的BMD并且因此特别可用于预防骨质减少的发病、预防骨质 减少向骨质疏松症进展以及治疗骨质减少和骨质疏松症。
[0030] 代表了克罗米芬类似物的三苯基亚烷基衍生物的家族在此被定义为包括所有未 修饰的反式形式、以及反式克罗米芬的4-羟基化类似物、N-脱烷基化类似物以及4-羟基-N-脱烷基化类似物中的每一种、以及具有基本上相似的结构的所有其它分子。反式克罗米芬 的类似物，如Ernst等，J.Pharmaceut. Sci .65:148(1976)中所述的那些和本文所述的代谢 物也可用于实施本发明。
[0031] 在一些实施方案中，需要通过本发明的方法中的任一种加以治疗的受试者是继发 性的性腺功能减退的男性。在相关实施方案中，需要通过本发明的方法中的任一种加以治 疗的受试者是具有以下身体质量指数的人类男性：至少20、至少21、至少22、至少23、至少 24、至少25、至少26、至少27、至少28、至少29、至少30、至少31或至少32。举例来说，需要治疗 的受试者可以是具有至少25的身体质量指数的人类男性。
[0032] 在相关实施方案中，需要通过本发明的方法中的任一种加以治疗的受试者是患有 2型糖尿病的人类男性或女性，在这种情况下，优先施用本发明的组合物作为被设计成降低 骨折风险的给药方案的一部分。在一个实施方案中，所述受试者是患有2型糖尿病的人类男 性并且将反式克罗米芬或其类似物或盐与二甲双胍(metformin)、苯乙双胍(phenformin) 或丁福明（buformin)相继或同时向所述受试者共同施用。
[0033] 在一个优选的实施方案中，本发明的组合物包含可以在Img至200mg或5mg至IOOmg 范围内的剂量的反式克罗米芬或其盐，如反式克罗米芬柠檬酸盐。反式克罗米芬的剂量还 可以是5mg至10mg、5mg至12 · 5mg、5mg至 15mg、5mg至20mg、IOmg至15mg、IOmg至20mg、12 · 5mg 至25mg、12.5mg至50mg、或25mg至50mg。反式克罗米芬的剂量还可以是12.5mg、25mg或50mg。
[0034] 在一个实施方案中，本发明的组合物包含反式克罗米芬或其类似物的一种或多种 药学上可接受的盐。根据工艺条件，所获得的盐化合物可以呈中性形式或盐形式。盐形式包 括水合物和其它溶剂化物以及结晶多晶型物。可以根据本发明使用这些最终产物的游离碱 和盐这两者。
[0035] 可以使用诸如