50mg)。在受试者中，通过免疫测定对基线血清（循环）雌激素 (E2)、二氢睾酮(DHT)、性激素结合球蛋白（SHBG)、P1NP-1以及CTX测量结果进行定量测定。 然后开始使用反式克罗米芬（12.5mg或25mg)或Testini?进行治疗。在初始剂量后3周时、初 始剂量后6个月时以及停止治疗后一个月时进行随访测量。结果呈现于下表1中： 表1:治疗对血清激素和SHBG水平的作用
*相比于TxT前有差异 ~相比于Testim有差异 1湘比于安慰剂有差异 tng/DL ilpg/mL §nmol/L
[0086]在6周和3个月的每天施用反式克罗米芬之后，观测到血清雌二醇17β(Ε2)显著增 加。Testim?，即局部外源性睾酮使血清雌激素升高到与反式克罗米芬相等的程度并且使 DHT升高到比反式克罗米芬更大的程度。在停止使用反式克罗米芬治疗之后，与基线相比， 血清雌激素水平仍升高。鉴于SHBG结合血清中的睾酮和雌激素这两者，在治疗期间SHBG水 平的相对稳定表明游离睾酮或雌激素没有发生变化。重要的是，没有观测到反式克罗米芬 升高雌二醇水平的能力与Testim?相比存在差异。
[0087] 反式克罗米芬和Testim?对骨形成血清生物标志物(PlNP)和骨再吸收血清生物 标志物(CTX)的水平的作用图示于图1和图2中。在接受任何一种剂量的反式克罗米芬治疗 的受试者中观测到血清PlNP-I水平降低;然而，在对照组和Testiin⑧组中没有观测到变化 或观测到略微增加（图1)。Testim?治疗不能简单地通过增加睾酮来降低PiNP-I表明了与 反式克罗米芬的作用相比有显著的差异。观测到PlNP-I水平的降低具有剂量依赖性，其中 25mg的剂量与12.5mg的剂量相比表现出更强的降低作用。在这两种反式克罗米芬剂量下 PlNP-I的更低水平完全在正常范围内（15yg/L-8〇yg/L)。在这两种反式克罗米芬剂量下还 观测到CTX水平的降低;然而，在25mg的剂量下，降低作用要强得多。相比之下，在对照受试 者中观测到CTX水平相对于基线的显著升高。Testim?;治疗组表现出CTX水平的中等降低。 根据意向性治疗(ITT)分析，血清生物标志物的变化是相同的，尽管ITT群体含有退出者。 [0088]在反式克罗米芬治疗的情况下所观测到的PlNP-I和CTX的降低似乎与血清睾酮、 DHT或雌激素的水平无关(表1)，这鉴于单独的治疗在那些激素作用方面没有显著差异，而 反式克罗米芬在每天25mg剂量下表现出这些生物标志物的更强降低。惊人的是，似乎反式 克罗米芬和Testim?通过不同的机制来发挥它们对骨骼的作用。
[0089]在治疗前具有25至42范围内的身体质量指数(BMI)并且没有骨病(包括骨质减少） 迹象的15名性腺功能减退男性（早晨睾酮低于300ng/dL)中，通过双能X射线吸收测定术 (DEXA)扫描来评估反式克罗米芬对全髋骨矿物质密度(BMD)的作用。在使用反式克罗米芬 治疗前进行DEXA扫描以确定基线测量结果并且在6个月的每天施用反式克罗米芬之后进行 DEXA扫描。在整个6个月的时间段期间，15名受试者中有四名接受12.5mg反式克罗米芬，每 天施用一次。15名受试者中有十一名从12.5毫克/天的剂量开始，但是随后向上滴定到25毫 克/天。还在25名安慰剂(对照)受试者中，在相同的时间点评估全髋BMD。将接受治疗的受试 者和对照受试者这两者在6个月时间点时的BMD测量结果与基线测量结果相比较。结果呈现 于图3中。在6个月的时间段期间接受反式克罗米芬治疗的受试者中观测到髋部BMD提高了 约1.23%，从而确认反式克罗米芬提高BMD的能力。另一方面，对照(安慰剂)受试者在相同 的时间段内表现出BMD降低0.59%。 讨论
[0090] 总之，这些结果表明反式克罗米芬显著降低骨再吸收生物标志物和骨形成生物标 志物的血清水平并且这种骨形成减少是通过与睾酮的机制显然不同的机制而发生的，并且 这种对骨转换的抑制与骨矿物质密度升高有关，从而表明反式克罗米芬和它的类似物可用 于治疗多种骨病症。 实施例2 使用反式克罗米芬或其类似物或盐抑制骨再吸收
[0091] 可以在具有足以实现所需结果的持续时间的治疗时间段内，向需要或期望减少骨 再吸收(例如以提高骨矿物质密度、减小骨折的可能性和/或预防或治疗一种或多种骨相关 病症)的受试者施用有效量的反式克罗米芬(或其盐或类似物）。在这种情况下，将在开始治 疗前评估一种或多种骨再吸收生物标志物，然后在治疗过程期间对所述生物标志物进行监 测。通过非限制性实施例的方式，每天或每隔一天向有患骨相关病症风险或被诊断患有骨 相关病症的受试者施用5mg至IOOmg的反式克罗米芬，持续至少三个月，优选地至少六个月 的治疗时间段。可根据所述方法使用的优选的骨再吸收生物标志物是CTX。可根据所述方法 使用的其它骨再吸收生物标志物包括但不限于1型胶原N末端端肽（NTX)、脱氧吡啶啉 (DPD)、吡啶啉、尿羟脯氨酸、半乳糖基羟赖氨酸、以及抗酒石酸酸性磷酸酶，尽管应当了解 的是，可以使用任何公认的骨再吸收生物标志物来评估骨再吸收。 实施例3 使用反式克罗米芬或其类似物或盐抑制骨转换
[0092] 可以在具有足以实现所需结果的持续时间的治疗时间段内，向需要或期望减少骨 转换(例如以提高骨矿物质密度、减小骨折的可能性和/或预防或治疗一种或多种骨相关病 症)的受试者施用有效量的反式克罗米芬(或其盐或类似物）。在这种情况下，将在开始治疗 前评估一种或多种骨再吸收生物标志物和一种或多种骨形成生物标志物，然后在治疗过程 期间对所述生物标志物进行监测。通过非限制性实施例的方式，每天或每隔一天向有患骨 相关病症风险或被诊断患有骨相关病症的受试者施用5mg至IOOmg的反式克罗米芬，持续至 少三个月，优选地至少六个月的治疗时间段。可根据所述方法使用的优选的骨再吸收生物 标志物包括但不限于(7^、1?^、0?0、吡啶啉、尿羟脯氨酸、半乳糖基羟赖氨酸、以及抗酒石酸 酸性磷酸酶。可根据所述方法使用的优选的骨形成生物标志物包括但不限于P1NP、骨特异 性碱性磷酸酶(BSAP)以及骨钙素(OstCa)。然而，应当了解的是，可以使用任何公认的骨再 吸收生物标志物和骨形成生物标志物来评估骨转换。
【主权项】
1. 一种用于抑制有需要的人类受试者的骨再吸收的方法，所述方法包括向所述受试者 施用组合物，所述组合物包含约5mg至约lOOmg的量的反式克罗米芬或其类似物或药学上可 接受的盐，所述组合物基本上不含顺式克罗米芬，其中所述量有效降低所述受试者的一种 或多种骨再吸收血清生物标志物的水平。2. 如权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种骨再吸收血清生物标志物包括I型胶 原C末端交联端肽(CTX)。3. 如权利要求1或2所述的方法，其中所述反式克罗米芬或其类似物或盐的量有效地使 所述受试者的所述CTX的血清水平降低至少约5 %、至少约10 %、至少约15 %、或至少约 20%〇4. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述有需要的受试者是患有骨相关病 症，优选地骨质疏松症或骨质减少的人类男性。5. -种用于抑制有需要的人类受试者的骨转换的方法，所述方法包括向所述受试者施 用组合物，所述组合物包含约5mg至约lOOmg的量的反式克罗米芬或其类似物或药学上可接 受的盐，所述组合物基本上不含顺式克罗米芬，其中所述量在所述受试者中（i)有效降低一 种或多种骨再吸收血清生物标志物的水平；以及(ii)有效降低一种或多种骨形成血清生物 标志物的水平。6. 如权利要求5所述的方法，其中所述一种或多种骨再吸收血清生物标志物包括CTX。7. 如权利要求5或6所述的方法，其中所述一种或多种骨形成血清生物标志物包括1型 前胶原N末端延长肽(P1NP)。8. 如权利要求5至7中任一项所述的方法，其中所述反式克罗米芬或其类似物或盐的量 有效地使所述受试者的所述CTX的血清水平降低至少约5%、至少约10%、至少约15%、或至 少约20 %和/或有效地使所述P1NP的血清水平降低至少约10 %、至少约15 %、至少约20 %、 至少约25 %或至少约30 %。9. 一种用于提高有需要的人类受试者的骨矿物质密度(BMD)的方法，所述方法包括向 所述受试者施用组合物，所述组合物包含约5mg至约lOOmg的量的反式克罗米芬或其类似物 或药学上可接受的盐，所述组合物基本上不含顺式克罗米芬，其中所述量有效地将所述受 试者的髋部中的BMD提高至少1 %。10. 如权利要求9所述的方法，其中所述量有效地将所述受试者的髋部中的BMD提高至 少1.2%〇11. 如权利要求9或10所述的方法，其中所述量有效地使所述受试者的CTX的血清水平 降低至少约5 %、至少约10 %、至少约15 %、或至少约20 %和/或有效地使P1NP的血清水平降 低至少约10%、至少约15%、至少约20%、至少约25%或至少约30%。12. 如权利要求9至11中任一项所述的方法，其中所述有需要的受试者是患有骨相关病 症，优选地骨质减少或骨质疏松症的人类男性。13. -种用于治疗人类受试者的骨相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用 组合物，所述组合物包含约5mg至约lOOmg的量的反式克罗米芬或其类似物或药学上可接受 的盐，所述组合物基本上不含顺式克罗米芬，其中所述量有效地使所述受试者的一种或多 种骨再吸收血清生物标志物的水平降低至少约5 %、至少约10 %、至少约15 %或至少约20 % 和/或将所述受试者的BMD提高至少约1 %。14. 如权利要求13所述的方法，其中所述一种或多种骨再吸收血清生物标志物包括 CTXo15. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述组合物包含5mg至20mg的反式克罗 米芬。16. 如权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述组合物包含12.5mg至25mg的反式 克罗米芬。17. 如权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述组合物包含12.5mg至50mg的反式 克罗米芬。18. 如权利要求17所述的方法，其中所述组合物包含25mg至50mg的反式克罗米芬。19. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中每天施用所述组合物一次。20. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中将所述组合物施用至少六周、至少3个 月、至少6个月或至少一年的时间段。21. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者是人类男性。22.如权利要求21所述的方法，其中所述男性具有低于约400ng/dl或低于约300ng/dl 的睾酮水平。23. 如权利要求22所述的方法，其中所述男性是继发性的性腺功能减退的男性。24. 如权利要求21至23中任一项所述的方法，其中所述人类男性是至少50岁的人类男 性。25. 如权利要求24所述的方法，其中所述人类男性是至少60岁的人类男性。26. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述组合物包含选自由以下各项组成 的组的反式克罗米芬的类似物：（E)-4-0H-克罗米芬和(E)-4-0H-N-脱乙基克罗米芬或其药 学上可接受的盐。27. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述组合物包含反式克罗米芬或其药 学上可接受的盐并且包含〇%w/w的顺式克罗米芬。28. 如权利要求23所述的方法，其中所述组合物包含反式克罗米芬柠檬酸盐。
【专利摘要】本发明涉及施用包含反式克罗米芬或其类似物或盐的组合物以抑制受试者的骨再吸收和骨转换。本发明还涉及用于提高受试者的骨矿物质密度以及预防或治疗受试者的骨相关病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的反式克罗米芬或其类似物或盐。
【IPC分类】A61P19/10
【公开号】CN105473183
【申请号】CN201480032162
【发明人】J.S.波多尔斯基, K.苏, R.D.维尔, G.丰特诺, J.汤普森
【申请人】利普生物药剂公司
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2014年6月3日
【公告号】CA2914503A1, EP3003487A1, US20160128953, WO2014197477A1