9.0)，H-8，（2.35，m)，H-9，（3.71，t，J = 8.5)，护9'（3.51，1，1 = 8.5)，3-0邸3(3.84,3)，3'-0邸3(3.83,3)，9-0邸3(3.19,3);核磁共 振碳谱数据SC(ppm，DMS0-d6,125Hz) :132.0(C，1-C)，112.4(CH，2-C)，147.4(C，3-C) ,144.7 (C，4-C)，114.8(CH，5-C)，121.3(CH，6-C)，39.2(CH2,7-C)，50.3(CH，8-C)，109.5(CH，9-C)， 135.5(C，r-C)，109.9(CH，2，-C)，147.7(C，3，-C)，145.9(C，4，-C)，114.7(CH，5，-C)，119.1 (CH，6'-C)，75.8(CH，7'-C)，51.6(CH，8'-C)，68.5(CH2,9'-C)，55.2(CH3,3-0CH3),55.1 (C册，3 ' -OC册），53.5(C册，9-0CH3);碳原子标记参见图I。IH-NMR谱显示该化合物存在两个 1，3,4-^取代芳香环[如6.77(1山(1^ = 2.0化，护2)，6.71(1山(1^ = 7.5化，护5)和6.62 (lH，dd，J = 7.5，2.0Hz，H-6) W 及 6.87( lH，d，J= 1.5Hz，H-2'），6.75( lH，d，J = 8. OHz, H-5'），和6.74(1山(1(1，1 = 8.0，1.5化，护6'）]，一个次甲基[姐4.67(1山(1，1=1.0化，护9)]， 一个含氧次甲基[如4.52(lH，d，J = 9.0Hz，H-7'）]，S个甲氧基[如 3.84(3H，s，3-0CH3)， 3.83(3山8,3'-0邸3)，和3.19(3山8,9-0邸3)]，一个甲醒基[姐3.71(1山1，1 = 8.5化，护9' a)和 3.5laH，t，J = 8.5Hz，H-9'b)]，一个亚甲基[姐2.75aH，dd，J=13.0,4.5Hz，H-7a)和 2.48(1山111，护76)]，和两个次甲基[化2.56(1山111，护8)和2.35(1山111，护8'）]。13(：-醒財普显 示有21个碳信号，其中包括两个芳环的12个芳香碳，一个次甲基[SC109.5(C-9)]，一个含氧 次甲基[SC75.8(C-7'）]，一个甲醒[SC68.5(C-9'）]，S 个甲氧基[SC55.2(3-0CH3)，55.1 (3'-0邸3)和53.5(9-0邸3)]，二个次甲基[5051.6((：-8'）和50.3((：-8)]，^及一个亚甲基[5 C39.2(C-7)]。通过1H-1H 〇)5￥，歷9(：和歷8村普确认该化合物的平面结构。护8与护9(1.0化） 的禪合常数表明，H-8和H-9构型相反;NOESY谱中H-7与H-9和H-8'W及H-8与H-7'的相关性 证实了 C-8，C-9，C-7 '和C-8 '的相对构型。具体地，该化合物结构如图1所示。
[0035] 上述汉黄琴素的结构式（n)如下：
[0037]药学上可接受的载体按照重量百分数计，由W下组分组成：维生素C 1 %、丹参粉 15%、=屯粉10%、淀粉71 %和甜味剂3%;该药学上可接受的载体总量总计为100%;甜味 剂由薦糖和k阿拉伯糖组成，该甜味剂中薦糖与心阿拉伯糖的重量比例为20:3。
[0038]实施例2:木脂素类化合物(I)和它联合汉黄琴素用药的药理作用试验 [0039] -、材料和仪器
[0040]人胃癌细胞株SGC-7901，购于赛尔试剂公司；木脂素类化合物（I)自制，归一化纯 度大于98%;CTX(环憐酷胺，阳性药）、膜蛋白酶、MTT、二甲基亚讽(DMS0)、琼脂糖、冰醋酸购 于美国S (I) gma公司;RPM( I) -1640培养基、PBS憐酸盐缓冲溶液购于美国G (I) BCO公司；胎牛 血清购于山东银香伟业;台吩蓝购自北京中杉金桥生物有限公司;TU肥L试剂盒购自凯基生 物科技发展有限公司；甲醒购自美国F(I)Sher公司；过氧化氨酶购自天津市天新精细化工 中屯、。
[0041 ] WD-9403C紫外分析仪购自德国B(I)Ometra公司；服（1)-1002型二氧化碳培养箱购 自日本（I)kemoto公司；超净工作台购自苏州净化实验设备有限公司；超速离屯、机购自北京 医疗器械厂；低速离屯、机购自北京医疗器械厂；W(I)Iovert S型倒置显微镜购自日本 Olympus公司；压力蒸汽灭菌器购自上海博讯实业有限公司；恒溫金属水浴箱购自杭州奥盛 仪器有限公司；细胞计数板购自上海精密仪器公司；超纯水器购自英国PURELAB ULTRA GEWT(I)Cc
[0042] 二、试验方法
[0043] 1、胃癌细胞SGC-7901的培养
[0044] 1.1细胞复苏
[0045] (1)从液氮罐中取出细胞冻存管，迅速置于37°C-42°C，75%酒精中，然后移至同溫 水浴锅中；（2)轻轻晃动l-3m(I)n冻存管，使冻存液融化，迅速移至超净台中；（3)将含有细 胞的冻存液吸入无菌离屯、管，加入适量RPQ )M-1640培养基；（4)吹打混匀后放入低速离屯、 机，800巧m/m(I)n离屯、3分钟，去除上清液；（5)加入适量培养基吹匀，将细胞悬液依据浓度 接种到IOmL培养皿中；（6)置于含5%二氧化碳、37°C饱和湿度的培养箱中培养。
[0046] 1.2细胞传代
[0047] (1)待培养皿中的细胞贴壁约80 %时，在超净台中用移液管吸取旧的培养基吹打 数次培养皿中细胞，W吹掉死亡细胞；（2)用移液管吸去旧培养基，加入适量0.25 %膜酶消 化细胞，置于30°C培养箱中消化；（3)约3m(I)n后将培养皿置于倒置显微镜下观察，待细胞 周边发亮、回缩变圆后则说明细胞已经从壁上脱离；（4)迅速于超净台中吸去膜酶。加入适 量培养基反复吹打细胞，使细胞完全脱离培养皿；（5)将细胞悬液按浓度分别接种至不同的 培养皿中，补足培养基；（6)重新置于含5%C02、37°C饱和湿度的培养箱中培养。
[004引 2、细胞计数
[0049] (1)准备好细胞计数板及盖玻片，二者均用酒精擦拭干净，将盖玻片盖在计数板 上；（2)待酒精挥发后，吸出适量细胞悬液，滴加在盖玻片边缘，使悬液充满盖玻片和计数板 之间，注意不要溢出盖玻片及两侧的玻璃槽，静置后计数；（3)在显微镜下找到4个大格，每 个大格又分为16个小格，分别计数4个大格中的细胞数，取平均值。压线细胞计左侧和上方 的，不计右侧和下方的；（4)细胞浓度(个/mL)=每个方格的平均细胞数X 10000; (5)将细胞 悬液稀释成实验所需浓度。
[0050] 3、细胞活力测定
[0051 ] (1)取待测定的SGC-7901胃癌细胞悬液0.9mL (2)向细胞悬液中加入台吩蓝吹打 混匀；（3)采用细胞计数板盲法计数至少200个细胞，倒置显微镜下观察；（4)镜下观察细胞 染色情况，细胞内染成淡蓝色者为死细胞，未染色者为活细胞，W活细胞所占细胞总数的百 分比反映细胞的活力（％)。
[0化2] 4、MTT检测细胞生长抑制率
[0053] 实验分组：①阴性对照组；②木脂素类化合物（I)组1，木脂素类化合物（I) (50y mo 1 /L);③木脂素类化合物（I)组2，木脂素类化合物（I) (100皿01 /L);④CTX组1，CTX(50y mo 1 /L);⑤CTX组2，CTX (100皿01 /L);⑥联合用药组1，木脂素类化合物（I)(25皿01 /L) +CTX (25皿ol/L);⑦联合用药组2,木脂素类化合物（IK50皿〇1/L)+CTX(50皿ol/L);⑧木脂素类 化合物（1)(25皿〇1/1)+汉黄琴素（11)(25皿〇1/1)。
[0054] (1)取对数生长期的SGC-7901细胞，用细胞计数板计数，调节细胞浓度为5 X 105/ (2)使用加样器W每孔I(K)化接种于96孔板。注意接种时只接种到中间的60个孔，周边36 孔WPBS填充，同时铺3个96孔板；（3)将铺好的96孔板置于37°C，5 % C02细胞培养箱中，待 24h细胞贴壁后取出；（4)将96孔板分为木脂素类化合物（I)组，（0、50、100皿ol/L)，CTX组 (0、50、100皿ol/L)，2药联合组(0/0、25/25、50/50皿ol/L)，同时设立不含细胞的空白对照 组（只加培养基)分别予W不同处理；（5)各药物每个浓度设5个复孔，分别培养24、48及72h; (6)分别在特定的结束时间点取出96孔板，每孔加入MTT (5g/L)溶液20化，放回培养箱继续 培养地，终止培养。（7)小屯、吸去孔内上清液，每孔加入15化L DMSO，平板摇床振荡10m( I )n 使结晶充分溶解，显微镜下观察颗粒消失。（8)于酶标仪490nm波长处测定各孔的光密度 (OD)值，计算各时间点的细胞生长抑制率。抑制率=[1 -(加药组OD值-空白对照组OD值)/ (阴性对照组OD值-空白对照组OD值）]X 100%。
[0055] 5、TU肥L法检测细胞调亡指数
[0化6] 5.1细胞爬片的制备
[0057] (1)盖玻