专利名称：含氮氧自由基鬼桕毒素衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于制备抗肿瘤药物的化合物。
背景技术：
70年代发现的天然产物鬼桕毒素的半合成糖甙衍生物Etoposide(VP-16)，其已成为目前临床上使用的最重要抗肿瘤药物之一，但其毒性较大，特别对骨髓有抑制作用，使临床应用受到限制。
发明内容本发明所要解决的技术问题和提出的技术任务是提供一种具有药用价值、使其抗肿瘤活性比VP-16有较大的提高且毒性比VP-16显著降低的鬼桕毒素衍生物。
本发明的技术方案是提供一种抗肿瘤药物的化合物，其化学名称为4β-((2，2，5，5-四甲基-1-氧基-3-吡咯啉基)羰基氨基)-4’-O-去甲基-4-脱氧鬼桕毒素，分子式为C30H33N2O9，熔点为186-188℃，结构式如下所示 其元素分析数据为计算值(％)C63.15，H5.65，N4.76，实测值(％)C63.72，H5.84，N4.96；MS(FAB)m/z％(质谱)565(M+，27)，550(M+15，32)，383(80)，229(20)，185(26)，154(100)；IR(KBr，cm-1)(红外吸收光谱)3318-3450(NH，OH)，1770(γ-内酯C＝O)，1611，1504，1482(苯环C＝C)，1372(N-O)，1230，1128(C-O-C)，930(OCH2O)；ESR(顺磁共振)，固态g＝2.0058，ΔH＝2.39×10-3(T)(单峰)，EtOH溶液，go＝2.0061，ΔHO＝2.17×10-3T(三重峰)，AN＝1.53×10-3T。
本发明所说的上述结构式化合物，可以由简单化工原料鬼桕毒素经溴代、水解、迭代、氢化等反应后与自由基酸进行中和反应制备得到。
本发明所述结构式的化合物可以采用按下述路线进行的具体实施例制备得到，其制备所采用的化学反应为常规反应。但下列所示的路线并非是在制备本发明所述化合物时可被采用的唯一路线。 利用本发明制备的化合物在体内与DNA拓扑异构酶II结合，抑制细胞生长，能在体内进行在线的代谢检测，使抗肿瘤活性比VP-16提高4倍，而且毒性比VP-16降低2倍，使其成为临床上抗肿瘤用药。
具体实施方式
4β-〔(2，2，5，5-四甲基-1-氧基-3-吡咯啉基)羰基氨基〕-4’-O-去甲基-4-脱氧鬼桕毒素的制备(1)4β-溴代-4-脱氧-4’-去甲基鬼桕毒素(I)的合成在150ml圆底烧瓶中，将11g(0.027mol)鬼桕毒素悬浮于100ml1，2-二氯乙烷和10ml无水乙醚中，用冰盐浴冷却至-16℃以下，通入干燥的溴化氢气体，至反应液增重28g，此时吸收溴化氢已达饱和。密封好瓶塞后，于0-10℃下放置过夜。室温下用氮气驱除过量的溴化氢，在水浴上将溶剂减压蒸发至干，残余物在10℃以下用20-50ml丙酮浸泡过夜，过滤收集白色沉淀产物，并用少量的丙酮洗涤，室温下真空干燥，得产物(I)4.85g，得率44％，真空保存。
m.p.(熔点)184-186℃(文献值185-186℃)。元素分析C21H19BrO7，计算值(％)C54.43，H4.10，实测值(％)C54.50，H4.05；IR(KBr，cm-1)3385(OH)，1758(γ-内酯环C＝O)，1608，1502，1482(芳环C＝C)，1236，1120(C-O-C)，934(OCH2O)。
(2)4-脱氧-4’-去甲基表鬼桕毒素(II)的合成在150ml圆底烧瓶中加入5g(0.011mol)的4β-溴代-4-脱氧-4’-去甲基鬼桕毒素，2.2g(0.016mol)碳酸钡，40ml水、40ml丙酮，回馏1小时，过滤除去钡盐，将滤液减压蒸干，粗产物用甲醇和丙酮(1∶1)重结晶，得白色晶体产物(II)3.6g，产率81.8％。
m.p.228-230℃(文献值228-230℃)。元素分析C21H20O8，计算值(％)C63.00，H5.00；实测值(％)C63.09，H4.87；MS(FAB)m/z(％)400(M+，78)，382(100)，298(10)，283(17)。
(3)4β-迭氮-4-脱氧-4’一去甲基表鬼桕毒素(III)的合成在圆底烧瓶中加入5g(0.0125mol)4-脱氧-4’-去甲基表鬼桕毒素，用100ml二氯甲烷溶解，加入1ml(0.0145mol)的迭氮酸的苯溶液，冰盐浴冷却至-15℃，搅拌下滴加含有2.5ml三氟化硼的乙醚溶液和2.5ml二氯甲烷的混合溶液，保持反应温度不超过-15℃。滴加完毕后，在-15℃以下搅拌反应1小时，用TLC(薄板层析)检查反应完全。加入2ml吡啶分解未反应完全的三氟化硼，有沉淀生成。加40ml水搅拌使沉淀溶解，分出有机层，用5％的盐酸溶液10ml和水(20ml×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂。用约20ml的丙酮-甲醇(1∶1)重结晶，得白色结晶(III)4.2g，产率84％。
m.p.213-215℃，MS(FAB)m/z(％)425(M+，34)，383(M-42(N3)，85)，307(42)，154(100)；1HNMR(CDCl3，TMS)δ(ppm)6.28(s，1H，5-H)，4.32(d，J＝4Hz，1H，4-H)，3.78(s，6H，3’5’-OCH3)，3.17-2.93(m，2H，2，3-H)；IR(KBr，cm-1)3435(ArOH)，2096(-N3)，1762(内酯C＝O)，1610，1520，1480(芳环C＝C)，1229，1208(C-O-C)，934(OCH2O)。
(4)4β-氨基-4-脱氧-4’-去甲基鬼桕毒素(IV)的合成将5g(11mmol)4β-迭氮-4-脱氧-4’-去甲基鬼桕毒素和100ml干燥的乙酸乙酯和1.2g10％钯/碳催化剂加入到250ml的高压釜中，在40℃下，0.38-0.4MPa的氢气压力下搅拌反应36小时，定期换气多次，以驱赶反应生成的氨气(使润湿的PH试纸变蓝)。过滤回收催化剂(可反复使用)。将滤液减压除去溶剂后，粗产物用氯仿重结晶，得白色晶体(IV)3.3g，产率66％。
m.p.229-230℃(文献值229-230℃)。MS(FAB)m/z(％)399(M+，100)，382(M-17(NH2)，85)，354(28)，324(23)，245(21)，154(32)；1HNMR(CDCl3，TMS)，δ(ppm)6.81(s，1H，5-H)，6.49(s，1H，8-H)，6.30(s，2H，2’，6’-H)，5.96(d，2H，OCH2O)，4.55(d，J＝5.2Hz，1H，1-H)，4.28(d，2H，11H)，4.20(d，J＝4Hz，1H，4-H)，3.77(s，6H，3’5’-OCH3)，3.28-2.85(m，2H，2，3-H)。
(5)4β-[(2，2，5，5-四甲基-1-氧基-3-吡咯啉基)羰基氨基]-4’-O-去甲基-4-脱氧鬼桕毒素(V)的合成将0.42g(1mmol)4β-氨基-4-脱氧鬼桕毒素溶入10ml1，2一二氯甲烷中，加入0.22g(1mmol)二环已基碳二亚胺(DCC)使之溶解，然后在上述溶液中加入1mmol的化合物自由基酸，室温下搅拌，有白色的沉淀产生，放置过夜。TLC检测反应达终点。滴加2滴冰乙酸分解未反应的DCC，滤去沉淀，滤液用1，2一二氯乙烷稀释至50ml，依次用饱和碳酸氢钠溶液，5％的盐酸溶液和水各洗涤一次，用无水硫酸镁干燥，减压蒸去溶剂，硅胶G层析柱层析分离产物，得黄色固体产物(V)。
熔点186-188℃。元素分析C30H33N2O9，C63.15(63.72)，H5.65(5.84)，N4.76(4.96)；MS(FAB)m/z％565(M+，27)，550(M+15，32)，383(80)，229(20)，185(26)，154(100)；IR(KBr，cm-1)3318-3450(NH，OH)，1770(γ-内酯 C＝O)，1611，1504，1482(苯环C＝C)，1372(N-O)，1230，1128(C-O-C)，930(OCH2O)；ESR(顺磁共振)，固态g＝2.0058，ΔH＝2.39×10-3(T)(单峰)，EtOH溶液，go＝2.0061，ΔHO＝2.17×10-3T(三重峰)，AN＝1.53×10-3T。
权利要求
1.一种含氮氧自由基鬼桕毒素衍生物，其化学结构式为 化学名称为4β-〔(2，2，5，5-四甲基-1-氧基-3-吡咯啉基)羰基氨基〕-4’-O-去甲基-4-脱氧鬼桕毒素，分子式为C30H33N2O9，熔点为186-188℃。
2.根据权利要求1所述的含氮氧自由基鬼桕毒素衍生物，其特征在于其元素分析数据为计算值(％)C63.15，H5.65，N4.76，实测值(％)C63.72，H5.84，N4.96；MS(FAB)m/z％(质谱)565(M+，27)，550(M+15，32)，383(80)，229(20)，185(26)，154(100)。
3.根据权利要求1所述的含氮氧自由基鬼桕毒素衍生物，其特征在于其IR(KBr，cm-1)(红外吸收光谱)3318-3450(NH，OH)，1770(γ-内酯C＝O)，1611，1504，1482(苯环C＝C)，1372(N-O)，1230，1128(C-O-C)，930(OCH2O)；ESR(顺磁共振)，固态g＝2.0058，ΔH＝2.39×10-3(T)(单峰)，EtOH溶液，go＝2.0061，ΔHO＝2.17×10-3T(三重峰)，AN＝1.53×10-3T。
全文摘要
本发明涉及一种用于制备抗肿瘤药物的含氮氧自由基鬼桕毒素衍生物，其化学名称为4β－〔(2，2，5，5－四甲基－1－氧基－3－吡咯啉基)羰基氨基〕－4’－O－去甲基－4－脱氧鬼桕毒素，分子式为C
文档编号C07D491/00GK1410425SQ0113600
公开日2003年4月16日 申请日期2001年9月28日 优先权日2001年9月28日
发明者陈绍明 申请人:陈绍明