一种离子型磷光铱配合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于有机光电功能材料技术领域，具体设及一种含氮氧自由基的憐光银配 合物材料及其制备方法和应用。 技术背景
[0002] 维生素C，又称抗坏血酸（AA)，是一种具有抗氧化作用的有机酸，也是生命所必需 的一种水溶性营养物，它作用于多项人体机能。在人的生理环境中，抗坏血酸不仅作为一种 辅酶因子，也是与神经递质相关酶的一种重要的组成成分，并且在维持正常细胞的生长W 及调控胆固醇和甘油=醋的合成等生理活动中发挥重要作用。缺乏维生素C将导致坏血病 或引发中风等屯、血管疾病，但是研究表明过量摄入维生素C也会导致腹泻、胃酸过多症和 肾脏结石。
[0003] 目前检测抗坏血酸的方法众多，液相色谱法、分光光度法、ESR光谱法W及电化学 的方法，但是W上的方法各自存在一些不足之处，比如液相色谱法的操作步骤复杂且时间 较长，分光光度法因其检测中影响因素较多导致准确性差，ESR光谱法则存在成本较高，数 据处理难度大的问题，电化学的方法也因与抗坏血酸氧化还原电位类似的尿酸等物质干扰 大，W致检测的灵敏性较差。
[0004] 目前实现抗坏血酸检测的探针多为巧光染料，然而，运些有机分子由于光稳定性 差，背景巧光干扰大，细胞毒性大等缺点限制了其在生物成像领域的应用。相比于巧光检测 信号，憐光银配合物除了能应用其自旋一轨道禪合提高电致发光的量子效率外，其相对较 长的憐光寿命使之成为一种非常理想的生物巧光成像标记染料。由于不同于有机分子，憐 光过渡金属银配合物具有W下几大特点：具有较大的Stokes位移和较长的发射寿命，长的 发射寿命有利于使用时间分辨技术使憐光信号与背景的巧光信号区分开，具有优越的光稳 定性便于长时间观测。 阳0化]由此可见，找到一种稳定性更好、细胞毒性更低的可用于生物体检测的长寿命抗 坏血酸检测探针是本领域亟待解决的问题。
【发明内容】
[0006] 1、技术问题
[0007] 为了克服现存技术中，巧光探针光稳定性差、细胞毒性大等问题，本发明提供了一 类可用于检测抗坏血酸的憐光发射的银配合物。
[0008] 本发明的另一目的在于给出所述憐光发射银配合物的制备方法。
[0009] 本发明的再一目的在于提出所述憐光发射银配合物在抗坏血酸检测、生物标记与 细胞成像领域中的应用。
[0010] 2、技术方案
[0011] 本发明提供了一种离子型憐光银配合物，所述银配合物的辅助配体上含有氮氧自 由基，该银配合物具有如下结构通式：
[0012] 阳013] 其中，C~N配体为下列结构中的一个：
[0014]
- ?
[0015] 本发明还提供了一种所述离子型憐光银配合物的制备方法，该制备方法包括W下 步骤：
[0016] (1)4,4'-二甲基-2,2'-联化晚经过氧化、甲氧基化、醋的还原、氨漠酸取代四步 反应得到N~N辅助配体；
[0017] 似将所述步骤1得到的辅助配体与银二氯桥（(C~N)2lr(ii-Cl)2lr((rN)2)通过 配位反应制备得到配合物中间体，其中C~N为所述C~N配体中的一种； 阳01引 做将所述步骤2得到的配合物中间体与4-氨基-2, 2, 6, 6-四甲基赃晚氮氧自由 基W及碳酸钟粉末溶解于N-甲基化咯烧酬溶液中反应，得到目标银配合物。
[0019] 本发明还提供了一种所述离子型憐光银配合物在抗坏血酸检测上的应用。
[0020] 所述离子型憐光银配合物还可用于细胞成像和时间分辨技术上。
[0021] 3、有益效果
[0022] 本发明合成的材料用作抗坏血酸检测憐光探针，在抗坏血酸存在下憐光发射增 强，为化rn-on型憐光探针，检测效果显著。
[0023] 本探针材料具有低生物毒性，且容易进入细胞胞浆中，长的憐光发射寿命可使用 时间分辨技术与背景巧光信号相区分W降低信噪比，使得运类探针可通过寿命成像和时间 口技术成像实现细胞内抗坏血酸检测，提高检测精度。
【附图说明】
[0024]图1为实施例2中配合物Ir-2 [Ir(卵y)2-bpy-NO]+PFe的MLDI-TOF谱图；
[00巧]图2为实施例3中憐光探针Ir-2在PBS缓冲溶液中的憐光发射光谱对抗坏血酸(Vc)的响应性； 阳0%] 图3为实施例3中憐光探针Ir-2在PBS缓冲溶液中的憐光发射强度与初始强度 比与不同当量抗坏血酸（Vc)的线性拟合曲线；
[0027] 图4为实施例4中憐光探针Ir-2在PBS缓冲溶液中的寿命对抗坏血酸的响应性。
[002引图5为实施例5中憐光探针Ir-2应用于活细胞抗坏血酸检测的共聚焦成像照片。
【具体实施方式】
[0029] 为了更好地理解本发明专利的内容，下面通过具体的实例来进一步说明本发明的 技术方案。但运些实施实例并不限制本发明。
[0030] 实施例1:配合物Ir-I [Ir(卵y)2-bpy-Br]中Fe的合成
阳0巧 （1)4, 4' -二漠甲基-2,2' -联化晚的合成 阳03引 I)氧化：取4,4'-二甲基-2,2'-联化晚5g加入带揽拌子的250血单口瓶，加入 80血浓HzSO這于水浴条件下剧烈揽拌，缓慢（保证溫度不会剧烈上升）加入17gKzCrzO,， 然后将其置于65°C揽拌化，冷却至室溫，加水抽滤，干燥得白色粉末。II)甲氧基化：取I 所得产物2g与IOmLH2S〇4，100mLCH3OH加入带揽拌子的单口瓶中，105°C回流过夜，反应结 束加至大量水中出现白色絮状沉淀，加入化OH溶液调抑约9.0,用CH2CI2萃取保留有机相， 无水Na2S〇4干燥，旋尽溶剂得到白色晶体，产率88%。III)醋的还原：取II所得产物630mg 与NaBHJg加入带揽拌子的250血单口瓶中，加入80血重蒸的乙醇溶液，80°C回流化，反应 结束加入20mL饱和畑典1溶液，旋除乙醇，用乙酸乙醋与水进行萃取，保留乙酸乙醋层，加 无水Na2S〇4干燥，旋除溶剂，真空干燥得到白色粉末。IV)氨漠酸取代：取III中所得中间产 物lOOmg，6血48 %皿r溶液加至带揽拌子的单口瓶，缓慢加入9血浓H2SO4,原料溶解，置于 l〇〇°C油浴揽拌锅中回流化，反应结束，加入少量水，边揽拌边加KOH调抑至7.