苯并咪唑酮羧酸衍生物的制作方法

专利名称：苯并咪唑酮羧酸衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及苯并咪唑酮羧酸衍生物。这些化合物具有选择性5-HT4受体激动活性。本发明还涉及包含上述衍生物的药物组合物、用于治疗由5-HT4受体活性，尤其是5-HT4受体激动活性介导的疾病的治疗方法和用途。
背景技术：
总的说来，已发现5-HT4受体激动剂可用于治疗多种多样的疾病，如胃食管反流病疾病、胃肠疾病、胃动力障碍、非溃疡性消化不良、功能性消化不良、肠易激综合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、恶心、中枢神经系统疾病、阿尔兹海默氏病、认知障碍、呕吐、偏头痛、神经学疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病及呼吸暂停综合征(见TiPs，1992，13，141；Ford A.P.D.W.等人，Med.Res.Rev.，1993，13，633；Gullikson G.W.等人，Drug Dev.Res.，1992，26，405；Richard M.Eglen等人，TiPS，1995，16，391；Bockaert J.等人，CNS Drugs，1，6；Romanelli M.N.等人，ArzheimForsch./Drug Res.，1993，43，913；Kaumann A.等人，Naunyn-Schmiedeberg′s.1991，344，150；以及Romanelli M.N.等人，Arzheim Forsch./Drug Res.，1993，43，913)。
WO 94/00449公开了作为5-HT4激动剂或拮抗剂及/或5-HT3拮抗剂的苯并咪唑酮化合物。尤其，公开了以下式表示的化合物作为实例10
化合物A目前需要提供为良好药物候选物的新颖5-HT4激动剂。尤其是，优选的化合物应与5-HT4受体强效结合，同时对其他受体几乎不显示亲和性，并且显示作为激动剂的功能性活性。它们应从胃肠道充分的吸收、在代谢上稳定且具有有利的药物动力学性质。当靶向中枢神经系统的受体时，则它们应可自由地穿过血脑屏障，并且当选择性地靶向外周神经系统中的受体时，则它们不应穿过血脑屏障。它们应无毒且证明几乎没有副作用。再者，理想的药物候选物应以稳定、非-吸水性及容易配制的物理形式存在。

发明内容
在本发明中，已发现(1)以哌啶/吡咯烷环置换喹宁环提高了对5-HT4受体的亲和性，和/或(2)导入羧基部分降低了对多非利特的亲和性，使得防止QT延长。
因此，现在令人意外地发现，本发明化合物相比较于现有技术，具有更强的选择性5-HT4激动活性和/或提高的多非利特亲和性，并且因此可用于治疗由5-HT4活性介导的疾病状况，如胃食管反流病、胃肠疾病、胃动力障碍、非溃疡性消化不良、功能性消化不良、肠易激综合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、恶心、中枢神经系统疾病、阿尔兹海默氏病、认知障碍、呕吐、偏头痛、神经学疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病及呼吸暂停综合征(尤其是因阿片类物质给药引起)。
本发明提供下式(I)的化合物
或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中A为具有1至4个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至4个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3-、4-、5-或6-元环；R1为异丙基或环戊基；R2为氢原子、卤素原子或羟基；R3为羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且m为整数1或2。
本发明的一个实施方案提供如上所述的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中A为具有1至4个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至4个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的6-元环；R1为异丙基或环戊基；R2为氢原子、卤素原子或羟基；R3为羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且
m为整数1或2。
本发明的一个实施方案提供如上所述的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中A为具有1至4个碳原子的亚烷基，该亚烷基被1至4个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的5-元环；R1为异丙基或环戊基；R2为氢原子、卤素原子或羟基；R3为羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且m为整数1或2。
在本发明的一个实施方案提供如上所述的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中A为具有1至4个碳原子的亚烷基，该亚烷基被1至4个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3至4-元环；R1为异丙基或环戊基；R2为氢原子、卤素原子或羟基；R3为羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且m为整数1或2。
而且，本发明提供式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物(各如本文所述)在制造用于治疗由5-HT4受体活性，尤其是5-HT4激动活性介导的疾病状况的药物中的用途。
优选地，本发明亦提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物(各如本文所述)在制造用于治疗选自胃食管反流病、胃肠疾病、胃动力障碍、非溃疡性消化不良、功能性消化不良、肠易激综合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、恶心、中枢神经系统疾病、阿尔兹海默氏病、认知障碍、呕吐、偏头痛、神经学疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病及呼吸暂停综合征的疾病的药物中的用途。
而且，本发明提供药物组合物，它包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物(各如本文所述)，以及用于该化合物的药学上可接受的载体。
再者，本发明提供一种治疗哺乳动物受治疗者中由5-HT4受体活性介导的疾病状况的方法，该方法包括对需要该治疗的哺乳动物给予治疗有效量的各如本文所述的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
由5-HT4受体活性介导的疾病状况的实例包括(但不限于)胃食管反流病、胃肠疾病、胃动力障碍、非溃疡性消化不良、功能性消化不良、肠易激综合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、恶心、中枢神经系统疾病、阿尔兹海默氏病、认知障碍、呕吐、偏头痛、神经学疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病及呼吸暂停综合征。
而且，本发明提供式(XI)的化合物 或其盐，其中R2为氢原子、羟基或卤素原子；R6为氢原子或氨基-保护基；Y为具有1至4个碳原子的烷氧基、具有2至8个碳原子的二烷基氨基、咪唑基、邻苯二甲酰亚氨基、琥珀酰亚氨基或磺酰基；并且m为1或2。
而且，本发明提供式(IXa)的化合物 或其盐，其中A为具有1至4个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至4个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3至6-元环；R2为氢原子、羟基或卤素原子；R3为羟基或羧基-保护基；R6为氢原子或氨基-保护基；并且m为1或2。
本发明的化合物可显示较低的毒性、良好的吸收、分布、良好的溶解性、较低的蛋白质结合亲和性、较低的药物-药物相互作用及良好的代谢稳定性。
具体实施例方式
在本发明的化合物中当A为具有1至4个碳原子的亚烷基时，其可为直链基，并且实例包括(但不限于)亚甲基、亚乙基、三亚甲基及四亚甲基。这些中优选亚甲基及亚乙基，并且最优选者为亚乙基。
当A的取代基为具有1至4个碳原子的烷基时，其可为直链或支链基，并且实例包括(但不限于)甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基及叔丁基。这些中优选者为具有1至3个碳原子的烷基；更优选者为甲基、乙基、丙基及异丙基；并且最优选者为甲基及乙基。
当Y的取代基为具有1至4个碳原子的烷氧基时，此代表被所述烷基取代的氧原子，并且实例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基及叔丁氧基。这些中，优选者为具有1至2个碳原子的烷基；并且更优选者为甲氧基。
当Y的取代基为具有2至8个碳原子的二烷基氨基时，此代表被两个所述烷基取代的氨基，并且实例包括(但不限于)二甲氨基、N-甲基-N-乙基氨基、二乙氨基、二丙氨基、二异丙氨基、二丁氨基、二异丁氨基及N，N-二(1-甲基丙基)氨基。这些中，优选者为具有2至4个碳原子的二烷基氨基；更优选者为二甲氨基、N-甲基-N-乙基氨基及二乙氨基。
当A的取代基为具有1至4个碳原子的羟基-烷基时，其可为直链或支链基，并且实例包括(但不限于)羟甲基、2-羟乙基、1-羟乙基、3-羟丙基、2-羟丙基、2-羟基-1-甲基乙基、4-羟丁基、3-羟丁基、2-羟丁基、3-羟基-2-甲基丙基及3-羟基-1-甲基丙基。这些中，优选者为具有1至3个碳原子的羟基-烷基；更优选者为羟甲基、2-羟乙基及2-羟丙基，并且最优选者为羟甲基及2-羟乙基。
当A的取代基为具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基时，其可为直链或支链基，并且实例包括(但不限于)甲氧基甲基、乙氧基甲基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、1-甲氧基乙基、3-甲氧基丙基、3-乙氧基丙基、2-甲氧基丙基、2-甲氧基-1-甲基乙基、4-甲氧基丁基、4-乙氧基丁基、3-甲氧基丁基、2-甲氧基丁基、3-甲氧基-2-甲基丙基及3-甲氧基-1-甲基丙基。这些中，优选者为具有2至4个碳原子的烷基氧基-烷基；更优选者为甲氧基甲基、2-甲氧基乙基及3-甲氧基丙基；并且最优选者为2-甲氧基乙基及3-甲氧基丙基。
当任意2个非-卤素取代基可与它们所连接的碳原子一起形成任选含有至少一选自N、O及S的杂原子的3、4、5或6-元环时，该环可为环烷基或杂环基，并且实例包含环丙基、环戊基、环丁基、环己基、甲基环丙基、乙基环丙基、甲基环丁基、甲基环戊基、甲基环己基、乙基环己基、羟基环丙基、羟基环丁基、羟基环戊基、羟基环己基、甲氧基环丙基、甲氧基环丁基、甲氧基环戊基、甲氧基环己基、四氢呋喃基及四氢吡喃基，优选为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、甲氧基环己基及四氢吡喃基，并且最优选为环丁基、环戊基、环己基及四氢吡喃基。
当R6为氨基-保护基时，其代表能够被用化学方法如氢解、水解、电解或光解而裂解的保护基，并且该氨基-保护基被描述在由T.W.Greene等人(John Wiley & Sons，1999)编辑的有机合成保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)中，并且实例包括(但不限于)苄基、C2H5O(C＝O)-、CH3(C＝O)-、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、苄基氧基羰基及叔丁氧基羰基。这些基团中，优选者为叔丁氧基羰基。
当R4为羧基-保护基时，其代表能够被用化学方法如氢解、水解、电解或光解而裂解的保护基，并且该羧基-保护基描述在由T.W.Greene等人(John Wiley & Sons，1999)编辑的有机合成保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)中，并且实例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、叔丁氧基、甲氧基甲氧基、2，2，2-三氯乙氧基、苄基氧基、二苯基甲氧基、三甲基硅烷基氧基、叔丁基二甲基硅烷基氧基及烯丙氧基，这些基团中，优选者为叔丁氧基、甲氧基或乙氧基。
当R1及A的取代基代表卤素原子时，这些可为氟、氯、溴或碘原子，这些中，优选者为氟或氯原子。
本文中所用的术语“治疗”是指治愈、减轻及预防性治疗，包括逆转、减轻、预防该术语适用的障碍或疾病状况或者障碍或疾病状况的一种或多种症状，或抑制其进展。
本文中所用的冠词″一″是指所指对象的单数和复数形式二者，除非另有说明。
优选类别的本发明化合物为各如本文所述的式(I)的那些化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中(A)R1为异丙基；
(B)R2为氢原子、氟原子或羟基；(C)R2为氢原子；(D)R3为羧基或四唑基；(E)R3为羧基；(F)A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至2个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的6-元环；(G)A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的偕取代基(即取代在同一碳原子上的取代基)取代，其中非卤素偕取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的6-元环；(H)A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个该取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的5-元环；(I)A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的偕取代基取代，其中该偕取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的5-元环；(J)A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中该取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3至4-元环；(K)A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的偕取代基取代，其中该偕取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3至4-元环；(L)A为 (M)A为 (N)A为
(O)A为 (P)A为 (Q)m为整数2。
本发明特别优选的化合物为式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中(R)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基或四唑基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至2个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的6-元环；并且m为整数2；(S)R1为异丙基；R2为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的偕取代基取代，其中该偕取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的6-元环；并且m为整数2；(T)R1为异丙基；R2为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为 并且m为整数2；(U)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至2个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素偕取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的6-元环；并且m为整数2；(V)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基；A为 并且m为整数2；(W)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基或四唑基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个该取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的5-元环；并且m为整数2；(X)R1为异丙基；R2为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的偕取代基取代，其中该偕取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的5-元环；并且m为整数2；(Y)R1为异丙基；R3为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为 并且m为整数2；(Z)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个该取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的5-元环；并且m为整数2；(AA)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基；A为 并且m为整数2；(AB)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基或四唑基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中该取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3至4-元环；并且m为整数2；(AC)R1为异丙基；R2为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的偕取代基取代，其中该偕取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3至4-元环；并且m为整数2；(AD)R1为异丙基；R2为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为 并且m为整数2；(AE)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非-卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3至4-元环；并且m为整数2；(AF)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基；A为 并且m为整数2；(AG)R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基；A为 ；且m为整数2；(AH)R1为异丙基；R2为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为 ；且m为整数2。
本发明的一个实施方案提供选自由以下化合物组成的组的化合物4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丙烷羧酸；
1-{[4-羟基-4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸；以及其药学上可接受的盐或溶剂合物。
本发明的一个实施方案提供由选自由以下化合物组成的组的化合物4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸；及其药学上可接受的盐及溶剂合物。
本发明的一个实施方案提供选自由以下化合物组成的组的化合物1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸；及其药学上可接受的盐及溶剂合物。
本发明的一个实施方案提供选自由以下化合物组成的组的化合物1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丙烷羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸；及其药学上可接受的盐及溶剂合物。
式(I)化合物的药学上可接受的盐包含其酸加成盐及碱盐(包含二盐)。
适用的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。实例包含乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、葡萄糖二酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐及三氟乙酸盐。
适用的碱盐由形成无毒盐的碱形成。实例包含铝盐、精氨酸盐、二苄基乙二胺盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、乙醇胺盐、钾盐、钠盐、氨基丁三醇盐及锌盐。
关于适用盐的评论，见Stahl及Wermuth的“药物用盐手册性质、选择及用途(Handbook of Pharmaceutical SaltsProperties，Selection，and Use)”(Wiley-VCH，Weinheim，德国，2002)。式(I)化合物的药学上可接受的盐可通过将式(I)化合物根据需要与所需的适用酸或碱的溶液混合在一起而轻易地制备。盐可从溶液中沉淀且通过过滤收集，或可通过蒸发溶剂而回收。盐中的离子化程度可从完全离子化变化至几乎未离子化。
本发明的化合物可以非溶剂合的形式和溶剂合的形式存在。在本文中使用术语“溶剂合物”描述包含本发明的化合物和一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如，乙醇)的分子络合物。当该溶剂为水时，使用术语“水合物”。
本发明的药学上可接受的溶剂合物包含水合物及其中的结晶溶剂可同位素取代，例如D2O、d6-丙酮、d6-DMSO的溶剂合物。
包含在本发明范围中的是络合物例如包合物，药物-主体包合配合物，其中，对照于上述的溶剂合物，药物和主体以化学计量或非化学计量的量存在。也被包括的是包含二种或更多种以化学计量或非化学计量的量存在的有机和/或无机成分的药物的配合物。所得络合物可是离子化的、部分离子化的或非离子化的。关于这类络合物的综述，参见J Pharm Sci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。
以下所有提到式(I)化合物及其药学上可接受的衍生物包括提到其盐、溶剂合物和络合物及其盐的溶剂合物和络合物。
术语“本发明的化合物”除非另有说明，否则是指前文定义的式(I)化合物、下文定义的多晶型物、前药及其异构体(包含旋光、几何及互变体异构体)，以及同位素标示的式(I)化合物。
所谓的式(I)化合物的“前药”也在本发明的范围内。因此某些本身具有很小的或没有药理活性的式(I)化合物的衍生物当给予至身体内或身体上时，可转化成具有所要活性的式(I)的化合物，例如，通过水解裂解。该衍生物称为“前药”。关于前药使用的进一步信息可在“Pro-drugs as Novel Delivery Systems，第14册，ACS SymposiumSeries(T.Higuchi和W Stella)和“Bioreversible Carriers in DrugDesign”，Pergamon Press，1987(E B Roche编辑，AmericanPharmaceutical Association)中找到。
根据本发明的前药可以(例如)通过用本领域的技术人员已知的如例如H Bundgaard描述在“Design of Prodrugs”(Elsevier，1985)中描述的被称为“前药部分”的某些部分，取代存在于式(I)化合物中的适当官能度来生产。
根据本发明的一些前药的例子包括(i)在式(I)的化合物包含羧酸官能度(-COOH)的情形下，其酯，例如，以C1-C8烷基置换氢；(ii)在式(I)的化合物包含醇官能度(-OH)的情形下，其醚，例如，以C1-C6烷酰氧基甲基置换氢；和(iii)在式(I)的化合物包含伯或仲氨基官能度(-NH2或-NHR，其中R≠H)的情形下，其酰胺，例如，以C1-C10烷酰基置换一个或两个氢。
根据前述例子和其它前药类型的例子的置换基团的进一步例子可在上述参考文献中找到。
最后，式(I)的某些化合物本身可用作式(I)其它化合物的前药。
包含一个或多个不对称碳原子的式(I)化合物可存在二种或更多种立体异构体。在式(I)化合物包含烯基或亚烯基的情形下，几何顺式/反式(或Z/E)异构体是可能的。在化合物包含例如酮或肟基或芳族部分的情况下，可发生互变异构现象(‘互变异构现象’)。依此单一化合物可显现超过一个类型的异构现象。
包含在本发明范围中的是式(I)化合物的所有立体异构体、几何异构体和互变异构形式，包括显示超过一个类型的异构现象的化合物和其一个或多个的混合物。也被包括的是酸加成盐或碱盐，其中抗衡离子为旋光活性的，例如，D-乳酸盐或L-赖氨酸，或外消旋的，例如，DL-酒石酸盐或DL-精氨酸。
顺式/反式异构体可通过本领域的技术人员己知的常规技术，例如，色谱法和分级结晶法分离。
用于单个对映异构体的制备/分离的常规技术包括从适当的旋光纯前体的手性合成或使用(例如)手性高效液相色谱法(HPLC)拆分外消旋物(或盐或衍生物的外消旋物)。
或者，外消旋物(或外消旋前体)可与适当旋光活性化合物(例如，醇)或，在式(I)化合物包含酸性或碱部分的情形中，与酸或碱例如酒石酸或1-苯基乙胺反应。所得非对映混合物可通过色谱法和/或分级结晶法分离并且非对映体的一个或两个通过本领域的技术人员熟知的方法可转化成对应的纯对映异构体。
本发明的手性化合物(和其手性前体)可使用色谱法，典型地HPLC，在不对称树脂上用由烃(典型地庚烷或己烷)组成的流动相，包含从0到50％的异丙醇，典型地从2％到20％，以及从0到5％的烷基胺，典型地是0.1％二乙胺，以富集对映体形式获得。浓缩洗出液提供富集的混合物。
立体异构聚集物可通过本领域的技术人员己知的常规技术分离-参见，例如，E L Eliel的“有机化合物的立体化学(Stereochemistry ofOrganic Compounds)”(维斯，纽约，1994)。
本发明包括所有药学上可接受的式(I)化合物的同位素标记的化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数，但原子质量或质量数与自然界中通常发现的原子质量或质量数不同的原子置换。
适合包含在本发明化合物中的同位素的例子包括氢的同位素，例如2H和3H；碳的同位素，例如11C、13C和14C；氯的同位素，例如36Cl；氟的同位素，例如18F；碘的同位素，例如123I和125I；氮的同位素，例如13N和15N；氧的同位素，例如15O，17O和18O；磷的同位素，例如32P；以及硫的同位素，例如35S。
某些同位素标记的式(I)化合物，例如结合了放射性同位素的那些，可用于药物和/或底物组织分布研究。放射性同位素氚，也就是，3H，和碳-14，也就是，14C，鉴于他们容易结合和检测的现成方法而特别适用于此目的。
被更重的同位素例如氘，也就是，2H取代，可提供由更大代谢稳定性导致的某些治疗优点，例如在活体内半衰期增加或减少剂量需求和因此，在某些情况中可以是优选的。
用发射正电子的同位素，例如11C、18F、15O和13N取代，可适用于检查底物受体占有度的正电子发射断层扫描术(PET)研究。
同位素标记的式(I)化合物通常可通过本领域的技术人员己知的常规技术或类似于在所附实施例及制备中所述的方法类似的方法，使用适合的同位素标记的试剂取代前面所采用的非同位素标记的试剂而制得。
所有式(I)的化合物均可通过以下所示的通用方法中所述的程序或通过实施例部分及制备部分中所述的特定方法，或通过其常规改进方法来制备。除其中所用的任何新颖中间体外，本发明亦涵盖用于制备式(I)化合物的这些方法的任一种或多种。
一般合成本发明化合物可通过制备该类化合物熟知的各种方法，如按照如下方法A至G中所示的方法进行制备。
以下方法A及B说明了式(I)化合物的制备。方法C至G说明了各种中间体的制备。
除非另外说明，以下方法中的R1、R2、R3、m及A均如上所定义。下文中所用的术语“保护基”意指羟基、羧基或氨基-保护基，其选自由T.W.Greene等人编辑的有机合成中的保护基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)(John Wiley & Sons，1999)中所述的典型羟基、羧基或氨基-保护基。以下一般合成中所有原料均为市售或通过本领域的技术人员已知的惯用方法获得，如European Journal ofMedicinal Chemistry，12(1)，87-91；1977，并且将其公开内容并入本文供参考。
方法A该方法说明式(I)化合物的制备。
在反应方案A中，R3a为如上所定义的R3或式-C(＝O)-R4基，其中R4为羧基保护基。
本文中所用的术语″羧基-保护基″意指能通过化学方法裂解的保护基，如氢解、水解、电解或光解，并且该羧基保护基方法叙述于T.W.Greene等人(John Wiley & Sons，1999)出版的有机合成中的保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)中。惯用的羧基-保护基包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、叔丁氧基、甲氧基甲氧基、2，2，2-三氯乙氧基、苄基氧基、二苯基甲氧基、三甲基硅烷基氧基、叔丁基二甲基硅烷基氧基及烯丙氧基。这些基团中，优选叔丁氧基、甲氧基或乙氧基。
步骤A1在该步骤中，期望的本发明式(I)化合物通过以式(III)的化合物使式(II)的化合物羰基化来制备。式(II)的化合物为商购。式(III)的化合物可依据以下所列的方法C制备。
反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度上)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷，芳族烃如苯、甲苯及硝基苯；醚类如二乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃及二烷；及酰胺如N，N-二甲基甲酰胺及N，N-二甲基乙酰胺。这些溶剂中优选二氯甲烷。
对所用羰基化剂的性质同样没有特别限制，并且该类反应中通常使用的任何羰基化剂可相等地用于本文中。该羰基化剂的实例包括(但不限于)咪唑衍生物如N，N′-羰基二咪唑(CDI)；氯甲酸酯如氯钾酸三氯甲酯及氯甲酸4-硝基苯酯；尿素及三光气。这些中优选者为氯甲酸4-硝基苯酯。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不重要。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，方便地是在约-78℃至约120℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料及溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间一般将足够。
若R3a为式-C(＝O)-R4基，进行去保护反应将获得羧基。该反应详述于T.W.Greene等人的有机合成的保护基(Protective Groups inOrganic Synthesis)，369-453，(1999)中，该公开并入本文供参考。以下列举涉及保护叔丁基的一般反应。
去保护反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度上)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷，以及芳族烃如苯、甲苯及硝基苯。这些溶剂中优选者为卤化的烃。
去保护反应在酸存在下进行。对所用酸的性质同样没有特别的限制，并且该类反应中通常使用的任何酸可相等地用于本文中。该酸的实例包括(但不限于)酸如盐酸、乙酸、对-甲苯磺酸或三氟乙酸。这些中优选者为三氟乙酸。
去保护反应可在自由基去除剂存在下进行，对所用自由基去除剂的性质同样没有特别限制，并且该类反应中惯用的自由基去除剂可等同地用于本文中。该自由基去除剂的实例包括(但不限于)HBr、二甲基亚砜或(CH3CH2)3SiH。这些中优选者为(CH3CH2)3SiH。
去保护反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不重要。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约100℃，更优选在约0℃至约50℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料及溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时，更优选约1小时至约24小时的时间一般将足够。
方法R本方法说明所需式(I)化合物的另一种制备方法。
反应方案R 在反应方案B中，R3a如以上定义，R5为氨基-保护基，Aa如上面定义的A或具有1至3个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至4个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中该取代基的2个可任选与碳原子一起形成3至6元环，并且X为卤素原子如碘原子、氯原子或溴原子。
本文中所用的术语″氨基-保护基″意指能通过化学方法裂解的保护基，如氢解、水解、电解或光解，并且该氨基保护基被叙述于T.W.Greene等人(John Wiley & Sons，1999)出版的有机合成中的保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)中。惯用的氨基-保护基包括(但不限于)苄基、C2H5O(C＝O)-、CH3(C＝O)-、叔丁基二甲基硅烷基、叔丁基二苯基硅烷基、苄基氧基羰基及叔丁氧基羰基。这些基中优选者为叔丁氧基羰基。
步骤B1在该步骤中，式(V)的化合物通过使式(IV)的化合物(其可通过例如与方法A中所述自式(II)化合物制备式(I)化合物类似的方法制备)去保护制备。该去保护方法被叙述于T.W.Greene等人[有机合成中的保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)，494-653，(1999)]中，该公开并入本文供参考。以下列举涉及保护叔丁氧基羰基的典型方法。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度上)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷，以及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。这些溶剂中优选者为醇。
该反应在过量的酸存在下进行。对所用酸的性质同样没有特别的限制，并且该类反应中惯用的任何酸可相等地用于本文中。该酸的实例包括(但不限于)酸如盐酸或三氟乙酸。这些中优选者为盐酸。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不重要。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约100℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛变化，尤其是反应温度及所用原料及溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间通常将足够。
步骤B2在该步骤中，期望的式(I)化合物通过使如步骤B1中所述而制备的式(V)化合物与式(VI)化合物偶合(B2-a)，或通过使式(V)的化合物与式(VII)的化合物还原性氨基化(B2-b)来制备。
(B2-a)与式(V)化合物的偶合该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度上)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚类如乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃及二烷；胺如N-甲基吗啉、三乙胺、三丙基胺、三丁基胺、二异丙基乙胺、二环己基胺、N-甲基哌啶、N-甲基吡咯烷、吡啶、4-吡咯烷基吡啶、N，N-二甲基苯胺及N，N-二乙基苯胺；及酰胺如N，N-二甲基甲酰胺及N，N-二甲基乙酰胺。这些中优选者为N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷。
反应在碱存在下进行。对所用碱的性质同样没有特别限制，并且该类反应中惯用的任何碱可相等地用于本文中。该碱的实例包括(但不限于)胺如N-甲基吗啉、三乙胺、三丙胺、三丁基胺、二异丙基乙胺、二环己基胺、N-甲基哌啶、吡啶、4-吡咯烷基吡啶、甲基吡啶、4-(N，N-二甲基氨基)吡啶、2，6-二(叔丁基)-4-甲基吡啶、喹啉、N，N-二甲基苯胺、N，N-二乙基苯胺、1，5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(DABCO)及1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)；碱金属氢化物如氢化锂、氢化钠及氢化钾；及碱金属烷氧化物如甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾。这些中优选者为二异丙基乙胺。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不重要。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约120℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料及溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约48小时的时间通常将足够。
(B2-b)还原性氨基化该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度上)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚类如二乙醚、二异丙基醚、二甲氧基乙烷、四氢呋喃及二烷；醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇；乙酸及水。这些溶剂中优选者为卤化的烃。
反应在还原试剂存在下进行。对所用还原试剂的性质同样没有特别限制，并且该类反应中惯用的任何还原试剂可相等地用于本文中。该还原试剂的实例包括(但不限于)硼氢化钠、氰基硼氢化钠及三乙酰氧基硼氢化钠。这些中优选者为三乙酰氧基硼氢化钠。反应所需还原试剂的量亦可依许多因素广泛的改变，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在优选的条件下进行，还原试剂与原料1比3的化学当量比通常将足够。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不重要。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约-20℃至约60℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间通常将足够。
若R3a为式-C(＝O)-R4基，则进行去保护反应将获得羧基。该反应可在如方法A的步骤A1中所述的相同条件下进行。
方法C该方法说明式(III)化合物的制备。
反应方案C 在反应方案C中，X、A、Aa、R3a及R6均如以上定义。因此，当R3a为-C(＝O)-R4时，上述式(IX)化合物如下。
步骤C1在该步骤中，式(IX)的化合物通过使式(VIII)的化合物与式(VI)的化合物偶合或通过以式(VII)的化合物使式(VIII)的化合物还原性氨基化来制备。式(VIII)的化合物可依据以下所列方法F及G制备或商购。
步骤C2在该步骤中，式(III)的化合物通过使如步骤C1中所述而制备的式(IX)化合物去保护来制备。该反应可在如方法B的步骤B1中所述相同的条件下进行。
方法D该方法说明式(IIIa)化合物的制备。
反应方案D 在反应方案D中，R3a、R4、R6及Y各如上所述的定义，并且R7为硅烷基如叔丁基二甲基硅烷基、叔丁基二苯基硅烷基、三乙基硅烷基或三甲基硅烷基，优选为三甲基硅烷基；R8及R9独立代表卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基，其中R8及R9可任选与其连接的碳原子一起形成3至6-元环；Ab为如上述定义的A，条件为不包含亚甲基及经取代的亚甲基。
步骤D1在该步骤中，式(XI)的化合物通过使式(VIII)的化合物与式(X)的化合物在低聚甲醛存在下缩合来制备。式(VIII)的化合物可依据方法F和G制备或商购。
若Y不为烷氧基，则反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度上)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。这些中优选者为二氯甲烷或乙醇。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不关键。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约120℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛变化，尤其是反应温度及所用原料及溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约48小时的时间一般将足够。
步骤D2在该步骤中，式(IIIa)的化合物通过使式(XI)的化合物与式(XII)的化合物经曼尼希反应来制备。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚如二乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃及二烷；腈类如乙腈及苄腈；及酰胺如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺及六甲基磷酸三酰胺。这些溶剂中，优选者为二氯甲烷。
该反应在路易斯酸存在下进行。对所用路易斯酸的性质同样没有特别限制，并且该类型反应中通常使用的任何路易斯酸可相等地用于本文中。该路易斯酸的实例包括(但不限于)BF3、AlCl3、FeCl3、MgCl2、AgCl、Fe(NO3)3、CF3SO3Si(CH3)3、Yb(CF3SO3)3及SnCl4。这些中，优选者为Yb(CF3SO3)3、MgCl2或CF3SO3Si(CH3)3。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不关键。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约100℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间一般将足够。
方法E该方法说明式(III)化合物(其中R2为氢原子且A为Ab)的制备。
反应方案E 在反应方案E中，Aa、Ab及R3a各如以上的定义，各R及R′均为具有1至4个碳原子的烷基，优选为甲基，或芳烷基如苄基或苯乙基，优选为苄基。
步骤E1在该步骤中，式(XIV)的化合物通过使式(XIII)化合物(商购)的氰基还原来制备。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)醚类如二乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃及二烷；芳族烃如苯、甲苯及硝基苯；及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。这些中优选者为甲醇。
该反应在还原试剂存在下进行。对所用还原试剂的性质同样没有特别限制，并且该类反应中惯用的任何还原试剂可相等地用于本文中。该还原试剂的实例包括(但不限于)金属硼氢化物如硼氢化钠及氰基硼氢化钠；氢气与催化剂如钯-炭、铂及阮内镍的组合；及氢化物化合物如氢化锂铝及氢化二异丁基铝。这些中，优选者为阮内镍。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不重要。优选的是的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约100℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间通常将足够。
步骤E2在该步骤中，式(XVI)的化合物通过使可商外购的式(XV)化合物与式(XIV)化合物反应来制备。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)水及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。这些中优选者为水及乙醇的混合物。
该反应在碱存在下进行。对所用碱的性质同样没有特别限制，并且该类反应中惯用的任何碱可相等地用于本文中。该碱的实例包括(但不限于)碱金属氢氧化物如氢氧化锂、氢氧化钠及氢氧化钾；碱金属烷氧化物如甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钾及碱金属碳酸盐，如碳酸锂、碳酸钠及碳酸钾。这些中优选者为碳酸钾。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不关键。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约120℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间通常将足够。
步骤E3在该步骤中，式(XVII)的化合物通过使式(XVI)化合物的羰基在对-甲苯磺酰基甲基异氰化物存在下转化成氰基而制备。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)醚类如二乙醚、二异丙基醚、乙二醇二甲基醚、四氢呋喃及二烷；及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。这些中优选者为乙二醇二甲基醚与乙醇的混合物。
该反应在碱存在下进行。同样对所用碱的性质并没有特别限制，并且该类反应中惯用的任何碱可相等地用于本文中。该碱的实例包括(但不限于)碱金属烷氧化物如甲醇钠、乙醇钠及叔丁醇钾。这些中优选者为叔丁醇钾。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不关键。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约100℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间通常将足够。
步骤E4在该步骤中，式(IIIb)的化合物通过使式(XVII)化合物的氰基还原来制备。该反应可在如方法E的步骤E1中所述相同条件下进行。
方法F该方法说明式(VIII)化合物(其中R2为卤素原子)的制备。
反应方案F 在反应方案F中，R2a为卤素原子；R6定义如上，并且R10为氨基保护基，优选为苯甲酰基。
步骤F1
在该步骤中，式(XIX)的化合物通过使式(XVIII)化合物的羰基转化成环氧基来制备。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)酰胺如甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺及六甲基磷三酰胺；亚砜如二甲基亚砜或环丁砜。这些溶剂中优选者为二甲基亚砜。
该反应在碱存在下进行。对所用碱的性质同样没有特别限制，并且该类反应中惯用的任何碱可相等地用于本文中。该碱的实例包括(但不限于)碱金属烷氧化物如甲醇钠、乙醇钠及叔丁醇钾；及碱金属碳酸盐，如碳酸锂、碳酸钠及碳酸钾。这些中优选者为叔丁醇钾。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不关键。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约100℃，更优选在约10℃至约50℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时，更优选约60分钟至约12小时的时间通常将足够。
步骤F2在该步骤中，式(XX)的化合物通过使卤化氢与式(XIX)的化合物反应来制备。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)醚类如二乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃及二烷；酰胺如甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺及六甲基磷三酰胺。这些溶剂中优选者为四氢呋喃。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不关键。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约100℃，更优选约10℃至约50℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时，更优选约60分钟至约12小时的时间通常将足够。
步骤F3在该步骤中，式(XXI)通过使式(XX)的化合物与叠氮化钠(F3-a)反应，接着使叠氮基(F3-b)还原来制备。
(F3-a)与叠氮化钠反应该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚类如二乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃及二烷；酰胺如甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺及六甲基磷三酰胺；及亚砜如二甲基亚砜及环丁砜。这些溶剂中优选者为N，N-二甲基甲酰胺。
添加叠氮化钠之前，通过添加试剂如三氟甲烷磺酰氯、甲烷磺酰氯及甲苯磺酰氯，将羟基转化成离去基团，如甲基磺酰基、三氟甲基磺酰基及4-甲基苯基磺酰基。这些试剂中，优选者为甲烷磺酰氯。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不关键。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约120℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料及溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间一般将足够。
(F3-h)还原该反应可在如方法E的步骤E1中所述的相同的条件下进行。
步骤F4在该步骤中，式(VIIIa)的化合物通过将氨基保护基R6导入伯氨基中(F4-a)，并且使仲氨基的氨基保护基R10选择性的去保护(F4-b)来制备。
(F4-a)氨基保护基的导入该反应由T.W.Greene等人，[有机合成的保护基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)，494-653，(1999)]详述，该公开并入本文供参考。以下列举涉及保护基团叔丁氧基羰基的典型反应。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)水、醚类如二乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃及二烷；及亚砜如二甲基亚砜及环丁砜。这些溶剂中优选者为四氢呋喃。
该反应一般在试剂存在下进行。对所用试剂的性质同样没有特别限制，并且该类反应中惯用的任何试剂可相等地用于本文中。该试剂的实例包括(但不限于)碳酸二叔丁酯及1-(叔丁氧基羰基)苯并三唑。这些中，优选者为碳酸二叔丁酯。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不重要。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约120℃，更优选约20℃至约80℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时，更优选约60分钟至约12小时的时间通常将足够。
(F4-b)去保护该方法由T.W.Greene等人，有机合成的保护基(ProtectiveGroups in Organic Synthesis，494-653，(1999)详述，该公开并入本文供参考。以下列举在氢气及催化剂如钯-炭或铂的组合存在下，涉及苯甲酰基保护基的典型方法。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)卤化的烃，如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇；及醚类如二乙醚、二异丙基醚、四氢呋喃及二烷。这些溶剂中优选者为甲醇。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不重要。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约120℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间通常将足够。
方法G该方法说明其中R2为羟基的式(VIII)化合物的制备。
反应方案G 在反应图G中，R6及R10各如以上定义。
步骤G1在该步骤中，式(XXII)化合物通过使式(XVIII)化合物(商购)的羰基与三甲基硅烷基氰化物反应来制备。
该反应通常且优选在溶剂存在下进行。对使用的溶剂的性质并没有特别的限制，只要对涉及的反应或试剂没有负面作用且它可溶解试剂(至少某种程度)即可。适用溶剂的实例包括(但不限于)芳族烃如苯、甲苯及硝基苯；卤化的烃如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳及1，2-二氯乙烷；醚类如二乙醚、二异丙基醚、乙二醇二甲基醚、四氢呋喃及二烷；腈类如乙腈及苄腈；及醇如甲醇、乙醇、丙醇、2-丙醇及丁醇。这些中优选者为甲苯。
该反应在试剂存在下进行。对所用试剂的性质同样没有特别限制，并且该类反应中惯用的任何试剂可相等地用于本文中。该试剂的实例包括(但不限于)路易斯酸如BF3、AlCl3、FeCl3、AgCl、ZnI2、Fe(NO3)3、CF3SO3Si(CH3)3、Yb(CF3SO3)3及SnCl4；碱如CaO；醚如18-冠状醚-6；酸如Amberlite XAD-4树脂。这些中优选者为ZnI2。
该反应可在广温度范围中进行，并且精确的反应温度对本发明并不关键。优选的反应温度会随着溶剂的性质及原料等因素而定。然而，通常，方便的是在约0℃至约100℃的温度下进行该反应。反应所需时间亦随着许多因素广泛的变化，尤其是反应温度及所用原料与溶剂的性质。然而，只要反应在上面所列优选条件下进行，约5分钟至约24小时的时间通常将足够。
步骤G2在该步骤中，式(XXIII)的化合物通过将式(XXII)化合物的氰基转化成氨基，接着使氨基-保护基R10去保护来制备。该反应可在如方法E步骤E1及方法F步骤F4中所述相同条件下进行。
步骤G3在该步骤中，式(VIIIb)的化合物通过式(XXIII)化合物的氨基的保护及去保护来制备。该反应可在如方法F步骤F4中所述相同条件下进行。
式(I)化合物及上述的制备方法中的中间体可经惯用的程序，如蒸馏、再结晶或色谱法纯化来分离和纯化。
打算用于药物用途的本发明化合物可以结晶或无定形产品给予。他们可通过该方法例如沉淀、结晶、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥以例如，如固体塞、粉末或薄膜形式获得。微波或辐射频率干燥可用于此目的。
他们可单独地或与一种或多种本发明的其它化合物组合或与一种或多种其它药物(或其任何组合)组合给予。通常，他们将以与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂结合的制剂的形式给予。术语“载体”或“赋形剂”使用在本文中用以描述本发明化合物以外的任何成分。赋形剂的选择很大程度上将取决于多种因素例如特殊的给药模式、赋形剂对溶解度和稳定性的影响和剂型的性质。
适合于本发明化合物的递送的药物组合物和他们的制备方法对本领域的技术人员是显而可知的。该组合物和他们的制备方法可发现于(例如)Remington′s Pharmaceutical Sciences，第19版本(Mack出版公司，1995)。
口服给药本发明的化合物可口服地给予。口服地给予可包括吞咽，使得化合物进入胃肠道，或可采用经颊或舌下给予，通过该途径化合物可直接地从嘴进入血流内。
适合于口服给予的制剂包括固体制剂例如片剂，包含粒子、液体、或粉末的胶囊、糖锭(包括液体-充填的)、咀嚼锭，多-和纳-粒子、凝胶剂、固溶液、脂质体、薄膜剂(包括粘膜粘附的)、卵形剂(ovule)、喷雾剂和液体制剂。
液体制剂包括例如悬浮液、溶液、糖浆和酏剂。该制剂可以作为软或硬胶囊中的填充剂使用和典型地包含载体，例如，水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素或适当的油和一种或多种乳化剂和/或悬浮剂。液体制剂也可以通过固体的重构(例如，从小药包)制备。
本发明的化合物也可以快速溶解、快速崩解剂型例如由Liang和Chen描述于Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986(2001)中的那些被使用。
对于片剂剂型，视剂量而定，药物可占剂型的约1重量％至约80重量％，更典型地占剂型的约5重量％至约60重量％。除药物以外，片剂通常包含崩解剂。崩解剂的例子包括淀粉羟乙酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、低级烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶化淀粉和藻酸钠。通常，崩解剂将占剂型的约1重量％至约25重量％，优选占约5重量％至约20重量％。
粘合剂通常用来赋予片剂制剂的粘着品质。适当粘合剂包括微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然和合成胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶化淀粉、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素。片剂也可包含稀释剂，例如乳糖(单水合物、喷雾干燥单水合物、无水等等)、甘露醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纤维素、淀粉和磷酸氢钙二水合物。
片剂也可任选地包含表面活性剂，例如硫酸月桂基酯钠和聚山梨酯80，和助流剂例如二氧化硅和滑石。当存在时，表面活性剂可占片剂的约0.2重量％至约5重量％，助流剂可占片剂的约0.2重量％至约1重量％。
片剂通常也包含润滑剂例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、反丁烯二酸硬脂酯钠，及硬脂酸镁与硫酸月桂基酯钠的混合物。润滑剂通常占片剂的约0.25重量％到约10重量％，优选从约0.5重量％到约3重量％。
其它可能的成分包括抗氧化剂、着色剂、调味剂、防腐剂和味道-掩蔽剂。
典型片剂包含至多约80％药物，约10重量％到约90重量％粘合剂，约0重量％到约85重量％稀释剂，约2重量％到约10重量％崩解剂，和约0.25重量％到约10重量％润滑剂。
片剂掺合物可直接地压缩或通过滚筒压缩形成片剂。片剂掺合物或掺合物的部分或者可在制片之前被湿式-、干式-、或熔化-制粒、熔化凝结、或挤出。最后制剂可包含一层或多层且可经包衣或未经包衣；其甚至可装入胶囊。
片剂的配制由H.Lieberman和L.Lachman讨论于“Pharmaceutical Dosage FormsTablets.第1册”，Marcel Dekker，纽约，1980(SIBN 0-8247-6918-X)
口服给予的固体制剂可配制成即释的和/或调释的。调释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序化释放。
为了本发明目的的适当调释的制剂描述在美国专利第6,106,864号中。其它适当的释放技术例如高能量分散体和渗透及涂布粒子的细节发现于Verma等人的Pharmaceutical Technology On-line，25(2)，1-14(2001)。使用口香糖以实现控制释放描述在WO 00/35298中。
肠胃外给药本发明的化合物也可直接地给予至血流内、至肌肉内，或至内部器官中。用于胃肠外给予的适当方法包括静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌肉内和皮下。胃肠外给予的适当装置包括针(包括微针)注射器、无针注射器和输注技术。
胃肠外制剂典型地为水溶液，其可包含赋形剂例如盐，碳水化合物和缓冲剂(优选约3到约9的pH)，但是，对于一些应用，他们可更合适地配制成无菌非水溶液或与适当媒介物例如无菌无热原水合并使用的干燥形式。
胃肠外制剂在无菌条件下的制备，例如，通过冷冻干燥，可使用本领域的技术人员熟知的标准药物技术轻易地完成。
使用于胃肠外溶液的制剂中的式(I)化合物的溶解度可通过使用适当配制技术，例如并入溶解度-提高剂来增加。
用于胃肠外给予的制剂可配制成即释的和/或调释的。调释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序化释放。因此本发明的化合物可配制成用于以提供活性化合物的调释的植入储库形式给药的固体、半固体、或触变液体。该制剂的例子包括药物涂布的斯腾特固定模和PGLA微球。
局部给药本发明的化合物也可局部地给予到皮肤或粘膜，也就是，通过皮肤或透皮给药。用于此目的的典型制剂包括凝胶剂、水凝胶剂、洗液、溶液、霜剂、软膏、扑粉、敷料、泡沫、薄膜剂、皮肤贴片、糯米纸囊剂、植入物、海绵、纤维、绷带和微乳液。也可使用脂质体。典型的载体包括醇、水、矿物油、液体石蜡、白凡士林、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可掺入渗透增强剂-参见，例如，Finnin和Morgan的JPharm Sci，88(10)，955-958(1999年10月)。
其它局部给予的装置包括通过电穿孔法、离子电渗疗法、超声导入法(phonophoresis)、超声导入(sonophoresis)和微针或无针(例如PowderjectTM、BiojectTM等)注射递送。
局部给予的制剂可配制成即释的和/或调释的。调释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序化释放。
吸入/鼻内给药本发明的化合物也可鼻内给予或通过吸入给予，典型地以干粉的形式(或单独，以混合物，例如，与乳糖的干掺合物形式，或以混合的成分粒子，例如，与磷脂，例如磷脂酰胆碱混合)从干粉吸入器或以气溶胶喷雾从加压容器、泵、喷雾器、雾化器(优选使用电液气动式(electrohydrodynamics)产生细雾的雾化器)，或喷雾器给药，使用或不使用适当的推进剂，例如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷。为了鼻内使用，粉末可包含生物粘着剂，例如，去乙酰壳多糖或环糊精。
加压容器、泵、喷雾器、雾化器、或喷雾器包含本发明化合物的溶液或悬浮液，其包含例如乙醇、乙醇水溶液、或适合于活性成分的分散、溶解化、或延长释放的替代剂，作为溶剂的推进剂和任选表面活性剂，例如山梨糖醇酐三油酸酯、油酸，或寡聚乳酸。
在使用于干粉或悬浮液制剂之前，将药物产物微粉化成适合于通过吸入递送的大小(典型地少于5微米)。这可通过任何适当粉碎方法，例如螺旋喷射碾磨、流化床喷射碾磨、形成纳粒子的超临界流体处理、高压均化、或喷雾干燥而实现。
用于吸入器或吹入器中的胶囊(利用(例如)明胶或羟丙基甲基纤维素做成)、泡眼和药筒可配制成包含本发明的化合物、适当粉基质例如乳糖或淀粉和效能修正剂例如l-亮氨酸、甘露醇或硬脂酸镁的粉末混合物。乳糖可为无水或单水合物的形式，优选为后者。其它适当的赋形剂包括葡聚糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、蔗糖和海藻糖。
适合使用于使用电流体动力学装置产生细雾的雾化器中的溶液制剂每次驱动可包含约1微克到约20毫克的本发明化合物且驱动体积可从约1微升变化到约100微升。典型的制剂可包含式(I)的化合物、丙二醇、灭菌水、乙醇和氯化钠。可用以代替丙二醇的替代溶剂包括甘油和聚乙二醇。
适当的矫味剂，例如薄荷醇和左薄荷醇或甜味剂，例如糖精或糖精钠，可加至该打算用于吸入/鼻内给予的本发明的制剂中。用于吸入/鼻内给药的制剂可使用例如(DL-乳酸-共乙醇酸)(PGLA)配制成即释的和/或调释的。调释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序化释放。
若为干粉吸入剂及气溶胶，则计量单位由输送计量量的阀决定。本发明的单位通常经安排给予含约1至约100微克式(I)化合物的计量剂量或″吹气剂量(puff)″。总的每日剂量一般在约50微克至约20毫克之间，其可以单一剂量或以全天多次(经常)分开的剂量给药。
直肠/阴道内给药本发明的化合物可通过直肠或阴道给予，例如，以栓剂、阴道栓、或灌肠剂的形式。可可脂为传统的栓剂基质，但是如适当可使用各种替代品。
用于直肠/阴道给药的制剂可配制成即释的和/或调释的。调释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序化释放。
眼睛/耳朵给药本发明的化合物也可直接地给予到眼睛或耳朵，典型地于以等张、pH-调节、灭菌盐水中的微粉化悬浮液或溶液的滴液形式。适合眼和耳给予的其它制剂包括软膏、生物可分解(例如可吸收性凝胶海绵、胶原)和非生物可分解(例如硅氧烷)植入物、糯米纸囊剂、镜片和粒子或小囊系统，例如囊泡剂(niosomes)或脂质体。聚合物例如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸、纤维聚合物，例如，羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素，或杂多醣聚合物，例如，gelan胶，可与防腐剂，例如苯扎氯铵掺合在一起。该制剂也可通过离子电渗疗法递送。
用于眼/耳给药的制剂可配制成即释的和/或调释的。调释制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序化释放。
其它技术本发明的化合物可与可溶性大分子实体，例如环糊精和其适当的衍生物或含聚乙二醇的聚合物组合，以便在以任何上述给药模式中使用时改良他们的溶解度、溶出速率、蔽掩味道、生物利用度和/或稳定性。
药物-环糊精络合物，例如，被发现通常可使用于大部分的剂型和给药路径。包合络合物和非包合络合物两者都可使用。作为与药物的直接络合的替代，可使用环糊精作为辅助添加剂，也就是作为载体、稀释剂、或增溶剂。最常使用于这些目的是α-，β-和γ-环糊精，其例子可发现于国际专利申请号WO 91/11172、WO 94/02518和WO 98/55148中。
部件的药剂盒(kit)只要可能想要给予活性化合物的组合，例如，为了治疗特定疾病或病况的目的，在本发明的范围内的是，二种或更多种药物组合物，至少其中的一种包含根据本发明的化合物，可方便地组合成适合于组合物共给予的药剂盒的形式。
因此本发明的药剂盒包含二种或更多种分开的药物组合物，至少其中的一种包含根据本发明的式(I)化合物，和用于分开地保留该组合物的装置，例如容器、分开的瓶，或分开箔袋。该类药剂盒的例子为用于包装片剂、胶囊等等的熟悉的泡眼包装。
本发明的药剂盒特别地适合于给予不同剂型，例如口服和胃肠外，用于以不同的剂量间隔给予该分开的组合物，或用于逐步增加(titrating)彼此分开的组合物。为有助于顺应性，药剂盒典型地包含给药的说明和可提供有所谓的记忆辅助装置。
剂量对于向人类患者的给药，本发明化合物的每日总剂量一般在约0.05毫克至约100毫克之间，当然依给药模式而定，优选在约0.1毫克至约50毫克之间，并且更优选在约0.5毫克至约20毫克之间。例如，口服给药可能需要的每日总剂量为约1毫克至约20毫克之间，但静脉内剂量可能仅须要约0.5毫克至约10毫克。每日总剂量可以单一剂量或分开的剂量给药。
这些剂量是以体重约65公斤至约70公斤的平均人类为基础。医师可轻易的决定体重落在该范围外的受治疗者如婴儿及年长者的剂量。
联合疗法如上所述，本发明化合物呈现出5-HT4激动剂活性。本发明的5-HT4激动剂可适用与至少一种其它药理学活性剂或化合物联用，尤其是在治疗胃食管反流病中。例如，5-HT4激动剂，尤其是上述定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物可与一种或多种选自以下的药理学活性剂联合，同时、依序或分开地给药(i)组织胺H2受体拮抗剂，例如雷尼替丁、拉呋替丁、尼扎替丁、西米替丁、法莫替丁及罗沙替丁；(ii)质子泵抑制剂，例如奥美拉唑、艾美拉唑、泮托拉唑、雷贝拉唑、替那拉唑、伊那拉唑(ilaprazole)及兰索拉唑；(iii)酸泵拮抗剂，例如缩拉雷占(soraprazan)、类凡雷占(revaprazan)(YH-1885)、AZD-0865、CS-526、AU-2064及YJA-20379-8；(iv)口服抗酸混合物，例如Maalox、Aludrox及Gaviscon；(v)粘膜保护基，例如聚普瑞锌、依卡贝特钠、瑞巴派特、替普瑞酮、西曲酸酯、硫糖铝、氯匹林(chloropylline)-铜及普劳诺托；(vi)GABAB激动剂，例如巴氯芬及AZD-3355；(vii)α2激动剂例如可乐定、美托美定、洛非西定、莫索尼定、替扎尼定、胍法辛、胍那苄、他利克索及右美托咪定；(viii)花黄素衍生物例如茶碱、氨茶碱及多索茶碱；(ix)钙通道阻断剂，例如阿雷地平、拉西地平、法罗地平(falodipine)、阿折地平、克林地平、洛美利嗪、地尔硫、戈洛帕米、依福地平、尼索地平、安氯地平、乐卡地平、贝凡洛尔、尼卡地平、伊拉地平、贝尼地平、维拉帕米、尼群地平、巴尼地平、普罗帕酮、马尼地平、苄普地尔、硝苯地平、尼伐地平、尼莫地平及法舒地尔；(x)苯并二氮杂激动剂，例如地西泮、扎来普隆、唑吡旦、卤沙唑仑、氯硝西泮、普拉西泮、夸西泮、氟他唑仑、三唑仑、氯甲西泮、咪达唑仑、托非索泮、氯巴占、氟硝西泮及氟托西泮；(xi)前列腺素类似物例如前列腺素、米索前列醇、天普替尼(treprostinil)、依索普天醇(esoprostenol)、拉坦前列素、依洛前列素、贝前列素、恩前列素、异丁司特及奥扎格雷；(xii)组织胺H3激动剂例如R-α-甲基组织胺及BP-294；(xiii)抗胃剂例如抗-促胃液素疫苗、伊曲谷胺及Z-360；(xiv)5-HT3拮抗剂例如多拉司琼、帕洛诺司琼、阿洛司琼、阿扎司琼、雷莫司琼、米氮平、格拉司琼、托烷司琼、E-3620、昂丹司琼及吲地司琼；(xv)三环类抗抑郁剂例如丙米嗪、阿米替林、氯米帕明、阿莫沙平及洛非帕明；(xvi)GABA激动剂例如嘉巴喷丁、托吡酯、西洛西泮、氯硝西泮、普罗加胺、溴替唑仑、佐匹克隆、普加巴林和依佐匹克隆(eszopiclone)；(xvii)阿片类物质镇痛剂例如吗啡、海洛因、氢吗啡酮、羟吗啡酮、左啡诺、左诺啡烷、美沙酮、哌替啶、芬太尼、可卡因、可待因、二氢可待因、羟考酮、氢可酮、右丙氧芬、纳美芬、烯丙吗啡、纳洛酮、纳曲酮、丁丙诺啡、布托啡诺、纳布啡及喷他佐辛；(xviii)生长抑素类似物例如奥曲肽、AN-238及PTR-3173；(xix)Cl通道活化剂例如卢必普斯酮(lubiprostone)；(xx)选择性5-羟色胺重摄取抑制剂例如舍曲林、依他普仑、氟西汀、奈法唑酮、氟伏沙明、西酞普兰、米那普仑、帕罗西汀、文拉法辛、曲马多、西布曲明、度洛西汀、降文拉法辛(desvenlafaxine)及达泊西汀；(xxi)抗胆碱能药例如双环胺及莨菪碱；(xxii)泻药例如Trifyba、Fybogel、Konsyl、Isogel、Regulan、Celevac及Normacol；(xxiii)纤维产品例如Metamucil；(xxiv)解痉药例如美贝维林；(xxv)多巴胺拮抗剂例如甲氧氯普胺、多潘立酮及左舒必利；(xxvi)胆碱能药例如新斯的明；(xxvii)AChE抑制剂例如加兰他敏、美曲膦酯、利凡斯的明、依托必利及多奈哌齐；(xxviii)速激肽(NK)拮抗剂，尤其是NK-3、NK-2和NK-1拮抗剂，例如奈帕坦特、沙雷度坦、他奈坦；(αR，9R)-7-[3，5-双(三氟甲基)苄基]-8，9，10，11-四氢-9-甲基-5-(4-甲基苯基)-7H-[1，4]二氮芳辛并[2，1-g][1，7]萘啶-6-13-二酮(TAK-637)，5-[[(2R，3S)-2-[(1R)-1-[3，5-双(三氟甲基)苯基]乙氧基-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基]甲基]-1，2-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮(MK-869)，拉奈匹坦、达匹坦以及3-[[2-甲氧基-5-(三氟甲氧基)苯基]甲基氨基]-2-苯基-哌啶(2S，3S)。
评价生物活性的方法通过以下程序测定本发明化合物的5-HT4受体结合亲和性。
人类5-HT4结合(1)制备人类5-HT4(d)转染的HEK293细胞且使其于内部(in-house)生长。将收集的细胞悬浮于补充了蛋白酶抑制剂混合液(Boehringer，1∶1000稀释)的50mM HEPES(pH 7.4，4℃)，并且使用设置在全动力下的手持式Polytron PT 1200破裂仪在冰上均化30秒。匀浆在40,000xg及4℃下离心30分钟。接着将粒状沉淀物再悬浮在50mMHEPES(pH 7.4，4℃)中且以相同方式再离心一次。将最终粒状沉淀物再悬浮于适当体积的50mM HEPES(pH 7.4在25℃)中、均化、等分样且储存在-80℃下直到使用。使用BCA蛋白质分析试剂盒(PIERCE)及ARVOsx板读取机(Wallac)使等分样的膜级分进行蛋白质浓度测定。
对于结合实验而言，在室温下以25微升的[3H]-GR113808(Amersham)，最终0.2nM)及150微升的膜匀浆及WGA-SPA珠(Amersham)悬浮溶液(10微克蛋白质及1毫克SPA珠/孔)培养25微升的试验化合物60分钟。由1μM GR113808(Tocris)在最终浓度下测定非特异性结合。通过在1000rpm下离心来终止培养。
受体结合的放射性通过以MicroBeta板计数器(Wallac)计数进行量化。
实施例的所有化合物均显示出5HT4受体亲和性。
人类5-HT4结合(2)制备人类5-HT4(d)转染的HEK293细胞且使其于内部生长。将收集的细胞悬浮于补充了蛋白酶抑制剂混合液(Boehringer，1∶1000稀释)的50mM Tris缓冲液(pH 7.4，4℃)中，并且使用设置在全动力下的手持式Polytron PT 1200破裂仪在冰上均化30秒。匀浆在40,000×g及4℃下离心10分钟。接着将粒状沉淀物再悬浮在50mM Tris缓冲液(pH 7.4，4℃)中且以相同方式再离心一次。将最终粒状沉淀物再悬浮于含10mM MgCl2的适当体积的50mM Tris缓冲液(pH 7.4，25℃)中、均化、等分样且储存在-80℃下直到使用。使用BCA蛋白质分析试剂盒(PIERCE)及ARVOsx板读取机(Wallac)对等分样的膜级分进行蛋白质浓度测定。
对于结合实验而言，在室温下以50微升的[3H]5-HT(Amersham，最终8.0nM)及400微升膜匀浆(300微升蛋白质/管)培养50微升的试验化合物60分钟。通过50μM GR113808(Tocris)在最终浓度下测定非特异性结合。使用BRANDEL收集器，通过以0.2％PEI浸泡的玻璃纤滤纸上快速真空过滤来终止所有培养，接着以50mM Tris缓冲液(pH 7.4，25℃)洗涤三次。用液体闪烁计数法，利用Packard LS计数器量化受体结合的放射性。
实施例的所有化合物均显示出5HT4受体亲和性。
人类5-HT4(d)转染的HEK293细胞中激动剂-诱发的cAMP升高在内部建立人类5-HT4(d)转染的HEK293细胞。该细胞在37℃及5％CO2下于补充有10％FCS、20mM HEPES(pH 7.4)、200微克/毫升潮霉素B(Gibco)、100单位/毫升青霉素及100微克/毫升链霉素的DMEM中生长。细胞成长至60-80％汇合。在以化合物处理之前一天，透析的FCS(Gibco)正常替换，并且使细胞培养过夜。化合物在96-孔板(12.5微升/孔)中制备。以PBS/1mM EDTA收集细胞、离心且以PBS洗涤。分析开始时，将细胞粒状沉淀物以1.6×105细胞/毫升的浓度，再悬浮于补充有20mM HEPES、10μM帕吉林(Sigma)及1mM3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(Sigma)的DMEM中，并且在室温下静置15分钟。反应通过将细胞添加到板(12.5微升/孔)中而起始。在室温下培养15分钟后，添加1％Triton X-100终止反应(25微升/孔)，并且使板在室温下静置30分钟。依据厂商的操作说明进行均匀时间解析的基于荧光的cAMP(Schering)检测。使用ARVOSX多重标识计数器(Wallac)测量HTRF(激发320nm，发射665nm/620nm，延迟时间50μs，窗口时间400μs)。基于各孔在620nm及665nm下的荧光强度的比例分析数据，接着使用cAMP标准曲线进行cAMP定量。将由各化合物诱出的cAMP产生的增强标准化成由1000nM 5-羟色胺(Sigma)产生的cAMP量。
实施例的所有化合物均显示5HT4受体激动活性。
人类多非利特结合制备人类HERG转染的HEK293S细胞且使之于内部生长。将收集的细胞悬浮于50mM Tris-HCl(pH 7.4，4℃)中，并且使用设置在全动力下的手持式Polytron PT 1200破裂仪在冰上均化20秒。匀浆在48,000×g及4℃下离心20分钟。接着使粒状沉淀物再悬浮、均化且以相同方式再离心一次。将最终粒状沉淀物再悬浮于适当体积的50mMTris-HCl、10mM KCl、1mM MgCl2(pH 7.4，4℃)中、均化、等分样且储存在-80℃下直到使用。使用BCA蛋白质分析试剂盒(PIERCE)及ARVOsx板读取机(Wallac)使等分样的膜级分进行蛋白质浓度测定。
在总体积200微升的96-孔板中进行结合分析。在室温下以20微升的[3H]-多非利特(Amersham，最终5nM)及160微升膜匀浆(25微克蛋白质)培养20微升的试验化合物60分钟。用10μM多非利特在最终浓度下测定非特异性结合。使用Skatron细胞收集器以50mMTris-HCl、10mM KCl、1mM MgCl2(pH 7.4在4℃)，通过用0.5％预浸泡的GF/B Betaplate过滤器上快速真空过滤来终止培养。过滤器经干燥，置于样品袋中且填充闪烁液Betaplate Scint。以WallacBetaplate计数器计数与过滤器结合的放射性。
Caco-2渗透性依据Shiyin Yee，Pharmaceutical Research，763(1997)中所述的方法测量Caco-2渗透性。
使Caco-2细胞在过滤器支撑器(Falcon HTS多孔插入系统)上生长14天。从顶端及基底外侧隔室二者中除去培养基，并且在37℃下于摇床水浴中，以50循环/分钟，以预加温的0.3毫升顶端缓冲液及1.0毫升基底外侧缓冲液预培养单层。顶端缓冲液由汉克氏平衡的盐溶液(Hanks Balanced Salt Solution)、25mM D-葡萄糖一水合物、20mMMES生物缓冲液、1.25mM CaCl2及0.5mM MgCl2(pH 6.5)组成。基底外侧缓冲液由汉克氏平衡的盐溶液、25mM D-葡萄糖一水合物、20mM HEPES生物缓冲液、1.25mM CaCl2及0.5mM MgCl2(pH 7.4)组成。预培养结束时，除去培养基且将含试验化合物溶液(10μM)的缓冲液添加于顶端隔室中。在1小时时将插入物移到含新鲜基底外侧缓冲液的孔中。缓冲液中的药物浓度以LC/MS分析进行测量。
流动速率(F，质量/时间)由接收器侧上基质的累积表现的斜率计算，并且表观渗透性系数(Papp)系由以下方程式计算。
Papp(cm/sec)＝(F*VD)/(SA*MD)其中SA为传送的表面积(0.3cm2)，VD为供体体积(0.3毫升)，MD为在t＝0时在供体侧上的药物总量。所有数据代表2次插入的平均值。单层整合度由Lucifer Yellow传送进行测定。
人类肝脏微粒体(HLM)的半衰期在37℃下于96-深孔板上，以含3.3mM MgCl2及0.78毫克/毫升HLM(HL101)的100mM磷酸钾缓冲液(Ph 7.4)培养试验化合物(1μM)。将反应混合物分成二组，非-P450及P450组。NADPH仅添加于P450组的反应混合物中。在0、10、30及60分钟的时间点收集P450组样品的等分样，其中0分钟时点是指NADPH添加于P450组反应混合物中的时间。在-10及65分钟时间点时收集非-P450组的等分样。收集的等分样以含内标的乙腈溶液萃取。沉淀的蛋白质以离心(2000rpm，15分钟)旋转沉降。以LC/MS/MS系统测量上清液中的化合物浓度。
通过将化合物/内标的峰面积比的自然对数对时间作图，获得半衰期值。通过点的最佳拟合线的斜率产生代谢的速率(k)。此可使用以下方程式转化成半衰期值。
半衰期＝ln 2/k实施例在以下非限制性实施例中举例说明本发明，其中除非另有说明，否则所有试剂均可商购，所有操作均在室温下或环境温度下进行，也就是说，在约18-25℃之间，溶剂的蒸发使用旋转蒸发器，在减压条件下以至多约60℃的浴温进行；通过薄层色谱法(tlc)监控反应，并且仅为举例说明而给出反应时间；提供的熔点(m.p.)未经校正(多晶型可能得到不同的熔点)；通过以下技术的至少一种确认所有分离化合物的结构及纯度tlc(Merck硅胶60 F254预涂覆的TLC板或Merck NH2F254S预涂覆的HPTLC板)，质谱法、核磁共振(NMR)、红外线吸收光谱(IR)或微量分析。仅为举例说明的目的而给出收率。急骤柱色谱法使用Merck硅胶60(230-400网目ASTM)或Fuji Silysia ChromatorexDU3050(氨基型，30-50微米)进行。低解析质谱数据(EI)以Integrity(Waters)质谱仪或Automass 120(JEOL)质谱仪获得。低解析质谱数据(ESI)以ZMD2(Waters)质谱仪或Quattro II(Micromass)质谱仪获得。NMR数据在270MHz(JEOL JNM-LA 270光度计)或300MHz(JEOL JNM-LA300)下，使用氘化的氯仿(99.8％D)和二甲基亚砜(99.9％D)作为溶剂(除非另有说明)，相对于作为内标的四甲基硅烷(TMS)，以每百万份数(ppm)测定；所用的常规简写为s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，br.＝宽峰等。IR光谱用Shimazu红外光谱仪(IR-470)测量。旋光度使用JASCO DIP-370数字旋光仪(Japan Spectroscopic Co.，Ltd.)测量。化学符号具有其常用的含义；b.p.(沸点)；m.p.(熔点)；l(升)，ml(毫升)，g(克)，mg(毫克)，mol(摩尔)，mmol(毫摩尔)，eq(当量)。粉末X射线衍射(PXRD)图案使用装配有自动进样交换器、2θ-θ测角器、光束发散裂口、二级单发色器及闪烁计数器的Rigaku RINT-TTR粉末X-射线衍射仪测定。通过将粉末充填于铝制样品承载器上制备样品用于分析。样本通过60.00rpm旋转，并且在室温下以Cu-Kα辐射用4°/分钟扫描。
实施例14-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸
步骤1.4-氰基四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯在0℃及N2中，于含NaH(17.7克，0.443摩尔)的DMF(200毫升)搅拌悬浮液中滴加含氰基乙酸叔丁酯(25.0克，0.177摩尔)的DMF(100毫升)。使混合物升温至环境温度且搅拌1小时。接着，将双(2-溴乙基)醚(49.3克，0.177摩尔)添加于混合物中，并且使所得混合物在90℃下搅拌24h。冷却至0℃后，混合物以水(100毫升)猝灭。蒸发除去挥发性成分，残留物以EtOAc-甲苯(1∶2，500毫升)及水(500毫升)的混合物沉淀。有机相以水(500毫升)洗涤三次，以Na2SO4干燥，经过滤且蒸发。固体以己烷洗涤且真空干躁，获得19.0克(57％)白色结晶标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.96(2H，dt，J＝3.9Hz，12.3Hz)，3.73(2H，dt，J＝2.6Hz，12.3Hz)，2.20-1.94(4H，m)，1.52(9H，s)。
步骤2.4-(氨基甲基)四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯含4-氰基四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(18.95克，0.0897摩尔，步骤1)及阮内镍(1.00克)的甲醇(200毫升)混合物在室温下氢化(3atm)12h。接着，使混合物经硅藻土垫过滤，并且真空浓缩滤液，获得16.01克(83％)黄色糖浆状标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.86(2H，dt，J＝4.1Hz，11.4Hz)，3.48(2H，dt，J＝2.5Hz，11.5Hz)，2.75(2H，s)，2.03(2H，br d，J＝10.7Hz)，1.55-1.35(13H，m，包含9H，s，1.49ppm)。
步骤3.4-[(4-氧代哌啶-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯于含4-(氨基甲基)四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(8.00克，0.0372摩尔，步骤2)及K2CO3(0.51克，0.0372摩尔)的EtOH-H2O(2∶1，240毫升)回流混合物中滴加含1-乙基-1-甲基-4-氧代哌啶碘化物(12.0克，0.0445摩尔，有机化学期刊(J.Org.Chem.)1995，60，4324-4330)的EtOH-H2O(2∶1，150毫升)，并且使所得混合物在相同温度(回流)下搅拌1h。冷却至室温后，真空除去溶剂。将残留物倒入饱和NaHCO3水溶液(200毫升)中，并且以CH2Cl2(200毫升三次)萃取混合物。萃取液经Na2SO4干燥且浓缩。残留物在硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(3∶1至2∶1)洗脱进行色谱法，获得10.77克(98％)无色糖浆状标题化合物。
MS(ESI)m/z298(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ3.84(2H，br d，J＝11.4Hz)，3.50(2H，dt，J＝2.0Hz，11.7Hz)，2.85(4H，t，J＝5.9Hz)，2.61(2H，s)，2.39(4H，t，J＝6.1Hz)，2.05(2H，d，J＝11.5Hz)，1.75-1.45(11H，m，包含9H，s，1.49ppm)。
步骤4.4-[(4-氰基哌啶-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯在0℃下于含4-[(4-氧代哌啶-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(8.77克，0.0295摩尔，步骤3)的1，2-二甲氧基乙烷(250毫升)搅拌溶液中添加对-甲苯磺酰基甲基异氰化物(11.51克，0.0590摩尔)、EtOH(3.96毫升，0.0678摩尔)及t-BuOK(11.58克，0.1032摩尔)。使所得混合物在50℃下搅拌16h。冷却后，将反应混合物倒入饱和NaHCO3水溶液(200毫升)中，并且混合物以CH2Cl2(200毫升×3次)萃取。萃取液经Na2SO4干燥且浓缩。残留物在硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脱进行色谱法，获得5.76克(63％)黄色糖浆状标题化合物。
MS(ESI)m/z309(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ3.81(2H，dt，J＝3.1Hz，11.0Hz)，3.48(2H，dt，J＝2.1Hz，11.7Hz)，2.76-2.64(2H，m)，2.64-2.52(1H，m)，2.50-2.35(4H，m，包含2H，s，2.46ppm)，1.98(2H，br d，J＝11.9Hz)，1.92-1.70(4H，m)，1.65-1.40(11H，m，包含9H，s，1.47ppm)。
步骤5.4-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯使含4-[(4-氰基哌啶-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(5.76克，0.0187摩尔，步骤4)及阮内镍(3.00克)的甲醇(100毫升)混合物在室温下氢化(3atm)12h。接着，使混合物经硅藻土垫过滤且真空浓缩滤液，获得5.72克(98％)黄色糖浆状标题化合物。
MS(ESI)m/z313(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ3.80(2H，dt，J＝3.1Hz，11.5Hz)，3.49(2H，dt，J＝2.1Hz，12.2Hz)，2.80(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.58-2.40(4H，m，包含2H，s，2.43ppm)，2.15(2H，br t，J＝7.3Hz)，1.98(2H，br d，J＝13.7Hz)，1.70-1.40(16H，m，包含9H，s，1.47ppm)，1.30-1.10(2H，m)。
步骤6.4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯使含对-硝基苯基氯甲酸酯(4.14克，0.0205摩尔)、1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(3.62克，0.0205摩尔，药物化学期刊(J.Med.Chem.)1999，42，2870-2880)及Et3N(7.81毫升，0.0560摩尔)的CH2Cl2(100毫升)混合物在室温下搅拌4h。接着，添加4-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(5.72克，0.0187摩尔，步骤5)，并且使所得混合物在室温下搅拌24h。反应混合物以饱和NaHCO3水溶液(300毫升)稀释，以CH2Cl2(300毫升)萃取三次。合并的萃取液以Na2SO4干燥且浓缩。残留物在NH-硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脱进行色谱法，获得9.83克(100％)黄色糖浆状标题化合物。
MS(ESI)m/z515(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.90(1H，t，J＝4.9Hz)，8.31-8.21(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.80(2H，dt，J＝3.1Hz，11.5Hz)，3.49(2H，dt，J＝1.7Hz，11.4Hz)，3.28(2H，t，J＝6.4Hz)，2.81(2H，brd，J＝10.4Hz)，2.44(2H，s)，2.16(2H，t，J＝10.4Hz)，1.98(2H，d，J＝12.4Hz)，1.81-1.20(22H，m，包含6H，d，J＝7.1Hz，1.56ppm及9H，s，1.47ppm)。
步骤7.4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸在0℃下于含4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸叔丁酯(3.67克，7.13毫摩尔，步骤6)的THF(80毫升)搅拌溶液中添加浓HCl(40毫升)，并且使所得混合物在室温下搅拌20h。浓缩混合物除去溶剂且将残留物倒入饱和NaHCO3水溶液中。混合物以CH2Cl2萃取三次，有机层以Na2SO4干燥。除去溶剂获得残留物，使之在硅胶柱上以MeOH/CH2Cl2(1∶10)洗脱进行色谱法，获得3.01克(92％)标题化合物。使产物自THF再结晶，获得白色结晶状标题化合物(0.893克)。
MS(ESI)m/z459(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.99(1H，t，J＝5.6Hz)，8.30-8.15(1H，m)，7.25-7.105(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.95-3.70(4H，m)，3.34(2H，t，J＝6.3Hz)，3.14(2H，br d，J＝12.0Hz)，2.65-2.45(4H，m，包含2H，s，2.59ppm)，1.92(4H，t，J＝13.8Hz)，1.85-1.40(11H，m，包含6H，d，J＝6.9Hz，1.57ppm)。
m.p.176℃。
IR(KBr)v3281，2947，1720，1688，1611，1595，1547，1481，1447，1375，1200，1159，1136，1105，760cm-1。
C24H34N4O5的计算值C，62.86；H，7.47；N，12.22。实测值C，62.77；H，7.42；N，12.16。
合成4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸的另一路径叙述如下。
步骤8.{[1-(乙氧基甲基)哌啶-4-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯在环境温度下于含(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(7.0克，33毫摩尔)的乙醇(19毫升)搅拌溶液中添加低聚甲醛(1.2克，39毫摩尔)及碳酸钾(5.4克，39毫摩尔)。使混合物在环境温度下搅拌4h。混合物经过滤且以乙醇(50毫升)洗涤滤饼。蒸发除去挥发性成分，获得白色粉末状标题化合物8.9克(定量)。
1H-NMR(CDCl3)δ4.60(1H，brs)，4.07(2H，s)，3.49(2H，q，J＝7.1Hz)，3.08-2.83(4H，m)，2.50-2.36(2H，m)，1.75-1.60(2H，m)，1.44(9H，s)，1.52-1.35(1H，m)，1.19(3H，t，J＝7.1Hz)，1.31-1.12(2H，m)。
步骤9.[甲氧基(四氢-4H-吡喃-4-亚基)甲氧基](三甲基)硅烷在0℃下及氮气中，于含二异丙基胺(1.6克，0.016摩尔)的四氢呋喃(4毫升)搅拌溶液中滴加正丁基锂(己烷中1.59M，9.2毫升，0.014摩尔)，并且搅拌20分钟。接着，使反应混合物冷却至-40℃，添加含四氢-2H-吡喃-4-羧酸甲酯(1.9克，0.013摩尔)及三甲基硅烷基氯(2.0毫升，0.015摩尔)的四氢呋喃(1毫升)，并且使所得混合物于3h内逐渐升温至室温。蒸发除去挥发性成份，残留物经以己烷洗涤的硅藻土垫过滤。真空干燥滤液，获得2.9克(定量)的透明黄色油状标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.64-3.59(4H，m)，3.52(3H，s)，2.24(2H，t，J＝5.2Hz)，2.15(2H，t，J＝5.3Hz)，0.22(9H，s)。
步骤10.4-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-羧酸酯在0℃下于含{[1-(乙氧基甲基)哌啶-4-基]甲基}氨基甲酸叔丁酯(4克，14毫摩尔，步骤8)及[甲氧基(四氢-4H-吡喃-4-亚基)甲氧基](三甲基)硅烷(2.9克，13毫摩尔，步骤9)的二氯甲烷(30毫升)搅拌溶液中滴加三甲基硅烷基三氟甲烷磺酸酯(0.24毫升，1.3毫摩尔)，并且使所得混合物在室温下搅拌12h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液(150毫升)猝灭，以二氯甲烷(30毫升×2)萃取，并且合并的有机层以硫酸钠干燥。除去溶剂获得残留物，使该残余物在硅胶柱上以乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脱进行色谱法，获得6.3克(64％)透明无色油状标题化合物。
MS(ESI)m/z371(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ4.57(1H，br s)，3.84-3.78(2H，m)，3.70(3H，s)，3.49-3.41(2H，m)，2.99-2.95(2H，m)，2.73-2.68(2H，m)，2.47(2H，s)，2.19-2.11(2H，m)，2.06-2.01(2H，m)，1.61-1.51(5H，m)，1.44(9H，s)，1.24-1.11(2H，m)。
步骤11.4-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-羧酸在室温下于含4-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-羧酸甲酯(6.47克，17.5毫摩尔，步骤10)的MeOH(32毫升)溶液中添加5N NaOH水溶液(10毫升)(放热)。使所得溶液在60℃下搅拌7h，接着于冰冷却浴中冷却至5-10℃。于该溶液中添加5N HCl(10毫升)，并且浓缩所得溶液(pH值约为6)。于残留物中添加2-丙醇(80毫升)。浓缩该溶液。于残留物中添加2-丙醇(80毫升)且再度浓缩。残留物以EtOH(80毫升)稀释，并且使混合物在室温下搅拌2h。使之经硅藻土垫(5.0克)过滤除去NaCl。硅藻土垫以EtOH(20毫升)洗涤且浓缩合并的滤液。残留物中添加CH3CN(40毫升)且浓缩。该程序的过程中发现形成白色沉淀物。于残留物中添加CH3CN(40毫升)，并且使所得悬浮液在室温下搅拌2h。该混合物经过滤且所得固体以CH3CN(10毫升)洗涤，接着减压干燥，获得4.1克(65％)白色粉末状标题化合物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.66(1H，m)，3.93-3.82(3H，m)，3.15-2.99(4H，m)，2.58(2H，s)，2.58-2.45(2H，m)，1.98-1.76(4H，m)，1.55-1.35(6H，m)，1.44(9H，s)。
mp 129℃。
步骤12.4-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸4-甲基苯磺酸酯在N2下于300毫升3-颈圆底烧瓶中加入4-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-羧酸(10克，28毫摩尔，步骤11)，并且在室温下倒入含p-TsOH H2O(16克，84毫摩尔)的IPA(150毫升)溶液。所得混合物在60℃下及N2中搅拌7h，并且于2h内在播晶种的同时缓慢滴加Et3N(8.6毫升，62毫摩尔)。添加Et3N过程中会形成白色沉淀物。所得白色悬浮液在60℃下搅拌3h，在50℃下搅拌5h且在室温下搅拌10h。悬浮液经过滤且所得固体以IPA(100毫升)洗涤，在50℃下干燥5h，获得10.5克(87％)白色粉末状标题化合物。
1H-NMR(D2O)δ7.54(2H，d，J＝7.4Hz)，7.22(2H，J＝7.4Hz)，3.80-3.65(2H，m)，3.55-3.40(4H，m)，3.20-2.75(6H，m)，2.24(3H，s)，1.90-1.80(6H，m)，1.55-1.35(4H，m)。
mp 247℃。
步骤13.4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸含1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(1.0克，5.7毫摩尔)及氯甲酸4-硝基苯酯(1.14克，5.7毫摩尔)的CH2Cl2(20毫升)混合物在室温下及N2中搅拌5分钟。于该混合物中缓慢添加Et3N(1.7毫升，12.5毫摩尔)，并且在室温下将产生的混合物添加于含4-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸4-甲基苯磺酸酯(2.4克，5.7毫摩尔，步骤12)的CH2Cl2(15毫升)混合物中。所得混合物在室温下搅拌2h。混合物以0.5N HCl水溶液(100毫升)洗涤，并且有机层以饱和NaHCO3水溶液(75毫升)洗涤，接着浓缩有机层。残留物以EtOAc(75毫升)稀释，并且浓缩至约15毫升。产物播晶后，使该混合物在室温下搅拌30分钟。该程序的过程中，形成固体且过滤该混合物。所得固体以EtOAc(10毫升)洗涤，在50℃下真空干燥，获得1.9克(73％)白色固态标题化合物。
步骤14.4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸苯磺酸酯在室温下于含4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸(750毫克，步骤13)的CH3CN(5毫升)悬浮液中添加含苯磺酸单水合物(288毫克)的CH3CN(5毫升)溶液。所得混合物在室温下搅拌2天，并且经浓缩。残留物经干燥，获得909毫克(90％)固态标题化合物。
1H-NMR(CD3OD)δ9.10(1H,t,J=5.7Hz),8.11(1H,dt,J=8.0,0.8Hz)，7.88-7.76(2H，m)，7.46-7.36(3H，m)，7.32(1H，dt，J＝8.0，0.8Hz)，7.22(1H，td，J＝7.8，1.4Hz)，7.13(1H，td，J＝7.8，1.4Hz)，4.70(1H，六重峰，J＝6.9Hz)，3.85-3.55(5H，m)，3.50-3.38(4H，m)，3.23-3.05(2H，m)，2.15-1.90(5H，m)，1.78-1.58(5H，m)，1,55(6H，d，J＝6.9Hz)。
mp 223℃。
C30H40N4O8S的计算值C，58.42；H，6.54；N，9.08。实测值C，58.50；H，6.51；N，9.11。
PXRD(2θ(+/-0.1)5.3，12.6，21.4，21.9)。
实施例21-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸 步骤1.4-氰基环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤1中所示的方法，使用1，5-二溴戊烷制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ2.07(2H，d，J＝13.0Hz)，1.85-1.57(7H，m)，1.50(9H，s)，1.35-1.15(1H，m)。
步骤2.1-(氨基甲基)环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤2中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z214(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ2.69(2H，s)，2.02(2H，d，J＝13.2Hz)，1.65-1.05(19H，m，包括9H，s，1.47ppm)。
步骤3.1-[(4-氧代哌啶-1-基)甲基]环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤3中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z296(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ2.84(4H，t，J＝6.1Hz)2.57(2H，s)，2.38(4H，t，J＝6.1Hz)，2.04(2H，d，J＝12.2Hz)，1.65-1.15(17H，m，包括9H，s，1.47ppm)。
步骤4.1-[(4-氰基哌啶-1-基)甲基]环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤4中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z307(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ2.53-2.66(2H，m)，2.53-2.48(1H，m)，2.48-2.30(4H，m，包括2H，s，2.41ppm)，1.97(2H，d，J＝12.5Hz)，1.92-1.70(4H，m)，1.65-1.10(19H，m，包括9H，s，1.45ppm)。
步骤5.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤5中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z311(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ2.81(2H，d，J＝11.37Hz)，2.55(2H，d，J＝5.8Hz)，2.39(2H，s)，2.11(2H，t，J＝11.0Hz)，2.03-1.85(5H，m)，1.65-1.10(21H，m，包括9H，s，1.45ppm)。
步骤6.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤6中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z513(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.89(1H，t，J＝5.3Hz)，8.33-8.20(1H，m)，7.23-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.27(2H，t，J＝6.3Hz)，2.82(2H，d，J＝11.5Hz)，2.39(2H，s)，2.12(2H，t，J＝11.4Hz)，1.97(2H，d，J＝13.2Hz)，1.73-1.10(28H，m，包括6H，d，J＝6.9Hz，1.56ppm及9H，s，1.45ppm)。
步骤7.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸用类似于实施例1步骤7中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z457(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.98(1H，t，J＝5.8Hz)，8.28-8.18(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.34(2H，t，J＝6.3Hz)，3.11(2H，d，J＝11.9Hz)，2.61(2H，s)，2.48(2H，t，J＝12.2Hz)，2.05-1.20(21H，m，包括6H，d，J＝6.9Hz，1.57ppm)。
m.p.151℃。
IR(KBr)v3291，2930，1732，1690，1545，1481，1373，1298，1202，1134，762cm-1。
C25H36N4O4的计算值C，65.76；H，7.95；N，12.27。实测值C，65.41；H，8.18；N，12.18。
实施例31-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸 步骤1.1-(碘甲基)环戊烷羧酸甲酯在N2中及维持在-10℃下，于含HN(iPr)2(1.31毫升，9.36毫摩尔)的THF(5毫升)搅拌溶液中添加n-BuLi(己烷中1.58M，5.43毫升，8.58毫摩尔)，并且使混合物在-10℃下搅拌1h。接着，在0℃下于该混合物中滴加含环戊烷羧酸甲酯(1.00克，7.80毫摩尔)的THF(3毫升)溶液，并且使混合物在0℃下搅拌2h。最后，在0℃下于该混合物中添加CH2I2(0.628毫升，7.80毫摩尔)，并且使所得混合物在室温下搅拌16h。反应混合物以饱和NH4Cl水溶液(50毫升)猝灭，以Et2O(75毫升)萃取二次，并且合并的有机层以盐水(75毫升)洗涤。有机层以Na2SO4干燥，经过滤且浓缩。除去溶剂获得残留物，使之在硅胶柱上以EtOAc/己烷(1∶20-1∶10)洗脱进行色谱法，获得1.085克(52％)无色油状标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.73(3H，s)，3.42(2H，s)，2.30-2.15(2H，m)，1.80-1.55(6H，m)。
步骤2.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环戊烷羧酸甲酯含1-(碘甲基)环戊烷羧酸甲酯(5.52克，0.0206摩尔，步骤1)、(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(8.83克，0.0412摩尔)及iPr2NEt(10.76毫升，0.0618摩尔)的N-甲基吡咯烷酮(70毫升)混合物在120℃下搅拌24h。冷却后，反应混合物以饱和NaHCO3水溶液(200毫升)稀释，以AcOEt(200毫升)萃取三次，并且合并的有机层以水(200毫升)及盐水(200毫升)洗涤。有机层以Na2SO4干燥，经过滤且浓缩。除去溶剂获得残留物，使之在硅胶上以EtOAc/己烷(1∶1)洗脱进行色谱法，获得4.91克(67％)黄色糖浆状标题化合物。
MS(ESI)m/z355(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ4.58(1H，br s)，3.66(3H，s)，2.97(2H，t，J＝6.3Hz)，2.77(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.55(2H，s)，1.70-1.50(9H，m)，1.44(9H，s)，1.25-1.08(2H，m)。
步骤3.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸甲酯使含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环戊烷羧酸甲酯(1.16克，3.27毫摩尔，步骤2)的CH2Cl2(25毫升)及三氟乙酸(5毫升)溶液在室温下搅拌1.5h。反应混合物再经浓缩，并且以饱和NaHCO3水溶液(100毫升)碱化，以CHCl3(100毫升)萃取五次。合并的萃取液经干燥且浓缩，获得0.831克(100％)黄色糖浆标题化合物。
MS(ESI)m/z255(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ3.66(3H，s)，2.78(2H，d，J＝11.5Hz)，2.62-2.50(4H，m)，2.15-1.98(4H，m)，1.80-1.40(9H，m)，1.30-1.05(2H，m)。
步骤4.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸甲酯用类似于实施例1步骤6中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z457(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.94(1H，t，J＝5.7Hz)，8.28-8.20(7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.66(3H，s)，3.27(2H，t，J＝6.4Hz)，2.84(2H，d，J＝11.6Hz)，2.62(2H，s)，2.20-2.00(4H，m)，1.75-1.50(15H，m，包括6H，d，J＝7.0Hz，1.56ppm)，1.40-1.20(2H，m)。
步骤5.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸使含1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸甲酯(1.33克，2.90毫摩尔，步骤4)的4 N-HCl(6毫升)及乙酸(6毫升)混合物在回流下搅拌18h。冷却后，反应混合物经浓缩且以NaHCO3水溶液(100毫升)碱化，以CH2Cl2(150毫升)萃取三次。合并的萃取液以Na2SO4干燥，经过滤且浓缩。残留物在硅胶柱上以MeOH/CH2Cl2(1∶10)洗脱进行色谱法，获得1.12克(85％)白色固态标题化合物。粗化合物自EtOAc×2再结晶，并且在50℃下真空干燥2天，获得610毫克白色结晶标题化合物。
MS(ESI)m/z443(M+H)+。
m.p.165℃。
IR(KBr)v3271，2934，1736，1684，1607，1558，1483，1454，1379，1358，1298，1209，1167，1097，758cm-1。
1H NMR(CDCl3)δ9.00(1H，t，J＝5.5Hz)，8.30-8.18(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.34(2H，t，J＝11.0Hz)，2.32-2.17(2H，m)，2.00-1.30(17H，m，包括6H，d，7.0Hz，1.57ppm)。
C24H34N4O4·0.2H2O的计算值C，64.61；H，7.77；N，12.56。实测值C，64.34；H，7.79；N，12.48。
合成1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸的另一路径叙述如下。
步骤6.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环戊烷羧酸甲酯依据实施例1步骤10中所述程序，使用[亚环戊基(甲氧基)甲氧基](三甲基)硅烷(合成(Synthesis)，1982，1，58-60)代替[甲氧基(四氢-4H-吡喃-4-亚基)甲氧基](三甲基)硅烷制备标题化合物。
MS(ESI)m/z355(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ4.58(1H，br s)，3.66(3H，s)，2.97(2H，t，J＝6.3Hz)，2.77(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.55(2H，s)，2.18-1.95(4H，m)，1.70-1.50(9H，m)，1.44(9H，s)，1.25-1.08(2H，m)。
步骤7.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环戊烷羧酸在室温下于含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环戊烷羧酸甲酯(2.8克，8.0毫摩尔，步骤6)的MeOH(11毫升)溶液中添加2N NaOH水溶液(6毫升)(放热)。所得溶液在70℃下搅拌4h，接着于冰冷却浴中冷却至5-10℃。于该溶液中滴加5N HCl水溶液(6毫升)。浓缩所得溶液(pH值约为6)且于残留物中添加2-丙醇(40毫升)。浓缩该溶液，于残留物中添加CH3CN(40毫升)。所得混合物在室温下搅拌2h，使之经硅藻土垫(5.0克)过滤除去NaCl。浓缩滤液获得2.4克(定量)白色固态标题化合物。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ6.90-6.75(1H，m)，2.95-2.80(2H，m)，2.79(2H，t，J＝6.4Hz)，2.58(2H，s)，2.25-2.05(2H，m)，2.05-1.85(2H，m)，1.65-1.50(6H，m)，1.50-1.25(3H，m)，1.37(9H，s)，1.20-0.95(2H，m)。
mp 150℃。
步骤8.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸4-甲基苯磺酸酯在室温下于100毫升2-颈圆底烧瓶中，于含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环戊烷羧酸(5克，14.7毫摩尔，步骤7)的THF(25毫升)混合物中添加含p-TsOH H2O(8.4克，44毫摩尔)的THF(25毫升)溶液。所得混合物在70℃下及N2中搅拌3h，并且冷却至室温。于该溶液中缓慢滴加Et3N(6毫升，44毫摩尔)。添加Et3N过程中会形成白色沉淀物，并且使所得混合物在室温下搅拌14h。悬浮液经过滤且所得固体以THF(10毫升)洗涤，在50℃下干燥5h，获得5.9克(97％)白色固态标题化合物。
1H-NMR(D2O)δ7.51(2H，J＝8.2Hz)，7.19(2H，J＝8.2Hz)，3.38(2H，d，J＝11.0Hz)，3.09(2H，d，J＝2.6Hz)，2.88(2H，t，J＝12.1Hz)，2.79(2H，t，J＝6.6Hz)，2.21(3H，s)，1.94-1.75(5H，m)，1.61-1.27(9H，m)。
步骤9.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸使含1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(10克，56.8毫摩尔)及氯甲酸4-硝基苯酯(11.4克，56.8毫摩尔)的CH2Cl2(150毫升)混合物在室温下搅拌5分钟。于该混合物中缓慢添加Et3N(17.4毫升，125毫摩尔)，并且在室温下将所得混合物添加于含1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸4-甲基苯磺酸酯(23.4克，56.8毫摩尔，步骤8)的CH2Cl2(75毫升)混合物中。搅拌10分钟后，添加Et3N(7.9毫升，56.8毫摩尔)，并且使所得混合物在室温下搅拌2h。混合物以1N HCl水溶液(100毫升)洗涤。有机层于50℃下浓缩，直到约5vol为止，并且在80℃下以丙酮(50毫升×3)置换直到约5vol为止。在80℃下于该混合物中添加H2O(100毫升)，并且所得混合物在100℃下浓缩。冷却至50℃后，将20％N，N-二甲基氨基乙醇水溶液(100毫升)添加于该混合物中，并且发现固体。所得混合物于冰冷浴中冷却，并且使之在该温度下搅拌18h。混合物经过滤且所得固体以H2O(100毫升)洗涤，在50℃下真空干躁，获得17.9克(71％)白色固态标题化合物。
mp.166℃PXRD(2θ(+/-0.1)4.4，8.8，13.2，17.6)。
实施例41-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丙烷羧酸盐酸盐 步骤1.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环丙烷羧酸叔丁酯依据实施例3步骤1中所述的程序，使用环丙烷羧酸叔丁酯(J.Organomet.Chem.，1983，252，267-274)代替环戊烷羧酸甲酯制备1-(碘甲基)环丙烷羧酸叔丁酯(包含原料，3∶2混合物)。不需进一步纯化用于下一步骤中。
用类似于实施例3步骤2中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z369(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ4.59(1H，br s)，2.99(2H，d，J＝5.9Hz)，2.89(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.57(2H，s)，2.00(2H，t，J＝11.7Hz)，1.62(2H，d，J＝12.9Hz)，1.55-1.35(1H，m)，1.44(9H，s)，1.42(9H，s)，1.30-1.15(2H，m)，1.13(2H，dd，J＝3.8Hz，6.6Hz)，0.74(2H，dd，J＝3.5Hz，6.3Hz)。
步骤2.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}环丙烷羧酸叔丁酯用类似于实施例3步骤3中所示方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z269(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ2.96(2H，br d，J＝11.5Hz)，2.60-2.50(4H，m)，2.00(2H，t，J＝11.4Hz)，1.75-1.35(14H，m，包括2H，br d，J＝9.6Hz，1.66ppm及9H，s，1.43ppm)，1.33-1.16(2H，m)，1.13(2H，dd，J＝4.0Hz，6.9Hz)，0.74(2H，dd，J＝3.8Hz，6.6Hz)。
步骤3.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丙烷羧酸叔丁酯用类似于实施例3步骤4中所示方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z471(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.91(1H，br t，J＝5.5Hz)，8.32-8.20(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，3.30(2H，t，J＝6.4Hz)，2.91(2H，br d，J＝11.6Hz)，2.57(2H，s)，2.01(2H，br t，J＝9.5Hz)，1.73(2H，brd，J＝12.1Hz)，1.67-1.50(10H，m，包括6H，d，J＝7.0Hz，1.56ppm)，1.43(9H，s)，1.34-1.20(2H，m)，1.12(2H，dd，J＝4.0Hz，7.0Hz)，0.73(2H，dd，J＝3.9Hz，6.8Hz)。
步骤4.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丙烷羧酸盐酸盐用类似于实施例1步骤7中所示方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z415(M+H)+。
m.p.206℃。
IR(KBr)v2936，2700，1732，1688，1556，1485，1383，1359，1182，1164，758cm-1。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.86(1H，t，J＝6.3Hz)，8.07(1H，dd，J＝1.0Hz，7.8Hz)，7.45(1H，d，J＝7.1Hz)，7.22(1H，dt，J＝1.3Hz，7.6Hz)，7.15(1H，dt，J＝1.2Hz，7.7Hz)，4.95-4.60(1H，m)，3.70-3.10(6H，m)，3.10-2.90(2H，m)，1.86(3H，m，包括2H，d，J＝11.2Hz，1.86ppm)，1.70-1.53(2H，m)，1.49(6H，d，J＝6.9Hz)，1.35-1.15(4H，m)。
C22H30N4O4·HCl·0.2H2O的计算值C，58.13；H，6.96；N,12.33.实测值C，57.93；H，6.97；N，12.18。
实施例53-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]丙酸盐酸盐 步骤1.4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯在室温下于含1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(J.Med.Chem.1999，42，2870-2880)(3.00克，17.02毫摩尔)及三乙胺(7.12毫升，51.06毫摩尔)的70毫升四氢呋喃搅拌溶液中添加含三光气(5.15克，17.02毫摩尔)的14毫升四氢呋喃。使反应混合物回流19h。混合物再冷却至室温，添加含4-(氨基甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(J.Prugh，L.A.Birchenough及M.S.Egbertson，Synth.Commun.，1992，22，2357-60)(3.28克，15.32毫摩尔)的10毫升四氢呋喃。反应混合物再回流24h。再经冷却且以50毫升饱和NaHCO3水溶液碱化，并且以100毫升乙酸乙酯萃取三次。合并的萃取液以盐水洗涤，以MgSO4干燥且浓缩。残留物经急骤色谱法(洗脱剂己烷/乙酸乙酯＝5/1至1/2)，获得3.99克(62％)无色油状标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ9.04-8.88(1H，m)，8.83-8.20(1H，m)，7.26-7.10(3H，m)，4.80-4.60(1H，m)，4.28-4.02(2H，m)，3.32(2H，t，J＝6.1Hz)，2.82-2.60(2H，m)，1.94-1.10(5H，m)，1.57(6H，d，J＝7.1Hz)，1.45(9H，s)。
步骤2.3-异丙基-2-氧代-N-(哌啶-4-基甲基)-2，3-二氢-1H-苯并咪式-1-甲酰胺使含4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.992克，9.58毫摩尔)的50毫升含10％盐酸的甲醇及10毫升浓盐酸的溶液在室温下搅拌18h。接着浓缩混合物且以Na2CO3水溶液碱化，以CHCl3(100毫升)萃取三次。合并的萃取液经干燥且浓缩。残留物经急骤色谱法(NH-硅胶，洗脱剂CH2Cl2/甲醇＝100/1)，获得2.272克(75％)无色油状标题化合物。
MS(ESI)m/z317(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ8.93(1H，br)，8.32-8.22(1H，m)，7.24-7.02(3H，m)，4.80-4.61(1H，m)，3.31(2H，t，J＝6.0Hz)，3.20-3.05(2H，m)，2.79-2.54(2H，m)，1.84-1.52(3H，m)，1.57(6H，d，J＝6.9Hz)，1.36-1.13(2H，m)。
步骤3.3-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]丙酸叔丁酯使含3-异丙基-2-氧代-N-(哌啶-4-基甲基)-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(0.50克，1.58毫摩尔，步骤2)、丙烯酸叔丁酯(0.340毫升，2.37毫摩尔)及iPrNEt(0.275毫升，2.37毫摩尔)的THF(20毫升)混合物回流18h。冷却后，反应混合物以饱和NaHCO3水溶液(100毫升)稀释，以CH2Cl2(100毫升)萃取三次。合并的萃取液以Na2SO4干燥，经过滤且浓缩。残留物在硅胶柱上以MeOH/CH2Cl2(1∶20→1∶10)洗脱，接着在NH-硅胶上以EtOAc/己烷(1∶5→1∶2)洗脱进行色谱法，获得0.111克(16％)无色糖浆状标题化合物。
MS(ESI)m/z445(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ8.94(1H，br s)，8.30-8.20(1H，m)，7.25-7.11(3H，m)，7.11-7.00(1H，m)，4.80-4.62(1H，m)，3.31(2H，t，J＝6.2Hz)，2.95(2H，br t，J＝11.6Hz)，2.68(2H，t，J＝7.2Hz)，2.43(2H，t，J＝7.7Hz)，2.03(2H，br t，J＝11.4Hz)，1.98-1.82(1H，m)，1.79(2H，d，J＝12.1Hz)，1.56(6H，d，J＝7.2Hz)，1.50-1.30(11H，m，包括9H，s，1.44ppm)。
步骤4.3-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]丙酸盐酸盐用类似于实施例1步骤7中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z389(M+H)+。
IR(KBr)v2939，2637，1724，1682，1542，1466，1373，1217，1194，953，762cm-1。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.86(1H，t，J＝5.9Hz)，8.07(1H，dd，J＝0.8Hz，7.7Hz)，7.49(1H，d，J＝7.6Hz)，7.22(1H，dt，J＝1.3Hz，7.6Hz)，7.15(1H，dt，J＝1.0Hz，7.6Hz)，4.75-4.60(1H，m)，3.70-3.10(6H，m)，2.93(2H，br t，J＝11.2Hz)，2.85-2.70(2H，m)，1.95-1.75(3H，m，包括2H，d，J＝11.5Hz，1.87ppm)，1.65-1.40(8H，m，包括6H，d，J＝7.1Hz，1.49ppm)。
C20H28N4O4·HCl·0.8H2O的计算值C，54.68；H，7.02；N，12.75。实测值C，54.67；H，6.88；N，12.70。
实施例61-{[4-羟基-4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环己烷羧酸
步骤1.1-(碘甲基)环己烷羧酸甲酯用类似于实施例3步骤1中所示的方法制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ3.73(3H，s)，3.32(2H，s)，2.20-2.05(2H，m)，1.70-1.20(8H，m)。
步骤2.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-4-羟基哌啶-1-基)甲基]环己烷羧酸甲酯用类似于实施例3步骤2中所示的方法，使用[(4-羟基哌啶-4-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(Chem.Pharm.Bull.，2002，50(9)1187-1194)及1-(碘甲基)环己烷羧酸甲酯(实施例6的步骤1)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z385(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ4.86(1H，br s)，3.66(3H，s)，3.11(2H，d，J＝6.3Hz)，2.55-2.45(6H，m)，2.03(2H，br d，J＝10.4Hz)，1.70-1.15(18H，m，包括9H，s，1.44ppm)。
步骤3.1-{[4-(氨基甲基)-4-羟基哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸甲酯用类似于实施例3步骤3中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z285(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ3.66(3H，s)，2.61(1H，br s)，2.57-2.45(5H，m)，2.35-2.11(3H，m)，2.04(2H，br d，J＝11.5Hz)，1.65-1.45(6H，m)，1.45-1.20(4H，m)。
步骤4.1-{[4-羟基-4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸甲酯用类似于实施例3步骤4中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z487(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ9.12(1H，t，J＝5.6Hz)，8.30-8.20(1H，m)，7.25-7.10(3H，m)，4.80-4.65(1H，m)，3.66(3H，s)，3.54(2H，d，J＝5.9Hz)，2.60-2.45(6H，m)，2.03(2H，br d，J＝9.1Hz)，1.75-1.47(12H，m)，1.47-1.15(6H，m)。
步骤5.1-{[4-羟基-4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸用类似于实施例3步骤5中所示的方法制备标题化合物。
MS(ESI)m/z473(M+H)+。
m.p.184℃。
IR(KBr)v3437，3273，2943，1732，1688，1601，1533，1479，1452，1371，1134，978，762cm-1。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.94(1H，t，J＝5.6Hz)，8.09(1H，d，J＝7.7Hz)，7.43(1H，d，J＝7.7Hz)，7.22(1H，t，J＝7.8Hz)，7.14(1H，t，J＝7.4Hz)，4.75-4.58(1H，m)，4.59(1H，s)，2.47(2H，s)，4.00-3.00(6H，m)，1.86(2H，d，J＝11.4Hz)，1.60-1.10(18H，m，包括6H，d，J＝6.9Hz，1.49ppm)。
C25H36N4O5·0.5H2O的计算值C，62.35；H，7.74；N，11.63。实测值C，62.52；H，7.70；N，11.66。
实施例71-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸 步骤1.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环丁烷羧酸甲酯在环境温度下，于含(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(12.8克，60毫摩尔)即1-甲酰基环丁烷羧酸甲酯(2.13克，15毫摩尔，Davis，CharlesR.；Swenson，Dale C.；Burton，Donald J.，J.Org.Chem.，1993，58，6843)的四氢呋喃搅拌混合物中添加乙酸(8.6毫升，150毫摩尔)。30分钟后，将三乙酰氧基硼氢化钠(12.7克，60毫摩尔)添加于混合物中。接着，使混合物加热至60℃2h。
冷却后，将反应混合物倒入饱和NaHCO3水溶液中。水层以二氯甲烷萃取三次。合并的有机相以盐水洗涤，以MgSO4干燥且浓缩。残留物在硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脱进行色谱法，获得4.25克(83％)白色固态标题化合物。
MS(ESI)m/z341(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ3.69(3H，s)，2.96(2H，t，J＝6.2Hz)，2.75(2H，d，J＝11.4Hz)，2.67(2H，s)，2.37-2.46(2H，m)，1.78-2.05(6H，m)，1.45-1.65(2H，m)，1.43(9H，s)，1.09-1.21(2H，m)。
步骤2.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸甲酯依据实施例3步骤3中所述程序，自1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环丁烷羧酸甲酯(实施例7的步骤1)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z241(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ3.67(3H，s)，2.72-2.78(2H，m)，2.66(2H，s)，2.54(2H，d，J＝6.2Hz)，2.34-2.47(2H，m)，1.79-2.04(8H，m)，1.54-1.64(2H，m)，1.05-1.35(3H，m)。
步骤3.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸甲酯依据实施例1步骤6中所述程序，由1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮和1-[(4-{[(叔丁氧羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环丁烷羧酸甲酯(实施例7的步骤2)制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.92-8.86(1H，m)，8.28-8.24(1H，m)，7.20-7.12(3H，m)，4.75-4.62(1H，m)，3.70(3H，s)，3.27(2H，t，J＝6.4Hz)，2.85-2.72(2H，m)，2.68(2H，s)，2.47-2.35(2H，m)，2.05-1.92(4H，m)，1.92-1.76(2H，m)，1.71-1.61(2H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.32-1.17(2H，m)。
MS(ESI)m/z443(M+H+)。
步骤4.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸依据实施例3步骤5中所述程序，自1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸甲酯(实施例7的步骤3)制备标题化合物。
IR(KBr)v3293，2979，2937，2875，1732，1687，1610，1548，1479，1375，1298，1203，1099，761，704cm-1。
1H-NMR(CDCl3)δ9.02-8.95(1H，m)，8.26-8.22(1H，m)，7.22-7.12(3H，m)，4.76-4.62(1H，m)，3.33(2H，t，J＝6.2Hz)，3.10-3.00(2H，m)，2.77(2H，s)，2.58-2.48(2H，m)，2.44-2.24(2H，m)，1.92-1.79(2H，s)，1.99-1.80(5H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.50-1.33(3H，m)。
MS(ESI)m/z429(M+H+)。
C23H32N4O4的计算值C，64.46；H，7.53；N，13.07。实测值C，64.47；H，7.43；N，12.93。
合成1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸的另一路径叙述如下。
步骤5.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环丁烷羧酸乙酯依据实施例1步骤10中所述的程序，使用[亚环丁基(乙氧基)甲氧基](三甲基)硅烷(Chem.Commun.，1971，136-137)取代[甲氧基(四氢-4H-吡喃-4-亚基)甲氧基](三甲基)硅烷制备标题化合物。
MS(ESI)m/z355(M+H)+。
1H-NMR(CDCl3)δ4.55(1H，br)，4.17(2H，q，J＝7.1Hz)，2.96(2H，t，J＝6.3Hz)，2.76(2H，d，J＝11.4Hz)，2.48-2.33(2H，m)，2.05-1.80(6H，m)，1.43(9H，s)，1.25(3H，q，J＝7.1Hz)，1.40-1.05(7H，m)。
步骤6.1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环丁烷羧酸含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环丁烷羧酸乙酯(4.2克，11.9毫摩尔，步骤5)、2N NaOH(18毫升)及EtOH(12毫升)的混合物在50℃下加热4h。所得溶液在冰浴中冷却，并且添加2N HCl(约19毫升)直到混合物的pH约5-6为止。全部以CH2Cl2/iPrOH(3∶1，30毫升×3)萃取。合并的有机层经干燥(Na2SO4)且过滤。浓缩滤液获得3.8克(98％)黄色固态标题化合物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.08(1H，m)，3.20-3.10(2H，m)，3.08-2.99(2H，m)，2.91(2H，s)，2.60-2.38(4H，m)，2.35-2.16(2H，m)，2.05-1.76(6H，m)，1.65(1H，m)，1.44(9H，s)。
mp 160℃。
步骤7.1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸4-甲基苯磺酸酯在N2下于500毫升3-颈圆底烧瓶中，使含1-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]环丁烷羧酸(30克，92毫摩尔，步骤6)的THF(150毫升)混合物在室温下搅拌10分钟。在室温下于该悬浮液中添加含p-TsOH H2O(52.4克，276毫摩尔)的THF(150毫升)溶液。在该温度下搅拌10分钟后，使所得溶液在回流条件下加热3h。冷却至室温后，于1h内在播晶种的同时非常缓慢地添加Et3N(28.1毫升，202毫摩尔)。添加Et3N的过程中形成白色沉淀物。所得白色悬浮液在室温下搅拌6h，经过滤且所得的固体以THF(100毫升×2)洗涤，在50℃下干燥5h，获得35克(96％)白色粉末状标题化合物。
1H-NMR(D2O)δ7.40(2H，d，J＝7.2Hz)，7.07(2H，d，J＝7.2Hz)，3.28-3.00(4H，m)，2.80-2.57(4H，m)，2.09(3H，s)，2.18-1.97(2H，m)，1.85-1.58(8H，m)，1.36-1.12(2H，m)。
mp210℃。
步骤8.1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸使含1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(486毫克，2.8毫摩尔)及氯甲酸4-硝基苯酯(556毫克，2.8毫摩尔)的CH2Cl2(10毫升)混合物在室温下搅拌5分钟。于该混合物中缓慢添加Et3N(0.84毫升，6.1毫摩尔)，并且该混合物变成溶液。在室温下将该溶液添加于含1-{[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸4-甲基苯磺酸酯(1.1克，2.8毫摩尔，步骤7)的CH2Cl2(5毫升)混合物中。搅拌10分钟后，添加Et3N(0.38毫升，2.8毫摩尔)，并且使所得混合物在室温下搅拌2h。该混合物以0.5N HCl水溶液(10毫升)及饱和NaHCO3水溶液(10毫升)洗涤，接着浓缩有机层。在室温下于残留物中添加饱和NaHCO3水溶液(15毫升)及庚烷(15毫升)，并且使之在该温度下搅拌6h。发现固体且过滤该混合物。所得固体以H2O及庚烷洗涤。经干燥后获得白色固态粗的物质(1.0克，82％)。该粗物质(4.0克)自甲苯(36毫升)再结晶纯化，获得2.6克白色固态标题化合物(66％)。
mp.173℃。
PXRD(2θ(+/-0.1)10.8，16.9，18.9，26.5)。
实施例8N-({1-(2-氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺 步骤1.[{1-(2-苄基氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯在环境温度下，于含(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(38.8克，181毫摩尔)的N，N-二甲基甲酰胺(100毫升)搅拌溶液中添加3-氯新戊酸苄酯(14.2克，124毫摩尔，由3-氯新戊酰氯(25.6克，165毫摩尔)及苄基醇(19.6克，181毫摩尔)制备)、乙基二异丙基胺(64.0克，495毫摩尔)及碘化钠(27.1克，181毫摩尔)。所得混合物在120℃下搅拌14h。蒸发除去挥发性成分，并且所得残留物在硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脱进行色谱法，获得640毫克(1％)淡黄色油状标题化合物。
MS(ESI)m/z405(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ7.43-7.23(5H，m)，5.10(2H，s)，4.58(1H，brt)，2.95(2H，m)，2.71(2H，m)，2.46(2H，br s)，2.06(2H，m)，1.57-1.36(3H，m)，1.44(9H，s)，1.12(2H，m)，1.17(6H，s)。
步骤2.N-({1-(2-苄基氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺在室温下于含1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(J.Med.Chem.1999，42，2870-2880)(411毫克，2.33毫摩尔)及三乙胺(1.00毫升，7.17毫摩尔)的二氯甲烷(20.0毫升)搅拌混合物中添加氯甲酸4-硝基苯酯(470毫克，2.33毫摩尔)。所得混合物在室温下搅拌2h。于该混合物中添加含1-(2-苄基氧基羰基-2-甲基丙基)-4-氨基甲基哌啶盐酸盐{由浓缩[{1-(2-苄基氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯(实施例1的步骤1)(640毫克，1.49毫摩尔)及含10％HCl的MeOH(20.0毫升)的混合物制备}及三乙胺(1.00毫升，7.17毫摩尔)的二氯甲烷(5.00毫升)悬浮液。所得混合物在室温下搅拌13h且于混合物中添加0.5M NaOH水溶液。混合物以二氯甲烷萃取。萃取液以0.5M NaOH水溶液及盐水洗涤，以MgSO4干燥且真空浓缩。残留物经制备型薄层色谱法(硅胶，以二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脱)纯化，获得508毫克(63％)淡黄色油状标题化合物。
MS(ESI)m/z507(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ8.89(1H，br t，J＝5.7Hz)，8.26(1H，m)，7.43-7.05(8H，m)，5.10(2H，s)，4.70(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.26(2H，m)，2.75(2H，m)，2.48(2H，br s)，2.11(2H，m)，1.61(2H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.52(1H，m)，1.26(2H，m)，1.18(6H，s)。
步骤3.N-({1-(2-氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺在室温下及氢气中使含N-({1-(2-苄基氧基羰基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(实施例8的步骤2)(418毫克，0.825毫摩尔)及20％Pd(OH)2/C(58.0毫克)的甲醇(80毫升)混合物搅拌12h。在硅藻土垫上过滤催化剂，并且减压蒸发滤液。所得固体以己烷-CH2Cl2再结晶，获得285毫克(84％)无色固态标题化合物。
MS(ESI)m/z417(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.80(1H，br t，J＝5.8Hz)，8.05(1H，m)，7.42(1H，m)，7.20(1H，m)，7.12(1H，m)，4.65(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.20(2H，m)，2.85(2H，m)，2.44(2H，br s)，2.18(2H，m)，1.61(2H，m)，1.50(1H，m)，1.47(6H，d，J＝7.0Hz)，1.20(2H，m)，1.04(6H，s)。未发现相当于羧酸的讯号。
C22H32N4O4·0.1H2O的计算值C，63.17；H，7.76；N，13.39。实测值C，62.78；H，7.74；N，13.11。
实施例9N-({1-(2-四唑-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺 步骤1.2-苄基-α，α-二甲基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯在环境温度下于含α，α-二甲基四唑-5-乙酸，乙酯(J.Med.Chem.1996，39，2354-2366)(6.87克，37.3毫摩尔)及K2CO3(12.3克，89.0毫摩尔)的丙酮(200毫升)搅拌混合物中添加苄基溴(4.45毫升，37.4毫摩尔)。所得混合物在50℃下搅拌18h且减压浓缩。所得残留物在硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(10∶1)洗脱进行色谱法，获得6.14克(60％)无色油状标题化合物。
MS(ESI)m/z275(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.23(5H，m)，5.73(2H，s)，4.11(2H，q，J＝7.2Hz)，1.70(6H，s)，1.13(3H，t，J＝7.2Hz)。
步骤2.2-苄基-α，α-二甲基-2H-四唑-5-乙醛在-78℃下于含2-苄基-α，α-二甲基-2H-四唑-5-乙酸乙酯乙醛(实施例9的步骤1)(6.14克，22.4毫摩尔)的二氯甲烷(100毫升)搅拌混合物中添加DIBAL(甲苯中1.0M，50.0毫升，50.0毫摩尔)。所得混合物在-78℃下搅拌4h。于反应混合物中添加DIBAL(甲苯中1.0M，25.0毫升，25.0毫摩尔)，并且使所得混合物在-78℃下搅拌8h。于该混合物中添加2M HCl水溶液(100毫升)及饱和NH4Cl水溶液(20毫升)。分离有机层，以硫酸镁干燥且减压浓缩。所得残留物在硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(10∶1)洗脱进行色谱法，获得3.45克(67％)无色油状标题化合物。
MS(ESI)m/z231(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ9.68(1H，s)，7.45-7.23(5H，m)，5.74(2H，s)，1.56(6H，s)。
步骤3.[{1-(2-(2-苄基四唑)-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯于含2-苄基-α，α-二甲基-2H-四唑-5-乙醛(实施例9的步骤2)(1.28克，5.56毫摩尔)及(哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.40克，11.2毫摩尔)的四氢呋喃(300毫升)搅拌溶液中添加NaBH(OAc)3(5.90克，27.8毫摩尔)及AcOH(1.67克，27.8毫摩尔)。所得混合物在60℃下搅拌9小时且减压浓缩。于搅拌的残留油及固体中添加饱和NaHCO3水溶液及二氯甲烷。分离有机层，以硫酸镁干燥且减压浓缩。所得残留物在硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脱进行色谱法，获得830毫克(35％)无色油状标题化合物。
MS(ESI)m/z429(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.43-7.23(5H，m)，5.72(2H，s)，4.50(1H，brt)，2.91(2H，m)，2.58(2H，br s)，2.49(2H，m)，2.05(2H，m)，1.68-1.14(3H，m)，1.44(9H，s)，1.38(6H，s)，1.00(2H，m)。
步骤4.N-({1-(2-(2-苄基四唑)-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依据实施例8步骤2中所述程序，自1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮及[{1-(2-(2-苄基四唑)-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯(实施例9的步骤3)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z531(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ8.86(1H，br t，J＝5.7Hz)，8.26(1H，m)，7.43-7.08(8H，m)，5.72(2H，s)，4.70(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.21(2H，m)，2.59(2H，br s)，2.51(2H，m)，2.07(2H，m)，1.65-1.32(3H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.38(6H，s)，1.10(2H，m)。
步骤5.N-({1-(2-甲基-2-四唑丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依据实施例8步骤3中所述程序，自N-({1-(2-(2-苄基四唑)-2-甲基丙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(实施例9的步骤4)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z441(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.77(1H，br t，J＝5.9Hz)，8.04(1H，m)，7.40(1H，m)，7.18(1H，m)，7.11(1H，m)，4.63(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.15(2H，m)，2.54(2H，br s)，2.43(2H，m)，2.10(2H，m)，1.60-1.25(3H，m)，1.45(6H，d，J＝7.0Hz)，1.32(6H，s)，1.14(2H，m)。未发现相当于四唑的讯号。
C22H32N8O4·0.95H2O的计算值C，57.74；H，7.47；N，24.48。实测值C，58.03；H，7.43；N，24.10。
实施例10N-({1-(2-环戊基-2-四唑乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺
步骤1.α-环戊基四唑-5-乙酸，乙酯在环境温度下于含1-氰基-1-环戊烷羧酸乙酯(Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，9，369-374)(6.19克，37.0毫摩尔)的1，4-二烷(100毫升)搅拌溶液中添加nBu3SnN3(12.3克，37.0毫摩尔)。所得混合物回流15h且减压浓缩。于所得残留物中添加含4M HCl的1，4-二烷(50毫升)，并且减压浓缩。所得油状物以己烷洗涤二次，获得黄色油状标题化合物的粗产物，其未进一步纯化用于下一步骤中。
步骤2.2-苄基-α-环戊基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯依据实施例9的步骤1中所述程序，自α-环戊基四唑-5-乙酸，乙酯(实施例10的步骤1)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z301(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.23(5H，m)，5.73(2H，s)，4.11(2H，q，J＝7.1Hz)，2.55-2.35(4H，m)，1.88-1.56(4H，m)，1.12(3H，t，J＝7.1Hz)。
步骤3.2-苄基-α-环戊基-2H-四唑-5-乙醛依据实施例9的步骤2中所述程序，自2-苄基-α-环戊基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯(实施例10的步骤2)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z257(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ9.71(1H，s)，7.50-7.30(5H，m)，5.74(2H，s)，2.45-2.18(4H，m)，1.85-1.66(4H，m)。
步骤4.[{1-(2-(2-苄基四唑)-2-环戊基乙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯依据实施例9的步骤3中所述程序，自2-苄基-α-环戊基-2H-四唑-5-乙醛(实施例10的步骤3)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z455(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.43-7.23(5H，m)，5.72(2H，s)，4.67(1H，brt)，2.88(2H，m)，2.66(2H，br s)，2.48(2H，m)，2.24(2H，m)，1.93(2H，m)，1.83(2H，m)，1.78-1.48(4H，m)，1.43(9H，s)，1.37(2H，m)，1.23(1H，m)，0.94(2H，m)。
步骤5.N-({1-(2-苄基四唑)-2-环戊基乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依据实施例8的步骤2中所述程序，自1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮及[{1-(2-(2-苄基四唑)-2-环戊基乙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯(实施例10的步骤4)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z557(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ8.85(1H，br t，J＝5.5Hz)，8.26(1H，m)，7.43-7.08(8H，m)，5.73(2H，s)，4.70(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.19(2H，m)，2.70(2H，br s)，2.53(2H，m)，2.25(2H，m)，2.15-1.35(11H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.07(2H，m)。
步骤6.N-({1-(2-环戊基-2-四唑乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依据实施例8的步骤3中所述程序，自N-({1-(2-苄基四唑)-2-环戊基乙基}哌啶-4-基)甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(实施例10的步骤5)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z467(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.76(1H，br t，J＝5.9Hz)，8.04(1H，m)，7.40(1H，m)，7.18(1H，m)，7.11(1H，m)，4.64(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.14(2H，m)，2.63(2H，br s)，2.54(2H，m)，2.08(2H，m)，2.00(2H，m)，1.76(2H，m)，1.68-0.96(9H，m)，1.46(6H，d，J＝7.0Hz)。未发现相当于四唑的讯号。
C24H34N8O4·1.0H2O·0.5CH2Cl2的计算值C，55.83；H，7.08；N，21.26。实测值C，55.71；H，7.48；N，20.86。
实施例11N-({1-(2-环己基-2-四唑乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺 步骤1.α-环己基四唑-5-乙酸，乙酯依据实施例10的步骤1中所述程序，自1-氰基-1-环己烷羧酸，乙酯(Bioorg.Med.Chem.Left.1999，9，369-374)制备标题化合物。
步骤2.2-苄基-α-环己基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯依据实施例9的步骤1中所述程序，自α-环己基四唑-5-乙酸，乙酯(实施例11的步骤1)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z315(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.23(5H，m)，5.75(2H，s)，4.11(2H，q，J＝7.1Hz)，2.36-2.16(4H，m)，1.70-1.44(6H，m)，1.12(3H，t，J＝7.1Hz)。
步骤3.2-苄基-α-环己基-2H-四唑-5-乙醛依据实施例9的步骤2中所述程序，自2-苄基-α-环己基-2H-四唑-5-乙酸，乙酯(实施例11的步骤2)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z271(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ9.55(1H，s)，7.45-7.25(5H，m)，5.75(2H，s)，2.34-2.16(2H，m)，2.14-1.94(2H，m)，1.70-1.32(6H，m)。
步骤4.[{1-(2-(2-苄基四唑)-2-环己基乙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯依据实施例9的步骤3中所述程序，自2-苄基-α-环己基-2H-四唑-5-乙醛(实施例11的步骤3)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z469(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.43-7.23(5H，m)，5.74(2H，s)，4.55(1H，brt)，2.87(2H，m)，2.62-1.05(17H，m)，2.49(2H，br s)，1.43(9H，s)，0.93(2H，m)。
步骤5.N-({1-(2-(2-苄基四唑)-2-环己基乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依据实施例8的步骤2中所述程序，自1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮及[{1-(2-(2-苄基四唑)-2-环己基乙基)哌啶-4-基}甲基]氨基甲酸叔丁酯(实施例11的步骤4)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z571(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ8.86(1H，br t，J＝5.7Hz)，8.26(1H，m)，7.43-7.08(8H，m)，5.73(2H，s)，4.70(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.18(2H，m)，2.51(2H，br s)，2.45-1.15(17H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.04(2H，m)。
步骤6.N-({1-(2-环己基-2-四唑乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依据实施例8的步骤3中所述程序，自N-({1-(2-(2-苄基四唑)-2-环己基乙基)哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(实施例11的步骤5)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z481(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)δ8.76(1H，br t，J＝5.9Hz)，8.04(1H，m)，7.41(1H，m)，7.18(1H，m)，7.12(1H，m)，4.64(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.14(2H，m)，2.38(2H，br s)，2.33-2.10(4H，m)，1.98(2H，m)，1.65-0.96(13H，m)，1.46(6H，d，J＝7.0Hz)。未发现相当于四唑的讯号。
实施例121-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环己烷羧酸盐酸盐
步骤1.1-(4-氧代哌啶-1-基)环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤3中所示的方法，使用1-氨基环己烷羧酸叔丁酯(Kenner等人，J.Chem.Soc.，.1965，6239，6243)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z282(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.92(4H，t，J＝5.9Hz)，2.41(4H，t，J＝6.0Hz)，2.01-1.89(2H，m)，1.76-1.62(4H，m)，1.45(9H，s)，1.53-1.33(4H，m)。
步骤2.1-(4-氰基哌啶-1-基)环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤4中所示的方法，使用1-(4-氧代哌啶-1-基)环己烷羧酸叔丁酯制备标题化合物。
MS(ESI)m/z293(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.94-2.85(2H，m)，2.67-2.56(1H，m)，2.55-2.42(2H，m)，1.96-1.72(6H，m)，1.70-1.23(8H，m)，1.48(9H，s)。
步骤3.1-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤5中所示的方法，使用1-(4-氰基哌啶-1-基)环己烷羧酸叔丁酯制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.07-3.18(2H，m)，2.55(2H，d，J＝6.4Hz)，2.15-1.94(4H，m)，1.47(9H，s)，1.76-1.19(13H，m)，1.19-1.03(2H，m)。
MS(ESI)m/z297(M+H+)。
步骤4.1-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环己烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤6中所示的方法，使用1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮及1-(4-氰基哌啶-1-基)环己烷羧酸叔丁酯制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.97-8.86(1H，m)，8.29-8.24(1H，m)，7.21-7.11(3H，m)，4.78-4.64(1H，m)，3.29(2H，t，J＝6.2Hz)，3.19-3.09(2H，m)，2.16-2.05(2H，m)，2.04-1.93(2H，m)，1.83-1.73(2H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)，1.46(9H，s)，1.70-1.39(2H，m)，1.38-1.16(7H，m)。
MS(ESI)m/z499(M+H+)。
步骤5.1-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环己烷羧酸盐酸盐在室温下于含1-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环己烷羧酸叔丁酯(400毫克，0.802毫摩尔)的二氯甲烷(5毫升)搅拌溶液中添加三氟乙酸(5毫升，65.2毫摩尔)。12h后，减压除去挥发性成分。于残留物中添加含4N HCl的二烷(5.0毫升)，并且搅拌10分钟。接着，减压除去挥发物。残留物在二乙醚/乙醇中沉淀，获得370毫克无色粉末状标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.94-8.82(1H，m)，7.45(1H，d，J＝7.9Hz)，7.27-7.10(2H，m)，4.73-4.61(1H，m)，3.71-3.19(7H，m)，2.98-2.81(2H，m)，2.38-2.26(2H，m)，1.98-1.53(10H，m)，1.49(6H，d，J＝7.0Hz)，1.38-1.03(2H，m)。
MS(ESI)m/z443(M+H+)。
C24H35N4O4·2H2O的计算值C，55.97；H，7.63；N，10.88。实测值C，55.61；H，7.51；N，10.48。
实施例132-乙基-2-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}丁酸
步骤1.2-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]-2-乙基丁酸甲酯用类似于实施例7的步骤1中所示的方法，使用2-乙基-2-甲酰基丁酸甲酯(Okano，K.；Morimoto，T.；Sekiya，M.Journal of theChemical Society，Chemical Communications，1985，3，119)制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ4.62-4.48(1H，br)，3.65(3H，s)，3.01-2.93(2H，m)，2.73-2.65(2H，m)，2.46(2H，s)，2.13-2.02(2H，m)，1.73-1.50(6H，m)，1.44(9H，s)，1.28-1.10(3H，m)，0.76(6H，t，J＝7.5Hz)。
MS(ESI)m/z357(M+H+)。
步骤2.2-乙基-2-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}丁酸甲酯依据实施例8的步骤2中所述程序，自1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮及2-[(4-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}哌啶-1-基)甲基]-2-乙基丁酸甲酯(实施例13的步骤1)制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.92-8.86(1H，m)，8.28-8.23(1H，m)，7.20-7.12(3H，m)，4.77-4.61(1H，m)，3.65(3H，s)，3.27(2H，t，J＝6.4Hz)，2.75-2.66(2H，m)，2.47(2H，s)，2.16-2.05(2H，m)，1.72-1.49(10H，m)，1.38-1.21(5H，m)，0.76(6H，d，J＝7.5Hz)。
MS(ESI)m/z459(M+H+)。
步骤3.2-乙基-2-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}丁酸依据实施例3的步骤5中所述程序，自2-乙基-2-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}丁酸甲酯(实施例13的步骤3)制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.03-8.94(1H，m)，8.27-8.21(1H，m)，7.20-7.12(3H，m)，4.76-4.63(1H，m)，3.34(2H，t，J＝6.2Hz)，3.16-3.05(2H，m)，2.60(2H，s)，2.55-2.38(2H，m)，1.94-1.38(2H，m)，1.80-1.38(15H，m)，0.88(6H，d，J＝7.5Hz)。
MS(ESI)m/z445(M+H+)。
C24H37N4O4Cl·0.2H2O的计算值59.48；H，7.78；N，11.56。实测值C，59.38；H，7.74；N，11.29。
实施例141-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环戊烷羧酸盐酸盐 步骤1.1-(4-氧代哌啶-1-基)环戊烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤3中所示的方法，使用1-氨基环戊烷羧酸叔丁酯(WO 9105796)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z268(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.93(4H，t，J＝5.9Hz)，2.41(4H，t，J＝6.0Hz)，2.39-2.26(2H，m)，1.85-1.54(8H，m)，1.46(9H，s)。
步骤2.1-(4-氰基哌啶-1-基)环戊烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤4中所示的方法，使用1-(4-氧代哌啶-1-基)环戊烷羧酸叔丁酯制备标题化合物。
MS(ESI)m/z279(M+H+)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.94-2.82(2H，m)，2.67-2.49(3H，m)，2.33-2.21(2H，m)，1.96-1.72(5H，m)，1.70-1.40(6H，m)，1.48(9H，s)。
步骤3.1-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]环戊烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤5中所示的方法，使用1-(4-氰基哌啶-1-基)环戊烷羧酸叔丁酯制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.07-2.95(2H，m)，2.60-2.52(2H，m)，2.41-1.19(4H，m)，1.76-1.62(4H，m)，1.61-1.40(12H，m)，1.19-1.03(2H，m)。
MS(ESI)m/z283(M+H+)。
步骤4.1-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环戊烷羧酸叔丁酯用类似于实施例1步骤6中所示的方法，使用1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮及1-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基]环戊烷羧酸叔丁酯制备标题化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ8.96-8.84(1H，m)，8.29-8.22(1H，m)，7.21-7.11(3H，m)，4.77-4.56(1H，m)，3.29(2H，t，J＝6.2Hz)，3.07-2.94(2H，m)，2.37-2.17(4H，m)，1.82-1.63(6H，m)，1.56(6H，d，J＝7.1Hz)，1.46(9H，s)，1.61-1.49(2H，m)，1.38-1.16(3H，m)。
MS(ESI)m/z485(M+H+)。
步骤5.1-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环戊烷羧酸盐酸盐用类似于实施例12的步骤5中所示方法，使用1-[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]环戊烷羧酸叔丁酯制备标题化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ8.91-8.82(1H，m)，8.07(1H，d，J＝7.5Hz)，7.45(1H，d，J＝7.7Hz)，7.26-7.09(2H，m)，4.74-4.56(1H，m)，3.60-3.00(6H，m)，2.26-2.10(4H，m)，1.96-1.57(9H，m)，1.49(6H，d，J＝7.0Hz)。
MS(ESI)m/z429(M+H+)。
C23H33N4O4Cl的计算值C，59.41；H，7.15；N，12.05。实测值C，59.14；H，7.22；N，11.82。
实施例15N-({1-[(4-氧基羰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺
步骤1.四氢吡喃-4-基-羧酸苄酯使含四氢吡喃-4-基-羧酸(910毫克，6.99毫摩尔)及SOCl2(5.0毫升)的混合物在60℃下搅拌1h，并且真空浓缩。在环境温度下于残留物中添加苄基醇(1.52克，14.1毫摩尔)及四氢呋喃(5.0毫升)。使所得混合物在环境温度下搅拌13h，并且真空浓缩。残留物经制备性薄层色谱法(硅胶，以己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脱)纯化，获得1.08克(70％)淡黄色油状标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.25(5H，m)，5.13(2H，s)，3.95(2H，m)，3.42(2H，m)，2.59(1H，m)，1.94-1.68(4H，m)。
步骤2.4-碘甲基四氢吡喃-4-基-羧酸苄酯依据实施例3的步骤1中所述程序，自四氢吡喃-4-基-羧酸苄酯(实施例15的步骤1)制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.25(5H，m)，5.19(2H，s)，3.80(2H，m)，3.47(2H，m)，3.31(2H，s)，2.18(2H，m)，1.56(2H，m)。
步骤3.N-苯甲酰基-4-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氟哌啶使含N-苯甲酰基-4-氨基甲基-4-氟哌啶(J.Med.Chem.1999，42，1648-1660)(3.54克，15.0毫摩尔)及二碳酸二叔丁酯(4.91克，22.5毫摩尔)的甲醇(80毫升)混合物在室温下搅拌15h，并且真空浓缩。所得残留物在硅胶柱上以己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脱进行色谱法，获得4.52克(89％)无色油状标题化合物。
MS(ESI)m/z337(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.55-7.25(5H，m)，5.16(1H，br t，J＝6.3Hz)，4.51(1H，m)，3.62(1H，m)，3.55-3.00(4H，m)，2.10-1.25(4H，m)，1.43(9H，s)。
步骤4.4-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氟哌啶使含N-苯甲酰基-4-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氟哌啶(实施例15的步骤3)(4.42克，13.1毫摩尔)、NaOH(2.62克，65.5毫摩尔)、H2O(9.00毫升)及乙醇(90.0毫升)的混合物回流15h，并且真空浓缩。向所得残留物中添加水及氯仿。分离有机层，以硫酸镁干燥且减压浓缩。所得固体以己烷-CH2Cl2再结晶，获得1.77克(58％)无色固态标题化合物。
MS(ESI)m/z233(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ4.93(1H，m)，3.30(2H，dd，J＝21.5，6.3Hz)，2.91(4H，m)，1.88-1.34(4H，m)，1.45(9H，s)，未发现相当于氨基的讯号。
步骤5.({1-[(4-苄基氧基羰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)氨基甲酸叔丁酯依据实施例3的步骤2中所述程序，自4-叔丁氧基羰基氨基甲基-4-氟哌啶(实施例15的步骤4)及4-碘甲基四氢吡喃-4-基-羧酸苄酯(实施例15的步骤2)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z465(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)δ7.45-7.25(5H，m)，5.16(2H，s)，4.78(1H，brt)，3.80(2H，m)，3.46(2H，m)，3.23(2H，dd，J＝21.9，6.3Hz)，2.64-2.32(4H，m)，2.52(2H，s)，2.08(2H，m)，1.90-1.35(6H，m)，1.45(9H，s)。
步骤6.N-({1-[(4-苄基氧基羰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依据实施例1的步骤6中所述程序，自1-异丙基-1，3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮及({1-[(4-苄基氧基羰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)氨基甲酸叔丁酯(实施例15的步骤5)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z567(M+H+)。
1H NMR(CDCl3)δ9.08(1H，br t，J＝6.0Hz)，8.25(1H，m)，7.46-7.06(8H，m)，5.16(2H，s)，4.71(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.80(2H，m)，3.54(2H，dd，J＝20.9，6.0Hz)，3.46(2H，m)，2.65-2.36(4H，m)，2.53(2H，br s)，2.08(2H，m)，1.88-1.44(6H，m)，1.56(6H，d，J＝7.0Hz)。
步骤7.N-({1-[(4-氧基羰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺依据实施例1的步骤3中所述程序，自N-({1-[(4-苄基氧基羰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]-4-氟哌啶-4-基}甲基)-3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-甲酰胺(实施例15的步骤6)制备标题化合物。
MS(ESI)m/z477(M+H)+。
1H NMR(CD3OD)δ7.93(1H，m)，7.12(1H，m)，7.02(1H，m)，6.93(1H，m)，4.49(1H，七重峰，J＝7.0Hz)，3.65-3.36(6H，m)，3.15-2.82(4H，m)，2.80(2H，br s)，1.98-1.70(6H，m)，1.35(6H，d，J＝7.0Hz)，1.34(2H，m)。未发现相当于酰胺及羧酸的讯号。
所有出版物，包括(但不限于)本申请中所引用的颁发专利、专利申请及期刊论文各以其全文并入本文供参考。
虽然上文已参考公开的实施方案描述了本发明，但本领域的技术人员可轻易了解详细的特定实验仅是本发明的举例说明。应了解，可以在不偏离本发明的精神下进行各种改进。因此，仅用下面的权利要求限定本发明。
权利要求
1.下式的化合物， 或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中A为具有1至4个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至4个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3-至6-元环；R1为异丙基或环戊基；R2为氢原子、卤素原子或羟基；R3为羧基、四唑基、5-氧代-1，2，4-二唑-3-基或5-氧代-1，2，4-噻二唑-3-基；并且m为整数1或2。
2.根据权利要求1的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基或四唑基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至2个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3-至6-元环；并且m为整数2。
3.根据权利要求1的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中R1为异丙基；R2为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为具有1至2个碳原子的亚烷基，该亚烷基被2个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的偕取代基取代，其中该偕取代基可与其连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3-至6-元环；并且m为整数2。
4.根据权利要求1的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中R1为异丙基；R2为氢原子；R3为羧基或四唑基；A为 并且m为整数2。
5.根据权利要求4的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中R1为异丙基；R2为氢原子、氟原子或羟基；R3为羧基；A为 并且m为整数2。
6.根据权利要求1的化合物，该化合物选自4-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环戊烷羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丙烷羧酸；1-{[4-羟基-4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环己烷羧酸；1-{[4-({[(3-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)羰基]氨基}甲基)哌啶-1-基]甲基}环丁烷羧酸；或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
7.药物组合物，其包含根据权利要求1至6中任一项的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，以及药学上可接受的载体。
8.根据权利要求7的药物组合物，其进一步包含另一种药理学活性剂。
9.治疗包括人类的哺乳动物中由5-HT4受体活性介导的疾病状况的方法，它包括给予需要该治疗的哺乳动物治疗有效量的根据权利要求1至6中任一项的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
10.根据权利要求9的方法，其中所述疾病状况是胃食管反流病、胃肠疾病、胃动力障碍、非溃疡性消化不良、功能性消化不良、肠易激综合征(IBS)、便秘、消化不良、食管炎、胃食管疾病、恶心、中枢神经系统疾病、阿尔兹海默氏病、认知障碍、呕吐、偏头痛、神经学疾病、疼痛、心血管疾病、心力衰竭、心律失常、糖尿病或呼吸暂停综合征。
11.下式的化合物， 或其盐，其中R2为氢原子、羟基或卤素原子；R6为氢原子或氨基保护基；Y为具有1至4个碳原子的烷氧基、具有2至8个碳原子的二烷基氨基、咪唑基、邻苯二甲酰亚氨基、琥珀酰亚氨基或磺酰基；并且m为1或2。
12.下式的化合物， 或其盐，其中A为具有1至4个碳原子的亚烷基，该亚烷基未被取代或被1至4个独立地选自由卤素原子、具有1至4个碳原子的烷基、具有1至4个碳原子的羟基-烷基和具有2至6个碳原子的烷氧基-烷基组成的组的取代基取代，其中任意2个非卤素取代基可与它们连接的碳原子一起形成任选含至少一个选自N、O及S的杂原子的3-至6-元环；R2为氢原子、羟基或卤素原子；R4为羟基或羧基保护基；R6为氢原子或氨基保护基；并且m为1或2。
全文摘要
本发明涉及式(I)的化合物，其中R
文档编号C07D405/14GK1968946SQ200580019734
公开日2007年5月23日 申请日期2005年6月1日 优先权日2004年6月15日
发明者安藤幸司, 井口聪, 村濑德晃, 村田好德, 沼田丰治, 曾根大纪, 内田力, 上木达生 申请人:辉瑞大药厂