晶体和无定形伊马替尼碱、甲磺酸伊马替尼及其制备方法

专利名称：：晶体和无定形伊马替尼碱、甲磺酸伊马替尼及其制备方法
技术领域：
：本发明分别涉及晶体伊马替尼碱、不含去甲基伊马替尼的伊马替尼、不含甲磺酸去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼，其制备方法及其药用组合物。
背景技术：
：甲磺酸伊马替尼，即曱磺酸4-(4-曱基哌嗪-l-基曱基)-N-[4-曱基-3-[(4-吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基]苯基]苯甲酰胺，是具有下面化学结构的化合物，是蛋白质-酪氨酸激酶抑制剂，特别可用于治疗各种癌症，也可用于治疗动脉硬化症、血栓症、术后再狭窄或纤维症。因此，甲磺酸伊马替尼还可用于治疗非恶性病。甲磺酸伊马替尼通常以适当的盐的形式口服给药，例如，以甲磺酸伊马替尼的形式，在美国有市售，商品名为Novartis的Gleevec。伊马替尼碱是制备例如甲磺酸伊马替尼的伊马替尼盐的关键中间体。美国专利No.5521184、国际申请WO03/066613,04/108699,04/074502,06/071130和美国申请04/0248918,06/0149061,06/0223817，描述了伊马替尼碱的合成，通过柱色语法或从不同溶剂中结晶进行的分离纯化。通过使伊马替尼碱从正丁醇和乙酸丁酯、乙酸乙酯、水的混合物中，或水和有机溶剂的混合物中析出而进行分离。描述于上述参考之中的分离的晶型伊马替尼碱的特征在于PXRD在6.0,17.2,18.1,18.7,19.8,20.9,23.8,24.3和25.2士0.2。26处具有主峰，称为I型。特别地，这种所述分离包括"将伊马替尼碱与正丁醇混合，把混合物加热至9rC，直至获得澄清的溶液。使溶液冷却至室温，所得晶体用2ml的冷正丁醇洗涤，过滤后在减压下干燥。"相同方法的报道也见于以下溶剂甲苯、环己烷、氯仿、二氯甲烷、乙腈、甲醇、曱基-乙基-酮、甲基-异丁基-酮、异丙醇和乙酸乙酯；其中获得澄清溶液的温度有所不同。此外，使用曱醇或其与氯仿的混合物进行柱色谱法。在用结晶法纯化时，溶剂的选择可以是正丁醇、甲苯及其它。本发明涉及伊马替尼碱的固态物理性质。通过控制获得固体形式伊马替尼碱的条件，可以影响这些性质。固态物理性质包括，例如，制粉固体的流动性。流动性影响原料在被加工成药品时处理的容易度。如果制粉化合物的颗粒不能容易地相互流过，则制剂专家在开发片剂或胶嚢制剂时必须要考虑到这个事实，这可能使助流剂的使用成为必要，例如胶状二氧化硅、滑石粉、淀粉或三碱式磷酸钙。药用化合物的另一个重要固态性质，是其在水性液体中的溶解速率。活性成分在患者胃液中的溶解速率，可产生治疗效果，因为它给出了口服给药的活性成分到达患者血流的速率上限。在糖浆、酏剂，及其它液体药物的配方时，也要考虑溶解速率。化合物的固态形式也可影响其压制行为及其贮藏稳定性。这些实际的物质特性受单位晶格中分子构型和定向的影响，其决定了物质特定的多晶型。多晶型可产生不同于无定型物质或另一多晶型的热行为。热行为在实验室可用例如毛细管熔点、热重分析法(TGA)和差示扫描量热法(DSC)的技术进行测定，并且可用于区分不同的晶型。特定的多晶型也可产生独特的光谱性质，可用粉末X射线结晶法(PXRD)、固态"C-NMR光镨法和红外光语法进行检测。能构成多晶型的药用化合物的最重要物理性质之一，是其在水性溶液中的溶解度，特别是在患者胃液中的溶解度。其它的重要性质涉及加工形成药物剂型的容易度，因为粉末或颗粒形式的易流动性和表面性质，决定了晶体形态在被压制成片剂时是否会相互粘合。此外，碱可再被转化成甲磺酸盐，通过从碱、曱磺酸和溶剂组成的反应混合物中析出而获分离，如国际申请WO99/03854,WO2005/077933,WO2005/095379,WO2004/106326,WO2006/054314,WO2006/024863,WO2006/048890,US2006/0030568,WO2007/023182和美国专利No.6,894,051中所述。如任何合成化合物一样，甲磺酸伊马替尼可以包含外来的化合物或杂质，例如曱磺酸去曱基伊马替尼。甲磺酸去甲基伊马替尼及其制备方法，见述于美国专利No.7081532。甲磺酸伊马替尼或任何活性药用成分("API")中的杂质，是不合需要的，在极端例子中，可能还会危及使用含API剂型治疗的患者。生产工艺中产生的API的纯度，对于商业化至关重要。美国食品药品监督管理局("FDA，，)要求将工艺杂质控制在规定限度以下。例如在供API生产商使用的ICHQ7A指南中，FDA规定了可用原料的质量，和可接受的工艺条件，例如温度、压力、时间和化学计量比，包括纯化步骤，例如结晶、蒸馏和液-液萃取。见ICHGoodManufacturingPracticeGuideforActivePharmaceuticalIngredients(活性药用成分的GMP指南)，Q7A,CurrentStep4Version(现行第4版)(11月10日，2000)。化学反应的产物很少是有足够纯度符合药物标准的单一化合物。反应副产物(sideproducts,by-products)和反应中使用的辅助试剂，在大多数情况下，也会存在于产物中。在API生产的某些阶段，必须进行纯度分析，通常用高效液相法("HPLC，，)或薄层色镨法("TLC"),以确定是否适于继续生产，并最终适用于药品。FDA要求API尽可能不含杂质，从而尽可能安全地供临床使用。例如，FDA建议某些杂质的限量小于0.1%。见ICHGoodManufacturingPracticeGuideforActivePharmaceuticalIngredients(活性药用成分的GMP指南)，Q7A,CurrentStep4Version(现行第4版)(11月10曰,2000)。一般而言，副产物(sideproducts,by-products)和辅助试剂(统称为"杂质")，可用光谱法和/或其它物理方法鉴别，再与峰位(例如色谱图中)，或TLC板上的点相关联。见Strobel,H.A.，等，CHEMICALINSTRUMENTATION:ASYSTEMATICAPPROACH(化学仪器系统方法)，953,第三版.(Wiley&Sons,NewYork1989)。一旦某特定杂质已与峰位相关联，则样品中的该杂质可通过其在色谱图上的相对位置来鉴别，而色镨图上的位置是通过检测器测得的从上柱进样到杂质洗脱之间的时间(分钟)。色谱图上的相对位置被称作"保留时间"。如本领域技术人员所周知，对化学结构和合成路径的理解，和对影响终产品中杂质含量的参数识别，可极大地促进工艺杂质的处理。新的多晶型伊马替尼碱的发现，通过生产具有改良特性(例如流动性和溶解度)的晶型伊马替尼碱，为改善活性药用成分(API)-甲磺酸伊马替尼的合成性能提供了新的机会。因此，本
技术领域：
需要多晶型的伊马替尼碱。此外，有益的是，提供不含去甲基伊马替尼的伊马替尼，和不含甲磺酸去曱基伊马替尼的曱磺酸伊马替尼，及其制备方法。发明概述在一个实施方式中，本发明包括晶体伊马替尼碱，其特征在于选自以下的数据粉末XRD图具有选自以下峰的任意5个峰，在约6.4，8.1,10.2，12.8，16.1,19.4,20.4,21.7,22.1,25.8和26.7±0.2。20处的峰；固态13CNMR光镨在约159.6,146.7,136.8和132.4±0.2ppm处具有信号；在固态13CNMR光谱中，化学位移100至180ppm范围内表示最低化学位移的信号与另一信号的化学位移差为约51.2,38.3,28.4和24.0±0.1ppm，及其组合。在另一个实施方式中，本发明包括晶体伊马替尼碱，其特征在于选自以下的数据粉末XRD如图3所示，固态"CNMR光谱如图1所示，且固态。CNMR光谱如图2所示。在另一个实施方式中，本发明包括上述晶体伊马替尼碱的制备方法，其包括使伊马替尼磁/人含吡啶的混合物中结晶。在一个实施方式中，本发明包括无定型伊马替尼碱。无定型伊马替尼碱的表面积大，溶解速率比晶体伊马替尼碱快。无定型伊马替尼碱的这些性质，在随后与甲磺酸反应制备甲磺酸伊马替尼中具备优势。在另一个实施方式中，本发明包括无定型伊马替尼碱的制备方法，其包括使伊马替尼^成的1，4-二氧杂环己烷溶液冻干。在另一个实施方式中，本发明包括伊马替尼盐的制备方法，其包括制备本发明任一形式的伊马替尼碱，并将其转化为伊马替尼盐。在一个实施方式中，本发明包括本发明任一形式的伊马替尼碱的用途，用于制备伊马替尼盐。在另一个实施方式中，本发明包括下式的伊马替尼其含小于约0.09。/。HPLC面积百分比单位的下式的去甲基伊马替尼在一个实施方式中，本发明包括含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的去甲基伊马替尼的伊马替尼碱制备方法，其包括测定式n去甲基杂质选择式I化合物批次，其含有小于约0.15%HPLC面积百分比单位的式II去甲基杂质；和制备含所选批次式I化合物的伊马替尼碱。在一个实施方式中，本发明包括含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的去甲基伊马替尼的伊马替尼制备方法，其包括a)提供式I化合物其含小于约0.15%HPLC面积百分比单位的式II去甲基化合物在至少一批式I化合物中的量b)使其与式III的胺反应16得到含小于约0.09。/。HPLC面积百分比单位的去甲基伊马替尼的伊马替尼，且任选地c)使伊马替尼碱结晶，得到含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的去甲基伊马替尼的晶体伊马替尼。在另一个实施方式中，本发明包括含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的甲磺酸去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼的制备方法，其包括测定至少一批伊马替尼中去甲基伊马替尼的量，选择含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的去甲基伊马替尼的伊马替尼批次；制备包含所选批次伊马替尼碱的曱磺酸伊马替尼。在另一个实施方式中，本发明包括下式的曱磺酸伊马替尼其含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的下式的甲磺酸去甲基伊马替尼在另一个实施方式中，本发明包括一种药用组合物，其包括含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的甲磺酸去甲基伊马替尼的曱磺酸伊马替尼和至少一种药学上可接受赋形剂。在另一个实施方式中，本发明包括药用组合物的制备方法，其包括将含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的甲磺酸去曱基伊马替尼的曱磺酸伊马替尼与药学上可接受的赋形剂混合。在一个实施方式中，本发明包括含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的曱磺酸去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼的用途，用于生产治疗各种癌症、动脉硬化症、血栓症、术后再狭窄或纤维症的药用组合物。在另一个实施方式中，本发明包括式IV的去甲基化合物在另一个实施方式中，本发明包括式IV的去甲基化合物的制备方法，其包括使下式的去曱基伊马替尼其中，X是离去基，HA是酸，且n为0、l或2。在一个实施方式中，本发明包括确定伊马替尼中式IV去甲基化合物是否存在的方法，其包括用式IV去甲基化合物作为基准标记进行HPLC或TLC。在另一个实施方式中，本发明包括确定含IV去甲基化合物和伊马替尼的样品中式IV去甲基化合物含量的方法，其包括用式IV去甲基化合物作为基准标记进行HPLC。附图简述图l为本发明晶体伊马替尼^5咸的固态"CNMR光谱。图2为上述晶体伊马替尼碱在100至180ppm范围内的固态13CNMR光谱。图3为上述晶体伊马替尼碱的粉末X射线衍射图。图4为上述晶体伊马替尼碱的DSC曲线。图5为无定型伊马替尼^5威的粉末X射线衍射图。图6为式IV去甲基杂质的1^^01(0]^80-(16)光谱。图7为式IV去甲基杂质的"CNMR(DMS0-d6)光谱。图8为式IV去曱基杂质的IR光谱。图9为式IV去甲基杂质的MS光谱。发明详述如本文所用的，术语"伊马替尼"是指下式的伊马替尼碱。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>如本文所用的，术语"化学位移差"是指同一固态"CNMR光谱上对照信号和另一信号之间的化学位移之差。在本专利申请中，通过从90至180ppm范围的同一固态NMR光谱中另一(观察到的)信号的化学位移值，减去90至180ppm范围的固态13CNMR光谱中表示最低化学位移(对照信号)的信号的化学位移值，来计算化学位移差。这些化学位移差是用于检测物质的，例如本发明的伊马替尼，以补偿NMR光谱中依赖仪器、温度和所用校验方法，观察到固态NMR"指玟"位移的现象。固态NMR"指紋"(在某些位置上具有信号)中的这个位移，使得尽管单个信号的化学位移已改变，但是各个信号之间的化学位移差保持不变。本发明包括晶体伊马替尼碱，其特征在于选自以下至少其一的数据粉末XRD图具有选自以下峰的任意5个峰，在约6.4，8.1,10.2,12.8，16.1，19.4,20.4，21.7，22.1，25.8和26.7±0.2。29处的峰；固态13CNMR光谱在约159.6,146.7，136.8和132.4±0.2ppm处具有信号;在固态13CNMR光语中，化学位移100至180ppm范围内表示最低化学位移的信号与另一信号的化学位移差为约51.2,38.3,28.4和24.0±0.1ppm。在100至180ppm的化学位移范围内表示最低化学位移的信号，通常在约108.4±0.2ppm处。该晶型的特征还在于选自以下的数据粉末XRD如图3所示，固态"CNMR光谱如图1所示，且固态"CNMR光谱如图2所示。该晶体伊马替尼碱的特征还在于选自以下的数据粉末XRD图在约8.1,10.2,12.8，16.1和19.4±0.2。26处具有峰；粉末XRD图在约6.4,8.1,10.2,19.4,20.4和25.8±0.2。29处具有峰；粉末XRD图在约17.3,20.4,21.1和25.8士0.2。20处具有峰；粉末XRD图在约6.4,21.7,22.1和26.7士0.2。26处具有峰；固态13CNMR光谱在约125.8和108.4±0.2ppm处具有信号；DSC曲线具有2个峰，第一个峰是由于溶剂化物脱溶剂产生的97.6。C处的吸热峰，第二个峰是由于脱溶剂化产物融化产生的210.5。C处的吸热峰；且DSC曲线如图4所示。本发明的晶体伊马替尼碱是伊马替尼碱的吡啶溶剂化物，优选地，是半吡啶溶剂化物。用气相色谱(GC)测得的吡啶含量为约7%(w/w)所述晶体伊马替尼碱，含有小于约20%的晶型I伊马替尼碱，优选地，小于约10%的晶型I，最优选地，小于约5%的晶型I,用PXRD或固态"CNMR测定。通常，上述晶型中的晶型I伊马替尼石成含量用%重量测得。晶型I的含量，可以用例如PXRD或固态13CNMR测定。当用PXRD测定时，可通过使用选自以下的晶型I峰来测定晶型I的含量6.0,9.5,14.0,17.1,18.1,18.6,24.2和29.1±0.2。29。当用固态13CNMR测定时，可通过使用选自以下的信号来测定晶型I的含量约105.4,122.2,124.2,129.1,140.0,142.4,148.5,150.7,158.4和162.2ppm±0.2ppm。所述晶体伊马替尼碱，可依照2007年10月26日的共同申请no.11/...，...(律师代理案件号No.13150/A400USl)中所公开的方法来制备，其通过引用而并入本文。该方法包括使式III的胺，与式V的4-[(4-曱基-l-哌嗪基)甲基]苯甲酰基衍生物和吡啶反应，每克式III化合物的吡啶用量为约2至约10，优选约4至约7，最优选约5至约6体积，并回收伊马替尼^4;其中X是选自Cl、Br的离去基，优选为Cl;其中R是H或烷基，优选为H;n=0，1或2，优选n=0或2;且HB是酸，优选HB是HC1、HI或HBr,更优选地，HB是HC1。回收伊马替尼碱，得到本发明的晶体伊马替尼碱。烷基优选为d-C6烷基。本发明的晶体伊马替尼碱的制备方法，还包括使伊马替尼石威从含吡咬的混合物中结晶。含吡啶的混合物可以包括溶剂、抗-溶剂和吡咬。进行结晶的方法包括制备包含伊马替尼碱或其盐、吡啶和所述溶剂的溶液，并加入抗-溶剂，得到所述晶体伊马替尼碱的沉淀；其中在使用伊马替尼盐时，混合物还包括其它的碱。通常，所述溶剂包括能溶解吡啶的溶剂，优选为水、水互溶性有机溶剂或其混合物。优选地，水互溶性有机溶剂选自二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、四氢呋喃、醇、丙酮、乙腈、二氧杂环己烷、二甲基亚砜，及其混合物。优选地，醇是d-3醇，更优选为甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇。更优选地，溶剂是二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、四氬呋喃，或水，最优选为水。其它的碱可以是有机碱或无机碱。优选地，有机石威是叔胺，例如二异丙基乙基胺或三乙胺。叔胺通常为式(N)R3，其中每个R独立选自C,-C6烷基。优选地，无机碱是氢氧化钠或氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾或氨。更优选地，碱是氨。通过加热伊马替尼碱或盐、所述溶剂、吡咬和任选其它碱的组合物而获得溶液。优选地，将组合物加热至约5'C至约7(TC，更优选地，至约4CTC至约50。C的温度。伊马替尼盐包括但不限于盐酸伊马替尼或曱磺酸伊马替尼。任选地，在使用伊马替尼盐时，该方法可不用加热。通常，溶液中吡啶的存在量为每克伊马替尼碱或盐约2至约10体积。溶液的特征还在于每体积溶液的吡啶用量为约50%至约70Q/。体积。在本发明的方法中，向溶液中加入抗-溶剂可得到所述混合物。优选地，混合物为浆体。抗-溶剂可以是相同或不同的溶剂。优选地，抗-溶剂是水。通常，浆体中吡啶的存在量为每总体积合并的溶剂和抗-溶剂约5%至约30%体积，更优选地，每总体积溶剂和抗-溶剂约10%至约20%体积。结晶方法还可包括使浆体冷却，并维持冷却的浆体，以增加所述晶体伊马替尼碱的产率。优选地，冷却可进行至约3(TC至约0。C,更优选地，至约20。C至约15。C的温度。优选地，维持冷却的浆体约1小时至约24小时，更优选地，约14小时至约16小时。结晶方法还可包括回收析出的晶体伊马替尼碱。可通过过滤进行回收。回收的产物可以被干燥。优选地，干燥在低于45。C的温度下进行。本发明还包括无定型伊马替尼碱。无定型伊马替尼碱的特征在于X射线粉末衍射图如图5所示。通常，无定型伊马替尼碱可通过X射线粉末衍射图上无任何明显衍射峰进行识别。在一个实施方式中，本发明的无定型包含小于约20%,更优选小于约10%，且最优选小于约5%的晶型，用XRD面积百分比测得。无定型伊马替尼碱的制备方法，可包括使伊马替尼碱的1，4-二氧杂环己烷溶液冻干。优选地，通过将伊马替尼碱和1,4-二氧杂环己烷结合，并加热组合物以制得溶液。优选地，加热进行至约5(TC至约ll(TC，更优选至约9(rc至约iorc的温度。任选地，在冻干步骤之前使溶液冷却。冷却优选进行至约25°C至约12。C的温度。冻干步骤可以在低于二氧杂环己烷的冷冻温度的温度下进行。优选地，冻干在约12。C至约O"的温度下进行。冻干优选在减压下进行，优选的压力为约0.01至约100mBar,更优选为约0.1至约15mBar，最优选为约1mBar。本发明包括伊马替尼盐的制备方法，其包括制备本发明的晶体或无定型伊马替尼碱，并将其转化为伊马替尼盐。优选地，用本文所述的方法来制备晶体或无定型伊马替尼碱。优选地，伊马替尼盐是曱磺酸伊马替尼。可通过使晶体伊马替尼碱与酸反应，由本发明的晶体或无定型伊马替尼碱制备伊马替尼盐。反应可依照例如国际专利申请NoWO1999/03854中所公开的方法进行。23在这种方法中，酸的使用量优选为每摩尔起始伊马替尼碱1摩尔当量。这是为了避免二酸盐的形成，二酸盐的形成在酸使用过量时会发生，见WO2005/095379。不过，可以使用稍过量的酸，例如0.1至0.2摩尔当量的酸，以确保伊马替尼碱完全转化为伊马替尼盐。在将上述晶体吡啶溶剂化物转化为伊马替尼盐时，可以使用更宽范围的酸量，例如每摩尔起始原料晶体伊马替尼碱1摩尔当量至约1.2摩尔当量的酸，而不会形成二酸盐。过量的酸，通常，会与吡啶反应生成吡咬鐵盐，其可溶于例如醇的溶剂中，并在伊马替尼盐析出时留在母液中。上述方法优选制备伊马替尼的甲磺酸盐。下式的曱磺酸去甲基伊马替尼是甲磺酸伊马替尼的杂质，发现其存在于市售产品中的量为至少约0.09%。杂质含量用面积百分比法，优选用下述的HPLC法测得。因为该杂质与甲磺酸伊马替尼结构上相关，因此难以从其中纯化甲磺酸伊马替尼，而且发现例如结晶的纯化方法不能将其有效除去。在一个实施方式中，本发明包括下式的甲磺酸伊马替尼其含小于约0.09%的下式的甲磺酸去甲基伊马替尼优选地，曱磺酸伊马替尼含有少于0.07%，更优选地，少于0.05%的甲磺酸去甲基伊马替尼。通常，用面积百分比单位测定曱磺酸去曱基伊马替尼的含量，且可用HPLC法进行，其包括a)将包含甲磺酸伊马替尼和甲磺酸去甲基伊马替尼的样品与水混合，以得到溶液；b)将溶液注入基于C18反相二氧化硅的HPLC柱；C)使用1-丁烷磺酸钠盐、KH2P04和H3P04的混合物(称作流动相A)，和乙腈、曱醇和四氢呋喃的混合物(称作流动相B)进行梯度洗脱，将4羊品>人柱上洗脱下来；和d)使用UV检测器测定甲磺酸去甲基伊马替尼的含量。甲磺酸去甲基伊马替尼是去甲基伊马替尼的盐。通常，在通过使伊马替尼与甲烷磺酸反应将伊马替尼转化为甲磺酸伊马替尼时，去甲基伊马替尼转化为曱磺酸去甲基伊马替尼。此外，在如实施例18和19所述的转化中，去曱基杂质的量保持相似。为了获得含小于约0.09%甲磺酸去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼，用于制备曱磺酸伊马替尼的伊马替尼碱起始原料，优选含小于约0.09%的去甲基伊马替尼。在另一个实施方式中，本发明包括下式的伊马替尼其含小于约0.09%的下式的去曱基伊马替尼优选地，伊马替尼含有小于约0.07%,更优选地，小于约0.05%的去甲基伊马替尼。通常，用面积百分比单位来测定去甲基伊马替尼的含量，且可用如上所述的HPLC法进行。含小于约0.09%去甲基伊马替尼的伊马替尼的制备方法包括a)测定式II的去甲基杂质HOOC、z、z11n=0.2在至少一批式I化合物中的量N一HOOC\z\^1n=0,2b)选择式I化合物批次，其含有小于约0.15%HPLC面积百分比单位的式II去甲基杂质；和c)用所选批次的式I化合物制备伊马替尼，其中n为0、1或2，优选2。可用面积百分比单位来测定式II去曱基杂质的含量，且可用HPLC法进行，其包括a)将包含式I化合物和式II去曱基杂质的样品与水混合，以得到溶液；b)将溶液注入基于CI8反相二氧化硅的HPLC柱；26C)使用1-丁烷磺酸钠盐、KH2P04和H3P04的混合物(称作流动相A)和乙腈混合物(称作流动相B)进行梯度洗脱，将样品从柱上洗脱下来；和d)使用uv检测器测定式n去甲基杂质的含量。含小于约0.15%的式II去甲基杂质的式I化合物的制备方法，包括使式I化合物从水和Cw醇的混合物中结晶。结晶包括制备式I化合物在水和d.3醇混合物中的溶液，并使式I化合物析出。通过将式I化合物与水和Cw醇混合物组合，并加热组合物而得到溶液。优选地，加热至约55。C至约80°C,更优选，约65至约75'C，最优选约75。C的温度。优选地，C—3醇是异丙醇("IPA")。优选地，混合物中Cw醇与水之比为约80:20,更优选地，约60:50,最优选地，57:43v/v。式I起始化合物的制备，可以依照例如2007年10月26日递交的共同悬而未决的美国临时申请No.1l人..，...(律师代理申请案编号.13150/A400US)中公开的方法，如上所述，例如通过使下式的4-苯甲酸衍生物，其中X是离去基并使产物与HC1反应，得到HC1盐。通常，将溶液冷却以促使式I化合物析出。优选地，溶液^皮冷却至约5CTC至约-5。C，更优选地，至约35。C至约0。C，最优选地，至约25。C至约0"的温度。冷却可以一次进行或者逐步进行。当逐步进去时，第一步冷却至约35。C至约15°C,更优选地，至约25。C至约20。C的温度，第二步至约5。C至约-5。C,更优选地，至约3。C至约0。C的温度。优选地，第一冷却阶段用时约0.5小时至约3小时，更优选地，与下式的N-甲基哌。秦反应约1小时至约1.5小时。优选地，第二冷却阶段用时约0.5小时至约5小时，更优选地，约0.5小时至约3小时，最优选地，约1至约1.5小时。通常，冷却得到悬浮液，其进一步被维持在约-5。C至约5°C,优选约3。C至约0。C的温度下，以增加式I化合物的产率。优选地，使悬浮液维持约1小时至约5小时，更优选地，约1小时至约3小时，最优选地，约1至约2小时。优选地，冷却和维持步骤在搅拌下进行。然后可用技术人员周知的任何方法来回收析出的式I化合物，例如过滤和干燥。然后使所得的含小于约0.15%式11去甲基杂质的式I化合物，与式III胺反应以得到含小于约0.09%去甲基伊马替尼的伊马替尼。式I化合物与式m胺之间的反应，可以用例如2007年10月26曰递交的美国临时申请No.11/...,...(律师代理案件号13150/A400US)中公开的方法进行。所述方法包括使式III的胺与式V的4-[(4-甲基-l-哌嗪基)甲基]苯甲酰基衍生物和吡啶反应,每克式III化合物的吡啶用量为约2至约10体积(7至35当量)，更优选约4至约7体积，最优选约5至约6体积，以得到伊马替尼；和回收所得的伊马替尼；其中n是O,l或2;X是选自Cl和Br的离去基，优选X是C1;R是H或Cw烷基，优选是H，且HB是选自以下的酸HC1、HBr、HI、甲烷磺酸和对甲苯磺酸(para-toluenesulofmicacid),优选地HB是HC1。所述方法还包括活化式I化合物，以得到活化的式V酸衍生化合物，通过使式I化合物与羧酸活化剂在碱或水吸收剂的存在下反应，得到含式V化合物的反应混合物。然后含式V化合物的混合物用于上述制备伊马替尼的方法中。或者，可通过使伊马替尼结晶，来制备含小于约0.09%去甲基伊马替尼的伊马替尼，或者结合两种方法，即，制备含小于约0.15%式n化合物的式i化合物，再使其与式m的胺反应，然后使所得伊马替尼结晶。优选地，结晶可用如上所述的方法进行。然后将所得伊马替尼转化为含小于约0.09%甲磺酸去曱基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼。所述方法包括测定至少一批伊马替尼中去甲基伊马替尼的量，选择含小于约0.09%去甲基伊马替尼的伊马替尼批次；并用所选批次的伊马替尼制备曱磺酸伊马替尼。另外，在伊马替尼碱的形成期间，去曱基伊马替尼可转化为另一种杂质，式IV的去甲基化合物。发现式IV去甲基杂质难以从伊马替在一个实施方式中，本发明包括式IV的去曱基化合物优选地，本发明包括分离的式IV去曱基化合物，(3-{4-[4-(4-曱基-哌嗪-l-基甲基)-苯甲酰基-哌嗪-l-基曱基)-N-[4-曱基-3-(4-p比咬-3-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺)。如本文所用的，术语"分离的"在指式IV去甲基化合物时，是指含不超过约0.15%去甲基伊马替尼的式IV去甲基化合物。通常，用面积。/。测定式IV去曱基化合物中去甲基伊马替尼的含量，优选用HPLC测定。式IV去甲基杂质的特征在于选自以下的至少一组数据HNMR(DMSO-d6)光谱在约2.141,2.329,2.305,2.399,3.463,3.583,7.322,7.325,7.923和10.159ppm处具有峰，^NMR光谱如图6所示，13CNMR(DMSO-d6)光谱在约45.71,52.54,54.73,61.63,61.42,126.67,126.69,126.93,128.76,133.95,134.48,137.85,139.94,141.59,165.24和168.97处具有峰，13CNMR光谱如图7所示，IR光谱在约1452,15281680和2937cm"处具有主峰，IR光镨如图8所示，MS光谱在约696克/摩尔处具有[MH]+峰，且MS光谱如图9所示。上述式IV去曱基化合物的制备方法，包括使下式的去曱基伊马<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>与式V的化合物反应其中X是离去基，HB是酸，且n是0、1、或2。优选地，X是C1、Br或I，更优选地，X是C1。优选地，HB是HC1、HI或HBr，更优选地，HB是HC1。优选地，n是0或2。通常，去曱基伊马替尼与式V化合物之间的反应，形成酸("HX")副产物，因此反应在碱(其可中和所述酸)存在下进行。所述碱可以是有机或无机碱。优选地，所述有机碱是胺，更优选地，脂肪胺或芳香胺。所述脂肪胺和芳香胺，优选为d-C8烷基或芳基胺。优选地，所述脂肪胺选自三乙胺("TEA，，)、二异丙基胺("DIPEA，，)、N-甲基吗啉、其混合物。优选地，所述芳香胺是吡啶。优选地，所述无机碱是碱金属碱，更优选地，K2C03、Na2C03、NaHC03、KHC03及其混合物。最优选地，所述碱是吡咬。优选地，所述碱的存在量为每摩尔式V化合物至少l摩尔当量，取决于化合物V的性质。优选地，当n为0时，至少约1摩尔当量的碱是足够的。优选地，如果n是l,应该使用至少约2摩尔当量的碱，如果n是2，应该使用至少约3摩尔当量的碱。通常，反应在溶剂的存在下进行。优选地，将溶剂和去甲基伊马替尼碱结合以得到混合物。所述溶剂可以是有机溶剂或碱本身(净(neat)溶剂)。优选地，所述有机溶剂选自四氢呋喃("THF，)、甲基四氢呋喃("MeTHF")、二氧戊环、二氯甲烷("DCM")、二甲基甲酰胺("DMF，)、二甲基乙酰胺("DMA，，)、二曱基亚砜("DMSO")、甲苯，及其混合物。在使用有机溶剂时，所述溶液还包括其它的^5咸。优选地，然后将溶液与式V化合物结合，得到反应混合物。优选地，将式V化合物加入到溶液中。优选地，加入在约-10°C至约-25°C，更优选地，在约0。C至约5。C，最优选地在约3。C的温度下进行。优选地，使反应混合物加热至约15"C至约25°C，然后再加入一定量的溶剂(如果需要)，以使粘度更小。反应混合物可以在此温度下保持足够的时间，以形成式IV的去甲基化合物，优选地约3小时至约10小时，更优选地约4小时至约6小时。优选地，使又加入了一定量溶剂的第二混合物，在此温度下保持约3小时至约IO小时，优选地约6小时。然后用本领域周知的任何方法，回收所得的式IV去曱基化合物，例如萃取和干燥。然后，式IV去甲基化合物可用于检测伊马替尼的纯度。在一个实施方式中，本发明包括确定伊马替尼中式IV去甲基化合物是否存在的方法，其包括用式IV去甲基化合物作为基准标记进行HPLC或TLC。优选地，所述方法包括(a)用HPLC或TLC测定对应基准标记样品中式IV去甲基化合物的相对保留时间(分别称作RRT,或RRF);(b)用HPLC或TLC确定对应含式IV去甲基化合物和伊马替尼的样品中式IV去曱基化合物的相对保留时间；和(c)通过比较步骤(a)的相对保留时间(RRT或RRF)与步骤(b)的RRT或RRF,确定样品中式IV去甲基化合物的相对保留时间。在另一个实施方式中，本发明包括确定含式IV去曱基化合物和伊马替尼的样品中式IV去甲基化合物含量的方法，其包括用式IV去甲基化合物作为对照标准品进行HPLC。优选地，上述方法包括(a)用HPLC测定含已知量式IV去曱基化合物的对照标准品中式IV去甲基化合物对应的峰面积；(b)用合物对应的峰面积；(c)通过比较步骤(a)的面积与步骤(b)的面积，确定样品中式IV去甲基化合物的量。进行上迷分析所用的HPLC方法，优选地，与用于测定去甲基伊马替尼和曱磺酸去曱基伊马替尼含量的方法相同。200780039310.2伊马替尼在被转化为甲磺酸伊马替尼时，可从式IV去甲基化合物中纯化。所述纯化，可以依照例如共同转让的美国申请No.11/796,573中所公开的方法进行，其通过引用而并入本文。所述方法包括制备甲磺酸伊马替尼在水和乙醇混合物中的溶液；通过使溶液维持在约0。C至约-30。C的温度下进行沉淀，以得到含曱磺酸伊马替尼的悬浮液。所得甲磺酸伊马替尼具有足够低量的式IV去甲基化合物，优选地，小于约0.15。/。式IV去曱基杂质，更优选地，小于约0.10。/。式IV去曱基杂质。优选地，用面积。/。单位测定甲磺酸伊马替尼中式IV去甲基杂质的含量，优选用HPLC。所得的曱磺酸伊马替尼可用于制备药用组合物。在一个实施方式中，本发明包括一种药用组合物，其包含具有小于约0.09%HPLC面积百分比单位的甲磺酸去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼和至少一种药学上可接受赋形剂。在另一个实施方式中，本发明包括药用组合物的制备方法，其包括将具有小于约0.09%HPLC面积百分比单位的甲磺酸去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼与药学上可接受赋形剂混合。在另一个实施方式中，本发明包括含小于约0.09%HPLC面积百分比单位的甲磺酸去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼的用途，用于生产治疗各种癌症、动脉硬化症、血栓症、术后再狭窄或纤维症的药用组合物。"治疗有效量"是指纯化的甲磺酸伊马替尼的量，在给予患者治疗疾病或其它不良病患时，足以产生对该疾病或病情有益的效果。"治疗有效量，，会随纯度、疾病或病患，及其严重度，和受治患者的年龄、体重等不同而有所不同。给定纯甲磺酸伊马替尼的治疗有效量的确定，是本领域的普通技术，仅需要进行常规试验。本发明的药物配方包含用本发明方法生产的纯化的甲磺酸伊马替尼。除活性成分之外，本发明的药物配方可以包含一种或多种赋形剂。在配方中加入赋形剂有多种目的。本发明配方中可以加入稀释剂。稀释剂增加固体药用组合物的体积，使包含组合物的药物剂型更方便患者和看护者使用。固体组合物的稀释剂包括，例如微晶纤维素(例如，AVIEL)、微粉纤维素、乳糖、淀粉、预胶化淀粉、碳酸4丐、硫酸钾、糖、葡萄糖结合剂、糊精、葡萄糖、二碱式磷酸钙、(脱水)、三碱式磷酸钙、高岭土、碳酸镁、氧化镁、麦芽糊精、甘露醇、聚曱基丙烯酸酯(如EUDRAGIT⑧)、氯化钾、纤维素粉、氯化钠、山梨醇和滑石粉。^組制成剂型(如片剂)的固体药用组合物可包含赋形剂，其作用包括帮助活性成分与其它赋形剂在压缩之后粘在一起。用于固体药用组合物的粘合剂包括阿拉伯树胶、褐藻酸、卡波姆(如卡波普(carb叩ol))、羧曱基纤维素钠、糊精、乙基纤维素、明胶、瓜尔胶、氢化植物油、羟乙基纤维素、鞋丙基纤维素(如KLUCEL⑧)、幾丙基曱基纤维素(如METHOCEL⑧)、液体葡萄糖、硅酸镁铝、麦芽糊精、甲基纤维素、聚甲基丙烯酸酯、聚维酮(如KOLLIDON、PLASDONE)、预胶化淀粉、藻酸钠和淀粉。通过向组合物中加入崩解剂，可增加压制固体药用组合物在患者胃中的溶解速率。崩解剂包括褐藻酸、羧曱基纤维素钩、羧甲基纤维素钠(如AC-DI-SOL、PRIMELLOSE⑧)、胶态二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮(如KOLLIDON、POLYPLASDONE⑧)、瓜尔胶、硅酸镁铝、甲基纤维素、微晶纤维素、波拉克林钾、纤维素粉、预胶化淀粉、藻酸钠、羟基乙酸淀粉钠(如EXPLOTAB⑧)和淀粉。可加入助流剂来改善非压制固体组合物的流动性，并提高定量的准确性。可用作助流剂的赋形剂包括胶态二氧化硅、三硅酸镁、纤维素粉、淀粉、滑石粉和三碱式磷酸钙。当剂型(例如片剂)是通过压制粉状组合物制得时，所述組合物要经受来自沖压机和冲模的压力。有些赋形剂和活性成分倾向于粘附在沖压机和沖模的表面，这使得产品具有凹痕及其它表面缺陷。可以向组合物中加入润滑剂，以减少粘附并使产品易于从冲才莫中释》文出来。润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯、棕榈硬脂酸甘油酯、氢化蓖麻油、氢化植物油、矿物油、聚乙二醇、苯甲酸钠、十二烷基硫酸钠、硬脂富马酸钠、硬脂酸、滑石粉和硬脂酸锌。调味剂和增味剂可使剂型更容易为患者接受。可用于本发明组合物中的用于药品的常见调味剂和增味剂包括麦芽醇、香兰素、乙基香兰素、薄荷醇、柠檬酸、富马酸、乙基麦芽醇和酒石酸。固体和液体组合物也可用药学上可接受的着色剂进行染色，以改善其外观和/或便于患者辨认产品和单位剂量水平。在用本发明方法生产的纯化的曱磺酸伊马替尼制得的液体药用组合物中，将曱磺酸伊马替尼和所有其它固体赋形剂溶于或悬浮于液体载体中，例如水、植物油、醇、聚乙二醇、丙二醇或甘油。液体药用组合物可包含乳化剂，将不溶于液体载体中的活性成分或其它赋形剂均匀分散在组合物中。可用于本发明液体组合物的乳化剂包括，例如明胶、蛋黄、酪蛋白、胆固醇、阿拉伯树胶、黄芪胶、角叉菜(chondms)、胶质、甲基纤维素、卡波姆、十六十八烷醇和十六烷醇。液体药用组合物还可包含增粘剂，以改善产品口感和/或在胃肠道内壁上涂层。这种增粘剂包括阿拉伯树胶、褐藻酸皂土、卡波姆、羧甲基纤维素4丐或钠、十六十八烷醇、甲基纤维素、乙基纤维素、凝胶瓜尔胶、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、幾丙基曱基纤维素、麦芽糊精、聚乙烯醇、聚维酮、碳酸丙二酯、藻酸丙二醇酯、藻酸钠、羟基乙酸淀粉钠、淀粉黄芪胶和黄原胶。可加入甜味剂，例如山梨醇、糖精、糖精钠、蔗糖、阿斯巴甜、果糖、甘露醇和转化糖，以改善口味。可加入摄取安全水平的防腐剂和螯合剂，例如醇、苯甲酸钠、丁羟甲苯、叔丁对甲氧酚和乙二胺四乙酸，以改善贮藏稳定性。液体组合物还可包含緩冲剂，例如葡萄糖酸、乳酸、柠檬酸或乙酸、葡萄糖酸钠、乳酸钠、柠檬酸钠或乙酸钠。制剂科学家依据经验和对本领域标准规程和参考著作的考虑，可容易地确定选用的赋形剂和量。本发明的固体组合物包括粉末剂、颗粒剂、聚集剂(aggregates)和压制组合物。剂型包括适于口服、颊腔、直肠、非肠道(包括皮下、肌内和静脉内)、吸入和眼用给药的剂型。虽然任何给定情形下的最适给药途径取决于受治病情的性质和严重程度，但本发明最优选的给药途径是口服。剂量可以单位剂量形式方便地提供，并用制药领域众所周知的任何方法来制备。剂型包括固体剂型，如片剂、粉末剂、胶嚢剂、栓剂、袋剂(sachets)、锭剂(troches)和糖锭剂(lozenges)，以及液体糖浆剂、悬浮剂和酏剂。本发明的口服剂型，优选是口服胶嚢的形式，包含约10毫克至约160毫克，更优选地约20毫克至约80毫克剂量，且最优选20、40、60和80毫克的胶嚢。日用剂量可以包括每日1个、2个或更多胶嚢。本发明的剂型可以是包含本发明组合物(优选粉状或颗粒状的固体组合物)的胶嚢剂(硬或软胶嚢壳内)。胶嚢壳可以由明胶制成，且任选包含增塑剂(例如甘油和山梨醇)和遮光剂或着色剂。用于压片或胶嚢填充的组合物可以通过湿法制粒制备。在湿法制粒中，将某些或所有粉末形式的活性成分和赋形剂混合，然后在液体(通常为水)存在下进一步混合，使粉末结成颗粒。将颗粒过筛和/或粉碎，干燥，然后过筛和/或粉碎成所需的颗粒大小。然后可将颗粒压片，或者在压片之前加入其它赋形剂，例如助流剂和/或润滑剂。压片组合物通常可通过干法混合制备。例如，可将活性成分和赋形剂的混合组合物压成块(slug)或片，然后粉碎成紧凑颗粒。紧凑颗粒随后^f皮压成片剂。作为干法制粒的替代方法，可用直接压片技术将混合组合物直接压成压制剂型。直接压片法得到的片剂更均匀，没有颗粒。特别适用于直接压片法的赋形剂包括微晶纤维素、喷雾干燥乳糖、二水合磷酸二4丐和胶体二氧化硅。这些赋形剂及其它赋形剂在直接压片法的正确使用，是本领域富有经验和技能(特别是直接压片成型方面)的技术人员所周知的。本发明的胶嚢填充可以包括上述有关压片所述的任何一种混合物和颗粒，但是它们不用进行最后的压片步骤。依照本领域周知的方法，可将活性成分和赋形剂配方成组合物和剂型。已参考某些优选的实施方式对本发明进行了描述，其它实施方式对于考虑本说明书的本领域技术人员将是显而易见的。本发明还通过参考以下详述本发明组合物制备和使用方法的实施例-故进一步说明。对原料和方法的很多修改，对于本领域技术人员将是明显的，可以被实施而不脱离本发明的范围。实施例HPLC法用于测定式I化合物中的式II去甲基杂质的分析方法柱&包装YMC隱PackODS-AQ;5|im，250x4.6mm(C.P.S.AnalyticaPart.No.AQ12S05-2546WT)或等同物；流动相A:20毫摩尔/升1-丁烷甲磺酸钠盐+10毫摩尔/升KH2P04用85。/。H3P04调至pH2.5。流动相B:乙腈。梯度时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)0901059010206535255050405050运行时间40分钟。后(Post)时间IO分钟。流速1.0毫升/分钟。检观寸器X-230nm。柱温60°C。进样体积5^L。稀释剂水。典型保留时间为<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>检测限为0.01%。用于测定伊马替尼中的去曱基伊马替尼杂质的分析方法柱&包装YMC-PackODS國AQ;5250x4.6mm(Part.No.AQ12S05-2546WT)或等同物；流动相A:水中25毫摩尔/升1-丁烷磺酸钠盐+25毫摩尔/升KH2P04用85%H3P04调至pH2.3。流动相B:乙腈/甲醇/四氢呋喃70:10:20(v/v/v)。梯度<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>运行时间60分钟。后时间15分钟。积分(integration)时间55分钟。流速0.9毫升/分钟。片企测器X=235nm。柱温6(TC。进样体积5pL。稀释剂流动相A/流动相B8:2(v/v)。典型保留时间为<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>检测限为0.01%。PXRDPXRD衍射在X-射线粉末衍射仪PhilipsX，pertPro粉末衍射仪上进行，CuKa射线，X=1.5418A。单点检测器；扫描速率为37分钟。多通道X，Celerator检测器，工作长度(2e)=2.122°;扫描速率6°/分钟，实验室温度22至25。C。DSC分析DSC测定在DifferentialScanningCalorimeterDSC823e(MettlerToledo)上进行。带PIN的铝坩锅40微升用于样品制备。样品的通常重量为1至5毫克。氮气作为吹扫气体；50毫升/分钟。程序1:温度范围50。C至IO(TC,10。C/分钟，100。C至250。C,4(TC/分钟程序2:温度范围5(TC至250。C,1(TC/分钟实施例l:本发明晶体伊马替尼碱的制备在(TC下，向N-。-氨基-:甲基苯基)-4-(3-吡啶基)-2-吡啶胺(80g)的吡咬(400g)溶液中，加入4-[(4-甲基-l-哌溱基)甲基]苯甲酰氯二盐酸盐(l.l当量)。使反应在15至20。C下保持搅拌1小时，然后加入水(400毫升)。使混合物加热至40。C，然后加入26%NH4OH(200克)和水(900克)。使反应混合物在室温下保持搅拌过夜。过滤除去固体，用水洗涤，并在45。C真空下干燥3至4小时。得到微黄色粉末的伊马替尼(135克,95%产率,〉98%纯度)。实施例2:本发明晶体伊马替尼碱的制备在(TC下，向4-[(4-曱基-l-哌。秦基)甲基]苯曱酸(84g)的吡啶(400g)悬浮液中，力口入S0Cl2(44.8克，1.05当量)，使混合物保持在30至5(TC下保持搅拌1至2小时。冷却至0。C后，加入N-(5-氨基-2-甲基苯基)-4-(3-吡咬基)-2-吡啶胺(80g)。使反应在15至20。C下保持搅拌1小时，然后加入水(400毫升)。使混合物加热至40°C,然后加入26%NH40H(200克)和水(900毫升)。使反应混合物在室温下保持搅拌过夜。过滤除去固体，用水洗涤，并在45"真空下干燥过夜。得到微黄色粉末的本发明晶体伊马替尼碱(125克，88%产率，>98%纯度)。实施例3:本发明晶体伊马替尼碱的制备在20。C下，向4-[(4-甲基-l-哌溱基)甲基]苯甲酸二盐酸盐(30g)的吡啶(100g)悬浮液中，力口入S0Cl2(11.5克,1.05当量)，使混合物在45至50。C下保持搅拌1至2小时。冷却至0。C后，加入N國(5-氨基-2陽甲基苯基)-4-(3-吡啶基)-2-吡啶胺(20g)。使反应在15至25。C下保持搅拌l小时，然后加入水(IOO毫升)。使混合物加热至40。C,然后加入26。/。NH4OH(50克)和水(225毫升)。使反应混合物在室温下保持搅拌过夜。过滤除去固体，用水洗涤，并在45。C真空下干燥过夜。得到微黄色粉末的本发明晶体伊马替尼碱(32克，90%产率，>98%纯度)。实施例4:本发明晶体伊马替尼碱的制备在40。C下，向甲磺酸伊马替尼(60g)在吡啶(140毫升)和水(70毫升)混合物中的溶液，加入28。/。NH3(30毫升)。使溶液在40。C下保持搅拌至伊马替尼碱沉淀出现。在40。C下，再加入一定量的水(490毫升)，然后使混合物自然冷至室温，搅拌下维持15小时。过滤除去固体，用水洗涤，并在40。C真空下干燥过夜。得到微黄色固体的本发明晶体伊马替尼碱(50克，90%产率)。实施例5:本发明晶体伊马替尼碱的制备在40至50。C下，向伊马替尼碱(94克)在吡啶(376克)和水(188克)中的溶液，加入水(1300克)。使混合物在15至20。C下保持搅拌过夜，然后过滤除去固体，用水洗涤，并在40。C真空下干燥16小时。得到微黄色固体的伊马替尼碱(99.6克，〉99%纯度)。实施例6:本发明晶体伊马替尼石威的制备向伊马替尼碱(50克)在吡啶(140毫升)和水(70毫升)混合物中的悬浮液，加入37。/。HC1(9毫升)。使溶液加热至40。C,用活性炭处理并过滤。在40。C下，向滤液(pH-9.3)中加入28o/oNH3(30毫升)，并使溶液在40。C下保持搅拌至伊马替尼碱沉淀出现。在40。C下，再加入水(490毫升)，然后使混合物自然冷至室温，搅拌下维持15小时。过滤除去固体，用水洗涤，并在4(TC真空下干燥过夜。得到微黄色固体的本发明晶体伊马替尼碱(50克，90%产率)。实施例7:依照WONo1999/03854,将伊马替尼碱转化为曱磺酸伊马替尼向EtOH(1.4升)中，加入4-[(4-曱基-l-哌嗪基)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡咬基)-2-嘧啶基]氨基苯基]苯甲酰胺(98.6克)。向悬浮液中逐滴加入甲烷磺酸(19.2克)。回流加热溶液20分钟，然后在65。C下过滤至清。蒸发滤液至50%,在25。C下滤除残余物(滤出物质A)。蒸发母液至干。将该残余物和滤出物质A悬浮于EtOH(2.2升)中，加水(30毫升)回流溶解。使溶液冷却并保持在25。C下过夜。过滤除去固体，并在65。C下干燥。实施例8:无定型伊马替尼碱的制备在90。C下，将伊马替尼碱(500毫克)溶于1,4-二氧杂环己烷(10毫升)中。使溶液冷却至25°C，并放置在-3(TC的冷拒里(这里溶液是冻结的)。将冻结的溶液转移至冻干机中，使用真空lmBar(使1,4-二氧杂环己烷冷冻干燥)，得到无定型伊马替尼碱。实施例9:式I(!1=2〗化合物的结晶将化合物I在水(320毫升)和异丙醇(420毫升)混合物中的悬浮液，加热至75。C以得到澄清的溶液。剧烈搅拌下，使反应混合物在l小时内冷却至20至25°C，然后在1至1.5小时内冷却至0至3°C,并保持在此温度下搅拌1至2小时。过滤除去固体，固体滤饼用异丙醇(180毫升)洗涤。产物在真空60至65。C下干燥15小时。得到白色固体的纯化合物(XK131克)。<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>实施例io:去曱基杂质aD的合成将4-氯甲基苯甲酸(10克，58.6毫摩尔)和哌嗪(20克，232毫摩尔)在n-BuOH(100克)中的混合物，加热至S0。C3小时，然后保持在室温下过夜。过滤除去固体，用n-BuOH洗涤并在70。C下干燥过夜。得到白色固体的去甲基杂质(II)(17.5克，86.6%纯度)。实施例ll:去甲基伊马替尼的合成4-氯甲基-N-『甲基-3-〖4-吡啶-3-基-嘧啶-2基氨基)-苯基l-苯甲酰胺的合成在2至3。C下，向N-(5-氨基-2-曱基苯基)-4-(3-吡啶基)-2-吡啶胺(18.5克)、K2C03(20克)在THF(370克)中的混合物，加入4-氯甲基苯甲酰氯(15克)。使混合物保持在2至7。C下搅拌1小时，然后在15至20。C下再搅拌3小时。加入水(700克)，使悬浮液保持在15至20°C下搅拌1小时。过滤除去固体，用水洗涤，并在65。C真空下干燥15小时，得到标题化合物(27克，94%产率)。在50°〇下，向哌。秦(28.4克)在EtOH(22克)和水(27.5克)的溶液中，15分钟内逐份加入Cp9665(14克)。反应混合物回流2小时，然后冷却至室温，并保持搅拌过夜。过滤除去固体，用水(13.75克)和EtOH(11克)的混合物洗涤，并用水(400克)和AcOEt(100克)吸收。加入28%NH3(25克)后，使混合物保持搅拌过夜。过滤除去固体，用水洗涤并在70。C真空下干燥15小时，得到所需产物(12克)。实施例12:含少于0.09%去甲基伊马替尼的晶体伊马替尼碱的制备向伊马替尼碱(50克，去甲基0.12%)在吡啶(140毫升)和水(70毫升)混合物中的悬浮液，加入37%HC1(9毫升)。使溶液加热至40°C,42用活性炭处理并过滤。在40。C下，向滤液(pH-9.3)中加入28。/。NH3(30毫升)，并使溶液保持在40。C下搅拌至伊马替尼碱沉淀出现。在4(TC下，再加入水(490毫升)，然后使混合物自然冷至室温，搅拌下维持15小时。过滤除去固体，用水洗涤，并在40。C真空下干燥过夜。得到微黄色固体的伊马替尼碱(50克，90%产率，0.08%去曱基含量)。然而，这种结晶不能成功地降低式IV去甲基杂质的量。起始的伊马替尼碱含有0.55%的式IV去曱基杂质，结晶后的伊马替尼碱也是如此。实施例13:含少于0.09%去曱基伊马替尼的晶体伊马替尼碱的制备在60。C氮气下，向化合物I(n=2,X-=C1)(20克，含0.13%的去曱基杂质11)在曱苯(35毫升)和DMF(l毫升)中的悬浮液，在1小时内加入SOC12(20克)。使混合物保持在62°C下搅拌20小时。冷却至20°C后，加入曱苯(20毫升)并搅拌混合物0.5小时。过滤除去固体，用甲苯(50毫升)洗涤并在65。C真空下干燥15小时。得到白色粉末的产物(21克)。在0。C下，向式III胺(R二H)(1.5千克)的吡啶(8.25升)溶液中，氮气下一次性加入固体的式I化合物(n二2;X=C1)(2.69千克)。使温度自然升至5至10。C。使反应保持在15至20。C搅拌2小时，然后加入水(8.25升)，使温度升高，然后将混合物加热至35至4(TC。加入CharcoalNoritS2(75克)，并在40。C下搅拌混合物30分钟，然后经硅藻土填料(dicalite)床过滤。用水(6升)洗涤面板(panel)。向滤液中加入28%N&OH(4.05升)，并使混合物保持搅拌15至30分钟，以得到产物沉淀(混合物pH=9.4)。加入水(15.2升)并使反应混合物保持在2(TC下搅拌15小时。过滤除去固体，用水洗涤并在40。C真空下干燥8小时。得到微黄色粉末的伊马替尼(2.98千克，93%产率，去甲基伊马替尼0.08%)。实施例14:曱磺酸去甲基伊马替尼的合成在60。C下，向去曱基伊马替尼(12克)的MeOH(240克)溶液中，加入MeS03H(2.4克)。真空蒸发溶剂，残余物用EtOH(72克)和AcOEt(360克)吸收。混合物在室温下搅拌过夜，然后过滤除去固体,用AcOEt洗涤并在75。C真空下干燥，得到标题产物(13.9克)。实施例15:去甲基伊马替尼衍生物av)的合成在3。C下，向去甲基伊马替尼(m)(5克)的吡啶(25毫升)溶液中，加入4-[(4-曱基-1-哌溱基)甲基]苯甲酰氯二盐酸盐(4克)。使混合物达到室温，然后再加入吡啶(25毫升)，并使混合物保持在室温下搅拌6小时。加入水(50毫升)和28。/。NH3，使混合物真空蒸发至干。残余物用DCM和水吸收。分离有机相并蒸发至干，得到微黄色粉末的标题化合物(4克)。实施例16:不同产物中去曱基杂质量之间的相关性<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>伞一些去曱基伊马替尼杂质已转化为杂质IV，因此其总量大于0.09%。实施例17:0^6￥60@片剂的分析取5粒片剂，去包衣，将剩余物在研钵里碾碎。20毫克粉末用4毫升流动相B和16毫升流动相A吸收。使混合物超声5分钟，然后过滤。滤液进样HPLC。GLEEVEC甲磺酸N-去曱基伊马替尼的量(面积百分比)甲磺酸伊马替尼的量(面积百分比)GLEEVEC卿片400毫克批号F0004失效期2007年2月0.09%99.91%GLIVEC(JP)片画毫克批号S0016失效期2009年7月0.10%99.90%实施例18:甲磺酸伊马替尼的结晶一保持杂质量向MeOH(10.5毫升)中，加入甲磺酸伊马替尼(4.2克，含0.08%的去曱基伊马替尼)，将混合物加热至6(TC。搅拌下使溶液冷却至20°C。在20。C下搅拌30分钟后，过滤除去固体，并在10(TC真空下干燥，得到甲磺酸伊马替尼(3.8克，含0.08。/。的去甲基伊马替尼)。实施例19:甲磺酸伊马替尼的结晶一保持杂质量向MeOH(10.5毫升)中加入甲磺酸伊马替尼(4.2克，含0.39%的去曱基伊马替尼)，将混合物加热至60°C。搅拌下使溶液冷却至20°C。在2(TC下搅拌30分钟后，过滤除去固体，并在IO(TC真空下干燥，得到甲磺酸伊马替尼(3.8克，含0.38%的去甲基伊马替尼)。实施例20:纯化除去伊马替尼中的式IV去甲基杂质将伊马替尼碱(60克；0.1216摩尔)悬浮于1200毫升乙醇中并挽拌。全部实验过程保持反应器处于氮气流下(6升/小时)。然后，向悬浮液中加入24毫升水，将温度调整至-15。C。向反应混合物中，2分钟内加入甲烷磺酸的乙醇溶液(79.8毫升10%V/V;0.1213摩尔)。使溶液温度定在-10°C10分钟。伊马替尼碱溶解，并加入晶种物质(2克)。结晶过程继续在搅拌下进行190分钟，连续升温至-5。C。悬浮液在约-27。C冷拒中保存过夜。然后，悬浮液用1000毫升TBME稀释，经氮压过滤，所得晶体部分用400毫升TBME洗涤。所得晶体形式用氮气流干燥(经过滤器)，除去游离的乙醇。乙醇含量约为7.5%。(产率为67.95克；85%)<table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table>权利要求1.晶体伊马替尼碱，其特征在于选自以下的数据粉末XRD图具有选自以下峰的任意5个峰，在约6.4，8.1，10.2，12.8，16.1，19.4，20.4，21.7，22.1，25.8和26.7±0.2°2θ处的峰；固态13CNMR光谱在约159.6，146.7，136.8和132.4±0.2ppm处具有信号；在固态13CNMR光谱中，化学位移100至180ppm范围内表示最低化学位移的信号与另一信号的化学位移差为约51.2，38.3，28.4和24.0±0.1ppm。2.权利要求1的晶体伊马替尼碱，其中晶体伊马替尼碱的特征在于选自以下的数据粉末XRD如图3所示，固态"CNMR光谱如图1所示，且固态"CNMR光谱如图2所示。3.权利要求1或2的晶体伊马替尼碱，其特征还在于选自以下的数据粉末XRD图在约8.1,10.2,12.8,16.1和19.4土0.2。20处具有峰；粉末XRD图在约6.4,8.1,10.2,19.4,20.4和25.8±0.2。20处具有峰；粉末XRD图在约17.3,20.4,21.1和25.8±0.2。20处具有峰；粉末XRD图在约6.4,21.7,22.1和26.7±0.2。20处具有峰；固态13CNMR光谨在约125.8和108.4±0.2ppm处具有信号；DSC曲线具有2个峰，第一个峰是97.6。C处的吸热峰，第二个峰是210.5。C处的吸热峰；且DSC曲线如图4所示。4.权利要求1至3中任一项的晶体伊马替尼碱，其中晶体伊马替尼碱是伊马替尼碱的吡啶溶剂化物。5.权利要求4的晶体伊马替尼碱，其中吡啶溶剂化物为半吡啶溶剂化物。6.权利要求4至5中任一项的晶体伊马替尼碱，其中GC测得的吡啶含量为约7%(w/w)。7.权利要求1至6中任一项的晶体伊马替尼碱，其中伊马替尼碱含有小于约20%的晶型I伊马替尼碱，用PXRD或固态C13NMR测得。8.—种制备权利要求1至8中任一项的晶体伊马替尼碱的方法,其包括使式m的胺与式V的4-[(4-甲基-l-哌嗪基)曱基]苯甲酰基衍生物和吡啶反应,每克式III化合物的吡啶用量为约2至约10体积，并回收伊马替尼碱；其中X是选自C1、Br的离去基；R是H或Cw烷基，HB是酸，且n-O,1或2。9.权利要求8的方法，其中X是C1，且R是H。10.—种制备权利要求1至8中任一项的晶体伊马替尼碱的方法，其包括将伊马替尼碱或其盐与吡啶组合以得到混合物，并使伊马替尼碱从混合物中结晶。11.权利要求10的方法，其中结晶包括制备包含伊马替尼碱、吡啶和溶剂的溶液，并加入抗-溶剂，以得到所述晶体伊马替尼碱的沉淀。12.权利要求10至11中任一项的方法，其中溶剂是水、水互溶性有机溶剂或其混合物。13.权利要求12的方法，其中水互溶性有机溶剂选自二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、四氢呋喃、醇、丙酮、乙腈、二氧杂环己烷、二甲基亚石风，及其混合物。14.权利要求12的方法，其中溶剂是二甲基甲酰胺、二曱基乙酰胺、四氢。夫喃，或水。15.权利要求10至14中任一项的方法，其中通过将伊马替尼盐与其它碱组合制得溶液，以获得伊马替尼碱。16.权利要求15的方法，其中其它碱是选自叔胺的有机碱，和无机碱，所述无机碱为选自氬氧化钾、碳酸钠或碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾的碱金属盐或氨。17.权利要求10至16中任一项的方法，其中通过将伊马替尼碱或盐、溶剂、吡啶和任选其它碱的组合物，加热至约5。C至约7(TC的温度以得到溶液。18.权利要求17的方法，其中加热至约40。C至约50。C的温度。19.权利要求10至18中任一项的方法，其中溶液中吡啶的存在量为每克伊马替尼碱或盐约2至约10体积。20.权利要求10至19中任一项的方法，其还包括使浆体冷却至约3CTC至约0。C的温度约1小时至约24小时。21.—种制备伊马替尼盐的方法，其包括将权利要求8至21中任一项的晶体伊马替尼碱转化为伊马替尼盐。22.无定型伊马替尼碱。23.权利要求22的无定型伊马替尼碱，其中无定型伊马替尼碱的特征在于X射线粉末衍射图如图5所示。24.权利要求22或23的无定型伊马替尼碱的制备方法，其包括使伊马替尼碱的1,4-二氧杂环己烷溶液冻干。25.权利要求24的方法，其中通过将伊马替尼碱与1,4-二氧杂环己烷组合，再将组合物加热至约50。C至约110。C的温度以得到溶液。26.权利要求24至25中任一项的方法，其中冻干过程在约12°C至约ot:的温度下进行。27.权利要求26的方法，其中冻干在约0.01至约100mBar下进行。28.伊马替尼盐的制备方法，其包括将无定型伊马替尼碱转化为伊马替尼盐。29.下式的曱磺酸伊马替尼其含有小于约0.09%HPLC面积百分比单位的下式的甲磺酸去甲基-伊马替尼30.权利要求29的甲磺酸伊马替尼，其含有小于0.07%面积百分比单位的甲磺酸去曱基-伊马替尼。31.下式的伊马替尼磁<其含有小于约0.09%面积HPLC百分比单位的下式的去甲基-伊马替尼32.权利要求31的伊马替尼碱，含有小于0.07%面积HPLC百分比单位的去甲基-伊马替尼碱。33.—种制备含有小于约0.09%面积HPLC百分比单位的去曱基-伊马替尼的伊马替尼的方法，其包括a)测定式II的去甲基杂质II在至少一批式I化合物中的量；b)选择式I化合物批次，其含有小于约0.15%的式11的去甲基杂质；和c)用所选批次的式I化合物制备伊马替尼，其中n为0、1或2。34.权利要求33的方法，其中以面积HPLC百分比单位计的式II去甲基杂质含量的测定包括a)将包含式I化合物和式II去曱基杂质的样品与水組合，以得到溶液；b)将溶液注入基于C18反相二氧化硅的HPLC柱；C)使用1-丁烷磺酸钠盐、KH2P04和H3P04的混合物(称作流动相A)，和乙腈混合物(称作流动相B)进行梯度洗脱，将样品从柱上洗脱下来；和d)使用UV检测器测定式II去曱基杂质的含量。35.权利要求33或34的方法，其中含有小于约0.15%面积HPLC百分比单位的式II去甲基杂质的式I化合物的制备方法，包括使式I化合物从水和C"3醇的混合物中结晶。36.权利要求35的方法，其中结晶包括制得式I化合物在水和Cw醇的混合物中的溶液，并使式I化合物析出。NH.nHCIn=0,237.权利要求35或36的方法，其中通过将式I化合物与水和Cw醇的混合物组合，并将组合物加热至约55t:至约8(TC的温度以制得溶液。38.权利要求37的方法，其中温度为约65。C至约75°C。39.权利要求36至38中任一项的方法，其中Cw醇是异丙醇("IPA")。40.权利要求36至39中任一项的方法，其中混合物中Cw醇与水的比例为约80:20。41.权利要求36至40中任一项的方法，其中溶液^皮冷却至约5(TC至约-5。C的温度。42.权利要求41的方法，其中冷却逐步进行，包括首先将溶液冷却至约35。C至约15。C的温度，第二步冷却至约5。C至约-5。C的温度。43.权利要求42的方法，其中第一冷却阶段用时约0.5小时至约3小时，第二冷却阶段用时约0.5小时至约5小时。44.权利要求41至43中任一项的方法，其中冷却的溶液在此温度下保持约1小时至约5小时。45.权利要求33至44中任一项的方法，其中步骤(c)中伊马替尼的制备包括，使含小于约0.15%面积HPLC百分比单位的式II去甲基杂质的式I化合物与式III的胺反应，以得到含小于约0.09%面积HPLC百分比单位的去甲基伊马替尼的伊马替尼。46.权利要求45的方法，其还包括使所得伊马替尼结晶。47.权利要求45的方法，其还包括制备含小于约0.09%面积HPLC百分比单位的去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼，其方法包括测定至少一批伊马替尼中去曱基伊马替尼的量，选择具有小于约0.09%面积HPLC百分比单位的伊马替尼批次，并用具有小于约0.09%面积HPLC百分比单位的伊马替尼来制备甲磺酸伊马替尼。48.式IV的去甲基化合物49.式IV的去甲基化合物，其含有小于约0.15%面积HPLC百分比单位的去甲基伊马替尼。50.式IV的去曱基化合物，其特征在于选自以下的至少一组数据HNMR(DMSO-d6)光谱在约2.141,2.329,2.305,2.399，3.463,3.583,7.322,7.325,7.923，和10.159ppm处具有峰，HNMR光谱如图6所示，13CNMR(DMSO-d6)光谱在约45.71,52.54,54.73,61.63,61.42,126.67,126.69,126.93,128.76,133.95,134.48,137.85,139.94，141.59,165.24和168.97处具有峰，13CNMR光谱如图7所示，IR光谱在约1452，1528,1680和2937cm"处具有主峰，IR光谱如图8所示，MS光谱在约696克/摩尔处具有[MH]+峰，且MS光谱如图9所示。51.—种制备权利要求48至50的式IV去甲基化合物的方法，其包括使下式的去甲基伊马替尼与式v化合物反应，其中X是离去基，HA是酸，且n是0、l或2。52.权利要求51的方法，其中X是Cl，HB是HC1,且n是0或2。53.权利要求51至52中任一项的方法，其中将碱加入到反应中。54.权利要求53的方法，其中碱选自胺和碱金属碱。55.权利要求53至54中任一项的方法，其中石威选自三乙胺("TEA")、二异丙基胺("DIPEA")、N-甲基吗啉、其混合物，K2C03、Na2C03、NaHC03、KHC03及其混合物。56.权利要求53至55中任一项的方法，其中每摩尔化合物V的碱量为至少l摩尔当量。57.权利要求51至56中的方法，其中反应在选自以下的溶剂中进行四氢呋喃("THF，)、甲基四氢呋喃("MeTHF，)、二氧戊环、二氯甲烷("DCM")、二甲基甲酰胺("DMF")、二甲基乙酰胺("DMA")、二甲基亚砜("DMSO，，)、曱苯，及其混合物。58.权利要求51至57中任一项的方法，其中将反应混合物加热至约15。C至约25。C的温度，然后再加入一定量的溶剂。59.权利要求48至50的式IV伊马替尼化合物，其中式IV的去甲基化合物是基准标记。60.—种测定样品中式IV去甲基化合物存在量的方法，其包括(a)用HPLC测定含已知量式IV去甲基化合物的对照标准品中式IV去曱基化合物对应的峰面积；(b)用HPLC测定含式IV去曱基化合物和伊马替尼的样品中式IV去曱基化合物对应的峰面积；(c)通过比较步骤(a)的面积与步骤(b)的面积，确定样品中式IV去甲基化合物的量。61.—种药用组合物，其包含具有小于约0.09%面积HPLC百分比单位的曱磺酸去曱基伊马替尼的曱磺酸伊马替尼和至少一种药学上可接受赋形剂。62.—种制备药用组合物的方法，其包括将含小于约0.09%面积HPLC百分比单位的曱磺酸去甲基伊马替尼的曱磺酸伊马替尼与药学上可接受赋形剂组合。全文摘要本发明提供了晶型伊马替尼碱，不含去甲基伊马替尼的伊马替尼碱，和不含甲磺酸去甲基伊马替尼的甲磺酸伊马替尼，及其制备方法和甲磺酸伊马替尼的药用组合物。文档编号C07D401/00GK101641345SQ200780039310公开日2010年2月3日申请日期2007年10月26日优先权日2006年10月26日发明者A·加文达,A·卡纳维西,A·焦利托,A·耶戈罗夫,D·滕托里奥,P·L·麦唐纳,P·罗塞托申请人:西科尔公司