一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法
【专利摘要】本发明涉及一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法，其处理步骤包括：a.三尖杉枝叶粉碎，过100目筛；b.酸性乙醇溶液中，超声波-微波辅助提取；c.碱调PH值至9~11，上三氧化铝柱纯化分离；d.以氯仿萃取2~3次，减压浓缩得三尖杉碱粗品；e.无水乙醇重结晶2次，即得三尖杉碱纯品。本发明采用现代提取技术，超声-微波联用辅助提取三尖杉碱，具有工艺简单、效率高、成本低，易于形成工业化生产纯度较高的三尖杉碱。
【专利说明】一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法，尤其涉及一种超声波-微波提 取三尖杉碱的方法，属于中药有效成分分离领域。
【背景技术】
[0002] 三尖杉碱，分子式C18H21N04，白色晶体，m. pl32?133°C，广泛存在于三尖杉属植物的 根、、茎、叶、干和果实中，占三尖杉属植物所含生物总碱的4(Γ80%，它是抗癌新药-三尖杉 酯碱和高三尖杉酯碱的母体，由于它独特的五元稠环结构，具有显著的抗癌作用，临床治疗 恶性肿瘤的有效率为32. 4% (特别是慢性白血病)。
[0003] 目前关于三尖杉碱的合成文献较多，如叶仙蓉报道的"三尖杉碱和桥氧三尖杉碱 衍生物的合成及抗肿瘤活性"一文，该合成路线冗长，不能用于规模化的生产；而从三尖杉 属植物中分离提纯三尖杉碱的文献及专利较少，且需要高效液相制备色谱分离，以及三氯 甲烷、苯等有毒试剂，不适于工业化生产。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种工艺简单、易操作、快速、高效的提取三尖杉碱的方法。 [0005] 本发明包括以下步骤： a. 三尖杉根茎粉碎，过100目筛； b. 取三尖杉粗粉，加入8?10倍的7(Γ80%的乙醇溶液，调节PH值为3. (Γ4. 0,置于超 声-微波提取装置中，超声波600W (常开)，微波功率为40(T500W，提取时间为9(Tl20min ; c. 将上述的提取液离心，取上清液，碱调PH值至扩11，直接通过三氧化二铝柱吸附，乙 醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止； d. 浓缩洗脱液，用氯仿萃取2?3次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品； e. 无水乙醇重结晶2次，即得三尖杉碱纯品。
[0006] 步骤b中所述的调节PH的酸为柠檬酸或盐酸。
[0007] 步骤c中所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠等。
[0008] 本发明利用超声波-微波协同提取药材有效成分的工艺充分利用了超声振动的 空化作用以及微波的高能作用，超声可破坏药材的细胞，使溶剂易于渗入细胞内，同时超声 波的强烈振动能传递巨大能量给浸提的药材和溶剂，使它们做高速运动，加强了胞内物质 的释放、扩散和溶解；而微波的高能作用，使样品介质内的各点受到的作用一致，加速目标 物从固相进入溶剂的过程。该方法具有高效性和强选择性，操作简单，产率高，成本低等优 点。
[0009] 下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
[0010]
【具体实施方式】： 实施例1 : 三尖杉枝叶粉碎，过100目筛，取三尖杉粗粉lkg，加入8倍的70%的乙醇溶液，盐酸调 节PH值为3. 0,置于超声-微波提取装置中，超声波600W (常开)，微波功率为400W，提取时 间为90min，提取液离心，取上清液，氢氧化钠调PH值至9,直接通过三氧化二铝柱吸附，乙 醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止，浓缩洗脱液，用氯仿萃取3次， 无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品，无水乙醇重结晶2次，即得白色晶体三尖杉碱 1. 85g，经检测，光学纯度为90. 1%。
[0011] 实施例2: 三尖杉枝叶粉碎，过1〇〇目筛，取三尖杉粗粉lkg，加入9倍的80%的乙醇溶液，盐酸调 节PH值为4. 0,置于超声-微波提取装置中，超声波600W (常开)，微波功率为450W，提取 时间为llOmin，提取液离心，取上清液，氢氧化钠调PH值至10,直接通过三氧化二铝柱吸 附，乙醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止，浓缩洗脱液，用氯仿萃取 3次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品，无水乙醇重结晶2次，即得白色晶体三尖 杉碱1. 90g，经检测，光学纯度为93. 2%。
[0012] 实施例3: 三尖杉枝叶粉碎，过1〇〇目筛，取三尖杉粗粉lkg，加入10倍的75%的乙醇溶液，柠檬 酸调节PH值为3. 5,置于超声-微波提取装置中，超声波600W (常开)，微波功率为500W，提 取时间为120min，提取液离心，取上清液，氢氧化钠调PH值至11，直接通过三氧化二铝柱吸 附，乙醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止，浓缩洗脱液，用氯仿萃取 2次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品，无水乙醇重结晶2次，即得白色晶体三尖 杉碱1. 86g，经检测，光学纯度为92. 5%。
【权利要求】
1. 一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法，其特征在于，包括以下步骤： a. 三尖杉枝叶粉碎，过100目筛； b. 取三尖杉粗粉，加入8?10倍的7(Γ80%的乙醇溶液，调节PH值为3. (Γ4. 0,置于超 声-微波提取装置中，超声波600W (常开)，微波功率为40(T500W，提取时间为9(Tl20min ; c. 将上述的提取液离心，取上清液，碱调PH值至扩11，直接通过三氧化二铝柱吸附，乙 醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止； d. 浓缩洗脱液，用氯仿萃取2?3次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品； e. 无水乙醇重结晶2次，即得三尖杉碱纯品。
2. 根据权利要求1所述的一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法，其特征在于，步骤b 中所述的调节PH的酸为柠檬酸或盐酸。
3. 根据权利要求1所述的一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法，其特征在于，步骤c 中所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠等。
【文档编号】C07D491/20GK104193755SQ201410445697
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月4日 优先权日:2014年9月4日
【发明者】张金芳, 杨存 申请人:南京标科生物科技有限公司