专利名称：具有生长激素释放性质的化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的肽衍生物、包含它们的组合物，以及它们在治疗由生长激素缺陷引起的疾病上的用途。
背景技术：
生长激素是刺激所有能够生长的组织的生长的激素。此外，已知生长激素对代谢过程具有许多作用(例如，刺激蛋白质合成和游离脂肪酸动员)和引起从碳水化合物至脂肪酸代谢的能量代谢转换。生长激素缺陷可以导致一些严重的疾病，例如，侏儒症。
生长激素从垂体释放。这一释放过程直接或间接地在一些激素与神经递质的严格控制下。生长激素释放可以受到生长激素释放激素(GHRH)的刺激和生长激素释放抑制因子的抑制。在两种情况下，所述激素从下丘脑释放，但是它们的作用主要经由位于垂体的特异性受体介导。也已描述了刺激生长激素从垂体释放的其它化合物。例如精氨酸、L-3，4-二羟基苯丙氨酸(L-多巴)、胰高血糖素、后叶加压素、PACAP(垂体腺苷酰环化酶激活肽)、毒蕈硷受体兴奋剂和合成的六肽，GHRP(生长激素释放肽)通过直接作用在垂体上或通过影响GHRH和/或生长激素释放抑制因子从下丘脑的释放来释放内源性生长激素。
在需要生长激素增加的水平的疾病或病态中，生长激素蛋白质的性质需要肠胃外施用。此外，其他直接作用的天然促分泌剂(例如GHRH和PACAP)是高分子量的多肽，因此肠胃外施用是优选的。
用于在哺乳动物中增加生长激素水平的更短的肽的用途以前已描述过，例如在EP18 072、EP83 864、WO89/07110、WO89/01711、WO89/10933、WO88/9780、WO83/02272、WO91/18016、WO92/01711和WO93/04081中。
生长激素释放肽或者肽衍生物的结构对它们的生长激素释放潜能以及它们的生物利用率来说是重要的。因此本发明的目的是提供新的具有生长激素释放性质的肽，这些肽具有相对于这种类型的已知肽而言的改善的性质。
发明概述通式I的化合物或其药学上可接受的盐A-B-C-D(-E)pI其中p是0或1；A是氢或R1-(CH2)q-(X)r-(CH2)sCO-。其中q是0或选自下组的整数1，2，3，4，5；r是0或1；s是0或选自下组的整数1，2，3，4，5；R1是氢、咪唑基、胍基、哌嗪基、吗啉代、哌啶子基或N(R2)-R3，其中R2和R3各自分别是氢或低级烷基(可被可不被一个或多个羟基、吡啶基或呋喃基取代的)；并且，当r是1时X是-NH-、-CH2-、-CH＝CH-、-C(R16)(R17)-；
其中R16和R17各自分别是氢或低级烷基；B是(G)t-(H)u，其中t和u各自分别是0或1；G和H是氨基酸残基，该残基选自由天然L-氨基酸或它们的相应的D-异构体或非-天然氨基酸(例如1，4-二氨基丁酸、氨基-异丁酸、1，3二氨基丙酸、4-氨基苯丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸、1，2，3，4-四氢降哈尔满(norharman)-3-羧酸、N-甲基邻氨基苯甲酸、邻氨基苯甲酸、N-苄基甘氨酸、3-氨甲基苯甲酸、3-氨基-3-甲基丁酸、肌氨酸、3-哌啶甲酸或异-3-哌啶甲酸)组成的组；并且其中，当t和u两者都是1时，G和H之间的酰胺键可以被可以不被Y-NR18-替代，其中Y是-CO-或-CH2-，且R18是氢、低级烷基或低级芳烷基；C是式-NH-CH((CH2)w-R4)-CO-的D-氨基酸，其中w是0，1或2；且R4选自由以下基团组成的组
以上各种可以是被或不被下列基团取代的卤素、低级烷基、低级烷氧基、低级烷氨基、氨基或羟基；当p是1时，D是式-NR20-CH((CH2)k-R5)-CO-的D-氨基酸或者当p是0时，D是-NR20-CH((CH2)1-R5)-CH2-R6或-NR20-CH((CH2)m-R5)-CR6，其中k是0，1或2；l是0，1或2；m是0，1或2；R20选自由低级烷基或低级芳烷基组成的组；R5选自由以下基团组成的组
以上各种可以是被或不被以下基团取代的卤素、低级烷基、低级烷氧氨基或羟基；且R6是哌嗪基、吗啉代、哌啶子基、-OH或-N(R7)-R8，其中R7和R8各自分别是氢成低级烷基；当p是1时，E是-NH-CH(R10)-(CH2)v-R9，其中v是0或选自下组的整数1，2，3，4，5，6，7，8；R9是氢、咪唑基、胍基、哌嗪基、吗啉代、哌啶子基、-N(R11)-R12或
其中n是0，1或2，且R19是氢或低级烷基，
其中o是选自下组的整数1，2，3，R11和R12各自分别是氢或低级烷基或
以上各种可以是被或不被以下基团取代的卤素、低级烷基、低级烷氧基、氨基、烷氨基、羟基或氨基和吡喃己糖或吡喃己糖基-吡喃己糖的Amadori重排产物，且当p是1时，R10选自由H、-COOH、-CH2-R13、-CO-R13或-CH2-OH组成的组，其中R13是哌嗪基、吗啉代、哌啶子基、-OH或-N(R14)R15其中R14和R15各自分别是氢或低级烷基；除了C和D之间的键外，所有式I内的酰胺键可以分别地由-Y-NR18替代；其中Y是-CO-或-CH2-，且R18是氢，低级烷基或低级芳烷基；但不包括下列化合物(3-氨甲基苯甲酰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、3-(H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉代丙烷、2-(H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、((3R)-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、3-((3-氨甲基苯甲酰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉基丙烷、2-(H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、2-(((3R)-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、2-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-R-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、3-(H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉基丙烷、3-(((3R)-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉代丙烷、3-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉代丙烷、2-((3-氨甲基苯甲酰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、2-(((3R)哌啶羰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷。
因为在肽序列中存在邻近的D-氨基酸(以及可有可无地由-Y-NR18(例如氨基亚甲基(-CH2-NH-))取代酰胺键(-CO-NH-)(如上所述))和/或修饰肽的N-或C-末端，式I的肽衍生物显示出对酶的蛋白降解的改进的抗性。并且本发明的肽衍生物的增加的生物利用率(与现有技术文献中所提出的肽的生物利用率比较)被认为是由于其对蛋白降解的抗性以及小的体积引起的。
在上述结构式和本说明书全文中，下列术语具有所指出的含义以上所限定的低级烷基部分旨在包括那些指定长度(优选地具有1-6个碳原子)的线性、支链或环状构型的烷基部分。线性烷基的例子是甲基、乙基、正丙基、丁基、戊基和己基。支链烷基的例子是异丙基、仲丁基、叔丁基、异戊基和异己基。环状烷基的例子是环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
以上所限定的低级烷氧基部分旨在包括那些指定长度(优选地具有1-6个碳原子)的线性、支链或环状构型的烷氧基部分。线性烷氧基的例子是甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基。支链烷氧基的例子是异丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戊氧基和异己氧基。环状烷氧基的例子是环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基和环己氧基。
以上所限定的低级烷氨基部分旨在包括那些指定长度(优选地具有1-6个碳原子)的线性、支链或环状构型的烷氨基部分。线性烷氨基的例子是甲氨基、乙氨基、丙氨基、丁氨基、戊氨基和己氨基。支链烷氨基的例子是异丙氨基、仲丁氨基、叔丁氨基、异戊氨基和异己氨基。环状烷氨基的例子是环丙氨基、环丁氨基、环戊氨基和环己氨基。
在本文上下文中，术语″芳基″旨在包括芳族环，如选自由以下基团组成的组的碳环和杂环芳族环苯基、萘基、吡啶基、1-H-四唑-5-基、噻唑基、咪唑基、吲哚基、嘧啶基、噻二嗪基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻吩基、喹啉基、吡嗪基或异噻唑基，这些基团是可被可不被一个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氨基或者芳基取代的。芳基优选地是可被可不被卤素，氨基，羟基，C1-6烷基或C1-6烷氧基取代的苯基、噻吩基、咪唑基、吡啶基、吲哚基、喹啉或萘基。
以上所限定的低级芳烷基部分由低级烷基部分和芳基部分形成，其中低级烷基部分和芳基部分是如上所限定的。
术语″卤素″旨在包括Cl、F、Br和I。
通用的三字母代码用于代表天然氨基酸，例如Ala用于代表丙氨酸。发明详述在式I的化合物的优选的实例中，A是氢、3-N-Me-AMB、3-AMB或Aib。当t是1时，在式I的化合物中G优选地是Ala、Gly、肌氨酸、3-氨甲基苯甲酰基、R-3-哌啶甲基(nipecotinyl)、3-哌啶甲酸或异3-哌啶甲酸，更优选地是3-氨甲基苯甲酰基、R-3-哌啶甲基、3-哌啶甲酸或异3-哌啶甲酸。当u是1时，H优选地是His、Phe、Tic、Phe(4-NH2)、3-Pyal、Gly、Ala、Sar、Pro、Tyr、Arg、Orn、3-氨甲基苯甲酸或D-Phe，H更优选地是His、Phe或Ala，H最优选地是His或Ala.。C在式I的化合物中优选地是D-2-萘基丙氨酸(D-2Nal)、D-1-萘基丙氨酸(D-1Nal)、D-Phe或D-Trp，更优选地是D-2Nal或D-Phe，最优选地是N-Me-D-2Nal、D-2Nal、D-Phe或N-Me-D-Phe。D在式I的化合物中优选地是-NR20-CH((CH2)k-R5)-CO-，其中k优选地是1，R20是低级烷基，D更优选地是D-Phe或D-2Nal。D最优选地是N-Me-D-Phe-醇、N-Me-D-Phe、N-Me-D-2Nal-醇、N-Me-D-Phe-NH2、N-Me-D-Phe-NH-Me或N-Me-D-(4-1)Phe-NH-Me。
当p是1时，在式I的化合物中E优选地是Lys-NH2、Ser-NH2、NH-(2-(1-哌嗪基)乙基)、NH-(3-(1-吗啉代)丙基)、NH-(2-氨乙基)、NH-(4-氨甲基苄基)、NH-(苄基)、Lys-OH、NH-(1-羟基-6-氨基-2S-己基)、NH-(2-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙基)或3-N，N-二甲基-氨基丙基，E最优选地是NH-(2-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙基)，3-N，N-二甲基-氨基丙基、Lys-NH2或Ser-NH2，或在式I的化合物中，R4优选地是2-萘基。R5优选地是苯基。v优选地是2-6，R9是NH2、2-吗啉代乙基、3-吗啉代丙基或(1-甲基吡咯烷基)乙基。R10优选地是-COOH、-CH2-OH、-H、-CONH2或-CON(CH3)2。
本发明特定的化合物例子是(2R)-2-((3-氨甲基苯甲酰基))-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-萘基)丙醇
(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
3-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-NMe-D-Phe-NH)-N，N-二甲基氨基丙烷
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2；
H-Aib-Ala-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH22-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉代乙烷
(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-Me
3-((3-甲基氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-N，N-二甲基氨基丙烷
(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-N-Me2
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-R-Me-D-Phe-NHMe
3-甲基氨甲基-Nme-D-2Nal-Nme-D-Phe-NH-CH3
哌啶-4-羧酸-N-((1R)-1-(N-((1R)-2-(4-碘苯基)1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲酰胺
非天然氨基酸残基的结构
用于肽键取代的缩写
式I的化合物可以用溶液或者固相肽合成的常规方法制备。例如，固相合成基本上可以按照Stewart和Young，固相肽合成，2nd.Ed.，Rockford，Illinois，USA，1976所描述的方法进行。基本上可以按照例如Bodansky etal.，肽合成，2nd.Ed.，纽约，纽约，USA，1976所描述的方法进行。
可以按照Y.Sasaki和D.H.Coy，肽8(1)，1987，pp.119-121所描述的方法引入作为酰胺键取代基的氨基亚甲基。包含单或二-吡喃己糖衍生化氨基基团的肽衍生物可以基本上用由R.Albert等，生命科学53，1993，pp.517-525所描述的方法的Amadori重排制备。合适的单或二-吡喃己糖的例子是葡萄糖，半乳糖，麦芽糖，乳糖或纤维素二糖。在合成中用作起始原料的衍生物可以是市售的(需要时，提供合适的保护基)，或者可以通过已知的方法制备用于制备通式I中的“A”部分的起始原料并根据需要可按本身已知的方法加以保护。
用于保护基的缩写
式I的化合物的药学上可接受的酸的加成盐包括通过使肽与无机或有机酸反应制备的那些，所述酸例如氢氯酸，氢溴酸，硫酸，醋酸，磷酸，乳酸，马来酸，邻苯二甲酸，柠檬酸，戊二酸，葡萄糖酸，甲磺酸，水杨酸，琥珀酸，酒石酸，草酸，甲苯磺酸，三氟乙酸，氨基磺酸和富马酸。
在另一个方面，本发明涉及一种药物组合物，该组合物包含作为活性组分的通式I的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或稀释剂。
包含本发明的化合物的药物组合物可以用常规技术制备，例如，按照Remington的药物科学，1985中所描述的技术进行。所述组合物可以以常规形式出现，例如胶囊，片剂，气雾剂，溶液，悬液，膏药或局部施用物。
所使用的药物载体或稀释剂可以是一种常规的固体或液态载体。固相载体的例子是乳糖，石膏粉，蔗糖，环糊精，滑石，明胶，琼脂，果胶，阿拉伯胶，硬脂酸镁，硬脂酸或纤维素的低级烷基醚。液态载体的例子是糖浆，花生油，橄榄油，磷脂，脂肪酸，脂肪酸胺，聚氧乙烯和水。
同样地，载体或者稀释剂可以包括本领域已知的任何持续释放物质，如单独的或与蜡混合的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
如果固相载体用于口服施用，所述制剂可以是压片的，以粉末状或片状形式置于硬明胶胶囊中，或者可以是锭剂或菱形剂形式。固相载体的量可以广泛地变化，但通常在大约25毫克到大约1克之间。
可以用常规压片技术制备的一个典型的片剂可以包含核心活性化合物(游离化合物或其盐)100毫克胶体二氧化硅(Aerosil) 1.5毫克纤维素，微晶(Avicel) 70毫克改性的纤维素树胶(Ac-Di-Sol)7.5毫克硬脂酸镁包衣HPMC约 9毫克*Mywacett9-40T约 0.9毫克*用作膜包衣的增塑剂的酰化的单酸甘油酯。
如果使用液态载体，则所述制剂可以是糖浆，乳状液，软胶囊或无菌的可注射液体(如含水或不含水悬液或者溶液)的形式。
对于鼻或者肺部施用，所述制剂可以包含溶解或悬浮在液态载体(特别是含水载体)中的式I的化合物，作为气溶胶施用。载体可以包含添加剂，例如增溶剂(如丙二醇)，表面活性剂(如胆汁酸盐聚乙二醇、聚丙二醇或聚氧乙烯高级醇醚)，吸收增强器(如卵磷脂(磷脂酰胆碱)或环糊精)或防腐剂(如羟苯甲酸甲酯)。
对于经皮施用，所述制剂可以是适合于粘贴或离子电渗疗法的形式。
一般地，本发明的化合物以单位剂量形式配药，其中每单位剂量包含0.0001-100毫克的活性成分和药学上可接受的载体。
根据本发明的化合物的剂量合适地是1-500mg/天，例如当作为药物施用给患者(例如人)时，每剂约100毫克。
已经证明，式I的化合物具有体内释放内源性生长激素的能力。因此这些化合物可以用于疾病的治疗，这些疾病需要增加的血浆生长激素水平，例如在生长激素缺陷的人或年长患者或家畜中。
这样，在一个特定的方面，本发明涉及刺激生长激素从垂体释放的药物组合物，该组合物包含作为活性组分的式I的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或者稀释剂。
在另一方面，本发明涉及刺激生长激素从垂体释放的方法，该方法包括向需要这种刺激的对象施用有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。
在另一方面，本发明涉及式I的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于刺激生长激素从垂体释放之药物上的用途。
式I的化合物具有令人感兴趣的药理学性质。这样的性质的例子是刺激生长激素从垂体释放(其自身作为生长激素具有相似的作用或用途)。生长激素的用途可以总结如下在年长者中刺激生长激素释放；预防糖皮质激素分解代谢的副作用，治疗骨质疏松，刺激免疫系统，加速创伤愈合，加速骨折修复，治疗生长迟缓，治疗肾衰竭或由生长迟缓引起的肾功能低下，治疗生理矮小(包括生长激素缺陷儿童和与慢性疾病相关的矮小)，治疗肥胖症和生长缓慢相关的肥胖症，治疗生长缓慢相关的Prader-Wilii综合症和Tumer′s综合症；加速恢复和减少烧伤患者的住院治疗；治疗子宫内的生长缓慢，骨胳发育异常，肾上腺皮质机能亢进和Cushing综合症；诱导脉动生长激素释放；在紧张状态患者中代替生长激素，治疗骨软骨发育不良，Noonan′s综合症，精神分裂症，抑郁症，Alzheimer′s病，延缓伤口愈合和精神丧失，治疗肺部机能障碍和呼吸困难，在大手术后削弱蛋白质分解代谢反应，降低噁病体质和蛋白质丧失(由慢性疾病如癌或爱滋病引起的)；治疗血胰岛素增多(包括胰岛细胞增殖症)，辅助治疗排卵诱导；刺激胸腺发育和预防胸腺功能的年龄相关性衰退，治疗免疫抑制患者，改善肌肉力量，运动性，保持皮肤厚度，代谢平衡，在虚弱的年长者中的肾部平衡，刺激成骨细胞，骨改型和软骨生长，在同伴动物中刺激免疫系统和在同伴动物中治疗老化疾病，促进家畜生长和刺激羊毛生长。
对上述适应症而言，剂量可以随所使用的式I的化合物、施用方式和所需的疗法变化。然而，一般地每天0.0001和100毫克/kg体重之间的剂量水平可以施用于患者和动物，以获得内源性生长激素的有效的释放。通常，适合于口头或鼻施用的剂量形式包含约0.0001毫克到约100毫克，优选地约0.001毫克到约50毫克式I的化合物，该化合物与药学上可接受的载体或者稀释剂混合在一起。
式I的化合物可以以药学上可接受的酸的加成盐形式(合适时以碱金属或碱土金属或低级烷铵盐形式)施用。这样的盐形式被认为与游离碱形式显示出大致相同级别的活性。
选择性地，本发明的药物组合物可以包含式I的化合物以及一种或多种显示出不同活性的化合物，例如，抗生素或者其它药理学上的活性物质。这可以另一种促分泌素，如GHRP(1或6)或GHRH或其类似物、生长激素或其类似物，或者生长调节素，如IGF-1或IGF-2。
给药路线可以是任何有效地将活性化合物运输到合适的或所需的作用位点的途径，例如，口服，鼻，肺部，经皮或者肠胃外，口服途径是优选的。
式I的化合物除了药学用途之外，它们作为研究生长激素释放的调节的体外工具还可以是有用的。
式I的化合物作为评价垂体释放生长激素能力的体内工具也可以是有用的。例如，在向人施用这些化合物之前和之后所采取的血清样品可以用于测定生长激素。在每种血清样品中生长激素的比较将直接确定患者垂体释放生长激素的能力。
式I的化合物可以施用到有商业重要性的动物上，以增加它们的生长速率和生长程度，并增加奶产量。药理学方法式I的化合物可以就它们在大鼠初级促生长激素细胞中释放生长激素的功效和效能进行体外评价。
可以基本上按照以前的描述(Chen等，内分泌学1991，129，3337-3342和Chen等，内分泌学1989，124，2791-2798)制备大鼠初级促生长激素细胞。简言之，去头处死大鼠。迅速切除垂体。以在Hanks平衡盐溶液中的0.2％胶原酶和0.2％透明质酸酶消化垂体。将细胞悬浮在Dulbecco′s改良的Eagle′s培养基中，所述培养基包含0.37％NaHCO3、10％马血清、2.5％胎牛血清、1％非必需氨基酸、1％谷氨酰胺和1％青霉素/链霉素，并调节至1.5×105个细胞/ml。在释放实验进行之前，将这种悬液1ml放置在24-孔盘的各孔中2-3天。
在实验的第一天，将细胞以包含25mM HEPES的上述培养基(pH7.4)洗涤两次。通过添加包含25mM HEPES和试验化合物的培养基起始生长激素释放。于37℃培养15分钟，在培养后，通过标准的RIA测定释放至培养基中的生长激素。
可以按照以前的描述(Bercu等，内分泌学1991，129，2592-2598)在戊巴比妥麻醉的雌性大鼠中评价式I的化合物体内对生长激素释放的作用。简言之，成年雄性Sprague-Dawley大鼠用戊巴比妥50mg/kg ip麻醉。在大鼠完全麻醉之后，将导管插管和导液管植入大鼠的颈动脉和颈静脉。在15分钟的恢复之后，采取血液样品(时间0)。经iv施用垂体促分泌剂，将动脉血样放在冰上15分钟，然后在12,000xg下离心2分钟。倒出血清，利用标准的RIA测定生长激素的量。
本发明由下列实施例进一步说明，这些实施例不以任何方式限制所要求的本发明的范围。
在以下实施例中所制备的化合物以三氟乙酸(TFA)盐分离出。实施例1制备2(R)-2-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-苯基丙醇
在0℃下，将165.7mg Boc-N-Me-D-2Nal-OH和165.2mg(R)-甲基氨基-3-苯基-丙-1-醇(从H-N-Me-D-Phe-OH按照McKennon M.J.；Meyers，I.有机化学杂志。1993，58，3568-71)和68.1mg HOAt溶解在2ml DMF和4ml DCM的混合物中。添加115mg EDAC，将混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌18小时。
在添加50ml EtOAc之前，经氮气流从混合物除去DCM，所形成的混合物用100ml5％NaHCO3水溶液、100ml H2O，100ml 5％KHSO4水溶液和100ml H2O依次抽提。所形成的有机相用Na2SO4干燥，并在旋转蒸发器上真空浓缩成油状物。
通过添加2滴DMF将502.6mg3-Boc-氨甲基苯甲酸溶解在10ml DCM中，然后，通过与191.6mg EDAC一起搅拌10分钟转变成对称的酸酐。
将上述冻干的2(R)-(H-N-Me-D2Nal-N-Me)-3-苯基丙醇和342μl DIEA在5ml DCM中的溶液加入到这一混合物中，然后在室温下反应20小时。接着将反应混合物浓缩成油状物，并再溶解于50ml EtOAc中。将这一溶液用100ml5％NaHCO3水溶液，100ml H2O，100ml 5％KHSO4水溶液和100ml H2O依次提取。将所形成的有机相用Na2SO4干燥，并在旋转蒸发器上真空浓缩成油状物。然后使油状物溶解在4ml DCM/TFA1∶1中并搅拌。10分钟后，通过氮气流浓缩混合物，将所形成的油状物再溶解于20ml 70％CH3CN/0.03M HCl中，加入480ml H2O。
然后通过半制备型HPLC纯化粗产物(在25mm×250mm柱上进行7次，该柱填装有7μC-18二氧化硅，用在0.05M(NH4)2SO4中的28％CH3CN(用4M H2SO4调节到pH 2.5)预平衡过)。
在40℃下，用梯度28％-38％CH3CN(在0.05M(NH4)2SO4中，pH2.5)洗脱(在47分钟期间10ml/分钟)柱，收集包含肽的组分，用3倍体积的H2O稀释，上到Sep-PakC18柱(Waters part.#51910)上，该柱用0.1％TFA平衡过。用70％CH3CN(在0.1％TFA中)从Sep-Pak柱洗脱肽，用水稀释后通过冻干从洗脱物分离肽。
通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内(质谱±0.9原子质量单位)质谱与所预期的结构一致。
用UV检测(在214nm)和Vydac 218TP54 4.6mm×250mm 5μC-18二氧化硅柱(The Separations Group，Hesperia)进行RP-HPLC分析，于42℃在1ml/分钟的流速下洗脱柱。采用两种不同的洗脱条件A1用在缓冲液中的5％CH3CN平衡柱，上述缓冲液由0.1M(NH4)2SO4组成，用4M H2SO4调节到pH2.5，在50分钟期间用梯度5％-60％CH3CN(在相同的缓冲液中)洗脱柱。B1用5％CH3CN/0.1％TFA/H2O平衡柱，在50分钟期间通过梯度5％CH3CN/0.1％TFA/H2O到60％CH3CN/0.1％TFA/H2O洗脱柱。
采用洗脱条件A1和B1的保留时间分别为29.90分钟和31.52分钟。合成3-Boc-氨甲基苯甲酸将25g 3-氰基苯甲酸溶解在70ml 25％NH3/H2O和200ml H2O中，在氮气流下加入5g10％Pd/C。在大气压和室温下氢化混合物，通过添加12％NH3/H2O将pH持续调节到10.5。在18小时期间在吸收约41Hz后，终止反应，经过滤除去催化剂。在真空下浓缩滤液至20ml，通过在用200ml 1.5M盐酸酸化后用乙酸乙酯提取除去未反应的起始原料。将水溶液相浓缩至干并再溶解于400ml THF和343ml 1M NaOH中。加入30g Boc-酐在100ml THF中的溶液，将混合物搅拌一夜。然后用1N HCl将反应混合物酸化到pH3，用3×300ml EtOAc抽提。将有机相蒸发成泡沫状。产量为22g。缩写r.t. 室温EDAC N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺氢氯化物EtOAc 乙酸乙酯Boc叔-丁氧羰基N-Me-D-2NalN-甲基-D-2-萘基丙氨酸DCM二氯甲烷DIEA 二异丙基乙基胺DMFN，N-二甲基甲酰胺HOAt 1-羟基-7-氮杂苯并三唑N-Me-D-Phe-醇 N-甲基-D-苯基丙氨醇TFA三氟乙酸THF四氢呋喃实施例23-((3-氨甲基苯甲酰基))-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)N，N-二甲基氨基丙烷
将Boc-N-Me-D-Phe-OH(279mg)溶解在DMF(4ml)中，与HOBt(168mg)和EDAC(230mg)一起搅拌10分钟。加入3-二甲氨基-1-丙基胺(188μl)，在室温下搅拌混合物18小时，然后加入5％碳酸氢钠水溶液(50ml)，用EtOAc(50ml)抽提所形成的混合物，在Na2SO4上干燥有机相，并在真空下浓缩成油状物。
在室温下使这一油状物与TFA/DCM 1∶1(6ml)一起搅拌10分钟。在通过氮气流蒸发掉这一TFA/DCM后，将所形成的油状物溶解在70％CH3CN(10ml)，1N HCl(3ml)和水(37ml)的混合物中，立即冷冻所形成的混合物并冻干。
将从冻干获得的产物溶解在DMF(6ml)和DCM(12ml)中。在搅拌下向这一混合物中加入Boc-N-Me-D-2Nal-OH(494mg)，HOAt(204mg)，DIEA(171μl)，并在冷却到℃后，加入EDAC(288mg)。在室温下搅拌18小时小时后，通过氮气流蒸发掉DCM，加入EtOAc(100ml)。用5％碳酸氢钠水溶液(100ml)和用水(100ml)抽提这一混合物两次，在Na2SO4上干燥，并在真空下浓缩成油状物(480mg)。
在室温下把这一油状物与TFA/DCM 1∶1(6ml)一起搅拌10分钟。在通过氮气流蒸发掉这一TFA/DCM后，将所形成的油状物溶解在70％CH3CN(10ml)中，加入1N HCl(1ml)和水(47ml)，立即冷冻所形成的混合物并冻干，产生一种油状物(2HCl，H-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-(CH2)3-N(CH3)2)。
将一半上述油状物(2HCl，H-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-(CH2)3-N(CH3)2)溶解在DCM(9ml)中，加入2滴DMF和DIEA(342μl)。
将这一溶液加入到Boc-3AMB-OH(503mg)和EDAC(192mg)在DCM(5ml)中的溶液(在室温下已搅拌15分钟)中。
在搅拌20小时后，在氮气流下将反应混合物浓缩成油状，与5％碳酸氢钠水溶液(100ml)一起搅拌15分钟。
然后添加EtOAc(50ml)，分离有机相，并用5％碳酸氢钠水溶液(100ml)和用水(100ml)抽提，然后在Na2SO4上干燥，并在真空下浓缩成油状物(340mg)。
在室温下把这一油状物与TFA/DCM 1∶1(6ml)一起搅拌10分钟。在通过氮气流蒸发掉这一TFA/DCM后，将所形成的油状物溶解在70％CH3CN(10ml)中，用水稀释成终体积为50ml。
然后通过半制备型HPLC(8次)纯化这一粗产物，采用类似于实施例中所描述的方法冻干。
通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+608.2原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+608.8原子质量单位)一致。
采用实施例1所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为25.23分钟和26.58分钟。实施例33-(((3R)-3-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-N，N-二甲氨基丙烷
将一半在实施例2中以油状物获得的2HCl，H-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-(CH2)3-N(CH3)2溶解在DCM(9ml)和2滴DMF中，加入DIEA(342μl)。
将这一溶液加入到Boc-(R)-3-哌啶甲酸(459mg)和EDAC(192mg)在DCM(5ml)中的溶液(在室温下已搅拌15分钟)中。
在搅拌20小时后，在氮气流下将反应混合物浓缩成油状，与5％碳酸氢钠水溶液(100ml)一起搅拌15分钟。
然后添加EtOAc(50ml)，分离有机相，并用5％碳酸氢钠水溶液(100ml)和用水(100ml)抽提，然后在Na2SO4上干燥，并在真空下浓缩成油状物。
在室温下把这一油状物与TFA/DCM 1∶1(6ml)一起搅拌10分钟。在通过氮气流蒸发掉这一TFA/DCM后，将所形成的油状物溶解在70％CH3CN(10ml)中，用水稀释成终体积为50ml。
然后通过半制备型HPLC(5次)纯化这一粗产物，采用类似于实施例中所描述的方法冻干。
通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+586.3原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+585.8原子质量单位)一致。
采用实施例1所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为25.33分钟和26.35分钟。实施例42-(((3R)-3-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷
将Boc-N-Me-D-Phe-OH(279mg)溶解在DMF(10ml)中，与HOBt(168mg)和EDAC(384mg)一起搅拌10分钟。加入2-(氨基乙基)-1-甲基-吡咯烷(290μl)和DIEA(171μl)，并在室温下搅拌混合物20小时。然后将混合物浓缩成油状物，使其溶解在50ml水中并冻干。将产物再溶解到25ml水中，然后上到Sep-PakC18柱(Waters part.#43345)上，该柱用0.03N盐酸平衡过。用70％CH3CN(在0.03N盐酸中)从Sep-Pak柱洗脱产物，在用水稀释后通过冻干从洗脱物中分离产物。在室温下将所形成的物质与TFA/DCM1∶1(6ml)一起搅拌10分钟。在这一步骤后，通过氮气流蒸发掉TFA/DCM，将所形成的油状物溶解在70％CH3CN(10ml)中，加入1N盐酸(2ml)。在用水稀释后通过冻干分离产物(50ml)。
将所形成的物质溶解在DMF(3ml)中，并在室温下在添加Boc-N-Me-D-2Nal-OH(329mg)，HOAt(136mg)，EDAC(230mg)和DIEA(171μl)后搅拌18小时。然后加入EtOAc(50ml)，用5％碳酸氢钠水溶液(50ml)，用5％硫酸氢钾水溶液(50ml)和用水(50ml)抽提这一混合物。用硫酸钠干燥有机相，并在真空下浓缩成油状物。
将这一油状物在室温下与TFA/DCM 1∶1(6ml)一起搅拌10分钟。在这一步骤后，通过氮气流蒸发掉TFA/DCM，将所形成的油状物溶解在70％CH3CN(10ml)中，加入1N盐酸(3ml)。在用水(50ml)稀释后通过冻干分离产物。
将286mg这一冻干产物溶解在DCM(15ml)和DIEA(17μl)中。把这一溶液加入到Boc-(R)-3-哌啶甲酸(459mg)和EDAC(192mg)在DCM(10ml)中的溶液(其已在室温下搅拌25分钟)中。
在搅拌20小时后，通过氮气流将反应混合物浓缩成油状物，然后再溶解到EtOAc(100ml)中，用5％碳酸氢钠水溶液(50ml)，用5％硫酸氢钾水溶液(50ml)和用水(50ml)抽提。用硫酸钠干燥有机相，并在真空下浓缩成油状物。
将这一油状物在室温下与TFA/DCM 1∶1(6ml)一起搅拌10分钟。在这一步骤后，通过氮气流蒸发掉TFA/DCM，将所形成的油状物溶解在70％CH3CN(10ml)中，再用水稀释至终体积50ml。
然后通过半制备型HPLC(3次)纯化这一粗产物，采用类似于实施例中所描述的方法冻干。
通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+612.2原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+612.39原子质量单位)一致。
采用实施例1所限定的洗脱条件A1的RP-HPLC保留时间为25.80分钟。实施例5(2R)-2-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-萘基)丙醇
(R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯
将(R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(2-萘基)丙酸(5.0g；16.4mmol)溶解在无水DMF(50ml)中。加入碘甲烷(6.2ml；98.4mmol)和氧化银(I)(13.3g；57.4mmol)，将混合物搅拌一夜。过滤反应混合物，用二氯甲烷(200ml)抽提滤液。用氰化钾(2×50ml；5％)和水(3×75ml)洗涤有机相。干燥有机相(MgSO4)，在真空下除去溶剂。对残余物用乙酸乙酯和庚烷(1∶2)为洗脱剂进行色谱分离(二氧化硅，5×40cm)，产生4.98g(R)2-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯。1H-NMR(CDCl3)1.30，1.35(两个s，9H)；2.71，2.75(两个s，3H)；3.19，3.47(两个m，2H)；3.74，3.77(两个s，3H)；4.65，5.05(两个dd，1H)；7.29-7.82(m，7H)(旋光异构体混合物)(R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)-3-(2-萘基)丙酸
将(R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(2-萘基)丙酸甲酯(21.73g；65.57mmol)溶解在1，4-二噁烷(200ml)中，加入水(20ml)。反应混合物在冰浴上冷却，加入氢氧化锂(1.73g；72.13mmol)。15分钟后，加入水(140ml)，然后在室温下搅拌反应混合物另外3小时。加入乙酸乙酯(400ml)和水(300ml)，用硫酸氢钠1M(110ml)将pH调节到2.5。进行相分离，用乙酸乙酯(200ml)提取水溶液相。合并的有机相用水(300ml)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空下除去溶剂，产生20.1g(R)2-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)-3-(2-萘基)丙酸。1H-NMR(DMSO)1.18，1.21(两个s，9H)；2.62，2.66(两个s，3H)，3.11-3.58(m，2H)；4.75，4.90(两个dd，1H)；7.48-7.88(m，7H)；1.85(s(br)，1H)(旋光异构体混合物)(R)2-甲酰基氨基-3-(2-萘基)丙酸。
将(R)-2-氨基-3-(2-萘基)丙酸(18.11g；84.14mmol)溶解在甲酸(204ml)中，逐滴加入乙酸酐(70ml)。将反应混合物加热到55℃和在室温下搅拌3.5小时。逐滴加入冰冷水(70ml)，在0℃下搅拌20分钟。过滤反应混合物，用冰冷水(20ml)洗涤，产生20.26g(R)2-甲酰基氨基-3-(2-萘基)丙酸。1H-NMR(DMSO)3.05(dd，1H)；3.27(dd，1H)；4.64(m，1H)；7.48-7.87(m，7H)；7.95(s，1H)；8.45(d，1H)；12.9(s(br)，1H)。(R)-甲氨基-3-(2-萘基)丙-1-醇
将(R)-2-甲酰基氨基-3-(2-萘基)丙酸(4.37g；18mmol)溶解在无水四氢呋喃(100ml)中，并加入硼氢化钠(1.6g；43.2mmol)。将碘(4.57g；18mmol)溶解在无水四氢呋喃(40ml)中并在40℃以下逐滴添加到反应混合物中。在添加后，将反应混合物加热回流12小时。加入氢氧化钾(50ml；20％)。用甲基叔丁基醚(4×50ml)抽提水溶液相。合并的有机层用饱和氯化钠(150ml)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空下除去溶剂。对残余物用DCM/甲醇/氨(100∶10∶1)进行色谱分离(二氧化硅，5×40cm)，产生1.81g(R)甲氨基-3-(2-萘基)丙-1-醇。1H-NMR(CDCl3)2.43(s，3H)；2.88-3.05(m，3H)；3.10(s(br)，2H)；3.42(dd，1H)；3.69(dd，1H)；7.30-7.82(m，7H)。N-{(1R)-1-[N-((1R)-2-羟基-1-((2-萘基)甲基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将(R)-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)-3-(2-萘基)丙酸(0.55g；1.67mmol)和(R)甲氨基-3-(2-萘基)丙-1-醇(0.38g；2.00mmol)溶解在二氯甲烷(15ml)和二甲基甲酰胺(7.5ml)中。将反应混合物在冰浴上冷却。加入1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.24g；2.09mmol)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺氢氯化物(0.38g；2.0mmol)。在室温下将反应混合物搅拌12小时。在真空下使反应混合物浓缩。加入乙酸乙酯(200ml)，用水(100ml)、碳酸氢钠/碳酸钠(pH9)(75ml)、硫酸氢钠(75ml；10％)和水(100ml)洗涤有机溶液，并干燥(MgSO4)。在真空下除去溶剂，残余物用乙酸乙酯进行色谱分离(二氧化硅，2×45cm)，产生0.25g N-{(1R)-1-[N-((1R)-2-羟基-1-((2-萘基)甲基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯。1H-NMR(DMSO)0.80-1.99(几个s，9H)；2.45-4.20(m，12H)；4.70-5.12(m，2H)(所选择的峰，旋光异构体混合物)。(2R)-N-((1R)-2-羟基-1-((2-萘基)甲基)乙基)-N-甲基-2-甲氨基-3-(2-萘基)丙酰胺
将N-{(1R)-1-(N-[(1R)-2-羟基-1-((2-萘基)甲基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基]-2-(2-萘基)乙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(0.25g；0.475mmol)溶解在DCM(3ml)中。加入三氟乙酸(1ml)，将反应混合物搅拌20分钟。在真空下除去溶剂。加入DCM(5ml)，在真空下除去并重复这一操作。将残余物溶解在甲醇(5ml)中。添加碳酸氢钠/碳酸钠(5ml；pH9)，用乙酸乙酯(2×10ml)抽提溶液。干燥有机相(MgSO4)，除去溶剂，产生0.22g(2R)-N-((1R)-2-羟基-4-((2-萘基)甲基)乙基)-N-甲基-2-甲氨基-3-(2-萘基)丙酰胺。1H-NMR(CDCl3)1.70，2.37，2.45，2.93(四个s，6H)；2.56-3.05(m，2H)，3.52-3.85(m，7H)；4.25，4.97(两个m，1H)；6.86-7.78(m，14H)(所选择的峰，旋光异构体混合物)。(2R)-2-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-萘基)丙醇
将3-Boc-氨甲基苯甲酸(502.6mg)溶解在DCM(6ml)中，然后与EDAC(191.6mg)一起搅拌15分钟转变成对称的酸酐。
将(2R)-N-((1R)-2-羟基-1-((2-萘基)甲基)乙基)-N-甲基-2-甲氨基-3-(2-萘基)丙酰胺(200mg)在DCM(5ml)中的溶液加入到这一混合物中，然后在室温下反应20小时。
接着将反应混合物浓缩成油状物，并再溶解到EtOAc(100ml)中。将这一溶液依次用5％NaHCO3水溶液(2×50ml)，5％KHSO4水溶液(2×50ml)和H2O(2×50ml)提取。用Na2SO4干燥所形成的有机相，在旋转蒸发器上真空浓缩成油状物。然后将油状物溶解在DCM/TFA1∶1(6ml)中并搅拌。10分钟后，通过氮气流浓缩混合物，将所形成的油状物再溶解到70％CH3CN/0.1％TFA(5ml)中，用水稀释到100ml体积。
然后通过半制备型HPLC(2次)纯化这一粗产物，采用类似于实施例中所描述的方法冻干。
通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+559.5原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+560.72原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为33.07分钟和34.63分钟。实施例6H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
按照Fmoc策略在Applied Biosystems 431肽合成仪上以0.22mmol规模合成肽，其中使用制造商提供的FastMoc UV方案(其在NMP和UV监测Fmoc保护基的脱保护中采用HBTU介导的偶联)。用于合成的起始树脂是cat.#D-1675(来源于Bachem Feinchemikalien AG，Bubendorf，Switzerland)427mg，它是通过酰胺键连接到氨甲基聚苯乙烯树脂上的Fmoc-2，4-二甲氧基-4′-(羧甲氧基)-二苯甲基-胺。取代额为0.55mmol/g。所使用的保护的氨基酸衍生物是Fmoc-N-Me-D-Phe-OH、Fmoc-D-2Nal-OH、Fmoc-His(Trt)和Fmoc-Aib-OH。以双偶联进行Fmoc-N-Me-D-Phe-OH的偶联。合成后，通过在室温下与8m1 TFA、600mg苯酚、200μl乙二硫醇，400μl苯硫基甲烷和400μl H2O的混合物一起搅拌180分钟从750mg肽树脂上裂解下肽。过滤裂解混合物，通过氮气流将滤液浓缩到约2ml。用50ml二乙醚从这一油状物沉淀粗肽，并用50ml二乙醚洗涤2次。
干燥粗肽，并通过半制备型HPLC(1次)纯化，采用类似于实施例中所描述的方法冻干。
通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+598.5原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+598.73原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为24.68分钟和25.58分钟。实施例7H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Ser-NH2
采用与实施例6中所描述的类似的方法合成这一化合物。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+685.6原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+685.81原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为24.42分钟和25.92分钟。实施例8(3-氨甲基苯甲酰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
采用与实施例6中所描述的类似的方法合成这一化合物。不同之处仅在于采用HATU为活化剂进行Fmoc-D-2Nal-OH的偶联。在DIEA(2mmol)存在下用1mmol HATU使H-N-Me-D-Phe-树脂(0.23mmol)与1mmol Fmoc-D-2Nal-OH偶联150分钟。
通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+511.2原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+509.6原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为30.73分钟和32.47分钟。实施例9(4-哌啶羰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
采用与实施例8中所描述的类似的方法合成这一化合物。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+486.8原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+487.6原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为27.03分钟和28.48分钟。实施例10((3R)-3-哌啶羰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
采用与实施例8中所描述的类似的方法合成这一化合物。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+486.9原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+487.6原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为28.03分钟和29.50分钟。实施例11(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
采用与实施例8中所描述的类似的方法合成这一化合物。不同之处在于通过使用对称的酸酐偶联引入最后的残基。将Boc-3-氨甲基苯甲酸(251mg)与EDAC(96mg)在DCM中搅拌15分钟。然后添加树脂(429mg)，连续搅拌18小时。其它不同之处是用于从树脂裂解肽的时间减少至60分钟。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+522.9原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+523.6原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为28.83分钟和30.13分钟。实施例12H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
采用与实施例8中所描述的类似的方法合成这一化合物。其中采用HATU偶联Fmoc-N-Me-D-2Nal-OH和Fmoc-His(Trt)，用于从树脂裂解肽的时间减少至60分钟。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+612.3原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+612.8原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为24.33分钟和26.20分钟。实施例13(3-氨甲基苯甲酰基)-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
采用与实施例8中所描述的类似的方法合成这一化合物。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+587.2原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+586.74原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为21.13分钟和22.60分钟。实施例14(3-氨甲基苯甲酰基)
采用与实施例11中所描述的类似的方法合成这一化合物。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+601.6原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+601.77原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为20.40分钟和21.70分钟。实施例15((3R)-3-哌啶羰基)-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
采用与实施例11中所描述的类似的方法合成这一化合物。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+579.4原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+579.8原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为19.88分钟和21.20分钟。实施例16H-Aib-His-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
采用与实施例11中所描述的类似的方法合成这一化合物。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+690.6原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+690.9原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为15.71分钟和17.82分钟。实施例17((3R)-3-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
采用与实施例11中所描述的类似的方法合成这一化合物。采用Fmoc-N-Me-D-Phe-OH、Fmoc-N-Me-D-2Nal-OH和Boc-(R)-3-哌啶甲酸，其中Fmoc-N-Me-D-2Nal-OH和Boc-(R)-3-哌啶甲酸两者用HATU偶联。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+500.7原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+501.7原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为28.18分钟和29.55分钟。实施例18H-Aib-Ala-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
采用与实施例6中所描述的类似的方法合成这一化合物。通过分析型RP-HPLC(保留时间)和通过等离子解吸质谱(分子量)确定所获得的终产物的特征。在方法的实验误差的范围内所测得的分子量(MH+660.7原子质量单位)与所预期的结构(teor.MH+660.8原子质量单位)一致。
采用实施例1中所限定的洗脱条件A1和B1的RP-HPLC保留时间分别为25.63分钟和26.75分钟。实施例19H-3-氨甲基苯甲酰基-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-CH3
将Boc-3AMB-OH(115mg，0.458mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(62mg，0.458mmol)和1-乙基-3(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺氢氯化物(97mg，0.504mmol)溶解在DCM(8ml)和DMF(1ml)中，并搅拌15分钟。将N-甲基-2-甲氨基-N-((1R)-1-(甲基氨基甲酰基)-2-苯乙基)-3-(2-萘基)丙酰胺(185mg，0.458mmol)溶解在DCM(5ml)中，添加进上一溶液中，接着添加二异丙基乙胺(80ml，0.458mmol)，将混合物搅拌20小时。
用碳酸氢钠(50ml，5％)、H2O(50ml)和饱和NaCl/H2O(50ml)洗涤有机相，用硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。将残余物溶解在DCM(2ml)中，用TFA(2ml)处理10分钟。用氮气流除去挥发物。将残余物溶解在50ml20％MeCN中，用H2O稀释到500ml。半制备型HPLC10ml/分钟。，5次，30-40％MeCN/0.1M(N4)2SO4，pH2.5检测波长276nm，Sep-Pals，70％MeCN/0.1％TFA，冻干PD-MS理论值536.7实测值535.7±1HPLC A1保留时间31.20分钟B1保留时间36.35分钟实施例20H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NHMe
将Fmoc-L-His(三苯甲基)-OH(1.54g，2.48mmol)(BACHEM B-1570)和1-羟基氮杂苯并三唑(338mg，2.48mmol)溶解在9ml DMF中，冷却到0-4℃，加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺氢氯化物(475mg，2.48mmol)。将反应混合物在0-4℃下搅拌15分钟。
将N-甲基-2-甲氨基-N-((1R)-1-(甲基氨基甲酰基)-2-苯乙基)-3-(2-萘基)丙酰胺(500mg，1.24mmol)溶解在二氯甲烷(18ml)中，冷却到0-4℃，加入到上一溶液中，在0-4℃下搅拌1小时，接着添加二异丙基乙胺(0.425ml，2.48mmol)。将混合物温度慢慢提高到室温，将混合物搅拌72小时。在氮气流中蒸发DCM，向混合物中加入100ml乙酸乙酯，并用碳酸氢钠(2×100ml，5％)和硫酸氢钾(100ml，5％)洗涤。进行相分离，用硫酸钠干燥有机相并在真空下蒸发。将残余物溶解在DMF(8ml)中，用哌啶处理15分钟。用H2O(100ml)稀释，用乙酸(1.5ml)淬火。添加乙腈，将混合物用H2O稀释到250ml。将澄清的溶液上到10g″Seppaks″#Water柱(用H2O/0.03M HCl洗涤和用50ml35％MeCN/0.03M HCl洗脱过)上。用H2O稀释到200ml并冻干。
将Boc-α氨基异丁酸(756mg，3.72mmol)、1-羟基氮杂苯并三唑水合物(506mg，3.72mmol)和1-乙基-3(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺氢氯化物(713mg，3.72mmol)溶解在DMF(6ml)中，15分钟后，加入H-L-His(三苯甲基)-NMeD2Nal-NMeDPhe-NHCH3，2HCL(溶解在DCM(12ml)中)，接着添加二异丙基乙胺(0.637ml)，搅拌72小时。在氮气流中蒸发DCM，向混合物中加入100ml乙酸乙酯，并用碳酸氢钠(2×50ml，5％)和硫酸氢钾(50ml，5％)洗涤。进行相分离，用硫酸钠干燥有机相并在真空下蒸发。将残余物溶解在DCM(6ml)中，冷却到0-4℃，在0-4℃下用TFA(6ml)处理10分钟。用氮气流除去挥发物。将油状残余物溶解在35ml70％乙腈中，用H2O稀释到50ml，加入10ml浓盐酸(12mol)，搅拌72小时。用水将混合物稀释到200ml，固体碳酸钠中和，最后用H2O稀释到400ml。半制备型HPLCPD-MS，理论值550.7，实测值550.1HPLC A1保留时间31.75分钟B1保留时间36.15分钟实施例213-甲基氨甲基苯甲酰基-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-CH3
将Boc-NMe3AMB-OH(658mg，2.48mmol)、1-羟基氮杂苯并三唑水合物(338mg，2.48mmol)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺氢氯化物(475mg，2.48mmol)溶解在6ml DMF中，并搅拌15分钟。加入溶解在二氯甲烷(12ml)中的N-甲基-2-甲氨基-N-((1R)-1-(甲基氨基甲酰基)-2-苯基乙基)-3-(2-萘基)丙酰胺(500mg，1.24mmol)，接着添加二异丙基乙胺(0.425ml，2.48mmol)。将混合物搅拌20小时。
在氮气流中蒸发DCM，向混合物中加入75ml乙酸乙酯，并用碳酸氢钠(2×50ml，5％)和硫酸氢钾(50ml，5％)洗涤。进行相分离，用硫酸钠干燥有机相并在真空下蒸发。将残余物溶解在10ml二氯甲烷中，冷却到0-4℃，在0-4℃下用TFA(10ml)处理10分钟。用氮气流除去挥发物。将油状残余物溶解在25ml70％MeCN/0.1％TFA中，用H2O稀释到600ml。半制备型HPLC大柱，40ml/分钟，8次28-40&P11(NH4)2SO4，276nM。Seppak，冻干PD-MS理论值550.7，实测值550.1HPLC A1保留时间31.75分钟B1保留时间36.15分钟实施例22哌啶-4-羧酸N-((1R)-1-(N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲酰胺
(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸
按照Can J.Chem.(1977)，55，906的描述制备。1H-NMR(CDCl3)d 1.34(s，4.5H)，1.38(s，4.5H)，2.70(s，1.5H)，2.75(s，1.5H)；2.85-3.10(m，1H)，3.2-3.4(m，1H)；4.4-4.6(m，0.5H)，6.9-7.0(m，2H)，7.62(d，J＝10Hz，2Hz)，9.5-10(bs，1H)。N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲基氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸(2.00g，4.9mmol)溶解在二氯甲烷(20ml)中。加入羟基苯并三唑水合物(0.67g，4.9mmol)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳化二亚胺氢氯化物(0.99g，4.9mmol)，将混合物搅拌15分钟。加入甲胺(0.38g40％的甲醇溶液，4.9mmol)，将混合物搅拌一夜。加入二氯甲烷(40ml)，用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)和硫酸氢钠溶液(10％，50ml)洗涤混合物。干燥有机相(MgSO4)，并在真空下除去溶剂。对残余物在二氧化硅(2.5×20cm)上用乙酸乙酯/庚烷(2∶1)为洗脱剂进行色谱分离，产生1.77g N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯。1H-NMR(CDCl3)(主要旋光异构体的所选择的峰)d1.39(s，9H)；2.75(s，3H)；2.80(d，3H)；3.29(dd，1H)；4.88(t，1H)。(2R)-3-(4-碘苯基)-N-甲基-2-(甲氨基)丙酰胺
将N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁酯(1.7g；4.0mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，加入三氟乙酸(5ml)。将混合物搅拌1小时。加入二氯甲烷(30ml)和水(30ml)。加入固体碳酸氢钠至pH8。分离有机相，干燥(MgSO4)，并在真空下蒸发，产生1.22g(2R)-3-(4-碘苯基)-N-甲基-2-(甲氨基)丙酰胺。H-NMR(CDCl3)d 2.28(s，3H)；2.68(dd，1H)；2.81(d，3H)；3.08-3.19(m，2H)；6.95(d，2H)；7.63(d，2H)。N-甲基-N-((1R)-l-(N-甲基-N-((1R)-1-(甲基氨基甲酰基)-2-(4-碘苯基)乙基)氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将(2R)-2-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)-3-(2-萘基)丙酸(1.10g；3.30mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，加入HOAt(0.45g，3.1mmol)和EDAC(0.66g，3.5mmol)。搅拌15分钟后，加入(2R)-3-(4-碘苯基)-N-甲基-2-(甲氨基)丙酰胺(1.0g，3.1mmol)和二异丙基乙胺(0.45g，3.4mmole)，将混合物搅拌一夜。加入二氯甲烷(30ml)，用饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)和硫酸氢钠溶液(10％，30ml)洗涤混合物。干燥有机相(MgSO4)，在真空下除去溶剂。对残余物在二氧化硅(2.5×20cm)上用乙酸乙酯/庚烷(2∶1)为洗脱剂进行色谱分离，产生1.74g N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-((1R)-1-(甲基氨基甲酰基)-2-(4-碘苯基)乙基)氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。1H-NMR(CDCl3)(主要旋光异构体的所选择的峰)d1.38(s，9H)；2.18(d，3H)；2.45(s，3H)；2.75(s，3H)；5.05(m，1H)；5.42(m，1H)。(2R)-N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基-2-甲氨基-3-(2-萘基)丙酰胺
将N-甲基-N-((1R)-1-(N-甲基-N-((1R)-1-(甲基氨基甲酰基)-2-(4-碘苯基)乙基)氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在二氯甲烷和三氟乙酸的混合物中，搅拌15分钟。加入二氯甲烷(20ml)和水(30ml)。加入固体碳酸氢钠至pH8。分离有机相，干燥(MgSO4)并在真空下蒸发，产生1.40g(2R)-N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基-2-甲氨基-3-(2-萘基)丙酰胺。1H-NMR(CDCl3)(主要旋光异构体的所选择的峰)d1.79(s，3H)；2.02(d，3H)；2.55(s，3H)；3.78(dd，1H)；5.44(dd，1H)。4-(N-((1R)-1-(N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将1-叔丁氧羰基哌啶4-羧酸(143mg，0.66mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，加入HOAt(90mg，0.66mmol)和EDAC(140mg，0.73mmol)。搅拌15分钟后，加入(2R)-N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基-2-甲氨基-3-(2-萘基)丙酰胺(350mg，0.66mmol)和二异丙基乙胺(85mg，0.66mmol)并将混合物搅拌一夜。加入二氯甲烷(20ml)，用饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)和硫酸氢钠溶液(10％，20ml)洗涤混合物。干燥有机相(MgSO4)，在真空下除去溶剂。对残余物用乙酸乙酯为洗脱剂进行二氧化硅(2.5×20cm)色谱分离，产生412mg4-(N-((1R)-1-(N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。
将4-(N-((1R)-1-(N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(412mg 0.56mmol)溶解在二氯甲烷(5ml)和三氟乙酸(5ml)的混合物中，搅拌5分钟。加入二氯甲烷(20ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)。加入固体碳酸氢钠至pH8。进行相分离，干燥有机相(MgSO4)并蒸发，产生255mg标题化合物。1H-NMR(CDCl3)(主要旋光异构体的所选择的峰)d2.32(d，3H)；2.58(s，3H)；2.68(s，3H)；5.33(m，1H)；5.84(t，1H)。HPLC保留时间＝33.35分钟(A1)PDMSm/z 640.8(M+H)+。缩写HBTU O-(苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸盐NMPN-甲基吡咯烷酮HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸盐Trt- 三苯甲基HOBT 7-羟基苯并三唑水合物3-AmB 3-氨甲基苯甲酰基N-Me-3-AMB 3-甲基氨甲基苯甲酰基
权利要求
1.通式I的化合物或其药学上可接受的盐A-B-C-D(-E)pI其中p是0或1；A是氢或R1-(CH2)q-(X)r-(CH2)sCO-，其中q是0或选自下组的整数1，2，3，4，5；r是0或1；s是0或选自下组的整数1，2，3，4，5；R1是氢、咪唑基、胍基、哌嗪基、吗啉代、哌啶子基或N(R2)-R3，其中R2和R3各自分别是氢或低级烷基(可被可不被一个或多个羟基、吡啶基或呋喃基取代的)；并且，当r是1时X是-NH-、-CH2-、-CH＝CH-、-C(R16)(R17)-；
其中R16和R17各自分别是氢或低级烷基；B是(G)t-(H)u，其中t和u各自分别是0或1；G和H是氨基酸残基，该残基选自由天然L-氨基酸或它们的相应的D-异构体或非-天然氨基酸(例如1，4-二氨基丁酸、氨基-异丁酸、1，3二氨基丙酸、4-氨基苯丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸、1，2，3，4-四氢降哈尔满(norharman)-3-羧酸、N-甲基邻氨基苯甲酸、邻氨基苯甲酸、N-苄基甘氨酸、3-氨甲基苯甲酸、3-氨基-3-甲基丁酸、肌氨酸、3-哌啶甲酸或异-3-哌啶甲酸)组成的组；并且其中，当t和u两者都是1时，G和H之间的酰胺键可以被可以不被Y-NR18-替代，其中Y是-CO-或-CH2-，且R18是氢、低级烷基或低级芳烷基；C是式-NH-CH((CH2)w-R4)-CO-的D-氨基酸，其中w是0，1或2；且R4选自由以下基团组成的组
以上各种可以是被或不被下列基团取代的卤素、低级烷基、低级烷氧基、低级烷氨基、氨基或羟基；当p是1时，D是式-NR20-CH((CH2)k-R5)-CO-的D-氨基酸或者当p是0时，D是-NR20-CH((CH2)1-R5)-CH2-R6或-NR20-CH((CH2)m-Ru)-CR6，其中k是0，1或2；l是0，1或2；m是0，1或2；R20选自由低级烷基或低级芳烷基组成的组；R5选自由以下基团组成的组
以上各种可以是被或不被以下基团取代的卤素、低级烷基、低级烷氧氨基或羟基；且R6是哌嗪基、吗啉代、哌啶子基、-OH或-N(R7)-R8，其中R7和R8各自分别是氢或低级烷基；当p是1时，E是-NH-CH(R10)-(CH2)v-R9，其中v是0或选自下组的整数1，2，3，4，5，6，7，8；R9是氢、咪唑基、胍基、哌嗪基、吗啉代、哌啶子基，-N(R11)-R12或
其中n是0，1或2，且R19是氢或低级烷基，
其中o是选自下组的整数1，2，3，R11和R12各自分别是氢或低级烷基或
以上各种可以是被或不被以下基团取代的卤素、低级烷基、低级烷氧基、氨基、烷氨基、羟基或氨基和吡喃己糖或吡喃己糖基-吡喃己糖的Amadori重排产物，且当p是1时，R10选自由H、-COOH、-CH2-R13、-CO-R13或-CH2-OH组成的组，其中R13是哌嗪基、吗啉代、哌啶子基、-OH或-N(R14)R15其中R14和R15各自分别是氢或低级烷基；除了C和D之间的键外，所有式I内的酰胺键可以分别地由-Y-NR18替代；其中Y是-CO-或-CH2-，且R18是氢，低级烷基或低级芳烷基；但不包括下列化合物(3-氨甲基苯甲酰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、3-(H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉代丙烷、2-(H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、((3R)-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、3-((3-氨甲基苯甲酰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉基丙烷、2-(H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、2-(((3R)-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、2-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、3-(H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉基丙烷、3-(((3R)-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉代丙烷、3-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉代丙烷、2-((3-氨甲基苯甲酰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷、2-(((3R)哌啶羰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷。
2.按照权利要求1的化合物，其中A是氢、3-AMB、N-Me-3-AMB或Aib。
3.按照权利要求1的化合物，其中t是1，u是0，且G选自由3-氨甲基苯甲酰基、3-哌啶甲酸和异3-哌啶甲酸组成的组。
4.按照权利要求1的化合物，其中t是1，u是1，G是Aib，且H选自由His，Phe和Ala组成的组。
5.按照权利要求1的化合物，其中C选自由D-2-Nal和D-Phe组成的组。
6.按照权利要求1的化合物，其中，当p是1时，D是D-Phe或D-2Nal。
7.按照权利要求1的化合物，其中，当p是0时，D是D-Phe-NH2或D-2Nal-NH2。
8.按照权利要求1的化合物，其中，当p是1时，E是-NH-CH(R10)-(CH2)v-R9，其中v是0或选自下组的整数1，2，3，4；R9是氢、吗啉代、哌啶子基、N(R11)-R12或
其中n是0，1或2，R19是氢或低级烷基，R11和R12各自分别是氢或低级烷基，且当p是1时，R10选自由-H、-COOH、-CH2-R13、-CO-R13或-CH2-OH组成的组，其中R13是哌嗪基、吗啉代、哌啶子基、-OH或-N(R14)-R15，其中R14和R15各自分别是氢或低级烷基。
9.按照权利要求1的化合物，其中A和B之间、B和C之间、D和(E)p之间以及G和H之间的至少一个酰胺键由-CO-N(CH3)-替代。
10.一种选自由以下化合物组成的组的化合物或其药学上可接受的盐(R)-2-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-苯基丙醇或其TFA盐、3-((3-氨甲基苯甲酰基))-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-1N，N-二甲基氨基丙烷或其TFA盐、3-(((3R)-3-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-N，N-二甲基氨基丙烷或其TFA盐、2-(((3R)-3-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(1-甲基-2-吡咯烷基)乙烷或其TFA盐、H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Ser-NH2，或其TFA盐、(3-氨甲基苯甲酰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2，或其TFA盐、(4-哌啶羰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2，或其TFA盐、((3R)-3-哌啶羰基)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2，或其TFA盐、(3-氨甲基苯甲酰基)-D-Phe-N-Me-D-Phe-NH2，或其TFA盐、(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2，或其TFA盐、((3R)-3-哌啶羰基)-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2，或其TFA盐、H-Aib-His-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2，或其TFA盐、((3R)-3-哌啶羰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2或其TFA盐、(2R)-2-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-萘基)丙醇，或其TFA盐、(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2或其TFA盐、3-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-Phe-NH)-1-N，N-二甲基氨基丙烷、H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2或其TFA盐、(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2、H-Aib-Ala-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2或其TFA盐、H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2或其TFA盐、2-((3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-吗啉代乙烷、(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-Me、3-((3-甲基氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1-N，N-二甲氨基丙烷、(3-氨甲基苯甲酰基)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-N-Me2、H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2、3-氨甲基苯甲酰基-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-CH3，或其TFA盐、3-甲氨基甲基苯甲酰基-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-CH3或其TFA盐、H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NHMe或其HCl盐、和哌啶-4-羧酸-N-((1R)-1-(N-((1R)-2-(4-碘苯基)-1-(甲基氨基甲酰基)乙基)-N-甲基氨基甲酰基)-2-(2-萘基)乙基)-N-甲酰胺。
11.一种药物组合物，该组合物包含作为活性成分的按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或稀释剂。
12.以单位剂量形式的按照权利要求11的组合物，该组合物包含约10到约200mg按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐。
13.一种用于刺激生长激素从垂体释放的药物组合物，该组合物包含作为活性成分的按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或稀释剂。
14.供口头、经皮、鼻、肺部或肠胃外施用的按照权利要求11、12或13的药物组合物。
15.一种刺激生长激素从垂体释放的方法，该方法包括向需要这种刺激的对象施用有效量的按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐或按照权利要求11、12或14之任一的组合物。
16.按照权利要求15的方法，其中有效量的按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐或酯在从每天约0.0001到约100mg/kg体重的范围内，优选地从每天约0.001到约50mg/kg体重的范围内。
17.一种用于提高动物生长速率和生长程度从而提高动物奶或毛产量或者用于治疗疾病的方法，该方法包含向需要这种刺激的对象施用有效量的按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐或按照权利要求11、12或14之任一的组合物。
18.用作药物的按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐。
19.按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于刺激生长激素从垂体释放之药物上的用途。
20.按照权利要求1到10之任一的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于提高动物生长速率和生长程度从而提高动物奶或毛产量或者用于治疗疾病之药物上的用途。
全文摘要
式A－B－C－D(E)p的化合物用于刺激生长激素从垂体释放。
文档编号C07K7/02GK1188484SQ9619494
公开日1998年7月22日 申请日期1996年6月19日 优先权日1996年6月19日
发明者N·L·约翰逊, J·劳, K·曼德森, H·索格森, B·F·伦德特, B·派什克, T·K·汉森, B·S·汉森 申请人:诺沃挪第克公司