睫状神经营养因子突变体及其修饰型突变体和应用的制作方法

文档序号:11095829阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种睫状神经营养因子突变体,其中,所述睫状神经营养因子突变体是在天然睫状神经营养因子的氨基酸序列的基础上发生突变得到的,所述突变包括:第40位的赖氨酸突变为半胱氨酸,以及第17位的半胱氨酸突变为丙氨酸。

2.根据权利要求1所述的睫状神经营养因子突变体,其中,所述突变还包括:第63位谷氨酰胺突变为精氨酸、以及去除天然睫状神经营养因子C末端的15个氨基酸。

3.根据权利要求1所述的睫状神经营养因子突变体,其中,所述的睫状神经营养因子突变体具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。

4.一种DNA,其中,所述DNA的核苷酸序列为编码根据权利要求1-3中任一项所述的睫状神经营养因子突变体的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的DNA,其中,所述DNA的核苷酸序列为SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。

6.一种重组表达载体,其中,所述重组表达载体含有权利要求4或5所述的核苷酸序列。

7.根据权利要求6所述的重组表达载体,其中,所述重组表达载体为PET24a+/CNTFnew/CC40表达载体。

8.一种遗传工程宿主细胞,其中,所述宿主细胞含有权利要求6或7所述的重组表达载体。

9.根据权利要求8所述的遗传工程宿主细胞,其中,所述宿主 细胞为CNTFnew/CC40工程菌。

10.一种修饰型睫状神经营养因子突变体,其中,所述的修饰型睫状神经营养因子是通过对根据权利要求1-3中任一项所述的睫状神经营养因子突变体的第40位半胱氨酸进行定点修饰而得到的,所述定点修饰是通过在所述的第40位半胱氨酸上结合化学修饰剂而实现的。

11.根据权利要求10所述的修饰型睫状神经营养因子突变体,其中,所述化学修饰剂为聚乙二醇或聚乙二醇类聚合物。

12.根据权利要求10所述的修饰型睫状神经营养因子突变体,其中,所述的化学修饰剂选自:聚乙二醇、甲氧基聚乙二醇、甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺琥珀酸酯、甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺碳酸酯、甲氧基聚乙二醇三氟乙基磺酸酯、甲氧基聚乙二醇-丙醛、甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺丙酸酯、甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺α甲基丁酸酯、甲氧基聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺、甲氧基聚乙二醇-马来酰亚胺或甲氧基聚乙二醇-乙醛。

13.根据权利要求10所述的修饰型睫状神经营养因子突变体,其中,所述化学修饰剂为甲氧基聚乙二醇-马来酰亚胺。

14.根据权利要求1-3中任一项所述的睫状神经营养因子突变体在制备用于治疗和/或预防肥胖症或与肥胖症相关的疾病的药物中的应用。

15.根据权利要求10-13中任意一项所述的修饰型睫状神经营养因子突变体在制备用于治疗和/或预防肥胖症或与肥胖症相关的疾病的药物中的应用。

16.一种用于治疗和/或预防肥胖症及肥胖相关疾病的药物组合物,其中,所述的药物组合物包含根据权利要求1-3中任一项所述的睫状神经营养因子突变体和/或根据权利要求10-13中任意一项所述的修饰型睫状神经营养因子突变体。

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