本发明属于药物化学领域，具体涉及一种二苯乙烯和二苯乙烷类化合物的磷酰氨基酸及其衍生物的制备及用途。
背景技术：
二苯乙烯和二苯乙烷类化合物广泛存在于自然界中，具有多种生物活性。二苯乙烯分为顺式二苯乙烯与反式二苯乙烯，两种构型在自然界都有存在。反式构型常以苷元或苷存在于天然植物中比较多，白藜芦醇和紫檀芪是该类化合物的代表。白藜芦醇(化学名：(e)-3，4′，5-三羟基二苯乙烯)又称为芪三酚，主要来源于花生、葡萄(红葡萄酒)、虎杖、桑椹等植物，是一种生物性很强的天然多酚类物质，是肿瘤的化学预防剂，也是对降低血小板聚集，预防和治疗动脉粥样硬化、心脑血管疾病的化学预防剂。而紫檀芪(pterostilbene，pte，化学名：(e)-3，5-二甲氧基-4′-羟基苯乙烯)，作为白藜芦醇的一种天热的甲基化产物衍生物，最初是在紫檀中提取发现的，随后在蓝莓、葡萄和花榈木等植物和蜂胶中发现过它的身影。有报道称，紫檀芪具有抗癌、抗炎、抗氧化和镇痛剂的作用[remsbergcm，yanezja，ohgamiy，etal.pharmacometricsofpterostilbene：preclinicalpharmacokineticsandmetabolism，anticancer，anti-inflammatory，antioxidantandanalgesicactivity[j].phytotherres，2008，22(2)：169-179.]。而作为抗癌药物，紫檀芪也表现出对hepg2细胞[刘盛楠，邵淑丽，张伟伟等.紫檀芪对人肝癌hepg2细胞增殖及凋亡的影响[j].基因组学与应用生物学.2015，34(8)：1617-1624.]，mda-mb-231细胞[黄海进，焦峰，何秀芝.紫檀芪对人乳腺癌mda-mb-231细胞系增殖及凋亡的影响[j].山东医药.2012，52(44)：53-55.]等较好的活性。
有关顺式二苯乙烯类天然产物的报道主要来自于从南非的一种灌木(combretumcaffrum)中分离出来一系列具有二苯乙烯类结构的活性组分，药理研究表明，该类化合物显示出特异性靶向和破坏已生成的肿瘤血管，因此能强效攻击活体肿瘤，导致肿瘤从内到外彻底死亡，其中以combretastatina-4(化学名：(z)-3，4，5-三甲氧基-3’-羟基-4’-甲氧基二苯乙烯，以下简称：ca4)的活性最好(srivastava，v.，etal.bioorg.med.chem.2005，13，5892-5908；dzierzbicka，k.，etal.polishj.chem.，2004，78，323-341.)。有关ca4的进一步的研究表明，此类化合物不仅能够阻断肿瘤血供对肿瘤细胞有抑制作用而且也能抑制微管蛋白的聚合这极大的引起了科学工作者的兴趣，随后对ca-4展开了一系列的合成修饰等研究。历经多年的发展，很多ca4衍生物被合成出来，而且已经有制药公司将ca-4做成前药用于临床，例如它的磷酸酯二钠盐前药(化学名：(z)-3，4，5-三甲氧基-4’-甲氧基二苯乙烯-3’-o-磷酸二钠盐，以下简称ca4p)在1/10mtd时就能显著地降低肿瘤血管的血流量，最终导致肿瘤坏死。ca4p是全球第一个进入临床研究的肿瘤血管破坏药物，目前已进入了iii期临床研究。
ca4具有与其它抑制微管聚合的抗癌药物相同的结构特征——二苯乙烯，其中有三个甲氧基的环为a环，另一个为b环(medarde，m.，etal.bioorg.med.chem.lett.1999，9，2303-2308)。hamel等的假设模型认为ca4的a，b两环分别与微管蛋白的α和β链上两个相离的位点作用，从而引起肿瘤血管内皮细胞的凋亡，这导致很多研究者把研究的重点放在两环之间的烯键。而分子结构中烯键的存在就必然有顺反异构的问题，因此研究者对其比较了顺式和反式。经研究表明顺式比反式明显有较高的活性(cushman，m.，etal.j.med.chem.，1991，34，2579-2588.nam，n.h.，etal.bioorg.med.chem.lett.，2002，12，1955-1958.)。其次，把烯键改成碳的数目为0～4的饱和碳链，活性实验结果显示除了碳数目为2的化合物保留有活性外，其余的化合物都没有活性(getahun，z.，etal.j.med.chem.，1992，35，1058-1067.)。在烯键上引入取代基的报道也有较多(hadfield，j.a.，etal.eur.j.med.chem.，2005，40，529-541.pinney，k.g.，etal.bioorg.med.chem.2000，8，2417-2425.borrel，c.etal.bioorg.med.chem.2005，13，3853-3864.)，但是所合成的衍生物活性并不高。另外，国外也有对ca-4进行拼接嵌合的报道。coggiola等(coggiola，b.，pagliai，f.，allegrone，g.etal..bioorg.med.chem.lett.2005，15，3551-3554.)把氮芥类药物结构中的有效部分带到ca4中，合成了化合物通过实验发现其对微管蛋白聚合有很好的抑制作用。toki等(pettit，g.r.，toki，b.，herald，d.l.etal.j.med.chem.1998，41，1688-1695.)通过研究与肿瘤迅速增殖相关的酶的作用，设计并合成出了新的ca4前药可在某种酶的作用下分解成为ca4。这种设计思路，为ca4前药的研究开辟了新的方向和研究领域，但是到目前为止尚未发现具有更高活性的化合物。
毛兰素(化学名：3，4，5-三甲氧基-3’-羟基-4’-甲氧基二苯乙烷，代号：mls)是一种天然的二苯乙烷类化合物，在结构上与ca4类似，是乙烯基桥被氢化了的ca4，同样是一种具有抗肿瘤活性的天然产物，是从我国名贵中药材石斛中提取出来的。石斛除了具有滋阴养胃，清热生津，润肺止咳，明目强身的传统功效外，现代药理学研究还发现其有抗肿瘤、抗衰老、增强体质和免疫力、扩张血管、减轻肝损伤的作用。
我们通过研究发现将二苯乙烯类化合物的双键氢化后形成的二苯乙烷类衍生物3，4，5-三甲氧基-3’-羟基-4’-乙氧基二苯乙烷(ebt)的4’-位-乙氧基和3’-位羟基同样具有协同作用，且与ca4相比其抗肿瘤效果有显著提高(吴范宏等，一种乙氧基二苯乙烷衍生物及其制备方法和用途，国际公布号us2012/0046492a1；一种3，4，5-三甲氧基-3’-羟基-4’-烷氧基二苯乙烷的制备方法cn103539642)。将双键改造成饱和键后，由于不存在顺反式异构体的变化，相关理化性质比ca4更稳定，化合物的制备工艺更加简便，合成收率显著提高，而原料损耗和单位合成成本大大降低。在此工作基础上，本发明人发现将二苯乙烯和二苯乙烷类化合物与氨基酸片段通过磷酸酯和磷酸酰胺键起来，形成新颖结构的抗肿瘤药物分子。在同等条件下比较，显示出优于ca4和ca4p的抗肿瘤活性，具有良好的应用开发前景。
技术实现要素：
1、本发明提供一种二苯乙烯和二苯乙烷类化合物的磷酰氨基酸及其衍生物及其制备方法与用途，其结构如通式(i)：
其中：
1)r1、r2、r3为羟基、烷基、氟取代的烷基、烷氧基、氟取代的烷氧基等，优选甲氧基和氟取代的甲氧基。
2)r4为羟基、烷基、氟取代的烷基、烷氧基和氟取代的烷氧基，优选甲氧基和乙氧基等。
3)r5为氢、烷基或芳基，优选苯基。
4)r6为氢、烷基、取代的烷基。
5)r7为烷基、烷氧基、羟基、氨基、取代的胺基、氨基酸及其衍生物等，优选烷氧基。
6)“---”为键或不存在。
2、本发明提供了一种通式(i)化合物中二苯乙烯类化合物磷酰氨基酸及其衍生物的制备方法，由二苯乙烯片段(ii)、氨基酸衍生物片段(iii)和二氯磷酸酯(iv)合成得到。
具体操作包括：
1)将所用的胺(iii)溶于二氯甲烷中，在低温下滴加三乙胺；
2)向上述所述的反应液中滴加二氯磷酸酯(iv)的二氯甲烷溶液；
3)再向以上的反应液中滴加二苯乙烯中间体(ii)与三乙胺的混合溶液，反应完毕经后处理得到产物通式(i)所述产物。
3、提供了一种通式(i)上化合物在制备治疗微管蛋白聚集抑制剂中的应用。
4、上述通式(i)上化合物在制备作为抗肿瘤血管破坏剂，对各种肿瘤具有血管靶向作用的药物中的应用。所述各种肿瘤主要包括有：肺癌、非小细胞肺癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、骨癌、食道癌、乳房癌、前列腺癌、睾丸癌、结肠癌、卵巢癌、膀胧癌、子宫颈癌、黑色素瘤、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊性腺癌、囊性癌、髓状癌、支气管癌、骨细胞癌、上皮癌、胆管癌、绒毛膜癌、胚癌、精原细胞癌、维尔姆斯癌、胶质细胞癌、星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、成血细胞瘤、声带神经瘤、脑膜瘤、成神经细胞瘤、成视神经细胞瘤、成视网膜细胞瘤、神经纤维瘤、纤维肉瘤、成纤维细胞瘤、纤维瘤、纤维腺瘤、纤维软骨瘤、纤维囊瘤、纤维粘液瘤、纤维骨瘤、纤维粘液肉瘤、纤维乳头状瘤、粘液肉瘤、粘液囊瘤、粘液软骨瘤、粘液软骨肉瘤、粘液软骨纤维肉瘤、粘液腺瘤、成粘液细胞瘤、脂肉瘤、脂肪瘤、脂肪腺瘤、成脂细胞瘤、脂肪软骨瘤、脂肪纤维瘤、脂肪血管瘤、粘液脂瘤、软骨肉瘤、软骨瘤、软骨肌瘤、脊索瘤、绒毛膜腺瘤、绒毛上皮瘤、成绒毛膜细胞瘤、骨肉瘤、成骨细胞瘤、骨软骨纤维瘤、骨软骨肉瘤、骨软骨瘤、骨囊瘤、骨牙质瘤、骨纤维瘤、骨纤维肉瘤、血管肉瘤、血管瘤、血管脂肪瘤、血管软骨瘤、成血管细胞瘤、血管角质瘤、血管神经胶质瘤、血管内皮瘤、血管纤维瘤、血管肌瘤、血管脂肪瘤、血管淋巴管瘤、血管脂肪平滑肌瘤、血管肌脂瘤、血管肌神经瘤、血管粘液瘤、血管网状内皮瘤、淋巴管肉瘤、淋巴肉芽瘤、淋巴管瘤、淋巴瘤、淋巴粘液瘤、淋巴肉瘤、淋巴管纤维瘤、淋巴细胞瘤、淋巴上皮瘤、成淋巴细胞瘤、内皮瘤、成内皮细胞瘤、滑膜瘤、滑膜肉瘤、间皮瘤、结缔组织瘤、尤因瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、成平滑肌瘤、平滑肌纤维瘤、横纹肌瘤、横纹肌肉瘤、横纹肌粘液瘤、急性淋巴白血病、急性骨髓性白血病、慢性病细胞、红细胞增多症、淋巴瘤、多发性骨髓瘤。
5、上述所述通式(i)上化合物在制备治疗非正常新生血管引起的疾病的药物中的应用，所述的疾病主要包括有：风湿性关节炎、糖尿病视网膜病、早熟视网膜病、视网膜静脉闭塞、牛皮癣、红斑痤疮、卡波济肉瘤、特异性反应性角膜炎、流行性角膜结膜炎、新生血管性青光眼、细菌性溃疡、真菌性溃疡、单纯性疤疹感染、带状疤疹感染、原生动物感染、分支杆菌感染、多动脉炎、肉样瘤、巩膜炎、潮红、口干眼燥关节炎综合症、全身性红斑狼疮、艾滋病综合症、梅毒。
6、上述通式(i)上化合物在制备作为抗肿瘤药物，测试对各种肿瘤具有抗肿瘤作用的药物中的应用。所测试肿瘤种类有：宫颈癌细胞hela、胃癌细胞mkn45、乳腺癌细胞mcf-7、结肠癌细胞hct-116、人胃癌细胞mgc-803、人肝癌细胞hepg2、人肺癌细胞a549、人乳腺癌细胞mda-mb-231、人甲状腺癌细胞sw579等。
7、上述所述通式(i)上化合物药效、安全评价结果综述如下：
1)通过细胞毒性实验(mtt)检测的化合物抗肿瘤活性的评价。所测试肿瘤种类有：宫颈癌细胞hela、胃癌细胞mkn45、乳腺癌细胞mcf-7、结肠癌细胞hct-116、肺癌细胞a549。结果表明：所测试化合物中，化合物sit-108所显示活性稍次于其他化合物，但也优于ca4p。化合物sit-116的化合物对多种肿瘤具有抗肿瘤活性，显示出广谱抗肿瘤活性，且其活性测试ic50值均较ca4p的为低，表明sit-116的抗肿瘤活性要优于ca4p。对于胃癌细胞mkn45，只有化合物sit-116表现出抗肿瘤活性。对于宫颈癌细胞hela，化合物sit-116表现出最优抗肿瘤活性；对于其余癌细胞，化合物sit-116基本上表现出最差抗肿瘤活性。这说明化合物sit-116抗肿瘤谱较广，活性优于ca4p，但次于所测的其他化合物。
2)通过采用cck-8法测试化合物对多种耐药型肿瘤细胞株，如人胃癌细胞mgc-803、人肝癌细胞hepg2、人肺癌细胞a549、人乳腺癌细胞mda-mb-231、人甲状腺癌细胞sw579等细胞的体外细胞毒活性及强度，结果表明：化合物对人胃癌细胞mgc-803、人肝癌细胞hepg2、人肺癌细胞a549、人乳腺癌细胞mda-mb-231、人甲状腺癌细胞sw579等细胞具有不同程度的抑制细胞增殖的活性。
3)化合物sit-108、sit-109、sit-111、sit-115、sit-116、sit-117等对人胃癌细胞mgc-803具有显著的细胞毒活性，其ic50值在10μm以下。化合物sit-108、sit-109、sit-111、sit-116、sit-117等对人肝癌细胞hepg2具有显著的细胞毒活性，其ic50值在10μm以下，化合物sit-115对人肝癌细胞hepg2亦具有明显的细胞毒活性，其ic50值在10μm-40μm之间。化合物sit-108、sit-109、sit-111、sit-116等对人肺癌细胞a549具有显著的细胞毒活性，其ic50值在10μm以下，化合物sit-115、sit-117对人肺癌细胞a549亦具有明显的细胞毒活性，其ic50值在10μm-40μm之间。化合物sit-108、sit-111、sit-116、sit-117等对人甲状腺癌细胞sw579具有显著的细胞毒活性，其ic50值在10μm以下，sit-115对人甲状腺癌细胞sw579亦具有明显的细胞毒活性，其ic50值在10μm-50μm之间。化合物sit-108、sit-109、sit-116、sit-117等对人乳腺癌细胞mda-mb-231具有显著的细胞毒活性，其ic50值在10μm以下；化合物sit-111、sit-115对人乳腺癌细胞mda-mb-231亦具有明显的细胞毒活性，其ic50值在10μm-50μm之间。
8、本发明研究发现ca4类似物经磷酸酯拼接多种氨基酸衍生物所得化合物确实对多种肿瘤细胞具有明显细胞毒活性，在相同条件下比较，确实显示出优于ca4和ca4p的抗肿瘤活性。这也说明此类将ca4及类似物进行某些药效基团或小分子拼接的设计确实有助于药效的提高。而且本发明的实验方法路线简单，操作简便，合成周期短。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的技术内容，现结合实施例进一步说明如下：
实施例1[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯氧基)(苯氧基)磷酰]-d-亮氨酸甲酯(代号：sit-109)的制备
向三口瓶中加入l-亮氨酸甲酯盐酸盐(1.82g，10mmol)和二氯甲烷(30ml)，搅拌溶解，冰浴冷却，加入三乙胺(2.81ml，20mmol)，搅拌30min后，向该反应液中缓慢滴加入ca4(3.16g，10mmol)和三乙胺(1.40ml，10mmol)的ch2cl2混合溶液(30ml)，加毕，继续搅拌反应4h，tlc检测显示反应完毕，加水淬灭，二氯甲烷萃取，分液，有机相依次用稀盐酸水溶液、饱和碳酸氢钠、食盐水和水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋干，粗品经柱色谱分离(pe/ea＝2/1)得产品为浅黄色油状物(2.82g，收率47％)。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.30(dd，j＝9.1，6.2hz，2h)，7.26-7.18(m，3h)，7.14(t，j＝6.9hz，1h)，7.07(d，j＝8.4hz，1h)，6.78(dd，j＝11.9，8.6hz，1h)，6.49(s，2h)，6.43(s，2h)，4.12(dd，j＝14.6，7.5hz，1h)，3.81(d，j＝17.2hz，6h)，3.65(dd，j＝28.5，8.0hz，9h)，1.56-1.42(m，2h)，0.91-0.86(m，3h)，0.84(dd，j＝6.2，4.5hz，3h)；ms(m/z)：599(m+)；hrms：calcd.599.2284，found599.2121。
实施例2[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙基)苯氧基)(苯氧基)磷酰)甘氨酸甲酯(sit-116)的制备
向三口瓶中加入l-亮氨酸甲酯盐酸盐(1.82g，10mmol)和二氯甲烷(30ml)，搅拌溶解，冰浴冷却，加入三乙胺(2.81ml，20mmol)，搅拌30min后，向该反应液中缓慢滴加入毛兰素(3.18g，10mmol)和三乙胺(1.40ml，10mmol)的ch2cl2混合溶液(30ml)，加毕，继续搅拌反应4h，tlc检测显示反应完毕，加水淬灭，二氯甲烷萃取，分液，有机相依次用稀盐酸水溶液、饱和碳酸氢钠、食盐水和水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋干，粗品经柱色谱分离(pe/ea＝2/1)得产品为浅黄色油状物(2.45g，收率45％)，。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.35(t，j＝7.8hz，2h)，7.29(d，j＝8.6hz，2h)，7.18(t，j＝7.6hz，1h)，6.93(d，j＝8.3hz，1h)，6.86(d，j＝8.3hz，1h)，6.79(dd，j＝17.9，8.1hz，1h)，6.39(d，j＝4.5hz，2h)，4.18(q，j＝7.1hz，2h)，3.83(d，j＝4.5hz，14h)，2.82(d，j＝5.9hz，4h)，1.25(t，j＝7.1hz，3h)；ms(m/z)：559(m+)；hrms：calcd.559.19712，found559.18135。
实施例3[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯氧基)(苯氧基)磷酰]-d-丙氨酸异丙酯(代号：sit-105)的制备
操作同实施例1，以3mmol投料，得0.97g，产率55.22％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.30(t，j＝7.5hz，2h)，7.22(d，j＝7.5hz，3h)，7.15(t，j＝6.9hz，1h)，7.07(d，j＝8.3hz，1h)，6.79(t，j＝8.0hz，1h)，6.48(d，j＝1.8hz，2h)，6.43(s，2h)，5.01-4.94(m，1h)，4.10(dd，j＝16.5，9.7hz，1h)，3.82(t，j＝6.1hz，6h)，3.68(s，6h)，1.33(t，j＝7.2hz，3h)，1.21(dd，j＝12.0，6.0hz，6h).
实施例4[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯氧基)(苯氧基)磷酰]-d-缬氨酸甲酯(代号：sit-106)的制备
操作同实施例1，以10mmol投料，得3.1042g，产率53.01％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.29(t，j＝7.7hz，2h)，7.22(t，j＝7.6hz，3h)，7.13(t，j＝7.2hz，1h)，7.06(d，j＝8.4hz，1h)，6.80-6.75(m，1h)，6.46(d，j＝15.8hz，2h)，6.40(d，j＝12.5hz，2h)，3.99-3.92(m，1h)，3.83-3.79(m，6h)，3.64(dd，j＝25.6，7.2hz，10h)，2.03(s，1h)，0.87-0.82(m，3h)，0.82-0.77(m，3h).
实施例5[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯氧基)(苯氧基)磷酰]-d-环丙氨酸乙酯(代号：sit-107)的制备
操作同实施例1，以10mmol规模投料，得2.94g，产率50.38％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.32(t，j＝7.8hz，2h)，7.25(d，j＝6.9hz，3h)，7.16(t，j＝7.2hz，1h)，7.08(d，j＝8.4hz，1h)，6.80(d，j＝8.5hz，1h)，6.49(d，j＝13.3hz，2h)，6.44(t，j＝6.9hz，2h)，4.05(dd，j＝7.2，3.4hz，2h)，3.86-3.69(m，12h)，1.45-1.37(m，2h)，1.26(ddd，j＝15.6，13.0，4.9hz，2h)，1.16(t，j＝7.1hz，3h).
实施例6[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯氧基)(苯氧基)磷酰]-d-甘氨酸乙酯(代号：sit-108)的制备
操作同实施例1，以10mmol投料，得2.7445，产率49.23％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.32(t，j＝7.8hz，2h)，7.24(d，j＝8.8hz，3h)，7.16(t，j＝7.2hz，1h)，7.08(d，j＝8.4hz，1h)，6.80(d，j＝8.5hz，1h)，6.47(d，j＝9.7hz，2h)，6.43(d，j＝13.0hz，2h)，4.18(q，j＝7.1hz，2h)，3.83(d，j＝2.9hz，6h)，3.69(s，6h)，2.04(s，2h)，1.26(t，j＝7.1hz，6h).
实施例7[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯氧基)(苯氧基)磷酰]-d-苯丙氨酸甲酯(代号：sit-110)的制备
操作同实施例1，以10mmol投料，产量3.5702g，产率56.4％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.30(dd，j＝15.5，7.7hz，2h)，7.21(dd，j＝15.0，7.2hz，6h)，7.14(dd，j＝14.8，7.4hz，1h)，7.08(t，j＝7.0hz，1h)，7.00(dd，j＝9.0，5.7hz，2h)，6.77(dd，j＝8.4，2.7hz，1h)，6.51-6.40(m，4h)，4.45(qd，j＝9.6，5.2hz，1h)，3.82(s，3h)，3.73(d，j＝9.0hz，3h)，3.65(s，6h)，3.58(d，j＝21.5hz，3h)，3.12-2.90(m，2h).
实施例8[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯氧基)(苯氧基)磷酰]-d-谷氨酸二甲酯(代号：sit-111)的制备
操作同实施例1，以10mmol投料，得2.75g，产率43.68％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.31(t，j＝7.7hz，2h)，7.25-7.18(m，3h)，7.16(t，j＝7.2hz，1h)，7.08(d，j＝8.0hz，1h)，6.79(t.j＝9.1hz，1h)，6.47(d，j＝13.0hz，2h)，6.42(t，j＝8.2hz，2h)，4.24-4.15(m，1h)，4.04-3.89(m，1h)，3.83(dd，j＝10.4，8.7hz，6h)，3.71-3.61(m，12h)，2.45-2.23(m，2h)，2.17-1.88(m，3h).
实施例9[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯氧基)(苯氧基)磷酰]-d-异亮氨酸甲酯(代号：sit-112)的制备
操作同实施例1，以10mmol投料，得2.8140g，产率46.93％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.30(t，j＝7.6hz，2h)，7.25-7.19(m，3h)，7.14(t，j＝7.1hz，1h)，7.07(d，j＝8.4hz，1h)，6.78(t，j＝8.5hz，1h)，6.47(d，j＝15.0hz，2h)，6.41(d，j＝12.6hz，2h)，3.91(dd，j＝19.1，10.0hz，1h)，3.84-3.79(m，6h)，3.65(dd，j＝27.8，8.1hz，9h)，1.81-1.67(m，1h)，1.10(ddd，j＝22.4，15.3，7.8hz，1h)，0.90-0.83(m，6h).
实施例10[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙基)苯氧基)(苯氧基)磷酰)丙氨酸异丙酯(代号：sit-113)的制备
操作同实施例2，以3mmol投料，产量0.95g，产率53.89％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.35(t，j＝7.1hz，2h)，7.28(t，j＝7.6hz，2h)，7.22(s，1h)，7.18(t，j＝7.2hz，1h)，6.93(d，j＝8.2hz，1h)，6.88-6.83(m，1h)，6.39(s，2h)，5.00(tt，j＝12.4，6.2hz，1h)，4.20-4.12(m，1h)，3.85(d，j＝15.3hz，12h)，2.87-2.75(m，4h)，1.35(dd，j＝27.0，7.0hz，3h)，1.25-1.19(m，6h)，0.09(s，1h).
实施例11[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙基)苯氧基)(苯氧基)磷酰)缬氨酸甲酯(sit-114)的制备
操作同实施例2，以3mmol投料，产量0.97g，产率55.03％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.37-7.31(m，2h)，7.31-7.25(m，2h)，7.22(d，j＝11.6hz，1h)，7.17(t，j＝7.1hz，1h)，6.93(d，j＝8.3hz，1h)，6.85(dd，j＝8.3，4.1hz，1h)，6.39(d，j＝3.4hz，2h)，3.99(dtd，j＝15.1，10.4，4.7hz，1h)，3.84(dd，j＝10.8，7.7hz，12h)，3.63(d，j＝20.2hz，3h)，2.81(d，j＝5.0hz，4h)，2.07-1.99(m，1h)，0.94-0.87(m，4h)，0.80(t，j＝6.5hz，3h)，0.09(s，1h).
实施例12[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙基)苯氧基)(苯氧基)磷酰)环丙氨酸乙酯(代号：sit-115)的制备
操作同实施例2，以10mmol投料，产量3.1761g，产率54.24％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.37-7.31(m，2h)，7.28(d，j＝8.5hz，2h)，7.24(s，1h)，7.17(t，j＝7.2hz，1h)，6.93(d，j＝7.7hz，1h)，6.86(d，j＝8.3hz，1h)，6.38(d，j＝11.5hz，2h)，4.03(q，j＝7.1hz，2h)，3.87-3.72(m，12h)，2.82(d，j＝2.9hz，4h)，1.51-1.25(m，4h)，1.13(t，j＝7.1hz，3h).
实施例13[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙基)苯氧基)(苯氧基)磷酰)亮氨酸甲酯(代号：sit-117)的制备
操作同实施例2，以5mmol投料，产量1.21g，产率40.22％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.36-7.31(m，2h)，7.30(s，1h)，7.27-7.20(m，2h)，7.20-7.15(m，1h)，6.94(d，j＝6.5hz，1h)，6.86(t，j＝8.3hz，1h)，6.40(d，j＝5.5hz，2h)，3.84(q，j＝8.0hz，12h)，3.71(d，j＝13.1hz，1h)，3.63(d，j＝21.3hz，3h)，2.85-2.78(m，4h)，1.52(dt，j＝12.3，6.4hz，2h)，1.28(t，j＝7.1hz，1h)，0.85-0.81(m，3h)，0.09(s，1h).
实施例14[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙基)苯氧基)(苯氧基)磷酰)苯丙氨酸甲酯(代号：sit-118)的制备
操作同实施例2，以10mmol投料，产量2.7480g，产率43.23％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.35(dd，j＝13.1，7.3hz，2h)，7.26(d，j＝15.0hz，5h)，7.22-7.19(m，2h)，7.03(d，j＝6.6hz，1h)，6.95(t，j＝8.4hz，2h)，6.85(d，j＝8.3hz，1h)，6.40(d，j＝2.4hz，2h)，4.54-4.45(m，1h)，3.84(s，9h)，3.77(d，j＝15.2hz，3h)，3.67(d，j＝12.6hz，1h)，3.61(d，j＝29.1hz，3h)，2.98(dd，j＝13.4，6.0hz，2h)，2.82(s，4h)，0.10(s，1h).
实施例15[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙基)苯氧基)(苯氧基)磷酰)谷氨酸二甲酯(代号：sit-119)的制备
操作同实施例2，以10mmol投料，产量1.14g，产率18.05％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.31-7.25(m，2h)，7.24(s，1h)，7.21(t，j＝7.3hz，1h)，7.16-7.08(m，2h)，6.87(d，j＝8.2hz，1h)，6.80(t，j＝7.9hz，1h)，6.34(d，j＝4.2hz，2h)，4.20-4.13(m，1h)，3.78(t，j＝8.9hz，12h)，3.57(dd，j＝19.1，14.5hz，6h)，2.76(s，4h)，2.34-1.81(m，4h).
实施例16[(2-甲氧基-5-甲基-((z)-3，4，5-三甲氧基苯乙基)苯氧基)(苯氧基)磷酰)异亮氨酸甲酯(代号：sit-120)的制备
操作同实施例2，以10mmol投料，产量3.7757g，产率61.81％。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.33(td，j＝8.1，3.0hz，2h)，7.30-7.25(m，2h)，7.25-7.19(m，1h)，7.16(t，j＝6.8hz，1h)，6.92(d，j＝8.3hz，1h)，6.87-6.82(m，1h)，6.39(d，j＝4.1hz，2h)，4.09-4.00(m，1h)，3.87-3.81(m，12h)，3.62(d，j＝20.8hz，3h)，2.80(dd，j＝8.5，5.7hz，4h)，1.80-1.67(m，1h)，1.27(dd，j＝15.1，8.1hz，2h)，0.91-0.75(m，7h)
实施例17化合物对hela宫颈癌细胞株的体外增殖抑制活性(mtt法)
1、试验方法
细胞以含200ml/l胎牛血清的rpmi1640培养液培养，使细胞一直处于对数生长期，接种至96孔板，密度4～8×104/ml，37℃，预培养24小时加药，药物设6个浓度，每种药物设3个复孔。连续作用48小时，甩去培养液风干，每孔加冰冷500g/l三氯醋酸50μl(终浓度为100g/l)固定60min后去离子水洗4～5次，干燥，每孔加4g/lsrb100μl作用30min，10ml/l醋酸轻洗4次，甩干，每孔加10mmoltrisbase200μl摇动混匀，在平板振荡器上振荡5min，在酶联免疫检测仪测定a值，用空白对照调零，所用波长为490nm，抑瘤率(％)＝(无药细胞对照孔a值平均值-用药孔a值平均值)/无药细胞对照孔a值平均值×100％，阳性对照为ca4和ca4p，根据不同浓度下药物对细胞生长的抑制率，以logit方法计算ic50值。
2.试验结果
表1实施例化合物对hela宫颈癌细胞株的体外增殖抑制活性(mtt法)。
表2实施例化合物对多种肿瘤细胞株的体外抗肿瘤活性评价(mtt法)
-*没测定
实施例17化合物对多种耐药性肿瘤细胞株的体外抗肿瘤活性评价(cck-8法)
1.实验方法
取活细胞比例达90％以上的细胞进行实验。细胞增殖抑制试验采用enogenecelltmcountingkit-8(cck-8)细胞活力检测试剂盒。细胞消化、计数、制成浓度为1×105个/ml的细胞悬液，96孔板中每孔加入100μl细胞悬液(每孔1×104个细胞)；96孔板置于37℃，5％co2培养箱中培养24小时；每孔加入100μl相应的含药物的培养基，同时设立阴性对照组，溶媒对照组，阳性对照组，每组5复孔；96孔板置于37℃，5％co2培养箱中培养72小时后；每孔加入10μlcck-8溶液，将培养板在培养箱内孵育4小时，用酶标仪测定在450nm处的od值，计算这些化合物对人甲状腺癌细胞sw579、人肝癌细胞hepg2、人肺癌细胞a549、人胃癌细胞mgc-803和人乳腺癌细胞mda-mb-231等细胞的抑制率及ic50值。
2.实验结果
表3化合物对多种耐药型肿瘤细胞株的体外增殖活性的抑制率及ic50值(cck8法)
需要说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制。尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明的精神和范围。