一种土壤类芽孢杆菌及其应用的制作方法

文档序号:11125930阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种土壤类芽孢杆菌,为Paenibacillus edaphicus NUST16,保藏编号为CCTCCNo.M2016542。

2.如权利要求1所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用。

3.如权利要求2所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用,其特征在于,具体应用步骤如下:

步骤1,将土壤类芽孢杆菌NUST16接种到灭菌后的培养基中,25-35℃摇床震荡培养形成种子培养液;

步骤2,按0.5%-20%接种量将种子培养液接种到灭菌后的培养基中,25-35℃摇床震荡培养,获得产胞外多糖的发酵液;

步骤3,在发酵液中加入沉淀剂A,发酵液中的沉淀经过滤或离心,干燥后即得固体粗多糖,所述的沉淀剂A为95%-100%乙醇、95%-100%甲醇、95%-100%异丙醇和95%-100%丙酮中的一种或者多种。

4.如权利要求3所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用,其特征在于,步骤1中,所述的培养时间为12-48h。

5.如权利要求3所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用,其特征在于,步骤2中,所述的培养时间为48-96h。

6.如权利要求3所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用,其特征在于,步骤3中,所述的沉淀剂A与发酵液的体积比为2~4:1,所述的沉淀剂A为95%-100%乙醇、95%-100%甲醇、95%-100%异丙醇和95%-100%丙酮中的两种以上溶剂按等体积混合而成的混合溶液。

7.如权利要求3~6任一所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用,其特征在于,所述的培养基的组成为蔗糖5-50g/L,蛋白胨0.5-5g/L,NaH2PO4 0.1-5.0g/L,CaCl20.01-0.5g/L,MgCl2 0.01-0.5g/L,KCl 0.01-0.5g/L,FeCl2 0.001-0.05g/L,CuSO40.001-0.05g/L,MnSO4 0.001-0.05g/L,ZnCl2 0.001-0.05g/L,CoCl2 0.001-0.05g/L,pH为6.0-9.0。

8.如权利要求7所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用,其特征在于,所述的液体培养基的pH为7.0-9.0。

9.如权利要求3所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用,其特征在于,还包括以下步骤:

步骤4,将固体粗多糖溶于水中形成粗多糖溶液,加入处理液B并剧烈震荡,静置或离心分离有机相和水相,收集水相,并重新加入处理液B,重复3~10次,可得纯化多糖,所述的处理液B为三氯甲烷、苯酚和正丁醇的混合溶液。

10.如权利要求9所述的土壤类芽孢杆菌在生产水溶性胞外多糖中的应用,其特征在于,步骤4中,所述的粗多糖溶液的浓度为0.25~20g/L,所述的粗多糖溶液与处理液B的体积比1:(1~2),所述的处理液B中,三氯甲烷、苯酚和正丁醇的体积比为1:(0.5~1):(0.05~0.5)。

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