一种提高核酸提取率的磁珠组合物及其应用的制作方法

文档序号:11899193阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于核酸提取的磁珠组合物,其特征在于,包括下列浓度组份:

纳米磁珠 1mg/mL;

聚乙二醇8000 0.018-0.026mol/L;

氯化钠 2.2-2.6mol/L;

乙二胺四乙酸溶液 0.5-2mol/L;

三羟甲基氨基甲烷溶液 10-20mmol/L。

2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述组合物,包括下列浓度组份:

纳米磁珠 1mg/mL;

聚乙二醇8000 0.024mol/L;

氯化钠 2.5mol/L;

乙二胺四乙酸溶液 0.5mol/L;

三羟甲基氨基甲烷溶液 10mmol/L。

3.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述纳米磁珠为超顺磁性纳米级双壳氧化硅羧基磁珠;所述磁珠结构由内至外依次为:聚苯乙烯核仁、第一层聚苯乙烯密封的磁铁圈、第二层聚苯乙烯密封的磁铁圈、包被羧基。

4.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述磁珠直径大小为100-1000nm。

5.根据权利要求3所述的组合物,其特征在于,所述磁珠的羧基密度2.5-5μM/mg。

6.根据权利要求1-5任一项所述的组合物,其特征在于,所述磁珠组合物在核酸提取中的应用。

7.根据权利要求6所述的组合物,其特征在于,将所述组合物应用于核酸提取,包括以下步骤:

(1)磁珠溶液的分装:将所述磁珠溶液分装到无核酸酶的离心管中;

(2)混样:将样本核酸溶液离心后,转移至(1)所得装有磁珠溶液的离心管中,混匀,离心;

(3)吸弃上清液:将(2)所得混合液置于磁力架上静置,吸弃上清液;

(4)洗涤:向(3)所得磁珠中加入洗涤液洗涤置于磁力架上静置,吸弃洗涤液,室温干燥;

(5)洗脱:向(4)所得磁珠中加入10mM Tris-HCl,混匀,离心,置于磁力架上静置至溶液澄清,转移上清液即得。

8.根据权利要求6所述的组合物,其特征在于,所述组合物应用于样本核酸定向提取,包括以下步骤:

(1)样本核酸溶液分装:分装核酸溶液至无核酸酶的离心管中;

(2)一次混样:向(1)所得核酸溶液管中加入所述磁珠溶液,混匀,离心;

(3)转移上清液:将(2)所得混合液置于磁力架上静置,转移上清液至无核酸酶的离心管中;

(4)二次混样:向(3)中所得的上清液管中加入所述磁珠溶液,混匀,离心;

(5)吸弃上清液:将(4)所得混合液静置于磁力架上静置,吸弃上清液;

(6)洗涤:向(5)所得磁珠中加入洗涤液洗涤,置于磁力架上静置,吸弃洗涤液,室温干燥;

(7)洗脱:向(6)所得磁珠中加入10mM Tris-HCl,混匀,离心,置于磁力架上静置至溶液澄清,转移上清液即得。

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