一种石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法与流程

技术特征：

1.一种石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法，其特征在于所述方法步骤如下

一、取80～120g含油土壤放入500mL三角瓶中，摇匀，静止至完全沉降；

二、取上清液接入含有80～120mL基础培养液的250mL三角瓶中，25～35℃，150～200r/min富集培养5～10天；

三、取1～5mL富集培养液接入含有100mL基本培养液的三角瓶中，3个平行样，20～40℃，150～200r/min震荡培养3～5天；

四、将培养液倍比稀释至1000倍，取100μL培养液涂布在含基本培养基的固体平板上，将平板放在20～40℃培养箱中培养直至长出菌落；

五、将单菌落划线纯化后进行低温氨氮降解试验，即可得到石油产品脱硫菌株。

2.根据权利要求1所述的石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法，其特征在于所述基本培养液由6.0～10.0g/L葡萄糖、2.0～3.0g/L NH₄Cl、6.0～7.0g/L KH₂PO₄、8.0～9.0g/L K₂HPO₄、0.2～0.4g/L MgCl₂·6H₂O、0.5～1.5mL/L微量元素溶液母液、0.5～1.5mL/L维生素溶液母液和余量的蒸馏水组成，总体积为100mL，121℃灭菌30min。

3.根据权利要求1所述的石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法，其特征在于所述基本培养液由8.0g/L葡萄糖、2.5g/L NH₄Cl、6.5g/L KH₂PO₄、8.5g/L K₂HPO₄、0.3g/L MgCl₂·6H₂O、1.0mL/L微量元素溶液母液、1.0mL/L维生素溶液母液和余量的蒸馏水组成，总体积为100mL，121℃灭菌30min。

4.根据权利要求2所述的石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法，其特征在于所述微量元素母液由0.6～1.0g/L FeCl₂·4H₂O、0.6～1.0g/L ZnCl₂、0.6～1.0g/L MnCl₂·4H₂O、0.1～0.3g/L NaMoO₄·2H₂O、0.06～0.10g/L CuCl₂、0.06～0.10g/L NaWO₄·2H₂O和140～160mmol/L HCl组成。

5.根据权利要求2所述的石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法，其特征在于所述微量元素母液由0.8g/L FeCl₂·4H₂O、0.8g/L ZnCl₂、0.8g/L MnCl₂·4H₂O、0.2g/L NaMoO₄·2H₂O、0.08g/L CuCl₂、0.08g/L NaWO₄·2H₂O和150mmol/L HCl组成。

6.根据权利要求2所述的石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法，其特征在于所述维生素母液由400～600mg/L泛酸钙、200～400mg/L肌醇、400～600mg/L烟酸、400～600mg/L盐酸吡哆醇、200～400mg/L对氨基甲苯和0.6～0.8mg/L维生素B12组成。

7.根据权利要求2所述的石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法，其特征在于所述维生素母液由500mg/L泛酸钙、300mg/L肌醇、500mg/L烟酸、500mg/L盐酸吡哆醇、300mg/L对氨基甲苯和0.8mg/L维生素B12组成。

8.根据权利要求1、2或3所述的石油产品脱硫巨大芽孢杆菌的筛选方法，其特征在于所述基本培养基由基本培养液和琼脂组成。