本发明涉及香菇多糖加工领域，特别涉及一种香菇多糖的制备方法。
背景技术：
香菇,又名花菇、香蕈、香信、香菌、冬菇、香菰，为侧耳科植物香蕈的子实体。香菇是世界第二大食用菌，也是我国特产之一，在民间素有“山珍”之称。香菇味道鲜美，香气沁人，营养丰富。富含维生素B群、铁、钾、维生素D原(经日晒后转成维生素D)、味甘，性平。主治食欲减退，少气乏力。香菇素有山珍之王之称，是高蛋白、低脂肪的营养保健食品。中国历代医学家对香菇均有著名论述。现代医学和营养学不断深入研究，香菇的药用价值也不断被发掘。香菇中麦角甾醇含量很高，对防治佝偻病有效；香菇多糖能增强细胞免疫能力，从而抑制癌细胞的生长；临床与药理研究表明，香菇多糖还具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用。香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分，香菇多糖中的活性成分是具有分支的的葡聚糖，主链由葡萄糖基组成，沿主链随机分布着由β-(1-6)连接的葡萄糖基，呈梳状结构。
多糖的生物活性倍受关注,其提取方法及工艺已成为目前研究焦点之一。在食用菌多糖提取的研究中采用了许多不同的方法,包括溶剂提取法、酸提法、碱提法、酶解法、超滤法、超声波强化法、微波法。传统的香菇多糖提取的方法为热水浸提法，该提取法多糖得率不高。为强化提取过程，一些研究者采用微波强化和超声强化方法增加得率，但超声和微波处理容易引起多糖的活性发生改变，酶法提取过程中纤维素酶有可能改变多糖的分子结构和理化性质，进一步影响多糖的药理功能。近年来，超高压提取技术在植物活性成分提取上得到应用，其提取时间短，提取得率高，活性成分破坏少，目前，采用超高压提取香菇多糖还未见报道。
技术实现要素：
为解决上述现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供
为达到上述目的，本发明的技术方案为：
一种香菇多糖的制备方法，包括如下步骤：
步骤一、鲜香菇清洗干净，采用刀片式粉碎机粉碎成颗粒，加入鲜菇10倍质量的纯净水，加热到50℃后进入超高压处理阶段；
步骤二、加热好的料液采用超高压处理机进行处理，超高压力为380～400MPa,保压时间3.7～4.3min；
步骤三、超高压处理好的料液中加入鲜香菇质量0.1％的复合酶进行酶解，酶解温度50～55℃、酶解pH值5～5.5、酶解后采用滤袋离心机离心分离，滤袋孔径≤0.1mm，收集滤液备用，滤渣进行进一步提取；
步骤四、亚临界水提取:将步骤三中的滤渣，加入滤渣两倍质量的水进一步采用亚临界水系统进行提取；提取结束后，采用滤袋离心机离心分离，滤袋孔径≤0.1mm，收集滤液备用；
步骤五、合并步骤3中和步骤4中的提取液，进行膜处理，首先采用陶瓷膜进行处理，收集滤过液，然后采用膜孔截留分子量为800000u的微滤膜过滤，进一步收集滤液，经过陶瓷膜和800000u的微滤膜过滤的滤液进一步采用截留分子量为100000u的膜过滤，收集截留物，经冷冻干燥后即可获得香菇多糖。
进一步的，所述步骤一中，粉碎的颗粒粒径为1mm≤直径≤0.25cm。
进一步的，所述步骤三中，复合酶具体为：木瓜蛋白酶、果胶酶酶活均≥15 000U/g，胰蛋白酶酶活≥10 000U/g、三种食品级酶按照质量比8:1:9的比例混合后即为复合酶。
进一步的，所述步骤四中，亚临界水提取的具体条件为：亚临界水温度130℃,浸提时间为3～4min,提取压力3～4MPa。
相对于现有技术，本发明的有益效果为：
本发明专利一种香菇多糖的制备方法有机的将多糖超高压萃取、复合酶提取和亚临界提取技术有机的整合，优化出一套针对香菇多糖的提取工艺，该工艺有效的避免了纤维素酶、超声和微波处理提取多糖的局限性。本发明专利直接采用组合膜分离技术，将香菇多糖粗提取液中的低分子量片段，小分子组分及大分子物质都进行了有效的去除，仅保留了分子量在100000～800000u之间的功能性的糖。有效的避免了传统的醇沉多糖工作过程中有机溶剂残留、能耗高、高成本等问题，属于高效、低能、绿色环保的集成型香菇多糖提取工艺。具有很好的市场应用前景。
附图说明
图1为本发明一种香菇多糖的制备方法的制备工艺流程图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明技术方案做进一步详细描述：
如图1所示，一种香菇多糖的制备方法，包括如下步骤：
步骤一、鲜香菇清洗干净，采用刀片式粉碎机粉碎成1mm≤直径≤0.25cm的颗粒，加入鲜菇10倍质量的纯净水，加热到50℃后进入超高压处理阶段。
步骤二、加热好的料液采用超高压处理机进行处理，超高压力为380～400MPa,保压时间3.7～4.3min。
步骤三、超高压处理好的料液中加入鲜香菇质量0.1％的复合酶(木瓜蛋白酶、果胶酶酶活均≥15 000U/g，胰蛋白酶酶活≥10 000U/g、三种食品级酶按照质量比8:1:9的比例混合后即为复合酶)进行酶解，酶解温度50～55℃、酶解pH值5～5.5、酶解后采用滤袋离心机离心分离，滤袋孔径≤0.1mm，收集滤液备用，滤渣进行进一步提取。
步骤四、亚临界水提取:将步骤3中的滤渣，加入滤渣两倍质量的水进一步采用亚临界水系统进行提取，亚临界水温度130℃,浸提时间为3～4min,提取压力3～4MPa。提取结束后，酶解后采用滤袋离心机离心分离，滤袋孔径≤0.1mm，收集滤液备用。
步骤五、合并步骤3中和步骤4中的提取液，进行膜处理，首先采用陶瓷膜进行处理，收集滤过液，然后采用膜孔截留分子量为800000u的微滤膜过滤，进一步收集滤液，经过陶瓷膜和800000u的微滤膜过滤采用膜孔截留分子量为100000u的滤液进一步过滤，收集截留物，经冷冻干燥后即可获得香菇多糖。
试验例：
本发明方法与现有其他工艺的比较如下表：
相较于现有技术，本发明方法在使用复合酶提取前，先采用超高压技术进行处理，并对酶解后的滤渣经行亚临界提取，上述几种技术有机的整合，优化出一套针对香菇多糖的提取工艺，该工艺不仅提高了多糖的提取效果，而且有效的避免了热水提取、超声和微波处理提取多糖的局限性。在后续纯化过程中直接采用组合膜分离技术，将香菇多糖粗提取液中的低分子量片段，小分子组分及大分子物质都进行了有效的去除，仅保留了分子量在100000～800000u之间的功能性的糖，不仅使得多糖纯度大大的提高、保护了多糖的天然结构和功能活性，而且有效的避免了传统的Sevage法除蛋白和醇沉多糖工艺过程中大量使用正丁醇、氯仿和乙醇等有机溶剂的弊端，同时也解决了有机溶剂对多糖的破坏和产品有机溶剂残留、含大量低分子量杂质等问题。属于高效、低能、绿色环保的集成型香菇多糖提取工艺，具有很好的市场应用前景。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何不经过创造性劳动想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。