一种提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法与流程

文档序号:12411705阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法,包括以下步骤:

1)斜面培养

将黑曲霉菌株接种到固体斜面培养基上,28~30℃下恒温培养24-48h;

2)摇瓶培养

取步骤1)中培养后的黑曲霉菌株,接种到种子培养基中,置于温度28~30℃,150-220r/min条件下摇瓶培养24-48h;

3)种子罐培养

取步骤2)中摇瓶培养后的黑曲霉菌株,按照接种量3-6%的比例接入种子罐培养基中,于28~30℃、转速150-250rpm条件下培养48-72h,获得种子液;

4)发酵培养

取步骤3)中的种子液,按照接种量3-6%的比例接入发酵培养基,进行好氧发酵,获得蛋白酶;其中,发酵培养基中含有肌醇0.1-1wt.%。

2.根据权利要求1所述的提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法,其特征在于,获得的蛋白酶酶活为10000-20000U/g。

3.根据权利要求1所述的提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法,其特征在于,步骤1)中的斜面培养基的组分及配制过程为:按重量份,马铃薯100-200份,葡萄糖10-20份,琼脂10-20份,MgSO4 0.2-1.0份,NaCl0.5-1份,FeSO4 0.002-0.05份,K2HPO4 0.3-1.2份,将上述各组分溶于1000-1500份水中,混合均匀,自然pH值,于110-130℃灭菌20-30min。

4.根据权利要求1所述的提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法,其特征在于,步骤2)中摇瓶种子培养基的组分及配制过程为:按重量份,蛋白胨10-15份,酵母提取物5-8份,NaCl 5-10份,将上述组分溶于1000-1500份水中,自然pH值,于110-130℃灭菌20-30min。

5.根据权利要求1所述的提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法,其特征在于,步骤3)中所述种子罐培养基的组分及配制过程为:按质量百分数,麸皮2-5%,豆粕3-8%,KH2PO4 0.2-0.5%,水85-95%,自然pH值,110-130℃灭菌20-30min。

6.根据权利要求1所述的提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法,其特征在于,步骤4)中发酵培养基的组分及配制过程为:按质量百分数,麸皮2-5%,豆粕3-5%,玉米粉2-4%,KH2PO40.3-0.8%,肌醇0.1-1%,水85-95%,自然pH值,110-130℃灭菌20-30min。

7.根据权利要求1-6任一项所述提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法,其特征在于,步骤4)中,好氧发酵条件为:30-45℃、自然pH值,通风量0.02-0.35vvm,转速为150-250rpm,发酵时间为48-72h。

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