一种荧光定量PCR技术防治肺结核的方法与流程

文档序号:17742131发布日期:2019-05-24 20:14阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
一种荧光定量PCR技术防治肺结核的方法,反应体系(40μl):4.0μl10×buffer,7.0mmol/LMg2+,200μmol/L dNTP,0.2μmol/L上下游引物,0.2μmol/L探针,4μlLDNA模板,2.5U Taq DNA聚合酶。94℃ 3min,94℃ 20s,52℃ 20s,72℃ 20s,40次循环。按照荧光定量PCR分析软件设定基线(baseline)与阈值(threshold),以结核分枝杆菌H37Ra为参考菌株,PCR扩增IS6110基因并克隆到质粒载体。提取纯化重组DNA,10倍系列准确定量稀释102~107Copies/ml的DNA模板,分别取4μl进行荧光定量PCR扩增。呈对数增长,Ct值≤36即可判定为阳性;如扩增曲线不规则或Ct值>40,报告为阴性。

技术研发人员:白金桃
受保护的技术使用者:白金桃
技术研发日:2017.11.17
技术公布日:2019.05.24
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