本发明属于医药合成技术领域，具体涉及一种具有抗血小板聚集活性的4-取代苯并二氮卓2-酮类化合物及其超临界制备方法。
背景技术：
苯并二氮卓结构具有广泛的生理活性和药理作用，是目前药物化学领域研究的热点。苯并二氮卓类化合物具有抗焦虑、镇静催眠、抗惊厥、肌肉松弛等作用，在医学上常用于镇静剂和治疗心血管疾病的的药物。
超临界流体(supercriticalfluidscf)是指处于临界温度和临界压力以上的流体,具有独特的物理化学性质,兼具气体和液体的优点：粘度小近似于气体、密度大接近于液体、扩散系数是液体的几十倍甚至上百倍,因此它具有很强的溶解能力和良好的流动性及传递性,在临界点附近对温度和压力的变化非常敏感。常用的超临界流体有co2、nh3、ch3oh、c2h5oh等。相比于传统有机合成方法，超临界流体具有操作条件温和、催化剂可回收、绿色环保等特点。
本研究利用超临界流体设计合成了一种4-取代苯并二氮卓2-酮类化合物，该路线具有操作简单、收率高的特点，通过巧妙的方法活化了羰基邻位碳原子，使其上面的氢容易被取代，并且使羰基能够很快被还原回原样，具有良好的工业前景，并对所得到的化合物进行了抗血小板聚集活性检测。
技术实现要素：
本发明解决的技术问题是提供了一种具有抗血小板聚集活性的4-取代苯并二氮卓2-酮类化合物及其超临界制备方法。
一种具有抗血小板聚集活性的4-取代苯并二氮卓2-酮类化合物结构如式ⅰ所示：
式ⅰ中，r为甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、或环己基。
一种具有抗血小板聚集活性的4-取代苯并二氮卓2-酮类化合物的超临界制备方法，其特征在于具体步骤为：
a、苯胺与特戊酰氯在超临界co2中发生酰化反应生成n-苯基三甲基乙酰胺；n-苯基三甲基乙酰胺在超临界ch3oh下与4-吡啶甲醛发生加成反应得到n-(2-(羟基(4-吡啶基)甲基)苯基)三甲基乙酰胺；
b、n-(2-(羟基(4-吡啶基)甲基)苯基)三甲基乙酰胺在超临界co2中被氧化，其结构上仲碳及所连接的羟基脱去一分子氢气后生成羰基，得到n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)三甲基乙酰胺；n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)三甲基乙酰胺在酸性条件下下脱去叔丁酰基得到2-(4-哌啶酮基)苯胺；
c、2-(4-哌啶酮基)苯胺在dcc作用下与boc氨基乙酰氯在超临界ch3oh中发生取代反应生成n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)boc氨基乙酰胺；
d、n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)boc氨基乙酰胺与hcl在thf中反应，脱去boc基团的同时成盐得到n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)氨基乙酰胺盐酸盐；
e、n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)氨基乙酰胺盐酸盐在超临界co2中，发生酮胺缩合得到5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮；
f、5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮与
g、化合物
进一步限定，步骤a的具体过程为：在超临界反应釜中加入苯胺、特戊酰氯和碳酸钾，通入超临界co2于30℃、20mpa搅拌反应30min，反应完全后体系内加入氯仿，搅拌后离心，有机相浓缩得到n-苯基三甲基乙酰胺；把所得到的n-苯基三甲基乙酰胺和4-吡啶甲醛加入超临界反应釜中，通入超临界ch3oh于220℃、15mpa搅拌反应2h，反应完全后体系内加入乙酸乙酯，搅拌后离心，有机相浓缩得到n-(2-(羟基(4-吡啶基)甲基)苯基)三甲基乙酰胺的粗品，再经柱层析分离得到纯品。
进一步限定，步骤b的具体过程为：在超临界反应釜中加入n-(2-(羟基(4-吡啶基)甲基)苯基)三甲基乙酰胺，通入氧气1mpa和超临界co2于40℃、13mpa搅拌反应1h，反应完全后体系内加入乙酸乙酯，搅拌后离心，有机相浓缩得到n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)三甲基乙酰胺；把所得到的n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)三甲基乙酰胺加入到乙醇和盐酸的混合溶液中，在室温条件下进行搅拌反应，搅拌2h后加热至回流，继续反应5h，tlc监控原料反应完全；真空浓缩蒸除乙醇，再用饱和碳酸钠溶液调节反应液ph>7，再用二氯甲烷萃取反应液三次，合并有机相后浓缩得到2-(4-哌啶酮基)苯胺的粗品，再经柱层析分离得到纯品。
进一步限定，步骤c的具体过程为：在超临界反应釜中加入2-(4-哌啶酮基)苯胺、boc氨基乙酰氯和dcc，通入超临界ch3oh于240℃、10mpa搅拌反应1h，反应完全后体系内加入氯仿，搅拌过滤后再分别用10％的hcl溶液和饱和碳酸钠溶液洗涤，分出有机相后浓缩得到n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)boc氨基乙酰胺粗品，再经柱层析分离得到纯品。
进一步限定，步骤d的具体过程为：在反应瓶中，把n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)boc氨基乙酰胺加入到含有4mhcl的thf中，在室温条件下搅拌反应2h，tlc监控原料反应完全，过滤反应液，滤饼为n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)氨基乙酰胺盐酸盐。
进一步限定，步骤e的具体过程为：在超临界反应釜中加入n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)氨基乙酰胺盐酸盐、甲醇钠和甲醇，通入超临界co2于30℃、8mpa搅拌反应1h，反应完全后体系内加入水和二氯甲烷，搅拌后离心，有机相浓缩后得到5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮。
进一步限定，步骤f的具体过程为：在超临界反应釜中加入5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮、
进一步限定，步骤g的具体过程为：在超临界反应釜中加入
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
在超临界反应釜中加入苯胺(10g,0.107mol)、特戊酰氯(14.24g,0.118mol)和碳酸钾(1.38g,0.01mol)，通入超临界co2于30℃、20mpa搅拌反应30min，反应完全后体系内加入氯仿50ml，搅拌后离心，有机相浓缩得到n-苯基三甲基乙酰胺(19g,yield:99.63％).ms(esi)m/z:177.1(m+h+).hnmr:(cdcl3)δ7.35(brs,1h,nh),7.53(d,j＝8hz,2h,ar-h),7.31(t,j＝8hz,2h,ar-h),7.09(t,j＝4hz,1h,ar-h),1.35(s,9h).
实施例2
在超临界反应釜中加入n-苯基三甲基乙酰胺(10g,0.056mol)和4-吡啶甲醛10g，通入超临界ch3oh于220℃、15mpa搅拌反应2h，反应完全后体系内加入乙酸乙酯50ml，搅拌后离心，有机相浓缩得到n-(2-(羟基(4-吡啶基)甲基)苯基)三甲基乙酰胺的粗品，再经柱层析分离得到纯品(13.1g,yield:82.11％).ms(esi)m/z:285.4(m+h+).hnmr:(cdcl3)δ8.99(brs,1h,nh),8.31(d,j＝6hz,2h,ar-h),8.11(d,j＝8hz,1h,ar-h),7.29-7.34(m,1h,ar-h),8.31(d,j＝6hz,2h,ar-h),7.22(d,j＝5.2hz,2h,ar-h),8.31(d,j＝6hz,2h,ar-h),7.07(d,j＝3.6hz,2h,ar-h),5.79(s,1h),1.04(s,9h).
实施例3
在超临界反应釜中加入n-(2-(羟基(4-吡啶基)甲基)苯基)三甲基乙酰胺(6g,0.021mol)，通入氧气1mpa和超临界co2于40℃、13mpa搅拌反应1h，反应完全后体系内加入乙酸乙酯50ml，搅拌后离心，有机相浓缩后得到n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)三甲基乙酰胺(5.6g,yield:93.1％).ms(esi)m/z:283.4(m+h+).1hnmr:(cdcl3)δ11.33(brs,1h,nh),8.77-8.79(m,3h,ar-h),7.60(t,j＝7.6hz,1h,ar-h),7.46-7.49(m,3h,ar-h),7.06(t,j＝7.2hz,1h,ar-h),1.04(s,9h).
实施例4
在反应瓶中，把n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)三甲基乙酰胺(4.2g,0.0154mol)加入到乙醇35ml和盐酸14ml的混合溶液中，在室温条件下进行搅拌反应，搅拌2h后加热至回流，继续反应5h，tlc监控原料反应完全；真空浓缩蒸除乙醇，再用饱和碳酸钠溶液调节反应液ph>7，再用二氯甲烷萃取反应液三次，合并有机相后浓缩得到2-(4-哌啶酮基)苯胺的粗品，再经柱层析分离得到纯品(2.4g,yield:80％).ms(esi)m/z:199.2(m+h+).hnmr:(cdcl3)δ8.75-8.76(m,2h,ar-h),7.44(d,2h,ar-h),7.43(d,2h,ar-h),6.75(d,1h,j＝8hz,ar-h),6.57-6.61(m,1h,ar-h),6.32(brs,2h,nh).
实施例5
在超临界反应釜中加入2-(4-哌啶酮基)苯胺(2g,0.01mol)、boc氨基乙酰氯(3.8g,0.02mol)和dcc(4.12g,0.02mol)，通入超临界ch3oh于240℃、10mpa搅拌反应1h，反应完全后体系内加入氯仿50ml，搅拌过滤后再分别用10％的hcl溶液和饱和碳酸钠溶液洗涤，分出有机相后浓缩得到n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)boc氨基乙酰胺粗品，再经柱层析分离得到纯品(3.1g.yield:88％).ms(esi)m/z:356.4(m+h+).hnmr:(cdcl3)δ11.46(brs,1h,nh),8.79(t,3h,j＝4hz,ar-h),8.72(d,1h,j＝4hz,ar-h),7.45-7.61(m,4h,ar-h),5.36(brs,1h,nh),4.00(d,j＝8hz,2h),1.45(s,9h).
实施例6
在反应瓶中，把n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)boc氨基乙酰胺(2g,0.0056mol)加入到含有4mhcl的thf30ml中，在室温条件下搅拌反应2h，tlc监控原料反应完全，过滤反应液，滤饼为n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)氨基乙酰胺盐酸盐(1.3g,yield:79％)ms(esi)m/z:256.4(m+h+).1hnmr:(cdcl3)δ8.66(t,3h,j＝4hz,ar-h),8.43(d,1h,j＝4hz,ar-h),7.38-7.61(m,4h,ar-h),7.23(brs,1h,nh),3.85(d,j＝8hz,2h),1.53(s,2h).
实施例7
在超临界反应釜中加入n-(2-(4-哌啶酮基)苯基)氨基乙酰胺盐酸盐(700mg,2.41mmol)、甲醇钠(155.8mg,2.88mmol)和甲醇15ml，通入超临界co2于30℃、8mpa搅拌反应1h，反应完全后体系内加入水10ml和二氯甲烷10ml，搅拌后离心，有机相浓缩后得到5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮(515mg,yield:90％).ms(esi)m/z:238.3(m+h+).1hnmr:(cdcl3)δ9.37(brs,1h,nh),8.68(s,2h,ar-h),7.54(d,1h,j＝8hz,ar-h),7.45(s,2h,ar-h),7.20-7.27(m,3h,ar-h),4.38(s,2h).
实施例8
在超临界反应釜中加入5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮(300mg,1.26mmol)、
实施例9
在超临界反应釜中加入5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮(300mg,1.26mmol)、
实施例10
在超临界反应釜中加入5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮(300mg,1.26mmol)、
实施例11
在超临界反应釜中加入5-(4-吡啶基)-1h-苯并[e][1,4]二氮桌-2(3h)-酮(300mg,1.26mmol)、
实施例12
在超临界反应釜中加入
实施例13
在超临界反应釜中加入
实施例14
重复实施例1-13中的方法，不同点在于采用不同的碘代烷基化合物，从而制得一系列化合物，具体见表1。
表1：
实施例15
抗血小板聚集活性测试
选用健康雄性兔子，随机分组。设正常及噻氯匹定对照组，灌胃给药，剂量30mg/kg-1。正常对照组给予等量质量浓度为0.5％的cmc-na。给药后2h，腹腔注射40mg/kg-1戊巴比妥钠(1ml/kg-1)麻醉，采集兔子心脏部位血液，用质量浓度为3.8％的枸橼酸钠抗凝，分别制备富血小板血浆(prp)和贫血小板血浆(ppp)，将二磷酸腺苷(终浓度：1.5μmol/l-1)加入以诱导血小板聚集，在37℃下检测相对透光率5分钟，观测期间的最大影响被用于计算诱导的血小板最大聚集率和抑制率。抑制率(％)＝(对照组的聚集最大值-测试组的聚集最大值)/对照组的聚集最大值*100％。
由上表可知，本发明所得到的目标化合物具有良好的的抗血小板聚集效果，部分化合物接近噻氯匹定水平。
以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。