本发明涉及一种冬笋多糖的提取方法。
背景技术：
冬笋是立秋前后由毛竹(楠竹)的地下茎(竹鞭)侧芽发育而成的笋芽，因尚末出土，笋质幼嫩，是一道人们十分喜欢吃的菜肴。主要产区为贵州赤水、四川宜宾、福建、江西、浙江、湖南、广西等地,其中贵州赤水冬笋因土质和环境原因，草酸含量低可以直接炒，有不过水不麻口的特点。竹笋味甘、性微寒，归胃、肺经；具有滋阴凉血、和中润肠、解渴除烦、清热益气、利隔爽胃、利尿通便、解毒透疹、养肝明目、消食的功效，而冬笋多糖是其有效成分之一，因此，从冬笋中对多糖进行提取，提高其价值，拓宽其应用，具有广阔的市场应用前景和应用意义。
技术实现要素：
要解决的技术问题：本发明的目的是提供一种冬笋多糖的提取方法，提取率高，所提取的多糖具有很好的抗氧化性能，同时还具有较好的抑菌效果。
技术方案：一种冬笋多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)将冬笋剥叶后切成小粒，冷冻干燥后粉碎，过80目筛；
(2)将5-10g冬笋粉和200-400ml蒸馏水混合，在80-100℃热水浴中转速为100-200rpm下搅拌浸提20-30min；
(3)静置冷却后在转速3000-3500rpm下离心5-6min，收集上清液；
(4)加入3倍体积上清液的sevag试剂，剧烈震荡30min后在4000-4500rpm下离心10-15min，收集上清液，重复3-6次，直到没有乳白色变性蛋白质析出为止，将上清液冷冻干燥得冬笋多糖，其中，sevag试剂的配制为氯仿∶正丁醇体积比为4∶1；
(5)将0.1-0.2g冬笋多糖和50-100ml蒸馏水混合溶解，放入超声仪中，在超声功率500-600w、间歇比5s/2s条件下超声100-110min，减压蒸馏浓缩，冷冻干燥即得。
进一步的，所述步骤(1)中小粒的边长为0.4-0.6cm。
进一步的，所述步骤(2)中水浴温度为90℃，转速为150℃，浸提时间为25min。
进一步的，所述步骤(4)中转速为4300rpm，离心时间为13min。
进一步的，所述步骤(5)中超声功率为550w，超声时间为105min。
有益效果：本发明冬笋多糖的提取方法提取率高，所提取的多糖具有很好的抗氧化性能，其还原力、对羟基自由基清除率和dpph·清除率分别高达0.99、41.77％和1.71％，同时本发明还具有较好的抑菌效果，在48小时内对于大肠杆菌的抑制率可达到100％。
具体实施方式
实施例1
一种冬笋多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)将冬笋剥叶后切成小粒，冷冻干燥后粉碎，过80目筛；
(2)将5g冬笋粉和200ml蒸馏水混合，在80℃热水浴中转速为100rpm下搅拌浸提20min；
(3)静置冷却后在转速3000rpm下离心5min，收集上清液；
(4)加入3倍体积上清液的sevag试剂，剧烈震荡30min后在4000rpm下离心10min，收集上清液，重复3次，直到没有乳白色变性蛋白质析出为止，将上清液冷冻干燥得冬笋多糖，其中，sevag试剂的配制为氯仿∶正丁醇体积比为4∶1；
(5)将0.1g冬笋多糖和50ml蒸馏水混合溶解，放入超声仪中，在超声功率500w、间歇比5s/2s条件下超声100min，减压蒸馏浓缩，冷冻干燥即得。
实施例2
一种冬笋多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)将冬笋剥叶后切成小粒，冷冻干燥后粉碎，过80目筛；
(2)将6g冬笋粉和250ml蒸馏水混合，在85℃热水浴中转速为150rpm下搅拌浸提25min；
(3)静置冷却后在转速3200rpm下离心5min，收集上清液；
(4)加入3倍体积上清液的sevag试剂，剧烈震荡30min后在4200rpm下离心12min，收集上清液，重复4次，直到没有乳白色变性蛋白质析出为止，将上清液冷冻干燥得冬笋多糖，其中，sevag试剂的配制为氯仿∶正丁醇体积比为4∶1；
(5)将0.15g冬笋多糖和60ml蒸馏水混合溶解，放入超声仪中，在超声功率550w、间歇比5s/2s条件下超声100min，减压蒸馏浓缩，冷冻干燥即得。
实施例3
一种冬笋多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)将冬笋剥叶后切成小粒，冷冻干燥后粉碎，过80目筛；
(2)将8g冬笋粉和300ml蒸馏水混合，在90℃热水浴中转速为150rpm下搅拌浸提25min；(3)静置冷却后在转速3300rpm下离心6min，收集上清液；
(4)加入3倍体积上清液的sevag试剂，剧烈震荡30min后在4300rpm下离心13min，收集上清液，重复5次，直到没有乳白色变性蛋白质析出为止，将上清液冷冻干燥得冬笋多糖，其中，sevag试剂的配制为氯仿∶正丁醇体积比为4∶1；
(5)将0.15g冬笋多糖和75ml蒸馏水混合溶解，放入超声仪中，在超声功率550w、间歇比5s/2s条件下超声105min，减压蒸馏浓缩，冷冻干燥即得。
实施例4
一种冬笋多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)将冬笋剥叶后切成小粒，冷冻干燥后粉碎，过80目筛；
(2)将10g冬笋粉和400ml蒸馏水混合，在100℃热水浴中转速为200rpm下搅拌浸提30min；
(3)静置冷却后在转速3500rpm下离心6min，收集上清液；
(4)加入3倍体积上清液的sevag试剂，剧烈震荡30min后在4500rpm下离心15min，收集上清液，重复6次，直到没有乳白色变性蛋白质析出为止，将上清液冷冻干燥得冬笋多糖，其中，sevag试剂的配制为氯仿∶正丁醇体积比为4∶1；
(5)将0.2g冬笋多糖和100ml蒸馏水混合溶解，放入超声仪中，在超声功率600w、间歇比5s/2s条件下超声110min，减压蒸馏浓缩，冷冻干燥即得。
本发明的冬笋多糖的提取方法的提取率及所提取的冬笋多糖的部分性能指标见下表，我们可以看到，本发明方法的多糖提取率很高，最高可达3.29％，所提取的多糖具有很好的抗氧化性能，其还原力、对羟基自由基清除率和dpph·清除率分别高达0.99、41.77％和1.71％，同时本发明还具有较好的抑菌效果，在48小时内对于大肠杆菌的抑制率可达到100％。
表1
注：多糖浓度为1％。