赖氨酰氧化酶的卤代烯丙胺砜衍生抑制剂及其用途的制作方法

本发明涉及能够抑制某些胺氧化酶的新颖化合物。这些化合物可用于治疗多种适应症，例如人类受试者以及宠物和家畜的纤维化、癌症和/或血管生成。另外，本发明涉及含有这些化合物的药物组合物以及其各种用途。
背景技术：
：：酶是第一个被描述的家族成员赖氨酰氧化酶(lox)以及lox-样1(loxl1)、loxl2、loxl3和loxl4(《细胞生物化学杂志(jcellbiochem)》2003；88:660-672)。赖氨酰氧化酶同工酶是铜依赖性的胺氧化酶，可引发胶原蛋白和弹性蛋白的共价交联。赖氨酰氧化酶同工酶的主要功能是通过将赖氨酸和羟赖氨酸氨基酸侧链氧化脱氨为与邻近残基自发反应的醛来促进胶原蛋白和弹性蛋白的交联。所得交联链有助于细胞外基质(ecm)的稳定性，并使其不易被诸如基质金属蛋白酶(mmp)之类的酶降解。赖氨酰氧化酶的活性对于维持人体许多器官系统的结缔组织的正常拉伸和弹性特征至关重要。赖氨酰氧化酶同工酶属于一大群的胺氧化酶，包括黄素依赖性和铜依赖性氧化酶，它们通过催化辅因子的性质来描述。黄素依赖性酶包括单胺氧化酶-a(mao-a)、单胺氧化酶-b(mao-b)、多胺氧化酶和赖氨酸脱甲基酶(lsd1)，并且铜依赖性酶包括氨基脲敏感性胺氧化酶(血管黏附蛋白-1、ssao/vap-1)、视网膜胺氧化酶、二胺氧化酶和赖氨酰氧化酶同工酶。铜依赖性胺氧化酶具有第二个辅因子，所述辅因子因酶而异。在ssao/vap-1中，它是一个氧化的酪氨酸残基(tpq，被氧化成醌)，而在赖氨酰氧化酶同工酶中，tpq已通过添加邻近的赖氨酸残基进一步加工(形成ltq)(《细胞生物化学杂志》2003；88:660-672)。赖氨酰氧化酶同工酶表现出不同的体内表达模式，这表明特定的同工酶将具有特定的生物学作用。lox的催化活性形式已经在胞质和核区室中被鉴定出来，并且正在进行研究以确定它们在这些区室中的作用。例如，lox本身在上皮到间质转化(emt)、细胞迁移、粘附、转化和基因调控中起主要作用。lox表达/活性的不同模式已经与不同的病理过程相关联起来，包括纤维化疾病、阿尔茨海默氏病和其他神经退行性过程，以及肿瘤的进展和转移(《美国外科学杂志(amjsurg)》2005；189:297-301)。损伤后具有结缔组织的死细胞或受损细胞的直接替代代表了一种生存机制，所述机制在整个进化过程中都是保守的，并且似乎在人类中最为明显，在创伤、感染或疾病发生后发挥着重要作用。在慢性和/或反复受伤后，可能会逐渐形成瘢痕，导致部分或整个受影响器官的功能受损。各种原因，诸如慢性感染、慢性暴露于酒精和其他毒素、自身免疫和变态反应或手术、放疗和化学疗法均可导致纤维化。因此，这种病理过程几乎可以发生在身体的任何器官或组织中，并且通常是由于同时发生炎症、组织破坏和修复持续数周或数月的情况所导致。在这种情况下，纤维化最常影响肺、肝、皮肤、肾脏和心血管系统。例如，肝纤维化可作为血色素沉着病、威尔逊氏病、酒精中毒、血吸虫病、病毒性肝炎、胆管阻塞、暴露于毒素和代谢紊乱的并发症而发生。肝纤维化的特征是细胞外基质的积累，可以从性质上区别于正常肝脏。这种纤维化可发展为肝硬化、肝衰竭、癌症并最终死亡(《病理学–研究与实践(pathology–researchandpractice)》1994；190:910-919)。高血压、高血压心脏病、动脉粥样硬化和心肌梗塞可导致纤维化组织在心脏和血管中积累，其中细胞外基质的积累或纤维化沉积导致血管系统变硬和心脏组织本身变硬(《美国生理学杂志:心脏与循环生理学(amjphysiolheartcircphysiol)》2010；299:h1-h9)。肺动脉高压(pah)是一种罕见且快速致死的病症，其特征是肺动脉压升高并由肺血管阻力增加引起。尽管存在多种原因的异质性病症，但人们越来越认识到，pah与其他疾病(诸如结缔组织疾病和硬皮病)有关。pah的病理特征包括血管壁重塑，与细胞外基质(ecm)过多沉积和交联。特发性肺动脉高压(ipah)患者的肺血管系统中的赖氨酰氧化酶失调，并导致ecm成分的持久性以及通过交联导致胶原和弹性蛋白重塑不当(《动脉硬化、血栓形成与血管生物学(arterioscler.thrombvasc.biol.)》2014；34：1446–1458)。pah患者的预后较差。在目前很少或根本不存在的情况下，药理学上靶向赖氨酰氧化酶可以提供治疗干预。已证明，纤维化与赖氨酰氧化酶活性增加之间有很强的关联。例如，在大鼠的实验性肝纤维化中(《美国科学学院学报(proc.natl.acad.sci.usa)》1978；75:2945-2949)、在肺纤维化模型中(《药理学与实验治疗学杂志(jpharmacolexpther)》1981；219:675-678)、在动脉纤维化中(《动脉硬化(arteriosclerosis)》1981；1:287-291)、在真皮纤维化中(《英国皮肤病学杂志(brjdermatol)》1995；133:710-715；以及阿霉素诱导的大鼠肾脏纤维化(《肾单位(nephron)》1997；76:192-200)。在这些人类疾病的实验模型中，在ccl4诱导的肝纤维化的大鼠模型中，酶活性的增加最为明显。在这些研究中，健康肝脏中低水平的酶活性在纤维化肝脏中增加了15到30倍。在人类中，血浆中测得的赖氨酰氧化酶活性与肝纤维化进程之间也存在显着关联。在健康受试者的血清中，赖氨酰氧化酶活性水平通常较低，但在慢性活动性肝炎中则明显升高，在肝硬化中甚至更高。因此，赖氨酰氧化酶可作为内部纤维化的标志。赖氨酰氧化酶同工酶受缺氧诱导因子1α(hif-1α)和tgf-β的高度调节，这两者是引起纤维化的最主要生长因子(《细胞生物学(cellbiol)》2009；29:4467-4483)。胶原蛋白的交联发生在每种类型的纤维化中，因此赖氨酰氧化酶同工酶抑制剂可用于特发性肺纤维化、硬皮病、肾脏或肝纤维化。在正常的伤口愈合中，肉芽组织的形成是一个短暂的过程，为上皮再生和修复提供了支架。随后，组织被重塑并形成营养正常型瘢痕。然而，受伤后，人类无法再生正常的皮肤。相反，修复(或愈合)过程导致瘢痕形成(结疤)。瘢痕在美观和功能上均不如皮肤。瘢痕是慢性问题，过度或肥厚性瘢痕和其伴随的美学、功能和心理后遗症仍然是治疗深层皮肤损伤和烧伤的关键性挑战。瘢痕(特别是肥厚性瘢痕)的外观和柔韧性差的关键因素是真皮层胶原蛋白的变化。在瘢痕组织中，胶原蛋白(主要是胶原蛋白i)更密集地堆积并且紧密排列成平行束。在正常皮肤中，胶原蛋白没有密集地堆积，而是更多的“篮子编织”结构。胶原的结构和数量上的这些改变很大程度上是瘢痕外观不良的基础，并导致柔韧性丧失、不适感和功能性问题。真皮纤维化或皮肤过度瘢痕是过度愈合反应的结果，其特征是真皮中的不成比例的成纤维细胞增殖和细胞外基质(ecm)产生。临床上，真皮纤维化表现为皮肤增厚、紧绷和变硬的区域。纤维化性皮肤病的范围很广，包括但不限于：肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、硬皮病(弥散性和有限的亚型)、硬肿病(buschke病)，系统性淀粉样变性、脂肪皮肤硬化症、类早衰病症、皮肤僵硬综合征、杜普伊特伦挛缩、肾源性纤维化皮肤病(nfd)、混合性结缔组织病、硬化性黏液水肿、移植物抗宿主病(gvhd)以及嗜酸性筋膜炎。尽管每种病症都有其自身的病因和临床特征，但都涉及过多的胶原蛋白产生和改变的胶原蛋白重塑。改变的ecm重塑的一种可能机制是通过共价交联。这直接暗示了lox酶家族与皮肤纤维化的发病机理有关(《实验室研究(laboratoryinvestigation)》2019；99:514–527)。与正常皮肤成纤维细胞相比，瘢痕成纤维细胞中lox和loxl1-4的表达升高，其中lox和loxl1是在皮肤组织中发现的主要同种型。涉及两个互补的体外皮肤样模型的研究——人皮肤等效物(hses)和自组装的基质组织鉴定loxl4是介导tgf-β诱导的纤维化表型的关键同工型(《实验室研究》2019；99:514–527)。瘢痕形成过程是眼睛和周围结构中的重大问题和挑战。眼部瘢痕在原发疾病(例如，角膜和结膜瘢痕)或治疗失败(例如，术后小梁切除术)中起主要作用(《眼外科新闻(ocularsurgerynews)》美国版，2002年10月1日)。青光眼是一种视神经受损，导致进行性和不可逆的视力丧失的疾病。眼内压升高(iop)是青光眼发生和发展的主要危险因素之一。青光眼的大多数治疗都旨在降低眼内压，方法是减少眼内含水液体的形成，或如在青光眼滤过手术的情况下那样，通过增加眼内液体的流出量来降低眼内压。小梁切除术(iop管理的当前金标准)是一种滤过手术，在所述手术中，在部分厚度的巩膜瓣下方的前房上产生一个眼孔，以使眼内水流出。术后瘢痕形成是治疗失败的主要原因。目前临床实践中使用抗代谢物丝裂霉素c(mmc)和5-氟尿嘧啶(5-fu)来帮助限制术后眼部瘢痕组织的形成。虽然这些药剂已显示出可改善滤过手术的iop结果，但它们以非选择性的方式这样做，并伴有明显的副作用(《眼科学文献(arch.ophthalmol.)》2002；120:297–300)。需要更安全、更有针对性的抗纤维化药物。牙龈纤维瘤病是一组罕见的异质性疾病，其发展为角化牙龈的缓慢进行性、局部或弥散性纤维性增生(牙龈过度生长或增生)。严重情况下，过多的组织可能会覆盖牙冠，从而导致咀嚼、美学、语音、功能和牙周问题。牙龈过度生长可以是自发性的遗传性疾病、与口腔炎性疾病有关，或与其他全身性疾病有关。然而，大多数情况下是由于全身用药的副作用，诸如抗癫痫药苯妥英、免疫抑制剂环孢菌素a，以及某些抗高血压的二氢吡啶的抗钙通道阻断剂，尤其是硝苯地平(《口腔生物医学与医学鉴定性评论(critrevoralbiol)》2004；15:165–175)。牙龈过度生长的病理表现包含细胞外基质蛋白的过度积累，其中胶原蛋白i是最主要的。药物引起的牙龈过度生长的机制的一个公认概念是emt——一种牙龈细胞与细胞外基质的相互作用随着上皮细胞转分化为成纤维的成纤维样细胞而减弱(《美国生理学杂志(ajp)》2010；177:208–218)。受损的上皮、基底膜和下层基质导致tgf-β刺激赖氨酰氧化酶活性并促进结缔组织纤维化(《实验室研究》1999；79:1655–1667)。赖氨酰氧化酶同功酶阻滞剂能够持续、强烈地抑制纤维化的原理是，缺乏交联活性使胶原蛋白易于被蛋白水解酶(诸如mmps)降解。因此，任何类型的纤维化都应通过使用赖氨酰氧化酶同工酶抑制剂逆转。鉴于所有赖氨酰氧化酶同工酶在纤维化中的参与程度各异，因此表现出对所有赖氨酰氧化酶同工酶(即泛lox抑制剂)的持续、强烈抑制作用的抑制剂应该是最有效的。类风湿性关节炎(ra)是一种全身性自身免疫性紊乱，其特征在于关节内膜的慢性疼痛性炎症。然而，在某些人中，所述病症可能发展为周围组织和其他身体系统(包括皮肤、眼睛、肺、心脏和血管)的肿胀和发炎。因此，类风湿性关节炎是一种痛苦和使人衰弱的疾病，可导致手、腕和脚的功能和活动性大量丧失。活动性类风湿性关节炎起源于几个关节，但随后可能发展为影响多个关节。滑膜增生涉及浸润的免疫细胞和驻留的滑膜成纤维细胞(sf)，是ra的典型特征。类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(rasf)是浸润部位最常见的细胞类型，并且是造成关节破坏的罪魁祸首。活化的rasf能够迁移，因此与关节之间的关节炎蔓延有关。来自浸润的免疫细胞的细胞因子诱导滑膜成纤维细胞的活化和增殖。这些活化的sf继而产生致病性基质，以使慢性炎症永存，最终导致软骨和骨破坏。通过将rasf与人软骨一起植入严重的合并免疫缺陷小鼠中，已证明活化的rasf在体内迁移，从而将疾病传播到植入的人软骨部位。此外，尽管rasf会积极降解软骨，但植入骨关节炎(oa)患者的滑膜成纤维细胞和健康捐献者的皮肤成纤维细胞的对照却不会(《自然医学(nat.med.)》2009；15:1414–1420)。rasf的形态和基因表达与未活化的健康成纤维细胞不同。rasf的特征在于抗凋亡、原癌基因的表达和肿瘤抑制基因的表达的缺乏。rasf产生促炎性细胞因子和趋化因子进一步使免疫细胞吸引至滑膜。此外，基质金属蛋白酶(mmp)酶的产生促进对软骨的侵入和破坏。ii型胶原蛋白诱导的关节炎(cia)模型是ra的常用动物模型，因为它很好地概括了在人类ra中观察到的特征性免疫学、病理学和关节炎表现。在cia大鼠中，已证明滑膜、滑液和血清中lox的高表达水平。发现，使用β-氨基丙腈(bapn；泛lox抑制剂)抑制lox可减轻炎症、滑膜增生、血管生成以及mmp-2和mmp-9的表达，这表明lox促进了cia大鼠的滑膜增生和血管生成。此外，敲除loxl2的和针对loxl2抗体减轻胶原沉积、扩散和rasf的侵袭(《分子医学报告(mol.med.rep.)》2017:6736–6742)。尽管无法治愈ra，但有许多可减轻症状和改变疾病进程的治疗方法。然而，这种治疗具有明显的副作用，部分与免疫系统的抑制有关。针对rasf的选择性药物将代表更有用的ra治疗方法。骨关节炎(oa)是一种以关节软骨和下层骨骼退化为特征的疾病。oa主要由“磨损”引起，可引起关节疼痛和僵硬。最常见的受影响关节是手指、膝盖、背部和臀部的关节。与其他形式的关节炎(诸如ra)不同，骨关节炎仅影响关节。通常，身体一侧的关节比另一侧的关节受到的影响更大。oa是一种进行性和衰弱性疾病，可能对工作和正常的日常活动产生重大影响。滑膜纤维化是oa的关键因素，并且是成纤维细胞增殖的表现以及胶原合成和胶原降解的不平衡。这种不平衡导致胶原蛋白过度沉积到细胞外基质(ecm)中，并导致滑膜增厚和变硬。已证明，编码多种赖氨酰氧化酶家族酶的基因(包括lox、loxl2、loxl3和loxl4)在患有实验性oa的小鼠和患有晚期oa的人类中高表达(《关节炎和风湿病(arthritisandrheumatology)》2014；66:647–656)。考虑到赖氨酰氧化酶家族酶的许多成员对类风湿性关节炎和骨关节炎的发展都做出了不同的贡献，泛lox抑制剂可能会提供潜在的更有效的治疗方法。bapn是一种广泛使用的基于非选择性机制的不可逆的赖氨酰氧化酶抑制剂。自20世纪60年代以来，bapn已用于动物研究(主要是大鼠、小鼠和仓鼠)，并有效降低了各种模型(例如ccl4、博来霉素、石英、癌症)和组织(例如，肝脏、肺和真皮)中的胶原蛋白含量(《细胞生物化学杂志(jcellbiochem)》2003；88:660-672)。然而，对人类硬皮病患者的研究发现bapn耐受性差，并强调了对更安全替代品的需求(《临床药理学与治疗学(clin.pharmacol.ther.)》1967：593–602)。赖氨酰氧化酶催化的胶原蛋白交联可以通过两个途径进行：赖氨酸和羟基赖氨酸途径。在羟基赖氨酸途径中，首先形成不成熟的二价交联，包括脱氢二羟基赖氨酸正亮氨酸(deh-dhlnl)和脱氢羟基赖氨酸正亮氨酸(deh-hlnl)，然后进一步发展(通过赖氨酰氧化酶独立反应)为成熟的三价交联，在三个胶原之间分子形成脱氧吡啶并啉(dpd)和吡啶并啉(pyd)。可以通过lc-ms/ms(《公共科学图书馆·综合》(plosone)2014；9(11),e112391)来测量这些成熟和不成熟的交联。赖氨酰氧化酶同工酶不仅参与伤口愈合和纤维化过程中弹性蛋白和胶原蛋白的交联，而且还调节细胞运动和信号转导。它的细胞内和核内功能与基因调节有关，并可导致肿瘤发生和肿瘤进展(《炎症药理学(inflammapharmacol)》2011；19:117-129)。已经描述了肿瘤组织和癌细胞系中的赖氨酰氧化酶同工酶的下调和上调，这暗示了赖氨酰氧化酶同工酶和lox前肽作为转移启动子基因和抑癌基因的双重作用。除了在组织重塑中的作用外，lox同工酶在原发癌和转移中也起着关键作用。肿瘤的生长与反应性基质有关，后者主要由成纤维细胞构成，称为癌症相关的成纤维细胞(caf)。皮下接种肿瘤和caf细胞均匀混合物的小鼠已知具有更快的生长速度和更高的转移发生率(《分子医学趋势(trendsmolmed.)》2013；19(8):447-453))。caf敲除模型已显示出促肿瘤作用，然而，与患者的肿瘤微环境相比，这是一个非常抽象的场景。与正常成纤维细胞相比，caf被证明具有增加的lox表达(《病模型与机制(dismodelmech.)》2018；11(4))。在癌症环境中使用lox抑制剂会影响肿瘤和基质区室，从而有助于减少肿瘤的生长和转移。新兴证据表明特发性肺纤维化和肺癌之间有关联，然而，还需要更多的研究。在肺和肝小鼠模型中，化学或辐射诱发性纤维化均会导致α平滑肌肌动蛋白(成纤维细胞的标志物)、lox表达和转移性肿瘤生长的增加，这被lox抗体逆转(《癌症研究(cancerres.)》2013；73(6):1721-1732)。迄今为止，在来自癌症基因组图谱(tcga)的乳腺、中枢神经系统癌细胞系、头颈部鳞状细胞癌、食道癌、肾脏癌、肺癌、前列腺癌、透明细胞肾细胞癌和肺癌、卵巢癌、子宫癌、黑色素瘤和骨肉瘤患者样品中观察到了赖氨酰氧化酶同工酶mrna和/或蛋白的增加。表1中显示了lox家族的tcga患者基因表达数据。加号表示高于此数据集中的平均基因表达。表1lox家族的tcga患者基因表达数据在乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌、骨髓纤维化、前列腺癌、胰腺癌、卵巢癌和透明细胞肾细胞癌中观察到赖氨酰氧化酶同工酶表达与肿瘤进展之间的统计学显着临床相关性。关于赖氨酰氧化酶同工酶在肿瘤进展中的作用，已使用迁移/侵袭的体外模型以及体内肿瘤发生和转移的小鼠模型在乳腺癌中进行了最广泛的研究(《自然(nature.)》2006；440(7088):1222-1226)。在缺氧患者中发现了赖氨酰氧化酶同工酶表达的增加，并且与阴性雌激素受体状态(er-)、未接受辅助全身治疗的er患者和淋巴结阴性患者的总生存率降低以及er患者和淋巴结阴性患者的较短的无转移生存率有关；体内模型证明，lox抑制剂可通过调节独立于rankl的骨稳态而在具有骨转移的乳腺癌患者中具有潜力《自然(nature.)》2015；522(7554):106-110)。与侵袭性和转移性细胞系(mda-mb-231和hs578t)以及更具侵略性的乳腺癌细胞系和远处转移组织相比，赖氨酰氧化酶同工酶mrna被证明与原发性癌组织相比有上调(《癌症研究》2002；62(15):4478-4483)。原发性骨髓纤维化的致病过程涉及原发性巨核细胞加权的克隆性骨髓增殖和副肿瘤间质反应，包括骨髓纤维化、骨硬化、血管生成和髓外造血。骨髓反应包括细胞外基质蛋白(诸如原纤维胶原蛋白)的过度沉积、细胞减少、骨髓成纤维细胞的活化和募集、细胞因子和生长因子的过量产生以及导致造血能力降低的其他变化。真性红细胞增多症或原发性血小板增多症可导致继发性骨髓纤维化。在骨髓纤维化中，疾病进展与过表达lox的巨核细胞数量增加有关。在gata1低小鼠骨髓纤维化模型中，泛lox抑制剂显着减轻疾病进展(包括巨核细胞数量、纤维化和脾脏大小的增加)(《生物化学杂志(jbiolchem.)》2011；286(31):27630-27638)。在大多数肿瘤类型中，首要治疗是手术切除。伤口愈合反应是通过手术启动的，并且可能与转移扩散的增加有关。乳腺癌模型已经表明，腹部手术会增加肺转移。此外，它被证明是由系统性lox引起的。将从腹部手术小鼠(含lox)中收集的血浆注射到荷瘤小鼠中，导致肺转移的增加。手术诱导的全身性lox被bapn阻断，从而减少了转移并提高了生存率(《细胞报告(cellrep.)》2017；19(4):774-784)。在结肠癌、乳腺癌和黑色素瘤模型中，肿瘤相关内皮细胞已显示出lox表达增加，从而刺激血管生成和肿瘤生长(《癌症研究》2015；73(2):583-594)。在胰腺癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌和结肠癌患者中，高胶原含量同高lox基因表达、化疗耐药性和显着降低的生存率相关(《癌基因(oncogene.)》2018；37(36)4921-4940，《欧洲分子生物组织之医学生物(embomolmed.)》2015；7(8)1063-1076，《癌症靶标(oncotarget.)》2016；7(22)32100-32112)。将lox抑制剂(bapn和lox抗体两者)和护理化学疗法结合在增生性肿瘤小鼠模型中，以降低引起血管扩张的肿瘤间质压力(《癌症靶标》2016；7(22)32100-32112)。增加的血管流量提高了原发肿瘤部位化疗药剂的浓度，这使得转移负荷较低并提高了生存率(《癌症靶标》2016年5月31日；7(22)32100-32112)。在头颈部鳞状细胞癌中，发现赖氨酰氧化酶同工酶表达的增加与缺氧的标志物ca-ix相关，并且与癌症特异性生存率降低、总生存率降低和无转移存活降低相关(《癌症靶标》2016；7(31):50781-50804)。在口腔鳞状细胞癌中，与正常粘膜相比，赖氨酰氧化酶同工酶mrna表达上调。胶质瘤的基因表达谱鉴定出过表达的赖氨酰氧化酶同工酶是指示侵袭的分子标签的一部分，并与同不良患者生存率密切相关的高级别肿瘤相关(《公共科学图书馆·综合》2015年3月19日；10(3)e0119781)。胶质母细胞瘤和星形细胞瘤组织以及浸润性u343和u251培养的星形细胞瘤细胞中的赖氨酰氧化酶同工酶蛋白表达增加。在组织中，与良性前列腺肥大相比，前列腺癌中的赖氨酰氧化酶同工酶mrna上调，同格里森评分相关，并且与高级别和短时间复发相关(《肿瘤学报告(oncolrep)》2008；20:1561-1567)。在透明细胞rcc中，吸烟与lox基因所在5q23.1号染色体上的等位基因失衡有关，并可能涉及所述基因的重复(《肿瘤遗传学与细胞遗传学(cancergenetcytogenet.)》2005；163(1)7:7-11)。siha宫颈癌细胞在缺氧/厌氧条件下表现出增加的体外侵袭能力；通过用bapn以及lox反义寡核苷酸、lox抗体、loxshrna或细胞外铜螯合剂处理抑制细胞外催化活性赖氨酰氧化酶的活性来抑制这一现象(《肿瘤学报告》2013；29(2),541-548)。在卵巢癌基因工程小鼠模型(apoe敲除)中，形成了lox基因表达增加的结缔组织增生性肿瘤。bapn治疗可显着提高生存率并减少肺转移(《实验与临床癌症研究杂志(jexpclincancerres.)》2018；37:32)。来自卵巢癌患者的某些肿瘤具有lox基因g473a的单核苷酸多态性。两项独立研究表明，表达g473a多态性的人发展卵巢癌的机会增加(《国际医学研究杂志(jintmedres.)》2012；40(3):917–923；《遗传检验与分子生物标记物(genettestmolbiomarkers.)》2012；16(8):915-919)。在原发性人类口腔鳞状细胞癌(oscc)中，赖氨酰氧化酶(特别是lox和loxl2)和赖氨酰羟化酶的表达显着增加，并且在晚期区域性淋巴结转移(rlnm)阳性肿瘤中明显升高。与正常组织相比，oscc中可还原或未成熟的交联(deh-dhlnl和deh-hlnl)和不可还原或成熟的交联(dpd和pyd)均显着升高(《牙科研究杂志(jdentres)》2019；98(5):517–525)。本文所述发现为患者的涉及lox同工酶抑制剂和抗肿瘤治疗的联合疗法提供了强有力的依据。最近，cct365623是一种可逆的泛lox抑制剂，已用于乳腺癌模型(mmtv-pymt)中，以减少转移并提高生存率(《自然通讯(natcommun.)》2017；18(8):14909)。科学和专利文献描述了赖氨酰氧化酶同工酶的小分子抑制剂以及lox和loxl2的抗体在纤维化和癌症转移动物模型中具有治疗作用。据报道，一些已知的mao抑制剂还可以抑制赖氨酰氧化酶同工酶(例如，以下所示的mao-b抑制剂莫非吉兰(mofegiline))。这种抑制剂是mao抑制剂卤代烯丙胺家族的成员。莫非吉兰中的卤素是氟。氟代烯丙胺抑制剂在美国专利第4,454,158号中有描述。公开了要求保护氟代烯丙胺和氯代烯丙胺的专利，例如作为赖氨酰氧化酶抑制剂的mdl72274(如下所示)(美国专利4,943,593；4,965,288；5,021,456；5,059,714；5,182,297；5,252,608)。这些专利中要求保护的许多化合物据报道也是有效的mao-b和ssao/vap-1抑制剂。附加的氟代烯丙胺抑制剂在美国专利4,699,928中有描述。在结构上与莫非吉兰有关的其他示例可以在wo2007/120528中找到。wo2009/066152公开了作为ssao/vap-1抑制剂的3-取代的3-卤代烯丙胺家族，其可用于治疗多种适应症，包括炎性疾病。这些文献均未具体公开根据本发明的式(i)的氟代烯丙胺化合物。在us2009/0053224中已经公开了针对lox和loxl2的抗体与用于诊断和治疗应用的方法。抗lox和抗loxl2抗体可用于鉴定和治疗病症，诸如纤维化病症、血管生成，或用于防止从上皮细胞状态向间充质细胞状态的转变：us2011/0044907。wo2017/136871和wo2017/136870公开了赖氨酰氧化酶的卤代烯丙胺吲哚和氮杂吲哚衍生物抑制剂以及其用途。wo2018/157190公开了赖氨酰氧化酶的卤代烯丙胺吡唑衍生物抑制剂及其用途。wo2017/141049和wo2019/073251分别公开了作为赖氨酰氧化酶抑制剂的甲胺和桥连高哌嗪衍生物家族以及其在治疗与纤维化相关的癌症和疾病中的用途。wo2003/097612、wo2006/053555和us2008/0293936公开了另一类赖氨酰氧化酶抑制剂。wo2018/048930、wo2017/015221、wo2017/003862、wo2016/144702和wo2016/144703公开了其他loxl2抑制剂。技术实现要素：本发明提供了抑制赖氨酰氧化酶(lox)、赖氨酰氧化酶样2(loxl2)和其他赖氨酰氧化酶同工酶的取代的氟代烯丙胺化合物。出人意料的是，先前描述的3-取代的3-氟代烯丙基胺结构的修饰导致发现了新颖化合物，所述新颖化合物是人lox和loxl同工酶的有效抑制剂。此外，相对于胺氧化酶家族中的其他酶，这些新颖化合物中的某些还选择性地抑制某些lox和loxl同工酶。本发明的第一方面提供式i化合物：或其立体异构体、药学上可接受的盐、多晶型形式、溶剂化物、水合物或互变异构形式；其中：a为芳基或杂芳基；每个r1独立选自由以下组成的群组：x-r2、卤素、氘、c1-6烷基、o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；x选自由以下组成的群组：o、ch2、och2、ch2o、ch2s(o)2、conh和nhco；r2选自由以下组成的群组：环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；r7选自由以下组成的群组：卤素、oh、c1-6烷基、o-c1-6烷基、c3-7环烷基、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-nr4c(o)r6、-s(o)2nr4r5、-nr4s(o)2r6和-s(o)2r6；其中每个c1-6烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素和-oh；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的5至7元环；并且n为0、1、2、3、4、5或6。本发明的第二方面提供了药物组合物，其包含根据本发明的第一方面的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及至少一种药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂。本发明的第三方面提供了一种在有此需要的受试者中抑制lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4中任一个的胺氧化酶活性的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的根据本发明的第一方面的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或根据本发明的第二方面的药物组合物。本发明的第四方面提供了一种治疗与lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4蛋白中的任一种相关的病症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用治疗有效量的根据本发明的第一方面的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或根据本发明的第二方面的药物组合物。本发明的第五方面提供了一种根据本发明的第一方面的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的用途，其用于制造用于治疗与lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4蛋白中的任一种相关的病症的药物。本发明的第六方面提供了用于治疗与lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4蛋白中的任一种相关的病症的根据本发明的第一方面的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在本发明的方法和用途的一个实施例中，所述病症选自纤维化、癌症和血管生成。本文考虑的是联合疗法，其中所述方法进一步包括共同施用用于治疗癌症、纤维化、血管生成、炎症、高血压、免疫抑制和代谢病症的治疗剂。定义以下是可能有助于理解本发明的描述的一些定义。这些旨在作为一般定义，绝不应将本发明的范围仅限制为这些术语，而是为了更好地理解以下描述而提出的。除非上下文另外要求或有相反的特别说明，否则本文列举的本发明的整数、步骤或元素为单数形式，步骤或元素清楚地涵盖所列举的整数、步骤或元素的单数形式和复数形式。在整个说明书中，除非上下文另外要求，否则词语“包含(comprise)”或诸如“包含(comprises)”或“包含((comprising)”的变体将被理解为暗示包括所述的步骤或元件或步骤或元件的整数或组，但不排除任何其他步骤或元素或整数，或一组元素或整数。因此，在本说明书的上下文中，术语“包含”是指“主要包括但不一定仅包括”。本领域技术人员将理解，本文描述的发明除了具体描述的那些之外还可以进行变化和修改。应当理解，本发明包括所有这样的变化和修改。本发明还单独或共同包括在本说明书中提及或指出的所有步骤、特征、组合物和化合物，以及所述步骤或特征的任何和所有组合或任何两个或更多个。如本文所用，术语“烷基”在其含义内包括具有1至6个碳原子，例如1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链饱和的烃基的单价(“烷基”)和二价(“亚烷基”)。直链或支链烷基在任何可用点连接以产生稳定的化合物。例如，术语烷基包括但不限于甲基、乙基、1-丙基、异丙基、1-丁基、2-丁基、异丁基、叔丁基、戊基、1,2-二甲基丙基、1,1-二甲基丙基、戊基、异戊基、己基、4-甲基戊基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、1,2,2-三甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基等。如本文所用，术语“烷氧基”或“烷基氧基”是指直链或支链烷氧基(即，o-烷基)基团，其中烷基如上文所定义。烷氧基的示例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基和异丙氧基。如本文所用，术语“环烷基”在其含义内包括饱和、单环、双环、多环或稠合类似物的单价(“环烷基”)和二价(“环亚烷基”)。在本发明的上下文中，环烷基可具有3至10个碳原子。环烷基的稠合类似物是指稠合至芳基或杂芳基的单环，其中连接点在非芳族部分上。环烷基和其稠合类似物的示例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、四氢萘基、十氢萘基、茚满基、金刚烷基等。如本文所用，术语“芳基”或变体诸如“亚芳基”是指具有6至10个碳原子的芳族烃的单价(“芳基”)和二价(“亚芳基”)单、多核、共轭和稠合的类似物。芳基的稠合类似物是指与单环环烷基或单环杂环基稠合的芳基，其中连接点在芳族部分上。芳基和其稠合类似物的示例包括苯基、萘基、茚满基、茚基、四氢萘基、2,3-二氢苯并呋喃基、四氢苯并吡喃基、1,4-苯并二恶烷基等。“取代的芳基”是被一个或多个，优选1、2或3个取代基独立地取代的芳基，所述取代基连接在任何可用的原子上以产生稳定的化合物。如本文所用，术语“烷基芳基”在其含义内包括与二价、饱和、直链或支链亚烷基连接的单价(“芳基”)和二价(“亚芳基”)、单、多核、共轭和稠合的芳族烃基。烷基芳基的示例包括苄基。如本文所用，术语“杂芳基”和变体诸如“杂芳族基团”或“杂亚芳基”，在其含义内包括具有5至10个原子的单价(“杂芳基”)和二价(“杂亚芳基”)、单、多核、共轭和稠合的杂芳族基，其中1至4个环原子或1至2个环原子是独立地选自o、n、nh和s的杂原子。杂芳基还旨在包括氧化的s或n，诸如亚磺酰基、磺酰基和三元环氮的n-氧化物。碳或氮原子是杂芳基环结构的连接点，从而产生稳定的化合物。杂芳族基团可以是c1-9杂芳族。杂芳基的稠合类似物是指与单环环烷基或单环杂环基稠合的杂芳基，其中连接点在芳族部分上。杂芳基和其稠合类似物的示例包括吡唑基、吡啶基、恶唑基、恶二唑基、噻二唑基、四唑基、三嗪基、噻吩基、苯并恶唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、呋喃并(2,3-b)吡啶基、吲哚基、异喹啉基、咪唑并吡啶、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、吡啶基、菲咯啉基、喹啉基、异喹啉基、咪唑啉基、噻唑啉基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、恶唑基、异恶唑基、异噻唑基、三唑基等。“含氮杂芳基”是指其中任何杂原子为n的杂芳基。“取代的杂芳基”是独立地被一个或多个，优选1、2或3个取代基取代的杂芳基，所述取代基连接在任何可用的原子上以产生稳定的化合物。如本文所用，术语“杂环基”和其变体，诸如“杂环烷基”，在其含义内包括具有3至10个环原子的单价(“杂环基”)和二价(“亚杂环基”)、饱和或部分饱和(非芳族)、单环、双环、多环或稠合烃基，其中1至4或1至2个环原子是独立地选自o、n、nh或s、so或so2的杂原子，其中连接点可以是碳或氮。杂环基的稠合类似物是指与芳基或杂芳基稠合的单环杂环，其中连接点在非芳族部分上。杂环基可以是c3-8杂环基。杂环烷基可以是c3-6杂环基。杂环基可以是c3-5杂环基。杂环基和其稠合类似物的示例包括吡咯烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、2,3-二氢呋喃(2,3-b)吡啶基、苯并恶嗪基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、二氢吲哚基、奎宁环基、氮杂环丁烷基、吗啉基、四氢噻吩基、四氢呋喃基、四氢吡喃基等。所述术语还包括不是芳族的部分不饱和单环，诸如通过氮或n-取代的尿嘧啶连接的2-或4-吡啶酮。如本文所用，术语“卤素”或变体诸如“卤化物”或“卤代”是指氟、氯、溴和碘。如本文所用，术语“杂原子”或变体诸如“杂-”或“杂基”是指o、n、nh和s。通常，“取代的”是指本文所定义的有机基团(例如，烷基)，其中与其中所含氢原子的一个或多个键被与非氢或非碳原子的键所替换。取代基还包括其中与碳原子或氢原子的一个或多个键被与杂原子的一个或多个键，包括双键或三键，所替换的基团。因此，除非另有说明，否则取代基将被一个或多个取代基取代。在一些实施例中，取代的基团被1、2、3、4、5或6个取代基取代。如本文所用，术语“任选地被取代”是指所述术语所指的基团可以是未取代的，或可以被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团独立地选自：烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、杂环烷基、卤素、卤代烷基、羟基、羟烷基、烷氧基、硫代烷氧基、烯基氧基、卤代烷氧基、no2、nh(烷基)、n(烷基)2、烷基氨基、二烷基氨基、酰基、链烯酰基、链烷酰基炔基、酰氨基、二酰氨基、酰氧基、烷基磺酰基、烷基磺酰基氧基、磺酰胺基、杂环氧基、杂环氨基、卤代杂环烷基、烷基亚硫基、烷基羰基氧基、含磷基团诸如膦酰基和氧膦基、芳基、杂芳基、烷基芳基、芳烷基、烷基杂芳基、氰基、co2h、co2烷基、c(o)nh2、c(o)nh(烷基)和-c(o)n(烷基)2。优选的取代基包括卤素、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基、羟基(c1-6)烷基、c3-c6环烷基、c(o)oh、nhc(o)c1-c4烷基、c(o)c1-c4烷基、nh2、nhc1-c4烷基、n(c1-c4烷基)2、so2(c1-c4烷基)、oh和cn。特别优选的取代基包括c1-4烷基、c1-4烷氧基、so2(c1-c4烷基)、卤素、oh、羟基(c1-3)烷基(例如c(ch3)2oh)和c1-3卤代烷基(例如cf3、ch2cf3)。本发明在其范围内包括本文公开的化合物的所有立体异构和异构形式，包括所有非对映异构体、外消旋体、对映异构体以及其混合物。还应理解，式i描述的化合物可以e和z异构体形式存在，也称为顺式和反式异构体。因此，本公开应理解为包括例如e、z、顺式、反式、(r)、(s)、(l)、(d)、(+)和/或(-)形式的化合物。在每种情况下均视情况而定。在结构中没有指出具体的立体异构体的情况下，应理解为涵盖任何和所有可能的异构体。本发明的化合物囊括所有构象异构体。本发明的化合物也可以以一种或多种互变异构形式存在，包括单个互变异构体和互变异构体的混合物。本文公开的化合物的所有多晶型物和晶体形式也包括在本发明的范围内。本发明在其范围内包括不同原子的同位素。没有特别指定为特定同位素的任何原子均表示该原子的任何稳定同位素。因此，本公开应理解为包括氢的氘和超重氢同位素。在本申请中引用的所有参考文献均通过交叉引用整体地特别地结合。对任何此类文件的引用均不应解释为承认所述文件构成公知常识的一部分或属于现有技术。在本说明书的上下文中，术语“施用(administering)”和该术语的变体包括“施用(administer)”和“施用(administration)”，包括通过任何适当的方式将本发明的化合物或组合物接触、施用、递送或提供给生物体或表面。在本说明书的上下文中，术语“治疗”是指用于补救疾病状态或症状、防止疾病的建立，或以其他方式防止、阻碍、延缓或逆转疾病或其他任何形式不良的症状进展的任何和所有用途。在本说明书的上下文中，术语“局部施用(topicaladministration)”或该术语的变体包括“局部应用”在其含义内包括将本发明的化合物或组合物施用、接触、递送或提供给皮肤或身体的局部区域。在本说明书的上下文中，术语“局部施用(localadministration)”或该术语的变体包括“局部应用(localapplication)”在其含义内包括将本发明的化合物或组合物施用、接触、递送或提供给皮肤或身体的局部区域。在本说明书的上下文中，术语“有效量”在其含义内包括足以提供所需效果的本发明化合物或组合物的足够但无毒的量。因此，术语“治疗有效量”在其含义内包括足以提供所需治疗效果的本发明化合物或组合物的足够但无毒的量。所需的确切剂量因受试者而异，具体取决于多种因素，诸如被治疗的物种；受试者的性别、年龄和一般状况；所治疗疾病的严重程度；所施用的特定药物；施用方式，等等。因此，不可能指定确切的“有效量”。然而，对于任何给定的情况，本领域普通技术人员可以仅使用常规实验来确定适当的“有效量”。附图说明图1(a)和1(b)描绘了根据tcga数据集比较胰腺癌患者高和低基因表达的生存曲线。a.lox基因表达。b.loxl2基因表达。图2(a-c)描绘了化合物1和33对赖氨酰氧化酶的酶活性的剂量依赖性阻断。与未治疗的对照组相比，大鼠组织(a)耳朵(单次口服剂量10和30mg/kg后24小时，化合物1)；(b)耳朵(单次口服剂量30mg/kg后4、24、48和120小时，化合物33)；以及(c)主动脉(单次口服剂量5、10或30mg/kg，化合物33)中的赖氨酰氧化酶活性的测定图3(a)显示了用局部化合物1治疗后小鼠瘢痕组织中胶原蛋白的减少。图3(b)组织学显示了对照瘢痕组织中的厚而平行的胶原束。图3(c)用化合物1治疗的组织显示了束密度降低，并且胶原蛋白的结构更“正常”。图4(a-b)显示了用3％化合物1溶液每日局部治疗4周后lox活性和总胶原蛋白相对于对照的降低。图4(c-f)的总体形态显示，在受伤时(c对照；d治疗)和安乐死治疗时的相似伤口看起来更愈合(e对照，f治疗)。图4(g-h)的组织学显示了未经治疗的瘢痕组织中胶原蛋白带较厚(箭头g突出显示)。这在治疗的组织中似乎减少了(h)。图5(a-e)原位人类胰腺癌异种移植模型的肿瘤生长数据：功效数据。a.生长和治疗策略图。b.通过生物发光成像体内监测肿瘤生长。c.总肿瘤负荷的离体生物发光信号。d.原发性肿瘤的离体生物发光信号。e.转移负荷的离体生物发光信号。图6(a-c)用化合物1局部治疗的硬化小鼠皮肤模型的组织学分析。a.复合皮评分。b.平均胶原蛋白评分。c.平均lox评分。图7(a-e)用化合物19治疗的原发性骨髓纤维化模型(gata-1低)的脾脏分析。a.脾脏的gomori银染。b.脾脏重量。c.脾脏网硬蛋白纤维化的定量。d.脾脏的h&e染色图像。e.脾脏中巨核细胞的定量。图8(a-d)用化合物19治疗的原发性骨髓纤维化模型(gata-1低)的骨髓分析。a.骨髓的gomori银染。b.骨髓网硬蛋白纤维化的定量。c.骨髓的h&e染色图像。d.骨髓中巨核细胞的定量。图9描绘了小鼠uuo模型中纤维化区域的变化。图10描述了化合物33减少博来霉素诱导的肺纤维化的能力(ashcroft评分)和体重增加。图11(a-d)描述了在原位注射的乳腺癌细胞系(4t)下，化合物33在ccl4诱导的小鼠肝纤维化模型中减少与纤维化相关的转移的能力。(a)研究设计示意图；(b)肝纤维化的临床测量；(c)肝中交联的浓度；(d)肝转移的测量。具体实施方式本发明涉及取代的氟代烯丙胺衍生物，其可以抑制赖氨酰氧化酶(lox)、赖氨酰氧化酶样2(loxl2)和其他赖氨酰氧化酶同工酶。特别地，本发明涉及具有砜连接基的取代的氟代烯丙胺衍生物。特别地，本发明涉及式i化合物：或其立体异构体、药学上可接受的盐、多晶型形式、溶剂化物、水合物或互变异构形式；其中：a为芳基或杂芳基；每个r1独立选自由以下组成的群组：x-r2、卤素、氘、c1-6烷基、o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；x选自由以下组成的群组：o、ch2、och2、ch2o、ch2s(o)2、conh和nhco；r2选自由以下组成的群组：环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；r7选自由以下组成的群组：卤素、-oh、c1-6烷基、o-c1-6烷基、c3-7环烷基、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-nr4c(o)r6、-s(o)2nr4r5、-nr4s(o)2r6和-s(o)2r6；其中每个c1-6烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素和-oh；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的5至7元环；并且n为0、1、2、3、4、5或6。在本发明化合物的一个实施例中，a选自芳基和杂芳基。在本发明化合物的另一个实施例中，a选自苯基、萘基、吡啶基、喹啉基、苯并噻唑基和吲哚基。在本发明化合物的进一步的实施例中，a选自：在本发明化合物的仍进一步的实施例中，a选自：在进一步的实施例中，a选自由以下组成的群组：在仍进一步的实施例中，a为在另一个实施例中，a是苯基。在进一步的实施例中，a为杂芳基。在本发明化合物的一个实施例中，r1独立选自由以下组成的群组：x-r2、卤素、氘、c1-6烷基、oc1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、–oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3。在本发明化合物的另一个实施例中，每个r1独立选自由以下组成的群组：-x-r2、c1-6烷基、c1-6卤代烷基、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6。在本发明化合物的另一个实施例中，每个r1独立地选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、c1-6卤代烷基和-s(o)2r6。在本发明化合物的一个实施例中，r1的至少一个是x-r2。在本发明化合物的另一个实施例中，r1之一是x-r2。在本发明化合物的一个实施例中，x选自由以下组成的群组：o、ch2、och2、ch2o、ch2s(o)2、conh和nhco。在本发明化合物的另一个实施例中，x选自由以下组成的群组：o、ch2、och2、conh和nhco。在本发明化合物的另一个实施例中，x选自由以下组成的群组：o、och2和conh。在本发明化合物的进一步的实施例中，x选自由以下组成的群组：o、ch2和och2。在本发明化合物的另一个实施例中，x选自由以下组成的群组：conh和nhco。在本发明化合物的进一步的实施例中，x是o。在本发明化合物的另一个实施例中，x是och2。在本发明化合物的进一步的实施例中，x是conh。在本发明化合物的一个实施例中，r2选自由以下组成的群组：环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中每个r2任选地被一个或多个r7取代。在本发明化合物的另一个实施例中，r2选自由以下组成的群组：芳基和环烷基，其中每个r2任选地被一个或多个r7取代。在本发明化合物的进一步的实施例中，r2是环烷基，其中每个r2任选地被一个或多个r7取代。在本发明化合物的另一个实施例中，r2为任选地被一个或多个r7取代的芳基。在本发明化合物的另一个实施例中，r2是被一个r7取代的苯基。在本发明化合物的另一个实施例中，r2是金刚烷基或苯基，其中每个r2任选地被一个或多个r7取代。在另一个实施例中，r2是金刚烷基或苯基，其任选地被–s(o)2nr4r5取代。在进一步的实施例中，r2是金刚烷基。在另一个实施例中，r2是任选被–s(o)2nr4r5取代的苯基。在本发明化合物的一个实施例中，r2被一个r7取代。在本发明化合物的另一个实施例中，r2被两个r7取代。在本发明化合物的进一步的实施例中，r2被三个r7取代。在本发明化合物的另一个实施例中，r2被四个或五个r7取代。在本发明化合物的一个实施例中，r3选自氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和-o-cf3。在本发明化合物的另一个实施例中，r3是氢。在本发明化合物的进一步的实施例中，r3为c1-6烷基或c3-7环烷基。在本发明化合物的仍进一步的实施例中，r3是氢或c1-6烷基。在本发明化合物的另一个实施例中，r3是c1-6烷基。在本发明化合物的进一步的实施例中，r3是甲基或乙基。在本发明化合物的另一个实施例中，r3选自由以下组成的群组：氢、甲基和乙基。在本发明化合物的一个实施例中，r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4、-cf3、-ch2cf3和-o-cf3。在本发明化合物的另一个实施例中，r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢和c1-6烷基。在本发明化合物的另一个实施例中，r4和r5为氢。在本发明化合物的进一步的实施例中，r4和r5为c1-6烷基。在本发明化合物的另一个实施例中，r4和r5均为甲基。在本发明化合物的进一步的实施例中，r4和r5均为异丙基。在本发明化合物的一个实施例中，r4为氢并且r5为异丙基。在本发明化合物的进一步的实施例中，r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢和c3-7环烷基。在本发明化合物的另一个实施例中，r4为氢并且r5为c1-6烷基。在本发明化合物的一个实施例中，r4为氢并且r5为甲基。在本发明化合物的进一步的实施例中，r4为氢并且r5为c3-7环烷基。在本发明化合物的一个实施例中，r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环。在进一步的实施例中，r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有1个附加杂原子作为环成员的4至7元环。在另一个实施例中，r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0个附加杂原子作为环成员的4至7元环。在本发明化合物的一个实施例中，r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和-o-cf3。在另一个实施例中，r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基。在另一个实施例中，r6为c1-6烷基。在进一步的实施例中，r6为c3-7环烷基。在本发明化合物的一个实施例中，r7选自由以下组成的群组：卤素、-oh、c1-6烷基、o-c1-6烷基、c3-7环烷基、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-nr4c(o)r6、-s(o)2nr4r5、-nr4s(o)2r6和-s(o)2r6；其中每个c1-6烷基任选被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自以下组成的群组：卤素和–oh。在本发明化合物的另一个实施例中，r7选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5和-s(o)2r6。在本发明化合物的进一步的实施例中，r7选自由以下组成的群组：-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5和-s(o)2r6。在本发明化合物的另一个实施例中，r7是-s(o)2nr4r5。在本发明化合物的另一个实施例中，r7是-s(o)2n(ch3)2。在本发明化合物的一个实施例中，r8是氢或c1-6烷基。在本发明化合物的另一个实施例中，r8为氢。在本发明化合物的进一步的实施例中，r8选自由以下组成的群组：氢、甲基和乙基。在本发明化合物的另一个实施例中，r8为氢或甲基。在本发明化合物的一个实施例中，r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh，-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和-o-cf3。在另一个实施例中，r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基。在另一个实施例中，r9是c1-6烷基。在进一步的实施例中，r9是c3-7环烷基。在本发明化合物的一个实施例中，r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子的5至7元环作为环成员。在进一步的实施例中，r8和r9结合形成具有1个附加杂原子的5至7元环作为环成员。在另一个实施例中，r8和r9结合形成具有0个附加杂原子的5至7元环。在本发明化合物的一个实施例中，n为0、1、2、3、4或5。在本发明化合物的另一个实施例中，n为0。在本发明化合物的进一步的实施例中，n为0、1或2。在本发明化合物的另一个实施例中，n为1、2或3。在本发明化合物的另一个实施例中，n为1或2。在本发明化合物的进一步的实施例中，n为1。在本发明化合物的另一个实施例中，n为2。在本发明化合物的进一步的实施例中，n为3。在本发明化合物的另一个实施例中，n为4。在本发明化合物的另一个实施例中，n为5。在本发明化合物的进一步的实施例中，n为6。在一个实施例中，本发明还涉及式ia的化合物：或其立体异构体、药学上可接受的盐、多晶型形式、溶剂化物、水合物或互变异构形式；其中：每个r1独立选自由以下组成的群组：x-r2、卤素、c1-6烷基、o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；x选自由以下组成的群组：o、ch2、och2、ch2o、ch2s(o)2、conh和nhco；r2选自由以下组成的群组：环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；r7选自由以下组成的群组：卤素、-oh、c1-6烷基、o-c1-6烷基、c3-7环烷基、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-nr4c(o)r6、-s(o)2nr4r5、-nr4s(o)2r6和-s(o)2r6；其中每个c1-6烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素和-oh；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子的5至7元环作为环成员；并且n为0、1、2或3。在一个实施例中，本发明还涉及式ib的化合物：或其药学上可接受的盐或溶剂化物；其中：每个r1独立选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；x选自由以下组成的群组：o、ch2、och2、ch2o、ch2s(o)2、conh和nhco；r2选自由以下组成的群组：环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基r7选自由以下组成的群组：卤素、-oh、c1-6烷基、o-c1-6烷基、c3-7环烷基、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-nr4c(o)r6、-s(o)2nr4r5、-nr4s(o)2r6和-s(o)2r6；其中每个c1-6烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素和-oh；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子的5至7元环作为环成员；并且n为0、1或2。在本发明的式ib的化合物的一个实施例中，x选自由以下组成的群组：o、och2和conh；r2选自由以下组成的群组：金刚烷基和苯基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢和c1-6烷基；r7为-s(o)2nr4r5；n为0。在另一个实施例中，本发明还涉及式ic的化合物：或其药学上可接受的盐或溶剂化物；其中：每个r1独立选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、-o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；x选自由以下组成的群组：o、ch2、och2、ch2o、ch2s(o)2、conh和nhco；r2选自由以下组成的群组：环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；r7选自由以下组成的群组：卤素、-oh、c1-6烷基、o-c1-6烷基、c3-7环烷基、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-nr4c(o)r6、-s(o)2nr4r5、-nr4s(o)2r6和-s(o)2r6；其中每个c1-6烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素和-oh；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子的5至7元环作为环成员；并且n为0、1或2。在本发明的式ic的化合物的一个实施例中，x选自由以下组成的群组：och2和conh；r2选自由以下组成的群组：金刚烷基和苯基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢和c1-6烷基；r7为-s(o)2nr4r5；并且n为0。在另一个实施例中，本发明还涉及式id的化合物：或其药学上可接受的盐或溶剂化物；其中：每个r1独立选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；x选自由以下组成的群组：o、ch2、och2、conh和nhco。r2选自由以下组成的群组：环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；r7选自由以下组成的群组：卤素、-oh、c1-6烷基、o-c1-6烷基、c3-7环烷基、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-nr4c(o)r6、-s(o)2nr4r5、-nr4s(o)2r6和-s(o)2r6；其中每个c1-6烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素和-oh；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子的5至7元环作为环成员；并且n为0、1或2。在本发明的式id的化合物的一个实施例中，x选自由以下组成的群组：och2和conh；r2选自由以下组成的群组：金刚烷基和苯基；其中每个r2任选地被一个或多个r7取代；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢和c1-6烷基；r7为-s(o)2nr4r5；并且n为0。在另一个实施例中，本发明还涉及式ie的化合物：或其药学上可接受的盐或溶剂化物；其中：每个r1独立选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子的5至7元环作为环成员；并且n为0、1或2。在另一个实施例中，本发明还涉及式if的化合物：或其药学上可接受的盐或溶剂化物；其中：每个r1独立选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子的5至7元环作为环成员；并且n为0、1或2。在另一个实施例中，本发明还涉及式ig的化合物：或其药学上可接受的盐或溶剂化物；其中：每个r1独立选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、o-c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-s(o)2nr4r5、-s(o)2r6、-nr8c(o)r9和-nr8s(o)2r9；其中每个c1-6烷基、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-so2ch3、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；r3选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、c1-6烷基和c3-7环烷基；或者r4和r5当与同一氮原子连接时结合形成具有0至1个附加杂原子作为环成员的4至7元环；r6选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；r8为氢或c1-6烷基；r9选自由以下组成的群组：c1-6烷基和c3-7环烷基；其中每个c1-6烷基和c3-7环烷基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自由以下组成的群组：卤素、-oh、-c1-4烷基、-o-c1-4烷基、-cf3、-ch2cf3和–o-cf3；或者r8和r9结合形成具有0至1个附加杂原子的5至7元环作为环成员；并且n为0、1或2：在本发明的式ie、if和ig的化合物的另一个实施例中，每个r1是c1-6烷基，并且n为0或1。在本发明的式i化合物的另一个实施例中，每个r1独立地选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、c1-6卤代烷基、c1-6烷氧基、c1-6卤代烷氧基、-cn、-c(o)or3、-c(o)nr4r5、-nr4c(o)r6、-s(o)2nr4r5、-nr4s(o)2r6和-s(o)2r6；r3选自由以下组成的群组：氢、任选取代的c1-6烷基和任选取代的c3-7环烷基；r4和r5独立地选自由以下组成的群组：氢、任选取代的c1-6烷基和任选取代的c3-7环烷基；或者r4和r5当连接到相同的氮原子时结合形成具有0至1个附加杂原子的4至7元作为环成员；r6选自由以下组成的群组：任选取代的c1-6烷基、任选取代的c3-7环烷基和任选取代的c1-6卤代烷基；并且n为0、1、2或3。在本发明式i化合物的另一个实施例中，每个r1独立地选自由以下组成的群组：卤素、c1-6烷基、c1-6卤代烷基和-s(o)2r6；r6为c1-6烷基；并且n为0、1或2。在本发明式i化合物的另一个实施例中，每个r1独立地选自由以下组成的群组：氯、氟、甲基、异丙基、och3、苯基和so2ch3；并且n为1或2。在本发明式i化合物的进一步的实施例中，a为并且n为0。在本公开的上下文中，任何一个或多个方面或实施例可以与任何其他方面或实施例组合。根据本发明的示例性化合物包括表2中列出的化合物：表2.在一个实施例中，本发明的化合物选自由以下组成的群组：或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在另一个实施例中，本发明的化合物为或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在进一步的实施例中，本发明的化合物为或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在一个实施例中，本发明的化合物选自由以下组成的群组：或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在另一个实施例中，本发明的化合物为或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在进一步的实施例中，本发明的化合物为或其药学上可接受的盐或溶剂化物。式i化合物的制备式i化合物可以由本领域技术人员使用本领域已知的方法和材料并参考标准教科书，诸如jerrymarch(第三版，1985，johnwileyandsons)的《高级有机化学(advancedorganicchemistry)》或richardc.larock的《综合有机转换(comprehensiveorganictransformations)》(1989，vch出版社)来容易地制备。式i化合物可如下所述合成。以下方案提供了本发明的代表性非限制性实施例的概述。本领域技术人员将认识到，也可以从类似的起始原料制备式i的类似物，包括不同的异构体形式。方案1：x为–och2-的式ib描述的化合物的制备在以下方案1中描述。本领域技术人员将认识到，式ic、id、ie、if和ig所述的化合物可以通过适合的起始原料采用类似合成方法来制备。方案1p1是用于保护氮官能团的官能团。p1的示例是形成氨基甲酸酯的基团，诸如叔丁氧羰基(boc)、9-芴基甲氧羰基(fmoc)和苄氧羰基(cbz)。在一般方案1中，式ii描述的r1取代的羟基苯硫酚起始原料可以从商业来源获得或可以通过本领域众所周知的许多方法来制备。尽管有许多方法可以完成方法a所述的反应，但一种便捷的方法涉及在环境温度下，在溶剂(诸如n,n-二甲基甲酰胺)中，使式ii和iii描述的化合物与碱(诸如碳酸钾)反应数小时。按照标准的提取和纯化方法，可以以良好的产率和纯度获得式iv描述的产物。尽管有许多方法可以实现方法b描述的反应，但一种便捷的方法涉及在环境温度下，在溶剂(诸如n,n-二甲基甲酰胺)中，使式iv和v描述的化合物(其中y是合适的离去基团，诸如br、i、ot和om)与碱(诸如碳酸钾)反应数小时。可以通过标准的后处理程序来回收式vi描述的产物。将式vi描述的化合物转化为式vii描述的化合物的一种便捷的方法是方法c，所述方法涉及在0℃和环境温度之间，用氧化剂诸如mcpba(3-氯过氧苯甲酸)处理式vi描述的化合物和碱(诸如碳酸氢钠)在溶剂(诸如二氯甲烷)中的溶液数小时。可以通过标准的后处理程序来回收式vii描述的产物。有许多完善的化学程序来将式vii描述的化合物脱保护为式ib描述的化合物(方法d)。例如，如果p1是boc保护基，则可以在溶剂诸如乙醚中用酸性物质诸如干燥的氯化氢处理式vii描述的化合物，以提供作为盐酸盐的式ib描述的化合物。通常，游离氨基化合物转化为酸加成盐，以易于处理并改善化学稳定性。酸加成盐的示例包括但不限于盐酸盐、氢溴酸盐、2,2,2-三氟乙酸盐和甲磺酸盐。方案2：在以下方案2中描述了式ib描述的化合物的制备，其中x为-conh-。本领域技术人员将认识到，式ic、id、ie、if和ig所述的化合物可以通过适合的起始原料采用类似合成方法来制备。方案2在一般方案2中，r1取代的巯基苯甲酸起始原料可以从商业来源获得或可以通过本领域众所周知的许多方法制备。式xi所示的化合物可以通过在环境温度下，在合适的偶联剂(诸如hatu)的存在下，在溶剂(诸如n,n-二甲基甲酰胺)中，使适当取代的苯甲酸片段与碱(诸如三乙胺)反应数小时(方法e)。可以通过标准的后处理程序来回收式xi描述的产物。方案3：在以下方案3中描述了式ib描述的化合物的制备，其中x为-–o-。本领域技术人员将认识到，式ic、id、ie、if和ig所述的化合物可以通过适合的起始原料采用类似合成方法来制备。方案3在一般方案3中，r1取代的羟基苯硫酚起始原料可以从商业来源获得或可以通过本领域众所周知的许多方法来制备。可以使用铜催化的乌尔曼(ullmann)反应的修饰来偶联式iv和xiii描述的化合物(方法f)。文献中描述了这一类型的反应的许多变体，其中一个示例是chan-evans-lam修饰。可以在吡啶存在下，将式iv和xiii描述的化合物溶解在溶剂诸如二氯甲烷中，然后在环境温度下用乙酸铜(ii)处理数小时。按照标准的提取和纯化方法，可以以良好的收率和纯度获得式xiv描述的偶联产物。方案4：在以下方案4中描述了式ia描述的化合物的制备。方案4在一般方案4中，r1取代的硫醇起始原料可以从商业来源获得或可以通过本领域技术人员熟知的许多方法制备。方案5：在以下方案5中描述了式ia描述的化合物的制备。方案5在一般方案5中，式xviii描述的r1取代的芳基亚磺酸盐起始原料可以从商业来源获得或可以通过本领域技术人员熟知的许多方法制备。一种实现方法e描述的转化的便捷方案涉及在环境温度下，在溶剂诸如n,n-二甲基甲酰胺中，使式xviii和iii描述的化合物与碱(诸如碳酸钾)反应。按照标准的提取和纯化方法，可以以良好的收率和纯度获得式xvii描述的产物本领域技术人员将理解，其中a为杂芳基的式i化合物可以通过与上述类似的方法制备。顺式/反式(e/z)异构体可以通过本领域技术人员众所周知的常规技术分离，例如色谱法和分步结晶法。治疗用途和配方本发明的另一个方面涉及药物组合物，其包含式i化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，以及药学上可接受的稀释剂、赋形剂或佐剂。本发明还涉及式i化合物在治疗中的用途，特别是抑制赖氨酰氧化酶家族成员lox、loxl1、loxl2、loxl3和loxl4。在一个实施例中，本发明提供了选择性抑制特定的赖氨酰氧化酶同工酶。在另一个实施例中，本发明提供同时抑制2、3或4个lox同工酶。化合物的相对抑制潜能可以通过多种方式抑制lox、loxl1、loxl2、loxl3和loxl4的胺氧化酶活性所需的量来确定，例如在体外用重组或纯化的人蛋白或在表达正常啮齿动物酶的细胞试验中，在已被人蛋白转染的细胞试验中，在啮齿动物和其他哺乳动物物种的体内试验中，用重组或纯化的非人酶进行纯化。在一个实施例中，本发明的化合物是赖氨酰氧化酶家族成员lox、loxl1、loxl2、loxl3和loxl4的持久抑制剂。在一个实施例中，如果在化合物浓度降低至低于ic50后，抑制继续大于lox或loxl1-4酶活性的50％，则本发明的化合物是lox或loxl1-4酶的持久抑制剂。在一个实施例中，本发明的化合物在24小时内显示出对lox或loxl1-4酶的持续抑制。在一个实施例中，本发明的化合物是赖氨酰氧化酶家族成员lox、loxl1、loxl2、loxl3和loxl4的不可逆抑制剂。因此，本发明的进一步的方面涉及在有此需要的受试者中抑制lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4中任一个的胺氧化酶活性的方法，包括向受试者施用有效量的式i化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物或其药物组合物。在一个实施例中，本发明涉及一种抑制loxl2的胺氧化酶活性的方法。在另一个实施例中，本发明涉及抑制lox和loxl2的胺氧化酶活性。在进一步的实施例中，本发明涉及一种抑制lox的胺氧化酶活性的方法。如前所讨论，lox和loxl1-4酶是一大类黄素依赖性和铜依赖性胺氧化酶的成员，包括ssao/vap-1、单胺氧化酶b(mao-b)和二胺氧化酶(dao)。在一个实施例中，相对于ssao/vap-1、mao-b、dao和胺氧化酶家族的其他成员，本发明的化合物选择性抑制赖氨酰氧化酶同工酶家族的成员。本发明还公开了使用式i描述的化合物在患有纤维化疾病的患者中抑制一种或多种赖氨酰氧化酶同工酶(lox、loxl1、loxl2、loxl3和loxl4)的方法，和治疗纤维化疾病的方法。此外，本发明公开了使用式i描述的化合物在患有癌症(包括转移性癌症)的患者中抑制一种或多种赖氨酰氧化酶同工酶(lox、loxl1、loxl2、loxl3和loxl4)的方法，和治疗癌症和转移性癌症的方法。在本发明的进一步的方面，提供了一种治疗与lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4蛋白中任一种相关的病症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用治疗有效量的式i化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或其药物组合物。在另一个方面，提供了一种治疗由lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4中的任一个调节的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的式i化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或其药物组合物。在本发明方法的一个实施例中，病症选自由以下组成的群组：纤维化、癌症和血管生成。在另一个方面，本发明提供了通过用本文所述的式i的赖氨酰氧化酶同工酶的氟代烯丙胺抑制剂治疗人类受试者、宠物和家畜来减少细胞外基质形成的方法。上述方法适用于病症为纤维化的情况。如本文所用，“纤维化”包括诸如囊性纤维化、特发性肺纤维化、肝纤维化、肾脏纤维化、硬皮病、辐射诱发性纤维化、佩罗尼氏病、瘢痕形成和其他过度纤维化导致疾病病理的疾病。在一个实施例中，纤维化选自由以下组成的群组：纵隔纤维化、骨髓纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化、肾原性系统性纤维化、克罗恩病、瘢痕瘤、系统性硬化症、关节纤维化、杜普伊特伦挛缩、粘连性关节囊炎、胰腺纤维化、肠纤维化、肝纤维化、肺纤维化、肾脏纤维化、心脏纤维化、纤维狭窄、囊性纤维化、特发性肺纤维化、辐射诱发性纤维化、佩罗尼氏病和硬皮症，或者与以下有关：呼吸系统疾病、伤口愈合和修复异常、瘢痕形成、肥厚性瘢痕/瘢痕瘤、手术后瘢痕形成、心脏骤停以及所有与疾病、损伤、植入物或手术有关的纤维物质沉积过多或异常的病症。在另一个实施例中，纤维化选自由以下组成的群组：肝纤维化、肺纤维化、肾脏纤维化、心脏纤维化、瘢痕形成和硬皮病。在进一步的实施例中，纤维化选自由以下组成的群组：骨髓纤维化、全身性硬化症、肝纤维化、肺纤维化、肾脏纤维化、心脏纤维化和辐射诱发性纤维化。在一个实施例中，肾脏纤维化包括但不限于，糖尿病性肾病、膀胱输尿管反流、肾小管间质性肾纤维化、肾小球性肾炎或肾小球肾炎，包括局灶性节段性肾小球硬化和膜性肾小球性肾炎、iga肾病和系膜毛细血管性肾小球肾炎。在一个实施例中，肝纤维化导致肝硬化，并且包括相关病症，诸如慢性病毒性肝炎、非酒精性脂肪肝疾病(nafld)、酒精性脂肪性肝炎(ash)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、原发性胆汁性肝硬化(pbc)、胆汁性肝硬化和自身免疫性肝炎。在一个实施例中，纤维化选自瘢痕瘤、瘢痕、眼瘢痕、肥厚性瘢痕、硬皮病、杜普伊特伦挛缩和佩罗尼氏病。在一个实施例中，肥厚性瘢痕由烧伤引起。在一个实施例中，肥厚性瘢痕由外部损伤引起。在另一个实施例中，肥厚性瘢痕由外科手术引起。在一个实施例中，瘢痕瘤由外部伤害引起。在另一个实施例中，瘢痕瘤由外科手术引起。在进一步的实施例中，瘢痕瘤是痤疮、烧伤、水痘、刺耳、划痕、手术切口或疫苗接种部位引起的皮肤损伤的结果。上述方法也适用于病症是增生性疾病(例如癌症)的情况。在一个实施例中，所述癌症选自由以下组成的群组：肺癌；乳腺癌；大肠癌；肛门癌；胰腺癌；前列腺癌；卵巢癌；肝胆管癌；食道癌；间皮瘤；非霍奇金淋巴瘤；膀胱癌；子宫癌；胶质瘤、胶质母细胞瘤、神经管母细胞瘤和其他脑瘤；骨髓纤维化、肾脏癌；头颈部癌症；胃癌；多发性骨髓瘤；睾丸癌；生殖细胞肿瘤；神经内分泌肿瘤；宫颈癌；口腔癌、胃肠道、乳腺和其他器官的类癌；印戒细胞癌；间叶肿瘤，包括肉瘤、纤维肉瘤、血管瘤、血管瘤病、血管外皮细胞瘤、假血管瘤样间质增生、成肌纤维母细胞、纤维瘤病、炎性肌纤维母细胞瘤、脂肪瘤、血管脂肪瘤、颗粒细胞瘤、神经纤维瘤、神经鞘瘤、血管肉瘤、脂肪肉瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、平滑肌瘤或平滑肌肉瘤。在一个实施例中，所述癌症选自由以下组成的群组：乳腺癌、头颈鳞状细胞癌、脑癌、前列腺癌、肾细胞癌、肝癌、肺癌、口腔癌、宫颈癌和肿瘤转移。在一个实施例中，肺癌包括肺腺癌、鳞状细胞癌、大细胞癌、支气管肺泡癌、非小细胞癌、小细胞癌和间皮瘤。在一个实施例中，乳腺癌包括导管癌、小叶癌、炎性乳腺癌、透明细胞癌和粘液癌。在一个实施例中，结肠直肠癌包括结肠癌和直肠癌。在一个实施例中，胰腺癌包括胰腺癌、胰岛细胞癌和神经内分泌肿瘤。在一个实施例中，卵巢癌包括卵巢上皮癌或表面上皮-间质肿瘤，包括浆液性肿瘤、子宫内膜样肿瘤和粘液性囊腺癌和性索-间质瘤。在一个实施例中，肝和胆管癌包括肝细胞癌、胆管癌和血管瘤。在一个实施例中，食道癌包括食道腺癌和鳞状细胞癌。在一个实施例中，子宫癌包括子宫内膜腺癌、子宫乳头状浆液性癌、子宫透明细胞癌、子宫肉瘤和平滑肌肉瘤以及苗勒管混合瘤。在一个实施例中，肾脏癌包括肾细胞癌、透明细胞癌和威尔姆氏肿瘤。在一个实施例中，头颈部癌包括鳞状细胞癌。在一个实施例中，胃癌包括胃腺癌和胃肠道间质瘤。在一个实施例中，癌症选自由以下组成的群组：结肠癌、卵巢癌、肺癌、食道癌、乳腺癌和前列腺癌。在一个实施例中，癌症选自由以下组成的群组：胰腺癌、肝癌、乳腺癌、骨髓纤维化和间皮瘤。在一个实施例中，本发明的化合物可以用于治疗非转移性癌症。在另一个实施例中，本发明的化合物可以用于治疗转移性癌症。在进一步的实施例中，本发明的化合物可以用于预防或治疗肿瘤转移。上述方法适用于病症为血管生成的情况。在本发明方法的一个实施例中，受试者选自由以下组成的群组：人、宠物和牲畜。在本发明方法的另一个实施例中，受试者是人。本发明的进一步的方面提供了式i化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗与lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4蛋白中任一个相关的病症的药物中的用途。本发明的另一个方面提供了式i化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗由lox、loxl1、loxl2、loxl3或loxl4中的任一个调节的病症的药物中的用途。药物和/或治疗制剂在本发明的另一个实施例中，提供了包含具有式i化合物和其至少一种药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂的组合物。式i化合物也可以作为合适的盐存在，包括药学上可接受的盐。短语“药学上可接受的载剂”是指本领域技术人员已知适合于特定施用方式的任何载剂。另外，化合物可以配制成组合物中的唯一药物活性成分，或者可以与其他活性成分组合。短语“药学上可接受的盐”是指适用于药学应用的任何盐制剂。药学上可接受的盐是指在合理的医学判断范围内适合与人和低等动物的组织接触而没有过度毒性、刺激性、过敏反应等的那些盐，且与合理的收益/风险比相当。药学上可接受的盐是本领域众所周知的，包括酸加成盐和碱式盐。还可形成酸和碱的半盐。药学上可接受的盐包括无机酸的胺盐(例如，盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐等)；和有机酸的胺盐(例如，甲酸盐、乙酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、丁酸盐、戊酸盐、富马酸盐等)。对于具有碱性位点的式(i)化合物，合适的药学上可接受的盐可以是酸加成盐。例如，可以通过混合药学上可接受的酸，诸如盐酸、硫酸、甲磺酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、苯甲酸、磷酸、乙酸、草酸、碳酸、酒石酸或柠檬酸与本发明的化合物来制备此类化合物的合适的药学上可接受的盐。smberge等人《药学科学杂志(j.pharmaceuticalsciences)》1977,66:1-19中详细描述了药学上可接受的盐。这些盐可以在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或者通过使游离碱官能团与合适的有机酸反应而单独制备。代表性的酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、二葡萄糖酸盐、环戊烷丙酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、葡庚糖酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、梳状(pectinate)、3-苯丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、三甲基乙酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。合适的碱盐由形成无毒盐的碱形成。示例包括精氨酸、苄星青霉素、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、甘氨酸、赖氨酸、镁、葡甲胺、乙醇胺、钾、钠、氨丁三醇和锌盐。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠、锂钾、钙、镁等，以及无毒铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲基铵、四乙基铵、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺、三乙醇胺等。式i化合物的药学上可接受的盐可以通过本领域技术人员已知的方法制备，包括例如：(i)通过使式i化合物与所需的酸或碱反应；(ii)通过从式i化合物的合适的前体中除去对酸或碱不稳定的保护基，或使用所需的酸或碱将合适的环状前体例如内酯或内酰胺开环；或者(iii)通过与合适的酸或碱反应或借助于合适的离子交换柱将式i化合物的一种盐转化为另一种盐。上述反应(i)-(iii)通常在溶液中进行。所得盐可以沉淀出来并通过过滤收集，或者可以通过蒸发溶剂来回收。所得盐中的电离度可能是完全电离到几乎未电离不等。因此，例如，可以通过混合药学上可接受的酸诸如盐酸、硫酸、甲磺酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、苯甲酸、磷酸、乙酸、碳酸、酒石酸或柠檬酸与本发明的化合物来制备本发明化合物的合适的药学上可接受的盐。因此，本发明化合物的合适的药学上可接受的盐包括酸加成盐。本发明的化合物可以以非溶剂化物和溶剂化物的形式存在。如本文使用，术语“溶剂化物”用来描述包含本发明的化合物和化学计量的一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如乙醇)的分子复合物。当溶剂是水时，使用术语“水合物”。在一个实施例中，式i化合物可以“前药”形式施用。短语“前药”是指在体内施用后，通过一个或多个步骤或过程代谢或以其他方式转化为所述化合物的生物学、药学或治疗活性形式的化合物。前药可以通过以下来制备：修饰化合物中存在的官能团，使得修饰物可以在常规操作中或在体内裂解为本文所述的化合物。例如，前药包括本发明的化合物，其中羟基、氨基或碳水化合物基团与任一基团键合，当施用于哺乳动物受试者时，所述基团可以分别裂解形成游离羟基、游离氨基或游离羧酸基团。代表性的前药包括，例如，本发明化合物中的醇和胺官能团的酰胺、酯、烯醇醚、烯醇酯、乙酸酯、甲酸酯、苯甲酸酯衍生物等。前药形式可以选自诸如-c(o)烷基、-c(o)环烷基、-c(o)芳基、-c(o)-芳基烷基、c(o)杂芳基、-c(o)-杂芳基烷基等。借助于体内药效学过程和药物代谢的知识，本领域技术人员一旦知道了药物活性化合物，就可以设计所述化合物的前药(参见，例如，nogrady(1985)《药物化学的分子和生化的方法(medicinalchemistryabiochemicalapproach)》，纽约牛津大学出版社，第388-392页)。本文的组合物包含本文提供的一种或多种化合物。在一个实施例中，将化合物配制成适合的药物制剂，诸如溶液、混悬剂、片剂、乳膏剂、凝胶剂、可分散的片剂、丸剂、胶囊剂、散剂、缓释制剂或酏剂，用于口服施用或在无菌溶液或悬浮剂中用于肠胃外施用，以及透皮贴剂和干粉吸入剂。在一个实施例中，使用本领域熟知的技术和方法将上述化合物配制成药物组合物(参见，例如，ansel《药物剂型介绍(introductiontopharmaceuticaldosageforms)》，第四版，1985,126)。在组合物中，将有效浓度的一种或多种化合物或其药学上可接受的衍生物与合适的药物载剂混合。如上所述，在配制之前，化合物可以作为相应的盐、酯、烯醇醚或酯、缩醛、缩酮、原酸酯、半缩醛、半缩酮、酸、碱、溶剂化物、水合物或前药被衍生化。组合物中化合物的浓度为施用后有效地递送一定量来治疗、预防或改善要治疗的疾病或紊乱的一种或多种症状。在一个实施例中，将组合物配制用于单剂量施用。为了配制组合物，将化合物的重量分数以有效浓度溶解、悬浮、分散或以其他方式混合在选定的载剂中，从而减轻、预防或改善一种或多种症状。活性化合物以足以在不对所治疗的患者产生不良副作用的情况下发挥治疗有效作用的量包含在药学上可接受的载剂中。治疗有效浓度可以通过以下凭经验确定：在本文所述的体外和体内系统中测试化合物，然后据以推断出人用剂量。药物组合物中活性化合物的浓度将取决于活性化合物的吸收、分布、失活和消除速率；化合物的理化特性；给药方案和给药量；以及本领域技术人员已知的其他因素。在一个实施例中，治疗有效剂量应产生约0.1ng/ml至约50-100μg/ml的活性成分的血清浓度。在另一个实施例中，药物组合物应提供每千克体重每天约0.001mg至约2000mg化合物的剂量。制备药物剂量单位形式以提供每剂量单位形式约0.01mg、0.1mg或1mg至约500mg、1000mg或2000mg，并且在一个实施例中，提供约10mg至约500mg的活性成分或必需成分的组合。给药可以每隔数分钟、数小时、数天、数周、数月或数年的间隔进行，也可以在任一这些期间连续进行。合适的剂量在每剂量每千克体重约0.1ng至每千克体重0.1g的范围内。剂量优选在每剂量每千克体重10μg至0.1g的范围内，诸如在每剂量每千克体重0.1mg至0.01g的范围内。合适地，剂量在每剂量每千克体重10μg至50mg的范围内，诸如每剂量每千克体重10μg至20mg，或每剂量每千克体重10μg至10mg。其他合适的剂量可以在每千克体重0.1mg至25mg的范围内，包括每剂量每千克体重0.1mg至10、20、50或100mg。可替代地，有效剂量可以高达约10mg/cm2，或者可以高达约1mg/cm2、约0.5mg/cm2、约0.2mg/cm2、约0.1mg/cm2、约0.05mg/cm2、约0.02mg/cm2或约0.01mg/cm2。例如，可以在约10μg/cm2至约1μg/cm2、约10μg/cm2至约0.1mg/cm2、约10μg/cm2至约0.01mg/cm2、约10μg/cm2至约500μg/cm2、约10μg/cm2至约200μg/cm2、约10μg/cm2至约100μg/cm2、约10μg/cm2至约50μg/cm2、约20μg/cm2至约1mg/cm2、约50μg/cm2至约1mg/cm2、约100μg/cm2至约1mg/cm2、约200μg/cm2至约1mg/cm2、约500μg/cm2至约1mg/cm2、约50μg/cm2至约500μg/cm2、约50μg/cm2至约200μg/cm2、约100μg/cm2至约500μg/cm2或约200μg/cm2至约500μg/cm2的范围内。合适的剂量和给药方案可以由主治医生确定，并且可以取决于所治疗的特定病症；病症的严重性；以及受试者的总体健康状况、年龄和体重。在化合物显示溶解度不足的情况下，可以使用使化合物增溶的方法。这样的方法是本领域技术人员已知的，并且包括但不限于，使用助溶剂，诸如二甲基亚砜(dmso)；使用表面活性剂，诸如溶解在碳酸氢钠水溶液中；配制感兴趣的化合物诸如纳米粒子等。化合物的衍生物，诸如化合物的前药，也可以用于配制有效的药物组合物。在混合或添加化合物后，所得混合物可以是溶液、混悬剂、乳剂等。所得混合物的形式取决于许多因素，包括预期的施用方式和化合物在所选载剂或媒剂中的溶解度。有效浓度足以改善所治疗的疾病、紊乱或病症的症状，并且可以凭经验确定。提供药物组合物以单位剂型(诸如片剂、胶囊剂、丸剂、散剂、颗粒剂、无菌肠胃外溶液或混悬剂、口服溶液或混悬剂，以及含有合适量的化合物或其药学上可接受的衍生物的油水乳剂)施用于人和动物。在一个实施例中，药物治疗活性化合物和其衍生物以单位剂型或多剂型配制和施用。活性成分可以一次施用，也可以分成许多较小的剂量，每隔一段时间施用一次。如本文所用，单位剂型是指适用于人和动物受试者的物理上离散的单元，并且如本领域已知地单独包装。每单位剂量包含预定量的足以产生所需治疗效果的治疗活性化合物，以及所需的药物载剂、媒剂或稀释剂。单位剂型的示例包括安瓿和注射器以及单独包装的片剂或胶囊。单位剂型可以其分数或倍数施用。多剂型是包装在单个容器中的多个相同的单位剂型，以分开的单位剂型给药。多剂型的示例包括小瓶、片剂或胶囊瓶或品脱或加仑瓶。因此，多剂型是在包装中没有分开的多个单位剂量。制备这种剂型的实际方法对本领域技术人员而言是已知的或显而易见的。例如，参阅《雷明顿药物科学(remington'spharmaceuticalsciences)》，麦克出版社(mackpublishingcompany)，宾夕法尼亚州伊斯顿，第15版，1975年。可以制备含有0.005％至100％(重量％)范围内的活性成分且其余部分由无毒载剂组成的剂型或组合物。这些组合物的制备方法是本领域技术人员已知的。预期的组合物可含有0.001％-100％(重量％)的活性成分，在一个实施例中为0.1-95％(重量％)，在另一个实施例中为75-85％(重量％)。施用方式便捷的施用方式包括注射(皮下、静脉内等)、口服、吸入、透皮应用、局部乳膏或凝胶或散剂、阴道或直肠施用。取决于施用途径，制剂和/或化合物可以用材料包衣以保护化合物免受酶、酸和其他可能使化合物的治疗活性失活的自然条件的作用。化合物也可以肠胃外或腹膜内施用。口服施用组合物口服药物剂型可以是固体、凝胶或液体。固体剂型是片剂、胶囊剂、颗粒剂和散装粉剂。口服片剂的类型包括压制的、可咀嚼的糖锭和可以是肠溶衣、糖衣或薄膜衣的片剂。胶囊可以是硬或软明胶胶囊，而颗粒剂和粉剂可以以非泡腾或泡腾的形式与本领域技术人员已知的其他成分组合提供。口服施用固体组合物在某些实施例中，制剂是固体剂型，在一个实施例中是胶囊或片剂。片剂、丸剂、胶囊剂、锭剂等可含有一种或多种以下成分或性质相似的化合物：粘合剂、润滑剂；稀释剂；助流剂；崩解剂；着色剂；甜味剂；调味剂；润湿剂；催吐剂包衣；以及薄膜包衣。粘合剂的示例包括微晶纤维素、黄蓍胶、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶溶液、糖蜜、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮、交聚维酮、蔗糖和淀粉糊。润滑剂包括滑石粉、淀粉、硬脂酸镁或硬脂酸钙、石松子和硬脂酸。稀释剂包括例如乳糖、蔗糖、淀粉、高岭土、盐、甘露醇和磷酸二钙。助流剂包括但不限于胶体二氧化硅。崩解剂包括交联羧甲基纤维素钠、羟乙酸淀粉钠、藻酸、玉米淀粉、马铃薯淀粉、膨润土、甲基纤维素、琼脂和羧甲基纤维素。着色剂包括，例如，任何经批准的认证水溶性fd和c染料，它们的混合物；和悬浮在水合氧化铝上的水不溶性fd和c染料。甜味剂包括蔗糖、乳糖、甘露醇和人造甜味剂(诸如糖精)和任何数量的喷雾干燥香料。调味剂包括从植物中提取的天然香料诸如水果，和产生令人愉悦感觉的化合物的合成混合物诸如但不限于薄荷和水杨酸甲酯。润湿剂包括丙二醇单硬脂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、二甘醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂醚。催吐剂包衣包括脂肪酸、脂肪、蜡、虫胶、氨化虫胶和邻苯二甲酸醋酸纤维素。薄膜包衣包括羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇4000和邻苯二甲酸醋酸纤维素。化合物或其药学上可接受的衍生物可以以保护其免受胃的酸性环境影响的组合物的形式提供。例如，可以将组合物配制成肠溶衣，所述肠溶衣在胃中保持其完整性并在肠中释放活性化合物。组合物也可以与抗酸剂或其他此类成分组合配制。当剂量单位形式是胶囊时，除上述类型的材料外，它还可以含有液体载剂，诸如脂肪油。另外，剂量单位形式可以含有改变剂量单位的物理形式的各种其他材料，例如糖和其他肠溶剂溶衣。化合物也可以作为酏剂、悬浮剂、糖浆、糯米纸囊剂、分散剂(sprinkle)、口香糖等的组分施用。除了活性化合物之外，糖浆还可含有蔗糖作为甜味剂和某些防腐剂、染料、着色剂和调味剂。活性物质还可以与其他不损害所需作用的活性物质或与补充所需作用的物质混合，诸如抗酸剂、h2阻滞剂和利尿剂。活性成分是本文所述的化合物或其药学上可接受的衍生物。可以包括更高的浓度，高达活性成分的约98重量％。在所有实施例中，片剂和胶囊剂可以如本领域技术人员已知的那样包衣，以改变或维持活性成分的溶解。因此，例如，它们可以用常规的肠溶性包衣进行包衣，诸如水杨酸苯酯、蜡和邻苯二甲酸醋酸纤维素。口服施用液体组合物液体口服剂型包括由非泡腾颗粒重构的水溶液、乳剂、悬浮剂、溶液和/或混悬剂和由泡腾颗粒重构的泡腾制剂。水溶液包括例如酏剂和糖浆。乳剂是水包油或油包水。药学上可施用的液体组合物可以例如通过将如上所定义的活性化合物和任选的药物佐剂溶解、分散或以其他方式混合在载剂，诸如例如水、盐水、右旋糖水溶液、甘油、二醇、乙醇等，从而形成溶液或混悬剂。如果需要的话，待施用的药物组合物还可以含有少量的无毒辅助物质，诸如润湿剂、乳化剂、增溶剂、ph缓冲剂等，例如乙酸盐、柠檬酸钠、环糊精衍生物、脱水山梨醇单月桂酸酯、三乙醇胺乙酸钠、三乙醇胺油酸酯和其他此类试剂。酏剂是澄清、甜味的水醇制剂。酏剂中使用的药学上可接受的载剂包括溶剂。糖浆是糖例如蔗糖的浓缩水溶液，并且可以含有防腐剂。乳剂是两相系统，其中一种液体以小球形式分散在另一种液体中。乳剂中使用的药学上可接受的载剂是非水液体、乳化剂和防腐剂。混悬剂使用药学上可接受的混悬剂和防腐剂。重构成液体口服剂型的非泡腾颗粒中使用的药学上可接受的物质包括稀释剂、甜味剂和湿润剂。泡腾颗粒中使用的药学上可接受的物质将重构成液体口服剂型，包括有机酸和二氧化碳源。着色剂和调味剂用于所有以上剂型中。溶剂包括甘油、山梨糖醇、乙醇和糖浆。防腐剂的示例包括甘油、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸、苯甲酸钠和乙醇。乳剂中使用的非水液体的示例包括矿物油和棉籽油。乳化剂的示例包括明胶、阿拉伯胶、黄蓍胶、膨润土和表面活性剂诸如聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯。混悬剂包括羧甲基纤维素钠、果胶、黄蓍胶、硅酸铝镁盐和阿拉伯胶。甜味剂包括蔗糖、糖浆、甘油和人造甜味剂诸如糖精。润湿剂包括丙二醇单硬脂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、二甘醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂醚。有机酸包括柠檬酸和酒石酸。二氧化碳的来源包括碳酸氢钠和碳酸钠。着色剂包括任何经批准的认证水溶性fd和c染料和其混合物。调味剂包括从植物诸如水果中提取的天然调味剂，和产生令人愉悦的口感的化合物的合成混合物。对于固体剂型，在一个实施例中，将溶液或混悬剂，例如碳酸丙烯酯、植物油或甘油三酯，封装在明胶胶囊中。对于液体剂型，例如溶液(例如，在聚乙二醇中)，也可以用足够量的药学上可接受的液体载剂(例如，水)稀释，以便施用时容易地测量。可替代地，可以通过将活性化合物或盐溶解或分散在植物油、乙二醇、甘油三酯、丙二醇酯(例如，碳酸丙烯酯)和其他此类载剂中并将这些溶液或混悬剂封装在硬或软明胶胶囊壳中来制备液体或半固体口服制剂。其他有用的制剂包括美国专利第re28,819和4,358,603号中列出的那些。简而言之，此类制剂包括但不限于含有本文提供的化合物的那些，二烷基化的单或聚亚烷基二醇，包括但不限于，1,2-二甲氧基甲烷、二甘醇二甲醚、三甘醇二甲醚、四甘醇二甲醚、聚乙二醇-350-二甲醚、聚乙二醇-550-二甲醚、聚乙二醇-750-二甲醚，其中350、550和750是指聚乙二醇的近似平均分子量，和一种或多种抗氧化剂，诸如丁基化羟基甲苯(bht)、丁基羟基茴香醚(bha)、没食子酸丙酯、维生素e、对苯二酚、羟基香豆素、乙醇胺、卵磷脂、脑磷脂、抗坏血酸、苹果酸、山梨糖醇、磷酸、硫代二丙酸和其酯以及二硫代氨基甲酸酯。其他制剂包括但不限于包括药学上可接受的缩醛的醇水溶液。这些制剂中使用的醇是具有一个或多个羟基的任何药学上可接受的水混溶性溶剂，包括但不限于丙二醇和乙醇。缩醛包括但不限于，低级烷基醛的二(低级烷基)缩醛，诸如乙醛二乙缩醛。注射剂、溶液和乳剂本文还考虑了，在一个实施例中以皮下、肌内或静脉内注射为特征的肠胃外施用。注射剂可以常规形式制备，可以是液体溶液或混悬剂，适合于在注射前在液体中溶解或混悬的固体形式，或者是乳剂。注射剂、溶液和乳剂还含有一种或多种赋形剂。合适的赋形剂是例如水、盐水、右旋糖、甘油或乙醇。另外，如果需要，要施用的药物组合物还可含有少量的无毒辅助物质，诸如润湿剂或乳化剂、ph缓冲剂、稳定剂、溶解度增强剂和其他此类试剂，诸如乙酸钠、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯和环糊精。本文还考虑了缓释或持续释放系统的植入，从而维持恒定的剂量水平。简而言之，将本文提供的化合物分散在固体内部基质中，例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、增塑或未增塑的聚氯乙烯、增塑的尼龙、增塑的聚对苯二甲酸乙二醇酯、天然橡胶、聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、碳酸硅酯共聚物、亲水性聚合物诸如丙烯酸和甲基丙烯酸酯的水凝胶、胶原蛋白、交联的聚乙烯醇和交联的部分水解的聚乙酸乙烯酯，它们外部聚合物膜包围，例如聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯与乙酸乙烯酯的共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、离聚物聚对苯二甲酸乙二酯、丁基橡胶表氯醇橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物和不溶于体液的乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物。在释放速率控制步骤中，化合物扩散通过外部聚合物膜。此类肠胃外组合物中所含的活性化合物的百分比高度取决于其特定性质，以及化合物的活性和受试者的需求。组合物的肠胃外给药包括静脉内、皮下和肌内施用。肠胃外施用的制剂包括准备注射的无菌溶液、准备使用前与溶剂结合的无菌干燥可溶性产品(诸如冻干粉，包括皮下注射片剂)、准备注射的无菌混悬剂、准备使用前与赋形结合的无菌干燥不溶产品和无菌乳剂。溶液可以是水性或非水性的。如果静脉内施用，合适的载剂包括生理盐水或磷酸盐缓冲盐水(pbs)，以及含有增稠剂和增溶剂诸如葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇和其混合物的溶液。肠胃外制剂中使用的药学上可接受的载剂包括水性媒剂、非水性媒剂、抗微生物剂、等渗剂、缓冲剂、抗氧化剂、局部麻醉剂、混悬剂和分散剂、乳化剂、掩蔽剂或螯合剂以及其他药学上可接受的物质。水性媒剂的示例包括氯化钠注射液、林格注射液、等渗右旋糖注射液、无菌水注射液、右旋糖和乳酸林格注射液。非水性肠胃外媒剂包括植物来源的不挥发性油、橄榄油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。必须将抗菌或抑菌浓度的抗菌剂添加到多剂量容器中包装的肠胃外制剂中，这些容器包括苯酚或甲酚、汞、苯甲醇、氯丁醇、对羟基苯甲酸甲酯和丙酯、硫柳汞、苯扎氯铵和苄索氯铵。等渗剂包括氯化钠和右旋糖。缓冲剂包括磷酸盐和柠檬酸盐。抗氧化剂包括硫酸氢钠。局部麻醉剂包括盐酸普鲁卡因。混悬剂和分散剂包括羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化剂包括聚山梨酯80金属离子的掩蔽剂或螯合剂包括edta。药物载剂还包括用于水混溶性媒剂的乙醇、聚乙二醇和丙二醇；以及氢氧化钠、盐酸、柠檬酸或乳酸来调节ph。调节药物活性化合物的浓度，使得注射剂提供有效量以产生所需的药理作用。如本领域中已知的，确切的剂量取决于患者或动物的年龄、体重和状况。单位剂量的肠胃外制剂包装在安瓿、小瓶或带针注射器中。如本领域已知和实践的，用于肠胃外施用的所有制剂均必须是无菌的。说明性地，含有活性化合物的无菌水溶液的静脉内或动脉内输注是有效的施用方式。另一个实施例是无菌水性或油性溶液或混悬剂，其含有根据需要注射以产生所需药理作用的活性物质。注射剂设计用于局部和全身施用。在一个实施例中，配制一种治疗有效剂量以相对于处理过的组织，含有药物活性成分至少约0.1％w/w至约90％w/w或更高的浓度，在某些实施例中，大于1％w/w的活性化合物。化合物可以以微粉化或其他合适的形式悬浮或可以被衍生以产生更可溶的活性产品或产生前药。所得混合物的形式取决于许多因素，包括预期的施用方式和化合物在所选载剂或媒剂中的溶解度。有效浓度足以缓解病症的症状，并且可以凭经验确定。冻干粉本文中还感兴趣的是冻干粉，其可以被重构为以溶液、乳剂和其他混合物的形式施用。它们也可以被重构并配制成固体或凝胶。通过将本文提供的化合物或其药学上可接受的衍生物溶解在合适的溶剂中来制备无菌的冻干粉剂。溶剂可含有赋形剂，其可改善粉剂或由粉剂制备的重构溶液的稳定性或其他药理学成分。可以使用的赋形剂包括但不限于葡萄糖、山梨糖醇、果糖、玉米糖浆、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其他合适的试剂。在一个实施例中，溶剂在约中性ph下还可以含有缓冲剂、诸如柠檬酸盐、磷酸钠或磷酸钾或本领域技术人员已知的其他此类缓冲剂。随后进行溶液的无菌过滤，然后在本领域技术人员已知的标准条件下冻干，提供所需的制剂。在一个实施例中，将所得溶液分配到小瓶中以冻干。每个小瓶将含有单剂量或多剂量的化合物。冻干粉可以在适当的条件下，诸如在约4℃至室温下储存。用注射用水将这一冻干粉重构提供用于肠胃外施用的制剂。为了重构，将冻干粉添加到无菌水或其他合适的载剂中。精确的量取决于所选化合物。这种量可以根据经验确定。局部施用如局部和全身施用所述制备局部混合物。所得混合物可以是溶液、混悬剂、乳剂等，并配制成乳膏、凝胶、软膏、乳剂、溶液、酏剂、洗剂、混悬剂、酊剂、糊剂、泡沫、气雾剂、冲洗剂、喷雾剂、栓剂、绷带、皮肤贴剂或任何其他适合局部施用的制剂。可以将化合物或其药学上可接受的衍生物配制成用于局部应用(诸如通过吸入)的气雾剂。这些用于呼吸道施用的制剂可以是喷雾剂的气雾剂或溶液形式，或者是用于吹入的微细粉末形式，可以单独使用或与惰性载剂(诸如乳糖)组合使用。在这种情况下，在一个实施例中，制剂的颗粒的直径小于50微米，在一个实施例中小于10微米。可以将化合物配制成用于局部或局部(local或topical)施用的形式，诸如以凝胶、乳膏和洗剂的形式局部应用于皮肤和粘膜，诸如眼中，并应用于眼或用于颅内或脊柱内应用。考虑局部施用用于透皮递送，也用于眼或粘膜施用，或用于吸入疗法。也可以单独或与其他药学上可接受的赋形剂组合地施用活性化合物的鼻溶液。这些溶液，特别是打算用于眼科用途的溶液，可以与适当的盐一起配制为ph为约5-7的0.01％至10％(体积％)的等渗溶液。其他施用途径组合物本文还考虑了其他施用途径，诸如透皮贴剂，包括离子电渗疗法和电泳装置、阴道和直肠施用。包括离子电渗疗法和电泳装置的透皮贴剂是本领域技术人员众所周知的。例如，用于直肠施用的药物剂型是直肠栓剂、胶囊和具有全身作用的片剂。本文使用的直肠栓剂是指用于插入直肠的固体，其在体温下熔化或软化，释放一种或多种药理或治疗活性成分。直肠栓剂中使用的药学上可接受的物质是碱或媒剂以及提高熔点的试剂。碱的示例包括可可脂(可可油)、甘油-明胶、碳水化合物(聚氧乙二醇)和脂肪酸的甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯的适当混合物。可以使用各种碱的组合。提高栓剂熔点的试剂包括乙酸精和蜡。直肠栓剂可以通过压缩方法或通过模制来制备。在一个实施例中，直肠栓剂的重量为约2至3gm。使用与口服施用制剂相同的药学上可接受的物质并通过相同的方法制造用于直肠施用的片剂和胶囊剂。目标制剂本文提供的化合物或其药学上可接受的衍生物也可以配制为靶向要治疗的受试者的特定组织、受体或身体的其他区域。许多此类靶向方法是本领域技术人员众所周知的。本文考虑了所有此类靶向方法用于本发明组合物中。在一个实施例中，脂质体混悬剂，包括靶向组织的脂质体，诸如靶向肿瘤的脂质体，也可以适合作为药学上可接受的载剂。这些可以根据本领域技术人员已知的方法来制备。例如，脂质体制剂可以如美国专利第4,522,811号中所述制备。简而言之，可以通过干燥烧瓶内部的蛋磷脂酰胆碱和脑磷脂酰丝氨酸(摩尔比为7:3)来形成脂质体，诸如多层囊泡(mlv)。添加本文提供的化合物在缺乏二价阳离子的磷酸盐缓冲盐水(pbs)中的溶液，并摇动烧瓶直至脂质膜分散。洗涤所得囊泡以除去未封装的化合物，通过离心沉淀，然后重悬于pbs中。与其他药物联合施用根据本发明的另一个方面，考虑了可以将本文所述的式i化合物与本领域技术人员认为是当前的护理标准的药物联合施用于有需要的受试者，用于感兴趣的病症。此类组合为受试者提供了一个或多个优点，例如，实现相似益处的所需剂量减少，在更少的时间内获得期望的缓解作用等。根据本发明的化合物可以作为治疗方案的一部分与其他药物一起施用。例如为了治疗特定的疾病或病症，可能需要施用活性化合物的组合。因此，在本发明的范围内，可以以适合于联合施用组合物的试剂盒的形式组合两种或更多种药物组合物，其中至少一种含有根据本发明的式(i)化合物。在本发明方法的一个实施例中，式i化合物可以与第二治疗剂一起施用。在一个实施例中，第二治疗剂可以选自以下一种或多种：(i)抗癌剂，诸如顺铂、奥沙利铂、卡铂、环磷酰胺、氮芥、尿嘧啶芥、苯达莫司汀、美法仑、苯丁酸氮芥、盐酸氮芥、白消安、替莫唑胺、亚硝基脲、异环磷酰胺(ifosamide)、哌泊溴烷、曲他胺、三亚乙基硫代磷酰胺、卡莫司汀、洛莫司丁、链脲菌素和达卡巴嗪、吉西他滨、福格西他滨帕拉帕酰胺(fosgemcitabinepalabenamide)、5-氟尿嘧啶、替加氟、雷替曲塞、氨甲蝶呤、培美曲塞、亚叶酸、胞嘧啶阿拉伯糖苷、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巯基鸟嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、喷司他丁(pentostatine)、羟基脲、三氟尿苷、三氟尿嘧啶(trifluracil)、阿霉素、博来霉素、亚德里亚霉素、道诺霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素-c、放线菌素、光神霉素、长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞滨、紫杉醇、泰索帝、艾瑞布林、卡非佐米、硼替佐米、依托泊苷、替尼泊苷、安吖啶、拓扑替康、伊立替康、米托蒽醌、喜树碱、放线菌素d、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、阿糖胞苷、紫杉醇(紫杉醇(taxoltm)、那巴胺紫杉醇、多西紫杉醇、脱氧助间型霉素(deoxycoformycin)、l-天冬酰胺酶、ifn-α、阿扎胞苷、地西他滨、伏立诺他、ms-275、帕比司他(panobinostat)、罗米地辛、丙戊酸、莫西司他(mocetinostat)、普拉司他(pracinostat)、贝利司他、依拉贝汀(irabectedin)、他莫昔芬、氟维司群、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、碘氧芬(iodoxyfene)、比卡鲁胺、氟他米特、尼鲁米特、醋酸环丙孕酮、戈舍瑞林、亮丙瑞林、布舍瑞林、孕激素、醋酸甲地孕酮、阿那曲唑、来曲唑、伏拉唑(vorazole)、依西美坦、非那雄胺、诺维本(navelbene)、卡培他滨和droloxafine；和阿比特龙、恩杂鲁胺、兰瑞肽、达沙替尼、博舒替尼、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、帕尼单抗、西妥昔单抗、吉非替尼、厄洛替尼、阿法替尼、凡德他尼(vandetanib)、奥西替尼、罗非替尼(rociletinib)、拉帕替尼、尼罗替尼、索拉非尼、替吡法尼和洛那法尼、维莫非尼、达拉菲尼、曲美替尼、考比替尼、帕纳替尼、帕博西尼、依维莫司、鲁索替尼、帕克替尼(pacritinib)、杰可替尼(jaktinib)、意米司他(imetelstat)、皮立德辛(plitidepsin)、派沃司他(pevonedistat)、依鲁替尼、色瑞替尼、克唑替尼、埃克替尼(ectinib)、卡博替里斯(cabozantirsib)、维莫德吉(vismodegib)、索尼德吉(sonidegib)、瑞格非尼、凡德他尼、瓦他拉尼、舒尼替尼、阿昔替尼、帕唑帕尼、乐伐替尼、talimogenelaherparepvec、狄诺塞麦、奥滨尤妥珠单抗、博纳吐单抗、地努图希单抗(dinutuximab)、依达赛珠单抗(idarucizumab)、达雷木单抗(daratumumab)、耐昔妥珠单抗、埃罗妥珠单抗、奥拉妥单抗(olaratumab)、阿仑单抗、利妥昔单抗、替伊莫单抗、奥法木单抗、聚乙二醇干扰素α-2a、阿地白介素、加德西(gardasil)、希瑞适(cervarix)、oncophage、西普鲁塞(sipuleucel-t)、纳武利尤单抗、派姆单抗、阿特朱单抗、indoximod、纳武利尤单抗、伊匹单抗、本妥昔单抗、曲妥珠单抗、氟达拉滨、克拉屈滨、喷司他丁、艾代拉里斯、哌立福辛、birinapant、硼替佐米、伊沙佐米、卡非佐米、玛丽佐米(marizomib)、奥拉帕尼、卢卡帕尼、维奈托克、那威托克(navitoclax)、奥巴克拉、格拉吉布(glasdegib)、pacrinostat、布帕尼西(buparlisib)、莫托替尼(momelotinib)、伊他替尼(itacitinib)、umbralisib、固赛替尼(gusacitinib)、tagraxofusp、瑞博西尼、阿贝西尼、尼拉帕尼、曲贝替定、泊芬、长春氟宁、napabucasin、卢比克替定、他泽司他(tazemetostat)、阿卡替尼、乐伐替尼、来那替尼、帕米帕利(pamiparib)、艾卡哚司他(epacadostat)、恩扎妥林(enzastaurin)、塞利尼索(selinexor)、马赛替尼、艾伏磷酰胺(evofosfamide)、葡磷酰胺、罗沙司他(roxadustat)、链脲菌素、德维司他(devimistat)、galunisertib、比美替尼(binimetinib)、维利帕尼(veliparib)、恩替诺特(entinostat)、培西达替尼(pexidartinib)、他拉唑帕尼(talazoparib)、恩曲替尼(entrectinib)。(ii)抗炎药，诸如美洛昔康、非诺洛芬、奥沙普嗪、双水杨酯、依托考昔、替诺昔康、阿司匹林、萘丁美酮、氟比洛芬、芬非那酸、苯基丁氮酮、氯诺昔康、吲哚美辛、依托度酸、二氟尼柳、酮洛芬、伐地考昔、托芬那酸、吡罗昔康、苏灵大、甲苯酰吡啶乙酸、酮咯酸、氯索洛芬、对乙酰氨基酚、溴芬酸、双氯芬酸、布洛芬、甲氯芬那酸、萘丁美酮、萘普生、奈帕芬胺、塞来昔布、曲安奈德、丙酮酸氢化可的松、醋酸氢化可的松、甲基强的松龙、二丙酸阿氯米松、恩利卡生(emricasan)、bi1467335、namodenoson、glpg-1,690、特麦角脲(terguride)。(iii)抗高血压药，诸如氢氯噻嗪、氯噻酮、呋塞米、螺内酯、氨苯蝶啶、阿米洛利、苯那普利、卡托普利、赖诺普利、依那普利、雷米普利、福辛普利、莫西普利、培哚普利、喹那普利、群多普利、洛沙坦、坎地沙坦、缬沙坦、替米沙坦、氯压定、甲基多巴、心得安、纳多洛尔、噻吗洛尔、品多洛尔、拉贝洛尔、美托洛尔、阿替洛尔、艾司洛尔、倍他洛尔、卡维地洛、哌唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪、苯氧苄胺、苯妥拉明、维拉帕米、地尔硫卓、硝苯地平、非洛地平、氨氯地平、尼莫地平、二氮嗪、米诺地尔、吡那地尔、尼可地尔、肼苯哒嗪、硝普钠、波生坦、依前列醇、伊洛前列素、贝拉前列素、依贝拉前列素(esuberaprost)、雷利帕格(ralinepag)、马西替坦、西他生坦、安贝生坦、利奥西呱、曲前列尼尔、乌苯美司(ubenimex)、西里帕格(selexipag)、左西孟旦、乌地那非、他达拉非和西地那非。(iv)抗纤维化剂，诸如吡非尼酮(pirfenidone)、尼达尼布(nintedanib)、西尼替罗克(cenicriviroc)、司隆色替(selonsertib)、拉尼菲伯诺(lanifibranor)、尼迈西单抗(nimacimab)、硝唑尼特、ngm282、阿帕利酮(apararenone)、泰必鲁司特(tipelukast)、阿替慕(actimmune)、帕纳替尼(ponatinib)、乐伐替尼(lenvatinib)、多韦替尼(dovitinib)、德立替尼(lucitanib)、达努替尼(danusertinib)、布瑞凡替尼(brivatinib)、厄达替尼(erdafitinib)、贝拉哌汀(belapectin)pd173074、pd166866、azd4547、bgj398、ly2874455、tas-120、arq087、blu9931、fgf401、bay-1163877、enmd-2076、imca1、fgf401、debio1347、fiin-2、gp-369、pro-001、h3b-6527、bay1187982、mfgr1877s、fp-1039、blu554、prn1371、s49076、su6668、su5416、pbi-4050、kd-025。(v)抗血管生成剂，诸如阿昔替尼、贝伐单抗、卡博替尼、来那度胺、乐伐替尼、帕唑帕尼、雷莫芦单抗、凡德他尼、瓦他拉尼、舒尼替尼、阿柏西普、沙利度胺、泊马度胺、来那度胺。(vi)免疫抑制剂，诸如泼尼松、布地奈德、泼尼松龙、托法西替尼、环孢菌素、他克莫司、西罗莫司、依维莫司、硫唑嘌呤、来氟米特、霉酚酸酯、阿巴西普、阿达木单抗、阿那白滞素(anakinra)、赛妥珠单抗、依那西普、戈利木单抗、英夫利昔、ixekizumab、那他珠单抗、利妥昔单抗、苏金单抗、托珠单抗、乌司奴单抗、维多珠单抗、巴利昔单抗、达珠单抗、富马酸二甲酯、霉酚酸酯。(vii)代谢药物，诸如奥贝胆酸、艾拉菲伯诺(elafibranor)、aramchol、司拉德帕(seladelpar)、mgl-3196、托吡非索(tropifexor)、msdc-0602k、bms-986036、索马鲁肽(semaglutide)、edp-305、吉卡滨(gemcabene)、pf-05221304、pf-06865571、pf-06835919lik066、lmb763、维生素e、阿卡波糖、米格列醇、普兰林肽、阿格列普坦(alogliptan)、利拉利汀、沙格列汀、西他列汀、阿比鲁肽、度拉糖肽、艾塞那肽、利拉鲁肽、利西拉肽、胰岛素、那格列奈、瑞格列奈。二甲双胍、卡格列净(canagliflozin)、达格列净(dapagliflozin)、恩格列净(empagliflozin)、氯磺丙脲、格列美脲(glimepiride)、格列吡嗪(glipizide)、格列本脲(glyburide)、甲磺氮草脲(tolazamide)、甲苯磺丁脲(tolbutamide)、罗格列酮(rosiglitazone)、吡格列酮(pioglitazone)、阿托伐他汀(atorvastatin)、氨氯地平(amlodipine)、辛伐他汀(simvastatin)、依泽麦布胺(ezetimibe)、洛伐他汀(lovastatin)、西他列汀(sitagliptin)、消胆胺(cholestyramine)、考来维纶(colesevelam)、考来替泊(colestipol)、非诺贝特(fenofibrate)、吉非贝齐(gemfibrozil)、非诺贝特酸(fenofibricacid)、烟酸、二十碳五烯酸、米泊美生(mipomersen)、洛美他派(lomitapide)、依伏库单抗(evolocumab)、阿利库单抗(alirocumab)、氟伐他汀(fluvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)别嘌呤醇(allopurinol)、雷西奈德(lesinurad)、培戈洛酶(pegloticase)、非布索坦(febuxostat)、拉布立酶(rasburicase)、伊伐卡托(ivacaftor)、velagluceraseα、半乳糖苷酶β、sebelipaseα、vestronidaseα、加硫酶、elosulfaseα、依利格鲁司他(eliglustat)、布罗沙单抗(burosumab)、米加司他(migalastat)、沙丙蝶呤、美曲普汀、尼替西农、苯丙氨酸解氨酶、asfotaseα、inotersen、美格鲁特(miglustat)、奥利司他(orlistat)、苯丁酸钠、苯丁酸甘油酯。在一个实施例中，本发明的化合物可以与其他治疗方法组合施用。例如，本发明的化合物可以与放射疗法或化学疗法联合施用。在一个实施例中，本发明的化合物可以与一种或多种附加的抗肿瘤剂和/或放射疗法联合施用以治疗癌症。当两种或更多种活性成分联合施用时，活性成分可以同时、顺序或分开给药。在一个实施例中，式i化合物与第二治疗剂同时联合施用。在另一个实施例中，式i化合物和第二治疗剂顺序施用。在进一步的实施例中，式i化合物和第二治疗剂分开施用。现在将参考以下非限制性实例，仅通过举例的方式更详细地描述本发明。实例旨在用于说明本发明，而不应解释为在整个说明书中限制说明书公开内容的一般性。实验性：一般方法市售的溶剂和试剂按原样使用。在适当的情况下，反应在氩气气氛下进行。通过分析薄层色谱(tlc)或通过液相色谱-质谱(lcms)监测反应，所述色谱在shimadzulcms2020仪器或agilentlc/msd1200仪器上使用反相条件进行记录。必要时，使用柱色谱法或制备型hplc纯化中间体和最终化合物。正相柱色谱法在中压下，使用快速色谱系统(combiflashrf200，teledyneisco系统，美国)在硅胶或预装硅胶小柱上进行。使用快速色谱系统在低压下对预装c18小柱进行反相柱色谱分析。洗脱液通过紫外线(λ＝254/280nm)监测。使用bruker300mhznmr光谱仪、brukeravanceiii加400mhznmr光谱仪或varianiii加300mhz光谱仪记录1h-nmr和19f-nmr光谱。相对于四甲基硅烷(tms；内标)，将化学位移(δ)报告为百万分之一(ppm)。以下缩写用于多重性：s＝单峰；brs＝宽单峰；d＝双峰；t＝三重峰；q＝四重峰；m＝多重峰；以及brm＝宽多重峰。低分辨率质谱(ms)是通过电喷雾-大气压电离(es-api)质谱获得的，这些质谱使用反相条件在shimadzulcms2020仪器或agilentlc/msd1200仪器上记录。进行的所有动物实验均遵守机构指南并获得当地伦理委员会的批准。实例1制备(z)-(4-溴-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯程序a：制备2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯在0-5℃下，向搅拌下的3-氨基-1,2-丙二醇(20.0g，0.22mol)在水(200ml)中的溶液中加入二碳酸二叔丁酯(55.5ml，0.24mol)。通过添加水溶液将溶液的碱度调节至ph约9后，通过添加naoh(6n)，将混合物在室温(rt)下搅拌18小时。将反应混合物冷却至0-5℃，然后酸化至ph约6，然后加入偏高碘酸钠(56.3g，0.26mol)。将所得混悬剂在室温搅拌2小时。过滤混合物以除去所有固体，并将滤液转移至分液漏斗中，并用乙酸乙酯(200ml)萃取。将氯化钠添加至水层直至获得饱和溶液。然后将水层进一步用乙酸乙酯(100ml)萃取。合并的有机物经na2so4干燥，然后真空浓缩，得到粗2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(45.7g)，为黄色胶状物。粗物质不经纯化即可用于后续步骤。程序b：制备(e)-4-(叔丁氧羰基氨基)-2-氟丁-2-烯酸乙酯和(z)-4-(叔丁氧羰基氨基)-2-氟丁-2-烯酸乙酯在0℃下，在n2下，向搅拌下的粗2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(43.7g，0.22mol)和硫酸镁(32.0g)在乙腈(200ml)中的混悬剂中，依次加入2-氟膦酰基乙酸乙酯(55.7ml，0.27mol)和1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(32.8ml，0.22mol)。使反应混合物升温至室温，并继续搅拌3小时。减压除去溶剂后，将残余物吸收在乙酸乙酯(200ml)中，然后转移至分液漏斗中。有机相依次用hcl(2m；100mlx2)水溶液、naoh(2m；100mlx2)水溶液和盐水(100ml)洗涤。经mgso4干燥后，将有机物真空浓缩，得到粗所需产物，为e/z异构体的混合物(2:3；57.0g)。这一粗物质无需纯化即可进行下一步。程序c：制备(e)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯和(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯在0℃下，在n2下，向搅拌下的粗e/z-4-(叔丁氧基羰基氨基)-2-氟丁-2-烯酸酯(18.0g，72.8mmol)在thf(150ml)中的溶液中，滴加氢化二异丁基铝(1m的甲苯溶液，182ml，182mmol)45分钟。加完后，将混合物在0℃下保持搅拌3小时。将反应混合物转移至分液漏斗中，并滴加至冰(100g)和naoh(2m；200ml)水溶液的搅拌混合物中。添加后，将混合物搅拌2小时。用二乙醚(100ml×2)萃取淬灭的反应混合物，并用盐水(100ml)洗涤合并的有机物。经mgso4干燥后，将有机物真空浓缩，得到粗醇，为e/z异构体的混合物。在硅胶(135g)纯化这一混合物，用在正己烷中的25％乙酸乙酯洗脱，得到(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(6.20克，30％，分三步)和(e)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(1.85g，8.9％，分三步)。(e)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯：1h-nmr(200mhz；cdcl3)δppm:1.43(9h,s),3.72(2h,dd,j7.5,5.4hz),4.25(2h,d,j21.5hz),4.85(1h,br.s),5.18(1h,dt,j19.2,8.5hz)。(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯：1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.46(9h,s),3.84(2h,dd,j6.2,6.2hz),4.13(2h,d,j13.9hz),4.68(1h,br.s),5.03(1h,dt,j36.0,7.1hz)。方法d：制备(z)-4-溴-3-氟丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向搅拌的(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(6.20g，30.2mmol)和三乙胺(6.32ml，45.3mmol)在丙酮(100ml)中的溶液中，滴加甲磺酰氯(2.81ml，36.3mmol)。加完后，将混合物在0℃下搅拌30分钟。此后，分批加入溴化锂(13.1g，0.15mol)，并将所得混悬剂再搅拌2小时。过滤反应混合物以除去所有固体，并将滤液减压浓缩。将残余物在水(50ml)和ch2cl2(50ml)之间分配，并用另外的ch2cl2(50ml×2)萃取水层。合并的有机物经na2so4干燥并真空浓缩。经硅胶(100g)纯化粗残留物，用正己烷，随后用在正己烷中的25％乙酸乙酯洗脱，得到(z)-4-溴-3-氟丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(7.00g，86％)，为无色固体。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.46(9h,s),3.85(2h,dd,j6.2,6.2hz),3.93(2h,d,j19.5hz),4.66(1h,br.s),5.16(1h,dt,j34.0,6.5hz)。实例2根据程序e、f、g、h和i制备以下化合物。制备(z)-4-((2-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)甲基)-n,n-二异丙基苯磺酰胺盐酸盐(化合物11)程序e：制备4-(溴甲基)-n,n-二异丙基苯磺酰胺在0℃下，向搅拌的4-(溴甲基)苯磺酰氯(500mg，1.86mmol)在ch2cl2(10ml)中的溶液中滴加二异丙基胺(0.65ml，4.63mmol)。添加后，将所得混合物在这一温度下搅拌30分钟，然后使其升温至室温并再搅拌48小时。将反应混合物在hcl(1m，20ml)和ch2cl2(20ml)之间分配。有机层用hcl(1m；20ml)水溶液和水(20ml)洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩，得到标题化合物(黄色油，190mg)，为与4-(氯甲基)-n,n-二异丙基苯磺酰胺的混合物，将其原样用于下一步。程序f：制备(z)-(3-氟-4-((2-羟苯基)硫基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯在室温下，向2-巯基苯酚(235mg，1.86mmol)和(z)-(4-溴-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.86mmol)在丙酮(3ml)中的溶液中加入碳酸钾(387mg，2.70mmol)，并将所得溶液在室温下搅拌16h。然后将反应混合物在etoac(20ml)和水(20ml)之间分配，并分离各相。用etoac(20ml×2)萃取水相，然后合并有机相并洗涤(盐水；20ml)，干燥(na2so4)并真空浓缩，得到(z)-(3-氟-4-((2-羟苯基)硫基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(580mg，99％)，为浅黄色固体。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.45(9h,s),3.31(2h,d,j＝19.7hz),3.69(2h,app.t,j＝6.7hz),4.47(1h,dt,j＝34.6,7.2hz),4.49(1h,br.s),6.67(1h,s),6.90(1h,ddd,j＝7.6,7.61.3hz),7.02(1h,dd,j＝8.2,1.2hz),7.31(1h,ddd,j＝8.2,7.3,1.6hz),7.45(1h,dd,j＝7.7,1.7hz)。程序g：制备(z)-(4-((2-((4-(n,n--二异丙基磺酰氨基)苄基)氧基)苯基)硫基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯在室温下，向搅拌的(z)-(3-氟-4-((2-羟苯基)硫基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.32mmol)和4-(溴甲基)-n,n-二异丙基苯磺酰胺在dmf(1ml)中的溶液(107mg,0.32mmol)中，加入碳酸钾(66mg，0.48mmol)。将所得混悬剂在这一温度下搅拌16小时。然后将反应混合物在etoac(10ml)和水(10ml)之间分配，并分离各相。用etoac(10ml×2)萃取水相，然后合并有机相并洗涤(饱和nh4cl水溶液，然后盐水)，干燥(na2so4)，并真空浓缩，得到(z)-(4-((2-((4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)苄基)氧基)苯基)硫基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(180mg，99％)，为黄色胶，其无需纯化即可用于后续步骤。程序h：制备(z)-(4-((2-((4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)苄基)氧基)苯基)磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯在0°下，向搅拌的(4-((2-((4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)苄基)氧基)苯基)硫基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸酯(180mg，0.32mmol)和碳酸氢钠(133mg，1.59mmol)在ch2cl2(2ml)和水(2ml)中的溶液中，在5分钟内分三部分加入3-氯过氧苯甲酸(178mg，0.79mmol)。将所得混悬剂在0℃搅拌2小时，然后用饱和nahco3水溶液(15ml)稀释并用ch2cl2(10ml)萃取。将水相进一步用ch2cl2(10ml×2)萃取，并将有机相合并，干燥(na2so4)并真空浓缩。粗物质通过快速柱纯化，先后用40％etoac/己烷和在50％etoac/己烷中的2％meoh洗脱，得到(z)-(4-((2-((4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)苄基)氧基)苯基)磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，84％)，为白色固体。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.29(12h,d,j＝6.8hz),1.43(9h,s),3.67-3.80(3h,m),4.15(2h,d,j＝18.9hz),4.52(1h,br.s),4.93(1h,dt,j＝34.4,6.9hz),5.33(2h,s),7.09(1h,d,j＝8.0hz),7.18(1h,ddd,j＝8.3,7.8,0.8hz),7.63(1h,ddd,j＝8.4,7.6,1.7hz),7.66(2h,d,j＝8.4),7.93(2h,d,j＝8.5hz),7.99(1h,dd,j＝7.9,1.7hz)。作为这一用于制备进一步的化合物的方法的改进，在室温下，通过将水溶液(每mmol在1.2mlh2o中含4当量)缓慢添加至巯基醚起始原料溶液中来进行氧化，其中meoh:thf(1:1，约每mmol巯基醚各3ml)，并使其反应直至lc-ms控制表明高度转化为所需砜产物。然后将混合物在过量的饱和焦亚硫酸钠水溶液和etoac之间分配，用盐水洗涤，干燥(na2so4)，真空浓缩并通过柱色谱法纯化。程序i：制备(z)-4-((2-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)甲基)-n,n-二异丙基苯磺酰胺盐酸盐(化合物11)在室温下，向搅拌的(z)-(4-((2-((4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)苄基)氧基)苯基)磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，0.27mmol)在meoh(1ml)中的溶液中，加入醚状hcl(2m；4.00ml，8.00mmol)，并将所得混合物搅拌1小时。此后，沉淀出白色固体，将其通过过滤收集并在高真空下干燥，得到(z)-(4-((2-((4-(氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)-甲基)-n,n-二异丙基苯-磺酰胺盐酸盐(79mg，55％)。白色固体；m.p.222-224℃；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:1.27(12h,d,j＝6.8hz),3.59(2h,dd,j＝7.4,1.8hz),3.79(2h,hept,j＝6.8hz),4.45(2h,d,j＝19.2hz),5.16(1h,dt,j＝32.8,7.4hz),5.46(2h,s),7.23(1h,ddd,j＝7.4,7.4,0.9hz),7.38(1h,dj＝7.9hz),7.74(1h,ddd,j＝8.5,7.5,1.7hz),7.79(2h,d,j＝8.6hz),7.91-7.95(3h,m)。实例3根据程序e-i，使用适当官能化的硫醇起始原料制备以下化合物。(z)-4-((2-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)甲基)-n,n-二甲基苯磺酰胺盐酸盐(化合物5)白色固体；m.p.235-236℃；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:2.72(6h,s),3.60(2h,dd,j＝7.4,1.7hz),4.47(2h,d,j＝19.2hz),5.18(1h,dt,j＝32.9,7.4hz),5.49(2h,s),7.24(1h,ddd,j＝7.9,7.9,0.9hz),7.39(1h,dd,j＝8.5,0.7hz),7.76(1h,ddd,j＝8.4,7.4,1.7hz),7.86(4h,br.s),7.95(1h,dd,j＝7.9,1.8hz)。(z)-4-((2-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)甲基)苯磺酰胺盐酸盐(化合物8)灰白色固体；m.p.233-235℃；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:3.59(2h,dd,j＝7.4,1.6hz),4.44(2h,d,j＝19.2hz),5.14(1h,dt,j＝32.8,7.4hz),5.45(2h,s),7.23(1h,dd,j＝7.3,7.3hz),7.38(1h,d,j＝8.3hz),7.74(1h,ddd,j＝8.6,8.6,1.7hz),7.78(2h,d,j＝8.2hz),7.94(1h,dd,j＝8.1,1.6hz),7.97(2h,d,j＝8.5hz)。(z)-4-((3-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)甲基)-n,n-二甲基苯磺酰胺盐酸盐(化合物9)白色固体；m.p.211-213℃；1h-nmr(300mhz；d6-dmso)δppm:2.63(6h,s),3.48(2h,br.s),4.65(2h,d,j＝19.6hz),5.17(1h,dt,j＝34.6,7.2hz),5.36(2h,s),7.45(1h,ddd,j＝8.1,2.5,1.0hz),7.52-7.57(2h,m),7.63(1h,dd,j＝8.1,8.1hz),7.75(2h,d,j＝8.5hz),7.81(2h,d,j＝8.6hz),8.11(3h,br.s)。(z)-4-((4-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)甲基)-n,n-二甲基苯磺酰胺盐酸盐(化合物10)白色固体；m.p.216-218℃；1h-nmr(300mhz；d6-dmso)δppm:2.63(6h,s),3.48(2h,br.s),4.55(2h,d,j＝19.7hz),5.12(1h,dt,j＝34.8,7.1hz),5.38(2h,s),7.29(2h,dd,j＝9.0,1.9hz),7.74(2h,dd,j＝8.5,1.8hz),7.81(2h,dd,j＝8.5,1.9hz),7.88(2h,dd,j＝8.9,2.0hz),8.03(3h,br.s)。(z)-(4-((2-((4-(氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)-甲基)-n-二异丙基苯磺酰胺盐酸盐(化合物14)白色固体；m.p.248-250℃；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:1.05(6h,d,j＝6.6hz),3.40(1h,hept,j＝6.6hz),3.59(2h,app.d,j＝7.3hz),4.45(2h,d,j＝19.1hz),5.16(1h,dt,j＝33.0,7.4hz),5.46(2h,s),7.23(1h,ddd,j＝8.0,8.0,1.0hz),7.38(1h,d,j＝8.1hz),7.74(1h,ddd,j＝8.4,7.4,1.8hz),7.80(2h,d,j＝8.7hz),7.91-7.95(3h,m)。实例4根据程序f-i，使用适当的硫醇起始原料制备以下化合物。(z)-4-((2-(苄氧基)苯基)磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物7)白色固体；m.p.205-207℃；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:3.57(2h,app.d,j＝7.0hz),4.44(2h,d,j＝19.1hz),5.14(1h,dt,j＝32.8,7.3hz),5.36(2h,s),7.20(1h,dd,j＝7.4,0.9hz),7.35-7.46(4h,m),7.55-7.60(2h,m),7.73(1h,ddd,j＝8.5,7.4,1.7hz),7.92(1h,dd,j＝7.9,1.7hz)。实例5根据程序f、h和i，使用适当官能化的硫醇起始原料制备以下化合物。(z)-4-((3,5-双(三氟甲基)苯基)磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物2)白色固体；m.p.217-220℃；1h-nmr(300mhz；d6-dmso)δppm:3.48(2h.app.d,j＝7.1hz),4.96(2h,d,j＝19.6hz),5.19(1h,dt,j＝34.8,7.2hz),8.10(3h,br.s),8.55(2h,s),8.67(1h,s)。(z)-4-(联苯-2-基磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物20)白色固体；m.p.170℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.18(dd,j＝8.0,1.4hz,1h),7.81(td,j＝7.5,1.4hz,1h),7.68(td,j＝7.6,1.6hz,1h),7.52–7.44(m,6h),5.03(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),3.83(d,j＝18.9hz,2h),3.56(dd,j＝7.4,1.3hz,2h)。(z)-3-氟-4-(2-异丙基苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物21)白色固体；m.p.205-215℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.00–7.95(m,1h),7.77–7.67(m,2h),7.48–7.41(m,1h),5.25(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),4.34(d,j＝19.2hz,2h),3.88(hept,j＝6.9hz,1h),3.63(dd,j＝7.5,1.9hz,2h),1.36(d,j＝6.8hz,6h)。(z)-3-氟-4-(2-甲氧基苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物22)白色固体；m.p.228-221℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.89(dd,j＝7.9,1.7hz,1h),7.75(ddd,j＝8.4,7.4,1.8hz,1h),7.32(dd,j＝8.5,0.9hz,1h),7.19(td,j＝7.6,1.0hz,1h),5.23(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),5.17(t,j＝7.4hz,0h),4.48(d,j＝19.3hz,2h),4.05(s,3h),3.61(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)。(z)-3-氟-4-(萘-1-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物23)白色固体；m.p.230-240℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.76(ddd,j＝8.7,1.2,0.6hz,1h),8.33(d,j＝7.8hz,2h),8.13(ddd,j＝8.2,1.5,0.8hz,1h),7.81(ddd,j＝8.6,6.9,1.5hz,1h),7.72(td,j＝8.0,1.9hz,2h),5.13(dt,j＝32.7,7.4hz,1h),4.49(d,j＝19.2hz,2h),3.57(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)。(z)-3-氟-4-(萘-2-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物24)白色固体；m.p.215-220℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.60(d,j＝1.9hz,1h),8.18–8.11(m,2h),8.06(dd,j＝8.2,1.4hz,1h),7.95(dd,j＝8.7,1.9hz,1h),7.81–7.68(m,2h),5.19(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),4.46(d,j＝19.2hz,2h),3.63(dt,j＝7.4,1.3hz,2h)。(z)-4-(2,4-二氯苯基磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物25)白色固体；m.p.220℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.10(d,j＝8.6hz,1h),7.85(d,j＝2.0hz,1h),7.66(dd,j＝8.6,2.0hz,1h),5.28(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),4.60(d,j＝19.1hz,2h),3.63(ddd,j＝7.4,2.0,0.6hz,2h)。(z)-4-(3-氯苯基磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物26)白色固体；m.p.225-235℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.00(t,j＝1.9hz,1h),7.92(ddd,j＝7.8,1.8,1.1hz,1h),7.82(ddd,j＝8.1,2.1,1.1hz,1h),7.68(d,j＝8.3hz,1h),5.22(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),4.44(d,j＝19.1hz,2h),3.65(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)(z)-4-(4-氯苯基磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物27)白色固体；m.p.240℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.96(dt,j＝8.8,2.3hz,2h),7.71(dt,j＝8.3,1.9hz,2h),5.20(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),4.40(d,j＝19.1hz,2h),3.65(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)。(z)-4-(3,5-二氯苯基磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物28)白色固体；m.p.250℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.97(d,j＝1.8hz,2h),7.93(t,j＝1.9hz,1h),5.27(dt,j＝33.0,7.4hz,1h),4.50(d,j＝19.0hz,2h),3.67(dd,j＝7.4,2.0hz,2h)。(z)-3-氟-4-(吡啶-4-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物29)白色固体；m.p.162-164℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.07(dd,j＝4.9,1.7hz,2h),8.22(dd,j＝4.6,1.6hz,2h),5.31(dt,j＝33.1,7.4hz,1h),4.63(d,j＝19.0hz,2h),3.67(d,j＝7.4hz,2h)(z)-3-氟-4-(喹啉-2-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物32)白色固体；m.p.203-205℃；1hnmr(300mhz,d6-dmso)δppm:8.82(d,j＝8.6hz,1h),8.29–8.20(m,2h),8.16(d,j＝8.5hz,1h),8.12–7.93(m,3h),7.92–7.83(m,1h),5.26(dt,j＝34.8,7.2hz,1h),4.92(d,j＝19.6hz,2h),3.48(s,2h)。(z)-3-氟-4-(喹啉-8-磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物33)白色固体；m.p.150-153℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.18(d,j＝4.7hz,1h),8.70(dd,j＝8.4,2.6hz,1h),8.57(d,j＝7.4hz,1h),8.45(d,j＝8.5hz,1h),7.99–7.68(m,2h),5.22(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),5.00(d,j＝19.4hz,2h),3.60(d,j＝7.7hz,2h)；lcms：对于c13h13fn2o2s，计算值280.1，实测值281.1[m+1]+。(z)-3-氟-4-(2-氟苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物37)灰白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.01–7.90(m,1h),7.89–7.77(m,1h),7.53–7.39(m,2h),5.29(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),4.49(d,j＝19.1hz,2h),3.63(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)。(z)-3-氟-4-(3-氟苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物38)灰白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.83(ddd,j＝7.8,1.7,1.1hz,1h),7.81–7.66(m,2h),7.56(tdd,j＝8.4,2.6,1.1hz,1h),5.23(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),4.44(d,j＝19.1hz,2h),3.65(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)。(z)-3-氟-4-(4-氟苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物39)灰白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.13–7.99(m,2h),7.51–7.34(m,2h),5.19(dt,j＝32.8,7.5hz,1h),4.39(d,j＝19.1hz,2h),3.62(ddt,j＝7.4,1.9,0.6hz,2h)。(z)-3-氟-4-(邻甲苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物40)灰白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.99(dd,j＝7.6,1.1hz,1h),7.71–7.59(m,1h),7.53–7.39(m,2h),5.22(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),4.35(dd,j＝19.3,0.5hz,2h),3.63(ddt,j＝7.4,2.0,0.6hz,2h),2.73(s,3h)。(z)-3-氟-4-(间甲苯磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物41)灰白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.84–7.72(m,2h),7.67–7.49(m,2h),5.44–5.08(m,1h),4.35(dq,j＝19.1,0.5hz,2h),3.64(ddt,j＝7.4,2.0,0.6hz,2h),2.56–2.38(m,3h)。(z)-3-氟-4-(对甲苯磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物42)灰白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.88–7.82(m,2h),7.54–7.45(m,2h),5.17(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),4.32(dd,j＝19.2,0.5hz,2h),3.64(ddt,j＝7.4,2.0,0.6hz,2h),2.49(s,3h)(z)-3-氟-4-((3-氟喹啉-8-基)磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物51)1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.09(dd,j＝2.9,0.6hz,1h),8.49(ddd,j＝7.4,1.4,0.4hz,1h),8.38(ddd,j＝8.3,1.4,0.4hz,1h),8.31(dd,j＝8.8,2.9hz,1h),7.87(ddd,j＝8.3,7.3,0.8hz,1h),5.20(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),4.99(d,j＝19.3hz,2h),3.59(d,j＝7.4hz,2h)。实例6根据程序f、j、h和i，使用适当官能化的硫醇起始原料制备以下化合物。程序j：制备(z)-(3-氟-4-((4-(甲基磺酰基)苯基)磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向搅拌的(z)-(3-氟-4-(4-(甲硫基)苯基)硫基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，0.35mmol)和碳酸氢钠(150mg，1.79mmol)在ch2cl2(4ml)和水(2ml)中的溶液中，在5分钟内分三部分加入3-氯过氧苯甲酸(378mg，2.19mmol)。将所得混悬剂在0℃下搅拌1.5小时，然后用naoh(2m；1ml)水溶液、水(10ml)和ch2cl2稀释。然后分离各相，水相用ch2cl2(10ml×2)萃取。合并有机相，干燥(na2so4)并真空浓缩。粗物质通过快速柱纯化，用30％etoac/己烷洗脱，得到(z)-(3-氟-4-((4-(甲基磺酰基)苯基)磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(17mg，12％)，为白色固体。1h-nmr(300mhz；d6-dmso)δppm:1.37(9h,s),3.33(3h,s),3.54(2h,app.t,j＝5.6hz),4.62(2h,d,j＝19.4hz),4.93(1h,dt,j＝36.4,6.8hz),7.05(1h,t,j＝5.8hz),8.15(2h,dd,j＝8.7,2.1hz),8.21(2h,dd,j＝8.7,2.1hz)。(z)-4-((3,5-双(三氟甲基)苯基)磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺三氟乙酸盐(化合物3)白色固体；m.p.155-157℃；1h-nmr(300mhz；d6-dmso)δppm:3.35(3h,s),3.50(2h,app.d,j＝6.7hz),4.80(2h,d,j＝19.7hz),5.12(1h,dt,j＝34.7,7.3hz),7.88(3h,br.s),8.19(2h,dd,j＝8.8,2.5hz),8.24(2h,dd,j＝8.9,2.4hz)。实例7根据程序k、l和m，然后按照f、n、h和i制备以下化合物。(z)-4-(2-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)-n,n-二甲基苯磺酰胺盐酸盐的制备(化合物6)程序k：制备4-溴-n,n,-二甲基苯磺酰胺在5℃下，向搅拌的二甲胺(12ml，40％w/w水溶液)在thf(20ml)中的溶液中，在5分钟内加入4-溴苯磺酰氯(5.00g，19.6mmol)在thf(10ml)中的溶液。添加后，将混合物在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物真空浓缩，并且所得残余物在水(25ml)和ch2cl2(20ml)之间分配，并用另外的ch2cl2(20ml×2)萃取水层。合并的有机物经na2so4干燥并真空浓缩，得到4-溴-n,n,-二甲基苯磺酰胺(4.83g，93％)，为白色固体。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:2.74(6h,s),7.64-7.73(4h,m)。程序l：制备n,n-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯磺酰胺搅拌的4-溴-n,n-二甲基苯磺酰胺(1.00g，3.79mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1,3,2-氧杂硼烷(1.15g，4.54mmol)和乙酸钾(1.11g，11.4mmol)在1,4-二恶烷(25ml)中的溶液用氮气冲洗15分钟，然后加入1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(ii)二氯甲烷复合物(155mg，0.19mmol)。将所得混悬剂在氮气下在80℃加热16小时。将混合物冷却至室温，在etoac(40ml)和水(30ml)之间分配，并通过硅藻土过滤。分离有机层，并将水层用另外的etoac(20ml×2)萃取。然后将合并的有机物用盐水洗涤，干燥(na2so4)并真空浓缩，得到n,n-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-苯磺酰胺(1.60g，68％)，为灰色固体。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.38(12h,s),2.71(6h,s),7.77(2h,dd,j＝8.4,1.0hz),7.98(2h,dd,j＝8.4,0.9hz)。程序m：制备(4-(n,n--二甲基磺酰氨基)苯基)硼酸在0℃，向搅拌的n,n-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)苯磺酰胺(1.00g，2.25mmol)在thf(20ml)和水(5ml)的溶液中，加入高碘酸钠(2.06g，9.64mmol)。将混合物在这一温度下搅拌5分钟，然后使其升温至室温，并且再搅拌30分钟。加入hcl水溶液(1m；1.57ml，1.57mmol)，并将所得混合物在室温下再搅拌1小时。用水(30ml)稀释反应混合物，并用etoac(20ml×3)萃取。然后合并有机层并洗涤(盐水)，干燥(na2so4)并真空浓缩。粗物质通过快速柱纯化，先后用50％etoac/己烷和在50％etoac/己烷中的10％meoh洗脱，得到(4-(n,n--二甲基磺酰氨基)苯基)硼酸(470mg，91％)，为褐色固体。1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:2.69(6h,s),7.75(2h,d,j＝8.2hz),7.88-7.98(2h,m)。程序n：制备(z)-(4-((2-(4-(n,n-二甲基磺酰氨基)苯氧基)苯基)硫基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯在室温下，向搅拌的(z)-(3-氟-4-((2-羟苯基)硫基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.48mmol)、(4-(n,n-二甲基磺酰氨基)苯基)硼酸(219mg，0.96mmol)和吡啶(0.19ml，2.39mmol)在ch2cl2(6ml)中的溶液中，一次性加入乙酸铜(ii)(87mg，0.48mmol)。将所得混合物在这一温度下搅拌16小时。此后，通过添加ch2cl2(30ml)稀释反应，通过硅藻土过滤，并用hcl(1m；20ml)水溶液洗涤，然后用饱和nahco3水溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤。然后将有机相干燥(na2so4)并真空浓缩。粗物质通过快速柱纯化，用25％etoac/己烷洗脱，得到(z)-(4-((2-(4-(n,n-二甲基磺酰氨基)苯氧基)苯基)硫基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg，34％)。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.45(9h,s),2.73(6h,s),3.55(2h,d,j＝17.1hz),3.73(2h,app.t,j＝5.6hz),4.46(1h,br.s),4.80(1h,dt,j＝34.8,6.8hz),7.02(2h,d,j＝8.7hz),7.06(1h,dd,j＝8.2,1.0hz),7.24(1h,ddd,j＝7.5,7.5,1.1hz),7.35(1h,ddd,j＝7.6,7.6,1.6hz),7.52(1h,dd,j＝7.7,1.5hz),7.75(2h,d,j＝8.6hz)。(z)-4-(2-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯氧基)-n,n-二甲基苯磺酰胺盐酸盐(化合物6)白色固体；m.p.153-156℃；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:2.73(6h,s),3.64(2h,app.d,j＝6.9hz),4.57(2h,d,j＝19.1hz),5.30(1h,dt,j＝32.8,7.3hz),7.25(1h,dd,j＝8.3,0.7hz),7.30(2h,dd,j＝8.9,2.0hz),7.49(1h,ddd,j＝7.9,7.9,1.0hz),7.81(1h,ddd,j＝7.8,8.3,1.7hz),7.86(2h,dd,j＝8.6,2.0hz),8.07(1h,dd,j＝7.9,1.6hz)。实例8根据程序k、l、m、n、h和i制备以下化合物。(z)-4-(3-(4-氨基-2-氟丁-2-烯基磺酰基)苯氧基)-n,n-二甲基苯磺酰胺盐酸盐(化合物16)白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.89–7.82(m,3h),7.76(td,j＝8.0,0.5hz,1h),7.68(t,j＝2.4,1.7hz,1h),7.53(ddd,j＝8.1,2.5,1.1hz,1h),7.29–7.22(m,2h),5.28(dt,j＝33.2,7.4hz,1h),4.90(s,6h),4.43(d,j＝19.1hz,2h),3.65(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)。(z)-3-(3-(4-氨基-2-氟丁-2-烯基磺酰基)苯氧基)-n,n-二甲基苯磺酰胺盐酸盐(化合物17)白色固体；m.p.220℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:7.81(ddd,j＝7.8,1.7,1.2hz,1h),7.77–7.69(m,2h),7.66–7.59(m,2h),7.50(ddd,j＝8.0,2.5,1.2hz,1h),7.46–7.38(m,2h),5.24(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),4.90(s,6h),4.41(d,j＝19.1hz,2h),3.65(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)。(z)-3-(2-(4-氨基-2-氟丁-2-烯基磺酰基)苯氧基)-n,n-二甲基苯磺酰胺盐酸盐(化合物18)白色固体；m.p.205℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.06(ddd,j＝7.9,1.7,0.3hz,1h),7.83–7.73(m,1h),7.70(dd,j＝7.7,0.7hz,1h),7.65(dt,j＝7.8,1.4hz,1h),7.51–7.42(m,3h),7.20(dd,j＝8.3,1.0hz,1h),5.31(dt,j＝33.0,7.4hz,1h),4.90(s,6h),4.60(d,j＝19.2hz,2h),3.64(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)。实例9根据程序o和p，然后按照f、q、h和i制备以下化合物。制备(z)-2-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰氨基)-n-(4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)-苯基)苯甲酰胺盐酸盐(化合物15)程序o：制备n,n-二异丙基-4-硝基苯磺酰胺在0-5℃下，向搅拌的二异丙胺(3.16ml，22.6mmol)在thf(10ml)中的溶液中，在5分钟内加入4-硝基苯磺酰氯(2.00g，9.02mmol)在thf(5ml)中的溶液。添加后，将混合物在室温搅拌16小时。然后将反应混合物真空浓缩，并将所得残余物在水(25ml)和ch2cl2(20ml)之间分配。分离各相，并用另外的ch2cl2(20ml×2)萃取水层。然后将合并的有机物经na2so4干燥并真空浓缩。粗物质通过快速柱纯化，用20％etoac/己烷洗脱，得到n,n-二异丙基-4-硝基苯磺酰胺(285mg，11％产率)，为黄色固体。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.30(12h,d,j＝6.7hz),3.79(1h,hept,j＝6.9hz),8.07(2h,dd,j＝9.2,2.2hz),8.35(2h,dd,j＝8.9,1.9hz)。程序p：制备4-氨基-n,n-二异丙基苯磺酰胺在室温下，在氮气层下，向搅拌的n,n-二异丙基-4-硝基苯磺酰胺(260mg，0.91mmol)在甲醇(10ml)中的溶液中，加入钯碳在水(50μl)中的浆料(10％w/w；50mg)。将所得混合物在氢气氛下搅拌3小时。通过硅藻土过滤混合物并真空浓缩，得到4-氨基-n,n-二异丙基苯磺酰胺(200mg，86％)，为棕色固体。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.27(12h,d,j＝6.8hz),3.66(2h,hept,j＝6.8hz),4.04(2h,br.s),6.67(2h,dd,j＝8.7,2.1hz),7.65(2h,dd,j＝8.6,1.9hz)。程序q：制备(z)-(4-((2-((4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)苯基)-氨基甲酰基)苯基)硫基)-3-氟丁-2-烯1-基氨基甲酸叔丁酯在室温下，向搅拌的(z)-2-((4-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-氟丁-2-烯-1-基)硫基)苯甲酸(180mg，0.53mmol)、4-氨基-n,n-二异丙基苯磺酰胺(203mg，0.79mmol)和三乙胺(0.26ml，1.85mmol)(0.8ml)在dmf中的溶液中，加入hatu(301mg，0.79mmol)，并将所得溶液在这一温度下搅拌16小时。然后将反应混合物在水(10ml)和etoac(10ml)之间分配，并分离各相。再次用etoac萃取水相，合并有机相，并用hcl(1m；20ml)洗涤，然后用水(20ml×3)和盐水(20ml)洗涤。将有机相干燥(na2so4)并真空浓缩。将粗物质经快速柱纯化，用50-100％etoac/己烷洗脱，得到(z)-(4-((2-((4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)苯基)氨基甲酰基)苯基)硫基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(93mg，30％)，为浅莲灰油。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.31(12h,d,j＝6.7hz),1.44(9h,s),3.57(2h,d,j＝18.5hz),3.63(2h,app.t,j＝5.6hz),3.74(2h,hept,j＝6.7hz),4.40(1h,dt,j＝34.8,6.9hz),4.75(1h,br.s),7.41(1h,dd,j＝7.1,7.1hz),7.47(1h,ddd,j＝7.8,7.8,1.8hz),7.62(1h,dd,j＝7.8,1.2hz),7.75(1h,dd,j＝7.3hz),7.88(4h,br.s)。(z)-2-((4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)-n-(4-(n,n-二异丙基磺酰氨基)苯基)苯甲酰胺盐酸盐(化合物15)白色固体；m.p.248-250℃；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:1.29(12h,d,j＝6.9hz),3.64(2h,dd,j＝7.4,1.5hz),3.78(2h,hept,j＝6.7hz),4.69(2h,d,j＝19.2hz),5.23(1h,dt,j＝32.4,7.4hz),7.76-7.82(2h,m),7.85-7.93(5h,m),8.10-8.13(1h,m)。实例10使用合适的硫醇和胺起始原料，根据程序q、h和i制备以下化合物。n-(金刚烷-1-基)-4-(((z)-4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯甲酰胺盐酸盐(化合物4)灰白色固体；m.p.231-233℃；1h-nmr(300mhz；d6-dmso)δppm:1.67(6h,br.s),2.08(9h,br.s),3.46(2h,br.s),4.67(2h,d,j＝19.7hz),5.10(1h,dt,j＝34.6,7.1hz),7.97(2h,dd,j＝8.6,1.5hz),8.00(2h,dd,j＝8.8,1.4hz),8.06(3h,br.s)。n-(金刚烷-1-基)-2-(((z)-4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯甲酰胺盐酸盐(化合物12)白色固体；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:1.77-1.80(6h,m),2.09-2.15(3h,m),2.16-2.21(6h,m),3.61(2h,app.d,j＝7.2hz),4.62(2h,d,j＝19.5hz),5.16(1h,dt,j＝32.6,7.4hz),7.56(1h,dd,j＝7.5,1.0hz),7.67(1h,ddd,j＝7.7,7.7,1.2hz),7.78(1h,ddd,j＝7.5,7.5,1.1hz),8.01(1h,dd,j＝7.8,1.0hz)。n-(金刚烷-1-基)-3-(((z)-4-氨基-2-氟丁-2-烯-1-基)磺酰基)苯甲酰胺盐酸盐(化合物13)白色固体；m.p.230-232℃；1h-nmr(300mhz；d6-dmso)δppm:1.68(6h,br.s),2.05-2.12(9h,m),3.49(2h,br.s),4.68(2h,d,j19.8hz),5.12(1h,dt,j34.7,7.0hz),7.73(1h,dd,j7.7,7.7hz),7.98(3h,br.s),8.03(1h,ddd,j7.8,1.7,0.9hz),8.16(1h,ddd,j7.8,1.4,1.0hz),8.28(1h,dd,j1.6,1.1hz)。实例11根据程序r和i制备以下化合物。(z)-3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物1)程序r：制备(z)-(3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯在室温下，向搅拌的(z)-(4-溴-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(60.0g，224mmol)在dmf(300ml)的溶液中，在15分钟内分批加入苯亚磺酸钠(44.1g，269mmol)。将所得反应混合物在室温搅拌2小时。用水(2.7l)稀释反应混合物，并在室温下继续再搅拌15分钟。将所得沉淀出的固体过滤，用水(50ml×2)洗涤，然后在60℃的烘箱中干燥，得到(z)-(3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(74.0g，100％)，为白色固体，将其直接用于下一步。1hnmr(300mhz,cdcl3)δppm:7.98–7.91(m,2h),7.76–7.67(m,1h),7.61(ddt,j＝8.3,6.6,1.3hz,2h),4.94(dt,j＝34.3,7.0hz,1h),4.59(s,1h),3.94(d,j＝18.4hz,2h),3.79(t,j＝6.5hz,2h),1.46(s,9h)。(z)-3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物1)灰白色固体；m.p.209-211℃；1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:3.64(2h,dd,j＝7.3,1.2hz),4.36(2h,d,j＝19.1hz),5.18(1h,dt,j＝32.7,7.4hz),7.65-7.71(2h,m),7.79(1h,tt,j＝7.4,1.2hz),7.96-8.00(2h,m)；lcms：对于c10h12fno2s，计算值229.1，实测值230.1[m+1]+。实例12根据程序r和i制备以下化合物。(z)-4-(2-氯苯基磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物19)白色固体；m.p.205-207℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.13(ddd,j＝7.9,1.5,0.6hz,1h),7.81–7.69(m,2h),7.62(ddd,j＝7.9,6.4,2.2hz,1h),5.27(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),4.59(d,j＝19.1hz,2h),3.62(dd,j＝7.4,1.9hz,2h)；lcms：对于c10h11clfno2s，计算值263.0，实测值264.0[m+1]+。(z)-3-氟-4-(吡啶-2-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物30)白色固体；m.p.153-155℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.88–8.73(m,1h),8.25–8.10(m,2h),7.77(ddd,j＝6.8,4.7,1.9hz,1h),5.26(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),4.59(d,j＝19.1hz,2h),3.63(dd,j＝7.3,1.8hz,2h)。(z)-3-氟-4-(吡啶-3-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物31)白色固体；m.p.168-170℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.23(dd,j＝2.3,0.8hz,1h),9.04(dd,j＝5.2,1.5hz,1h),8.64(dt,j＝8.2,1.9hz,1h),7.94(ddd,j＝8.2,5.2,0.8hz,1h),5.30(dt,j＝33.1,7.4hz,1h),4.59(d,j＝19.1hz,2h),3.68(d,j＝7.4hz,2h)。实例13根据程序s、f、h和i制备以下化合物。(z)-3-氟-4-(3-甲基吡啶-2-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物43)程序s：3-甲基吡啶-2-硫醇的制备将2-氯-3-甲基吡啶(500mg，3.93mmol)和硫氢化钠水合物(2.21g，39.36mmol)溶于dmf(2.0ml)。将所得混合物在120℃加热12小时。反应(tlc)完成后，将反应混合物冷却至室温，用水(20ml)稀释，加入乙酸酸化(ph＝5)，并用etoac(20ml×3)萃取。合并的有机萃取物经na2so4干燥，并减压浓缩，得到3-甲基吡啶-2-硫醇(1.50g，50.5％)。1hnmr(600mhz,d6-dmso)δppm:13.5-13.3(m,1h),7.6-7.58(m,1h),7.51(d,j＝6hz,1h)。2.21(s,3h)(z)-3-氟-4-(3-甲基吡啶-2-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物43)灰白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.53(dd,j＝4.7,1.3hz,1h),7.92(d,j＝7.6hz,1h),7.60(dd,j＝7.8,4.5hz,1h),5.37(dt,j＝32.9,7.2hz,1h),4.75(d,j＝19.0hz,2h),3.67(d,j＝7.1hz,2h),2.68(s,3h)。实例14根据程序s、f、h和i制备以下化合物(z)-3-氟-4-(2-甲基吡啶-4-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物44)浅黄色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δ9.00(d,j＝5.6hz,1h),8.35(s,1h),8.23(d,j＝5.4hz,1h),5.36(dt,j＝33.0,7.1hz,1h),4.68(d,j＝18.9hz,2h),3.69(d,j＝6.7hz,2h),2.90(s,3h)。(z)-3-氟-4-(5-异丙基吡啶-2-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物34)白色玻璃状固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δ8.70(t,j＝1.3hz,1h),8.12–7.94(m,2h),5.28(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),4.55(d,j＝19.1hz,2h),3.64(dd,j＝7.6,1.7hz,2h),3.15(hept,j＝6.9hz,1h),1.36(d,j＝6.9hz,6h)。(z)-3-氟-4-(5-甲基吡啶-2-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物35)白色固体；m.p.155-157℃；1hnmr(300mhz,d6-dmso)δ8.67(d,j＝0.9hz,1h),8.09(s,3h),7.98(t,j＝1.4hz,2h),5.20(dt,j＝34.8,7.2hz,1h),4.70(d,j＝19.6hz,2h),3.46(t,j＝5.9hz,2h),2.45(s,3h)。(z)-3-氟-4-(6-甲基吡啶-2-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物36)浅黄色固体；m.p.174-176℃；1hnmr(300mhz,d6-dmso)δ8.18(s,3h),8.06(t,j＝7.8hz,1h),7.88(d,j＝7.7hz,1h),7.66(d,j＝7.5hz,1h),5.23(dt,j＝34.8,7.1hz,1h),4.70(d,j＝19.6hz,2h),3.46(t,j＝5.9hz,2h),2.61(s,3h)。实例15根据程序t、u和v，然后按照f、h和i制备以下化合物(z)-3-氟-4-(6-异丙基吡啶-3-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物49)程序t：制备3-((6-氯吡啶-3-基)硫基)丙酸甲酯在室温下，在氮气气氛氛下，在50ml可再密封的反应管中，将2-氯-5-碘吡啶(2.50g，10.5mmol)溶解在脱气的1,4-二恶烷(25ml)中。在氮气气氛下，依次加入pd2(dba)3(100mg，0.11mmol)、4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(xantphos)(125mg，0.22mmol)、3-巯基丙酸甲酯(1.25g，10.5mmol)和dipea(2.50ml，14.4mmol)。通过吹扫氮气15分钟使溶液脱气，然后逐渐加热至70℃。将所得反应混合物在这一温度下搅拌6小时。反应(tlc)完成后，将反应混合物冷却至室温，用冷水稀释，并用乙酸乙酯(3×30ml)萃取。用盐水溶液洗涤合并的有机物，并减压浓缩。通过硅胶(100-200目)柱色谱法纯化获得的残余物，用10％etoac-己烷洗脱，得到3-((6-氯吡啶-3-基)硫基)丙酸甲酯(2.40g，99％)，为灰白色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.36(d,j＝2.4hz,1h),7.67(dd,j＝8.4,2.4hz,1h),7.28(d,j＝9.2hz,1h),3.69(s,3h),3.17(t,j＝7.2hz,2h),2.64(t,j＝7.2hz,2h)。程序u：制备3-((6-异丙基吡啶-3-基)硫基)丙酸甲酯在氮气气氛下，在1000ml圆底烧瓶中，将3-((6-氯吡啶基-3-基)硫基)丙酸甲酯(5.00g，21.6mmol)溶于无水thf(200ml)和1-甲基-2-吡咯烷酮(25ml)。溶液冷却至-55℃，并在保持氮气气氛的同时添加乙酰丙酮铁(iii)(1.70g，4.80mmol)在thf(50ml)中的溶液。在氮气气氛下，将所得混合物在-55℃下搅拌15分钟，此时，在-55℃下，滴加异丙基氯化镁在thf(2m，50ml)中的溶液。将所得反应混合物在-40℃下再搅拌1小时。反应(tlc)完成后，将反应混合物冷却至0℃，用饱和nh4cl溶液(50ml)淬灭，并将产物用乙酸乙酯(100ml×3)萃取。合并的有机物经na2so4干燥并减压浓缩。获得的残余物经硅胶(100-200目)柱色谱法纯化，用10％etoac-己烷洗脱，得到3-((6-异丙基吡啶-3-基)硫基)丙酸甲酯(2.60g，50％)，为淡黄色液体。程序v：制备6-异丙基吡啶-3-硫醇在氮气气氛下，在100ml圆底烧瓶中，将3-((6-异丙基吡啶-3-基)硫基)丙酸甲酯(860mg，3.59mmol)溶解在无水thf(20ml)中，并将溶液冷却至-78℃。在氮气气氛下，将叔丁醇钾在thf溶液(1.0m，3.5ml，3.59mmol)中的溶液加入上述混合物中。将所得混合物在-78℃搅拌1小时。反应(tlc)完成后，将反应混合物加热至室温并减压浓缩。获得的残余物用正己烷洗涤，得到6-异丙基吡啶-3-硫醇(655mg)，为浅棕色固体。所述化合物无需进一步纯化即可用于下一步。(z)-3-氟-4-(6-异丙基吡啶-3-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物49)1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.29(dd,j＝2.1,0.7hz,1h),9.02(ddd,j＝8.6,3.5,2.1hz,1h),8.32(dd,j＝8.6,3.2hz,1h),5.48(t,j＝7.3hz,1h),4.74(d,j＝19.0hz,2h),3.81–3.65(m,2h),3.55(dq,j＝7.0,2.2hz,1h),1.53(dd,j＝7.0,0.8hz,6h)。实例16根据程序t、u和v，然后按照f、h和i制备以下化合物。(z)-3-氟-4-(2-异丙基吡啶-3-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物45)1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.95(dd,j＝5.2,1.7hz,1h),8.66(dd,j＝8.2,1.8hz,1h),7.78(dd,j＝8.0,5.0hz,1h),5.39(dt,j＝33.2,7.3hz,1h),4.58(d,j＝19.0hz,2h),4.08(p,j＝6.8hz,1h),3.72–3.62(m,2h),1.45(d,j＝6.7hz,6h)。实例17根据程序t和v，然后按照f、h和i制备以下化合物。(z)-3-氟-4-(6-甲基吡啶-3-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物46)1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.17(d,j＝2.2hz,1h),8.67(d,j＝8.5hz,1h),7.96(d,j＝8.4hz,1h),5.33(dt,j＝33.0,7.3hz,1h),4.62(d,j＝19.1hz,2h),3.75–3.63(m,2h),2.85(s,3h)。(z)-3-氟-4-(2-甲基吡啶-3-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物47)1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.00(dd,j＝5.6,1.5hz,1h),8.91(dd,j＝8.1,1.5hz,1h),8.05(dd,j＝8.1,5.6hz,1h),5.42(dt,j＝33.2,7.3hz,1h),4.67(d,j＝19.0hz,2h),3.79–3.64(m,2h),3.12(s,3h)。(z)-3-氟-4-(4-甲基吡啶-3-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物48)灰白色固体；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.25(s,1h),8.97(d,j＝5.8hz,1h),8.07(d,j＝5.9hz,1h),5.42(dt,j＝33.2,7.3hz,1h),4.68(d,j＝19.1hz,2h),3.70(dd,j＝7.4,1.9hz,2h),2.99(d,j＝0.6hz,3h)。(z)-3-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-4-基)磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物50)浅黄色固体；m.p.243–245℃；1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:8.37(dd,j＝8.1,1.2hz,1h),8.10(dd,j＝7.7,1.2hz,1h),7.63(t,j＝7.9hz,1h),5.20(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),4.82(d,j＝19.0hz,2h),3.60(d,j＝7.4hz,2h),2.97(s,3h)。实例18根据程序w、x、y、z，然后按照h和i制备以下化合物(z)-4-((2,3-二甲基-1h-吲哚-7-基)磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物52)程序w：(2-碘苯基)肼的制备在0℃，在1l圆底烧瓶中，2-碘苯胺(40.0g，0.182mmol)在浓hcl(250ml)的溶液用nano2(15.1g，0.22mmol)在水(40ml)中的溶液处理。将反应混合物在0℃下搅拌2小时，并在0℃下缓慢用sncl2(86.6g，0.46mmol)处理。将反应温度逐渐升高至室温，并再搅拌6小时。反应(tlc)完成后，将反应混合物过滤并用正戊烷(50ml)和二乙醚(50ml)洗涤，得到标题化合物(42g，98.26％)。1hnmr(300mhz,d6-dmso)δppm:10.2(br.s,2h),7.79-7.76(m,1h),7.7-7.45(br,1h),7.36(t,j＝8.1hz,1h),7.02(d,j＝7.8hz,1h),6.75(t,j＝7.8hz,1h)。程序x：制备7-碘-2,3-二甲基-1h-吲哚在250ml圆底烧瓶中，将(2-碘苯基)肼(10g，42.73mmol)在乙酸(80ml)中的溶液逐渐加热至60℃并搅拌1小时。在60℃下，缓慢加入2-丁酮(6.18g，85.36mmol)。然后将所得反应混合物在80℃加热5小时。反应(tlc)完成后，将反应混合物冷却至室温，然后减压浓缩。将获得的残余物用冷水稀释，并用乙酸乙酯(100ml×2)萃取。合并的有机萃取物用盐水洗涤，并减压浓缩。将获得的残余物通过硅胶纯化，用10％etoac-己烷洗脱，得到标题化合物，为灰白色固体(2.00g，18％)。1hnmr(400mhz,d6-dmso)δppm:10.54(s,1h),7.37-7.24(m,2h),6.73(t,j＝8hz,1h),2.32(s,3h),2.12(s,3h)。程序y：制备3-((2,3-二甲基-1h-吲哚-7-基)硫基)丙酸甲酯在氮气气氛下，在50ml可再密封的反应管中，对7-碘-2,3-二甲基-1h-吲哚(1.60g，10.5mmol)在1,4-二恶烷(10ml)中的溶液脱气。在氮气气氛下，依次添加pd2(dba)3(50.0mg，0.06mmol)、4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(100mg，0.18mmol)、3-巯基丙酸甲酯(0.70g，5.90mmol)和dipea(2.00ml，11.80mmol)。通过吹扫氩气将溶液脱气15分钟，然后逐渐加热至110℃，并在这一温度下搅拌12小时。反应(tlc)完成后，将反应混合物冷却至室温，用冷水稀释，并用etoac(2×20ml)萃取。合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并减压浓缩。将获得的残余物经硅胶纯化，用10％etoac-己烷洗脱，得到标题化合物，为灰白色固体(1.50g，96％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.6(br,1h),7.44(d,j＝8hz,1h),7.22(d,j＝7.6hz,1h),7.03(t,j＝7.6hz,1h),3.7(s,3h),3.08(t,j＝6.8hz,2h),2.57(t,j＝7.2hz,2h),2.41(s,3h),2.22(s,3h)。程序z：制备(z)-(4-((2,3-二甲基-1h-吲哚-7-基)硫基)-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯在室温下，在100ml圆底烧瓶中，将碳酸铯(1.49g，4.56mmol)加入到搅拌的3-((2,3-二甲基-1h-吲哚-7-基)硫基)丙酸甲酯(0.40g1.52mmol)和(z)-(4-溴-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.41g，1.53mmol)在dmf(15ml)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌5小时。反应(tlc)完成后，通过加入冰冷的水(10ml)淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯(10ml×3)萃取。合并的有机萃取物用无水na2so4干燥并减压浓缩。粗物质经硅胶纯化，用20％乙酸乙酯己烷洗脱，得到标题化合物，为浅黄色液体(350mg，63％)。1hnmr(300mhz,d6-dmso-)δppm:10.65(s,1h),7.31(d,j＝7.5hz,1h),7.07(d,j＝7.8hz,1h),6.93-6.83(m,2h),4.66(dt,j＝36.3,7.2hz,1h),3.67(d,j＝19.5hz,2h),3.47(t,j＝6hz,2h),2.32(s,3h),2.13(s,3h),1.34(s,9h)。(z)-4-((2,3-二甲基-1h-吲哚-7-基)磺酰基)-3-氟丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物52)1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:10.25(s,1h),7.80(dd,j＝7.8,1.0hz,1h),7.55(dd,j＝7.7,1.1hz,1h),7.20(t,j＝7.7hz,1h),5.05(dt,j＝32.7,7.4hz,1h),4.34(d,j＝19.2hz,2h),3.55(dd,j＝7.4,1.9hz,2h),2.49–2.39(m,3h),2.26(d,j＝0.8hz,3h)。实例19制备(z)-(4-溴-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯程序aa：制备2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯将装有3-氨基-1,2-丙二醇(50.0kg，549mol)和乙酸乙酯(150l)的容器冷却至0–5℃。向这一溶液中分批加入二碳酸二叔丁酯(120kg，550mol)。将所得混合物在20–25℃下搅拌12小时。将反应混合物冷却至0–5℃后，分批加入高碘酸钠(120kg，561mol)。将混悬剂在这一温度下搅拌1小时。然后将反应混合物过滤，并将滤“饼”用乙酸乙酯(180l)洗涤。合并的滤液用nacl水溶液(10％w/w，300l)洗涤，用na2so4干燥，然后真空浓缩，得到粗2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(70.0kg，80％)。粗物质不经纯化即可用于后续步骤。程序ab：制备(e)-4-(叔丁氧羰基氨基)-2-氟丁-2-烯酸乙酯将装有2-氟膦酰基乙酸乙酯(46.0kg，190mol)、乙腈(250l)和1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)(38.0kg，250mol)的容器冷却至0–10℃。向其中滴加2-氧代乙基氨基甲酸叔丁酯(68.0kg，427mol)，并将所得混合物在0-10℃下搅拌4小时。将反应混合物用叔丁基甲基醚(500l)和水(500l)稀释，并继续搅拌30分钟。再静置30分钟后，除去水层。有机层用水(250l)洗涤，然后真空浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(56l)和石油醚(240l)中，并经硅胶(40kg，目径：100–200)纯化，用在石油醚中的乙酸乙酯(1:10)洗脱，得到粗(e)-4-(叔丁氧羰基氨基)-2-氟丁-2-烯酸乙酯(90kg)。粗物质无需进一步纯化即可用于后续步骤。程序ac：制备(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯在0–10℃下，在装有粗(e)-4-(叔丁氧羰基氨基)-2-氟丁-2-烯酸乙酯(90.0kg，364mol)、thf(314l)和甲醇(36l)的反应容器中，在4小时内分批加入硼氢化钠(16.6kg，439mol)。加完后，将所得混合物在0–10℃下搅拌3小时。通过加入hcl水溶液(0.5n，900l)淬灭反应。然后将产物用乙酸乙酯(720l×2)萃取。用水(450l)洗涤合并的有机物，并真空浓缩。通过与thf(200l×3)共蒸发除去残留的水，得到粗(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(85kg)。该物质无需进一步纯化即可进行下一步。程序ad：制备(z)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-氟丁-2-烯-1-基3,5-二硝基苯甲酸酯在0–20℃下，向装有粗(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(170kg，828mol)、thf(765l)和三乙胺(174l，1245mol)的反应容器中，分批加入3,5-二硝基苯甲酰氯(190kg，824mol)。将所得混合物在0–20℃下搅拌2小时，然后用水(850l)和乙酸乙酯(1700l)稀释。除去水层，有机物用na2co3水溶液(10％w/w，850l×2)洗涤，然后用水(850l)洗涤。真空浓缩(至大约190l)后，加入乙酸乙酯(245l)。将混合物在55℃下搅拌直至获得澄清溶液。将混合物冷却至10–20℃，加入正庚烷(730l)，并将混合物搅拌6小时。通过过滤分离由此形成的固体，并用正庚烷/乙酸乙酯(4:1，170l)洗涤。hplc分析表明e-异构体含量为30％。通过如下沉淀过程将e-异构体含量降低至4.3％。将固体溶解在乙酸乙酯(570l)中。向其中加入正庚烷，将所得浆液在20–30℃下搅拌4–6小时。通过过滤分离固体，并用正庚烷/乙酸乙酯(4:1)洗涤滤“饼”。再次重复这一过程，得到(z)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-氟丁-2-烯-1-基3,5-二硝基苯甲酸酯(84kg为湿“饼”)。该资料已进行到下一步。程序ae：制备(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯在15–25℃下，将装有(z)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-氟丁-2-烯-1-基3,5-二硝基苯甲酸酯(84kg，210mol)、thf(187l)和naoh水溶液(1.00m，420l)的反应容器搅拌2–5小时。通过tlc监测反应进程。反应混合物用乙酸异丙酯(966l)稀释，并继续搅拌10-30分钟。静置10–30分钟，然后分离各层后，再用乙酸异丙酯(483l)萃取水层。用na2co3水溶液(10％w/w，420l×2)、nacl水溶液(10％w/w，420l)洗涤合并的有机物，然后浓缩至大约84l。通过与thf(468l)共蒸发除去残余水，得到(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(29.0kg，67％)。hplc分析表明，e-异构体含量为3.8％。程序af：制备(z)-4-溴-3-氟丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯将装有(z)-3-氟-4-羟基丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(29.0kg，141mol)、thf(290l)和二异丙基乙胺(dipea)(74.0l，425mol)的反应容器冷却至0–10℃。向其中滴加甲磺酸酐(50.0kg，287mol)在thf(145l)中的溶液。加完后，分批添加溴化锂(74.0kg，852mol)，同时保持温度在0–10℃之间。将所得混合物在0–10℃下搅拌4小时。此后的tlc表明起始原料已完全消耗。将反应混合物用水(290l)稀释，并将产物用乙酸乙酯(290l+145l)萃取。用水(150l)洗涤合并的有机物，然后浓缩至干。将粗残留物吸收在乙酸乙酯(67l)和正庚烷(440l)中，并通过硅胶(40kg；目径为100–200)进行纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1:5)。将所有含有所需产物的级分浓缩至干。加入乙酸乙酯(56l)，并在40–50℃下继续搅拌直至获得澄清溶液。向其中逐滴添加正庚烷(280l)。将混合物冷却至10–15℃并搅拌8小时。过滤收集所得固体。hplc分析表明e-异构体含量为0.9％。为了进一步降低e-异构体含量，沉淀过程如下重复。加入乙酸乙酯(33l)，并在40–50℃下继续搅拌直至获得澄清溶液。向其中滴加正庚烷(164l)。将混合物冷却至10–15℃并搅拌8小时。过滤收集所得固体并干燥，得到(z)-4-溴-3-氟丁-2-烯基氨基甲酸叔丁酯(29.5kg，68％)。hplc分析表明，e-异构体含量为0.1％。1h-nmr(300mhz；cdcl3)δppm:1.46(9h,s),3.85(2h,dd,j6.2,6.2hz),3.93(2h,d,j19.5hz),4.66(1h,br.s),5.16(1h,dt,j＝34.0,6.5hz)。实例20根据程序ag和ah制备以下化合物。制备(z)-3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物1)程序ag：制备(z)-(3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯将装有(z)-(4-溴-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(2.40kg，8.95mol)和dmf(12.0l)的容器冷却至15-20℃。向其中加入苯亚磺酸钠(2.20kg，13.4mol)，并将所得混合物在15–20℃下搅拌4h。将反应混合物用水(12.0l)稀释，并在室温下继续再搅拌1小时。过滤分离由此形成的固体，并将滤“饼”进一步用水(6.0l)洗涤。然后将固体在50–55℃真空下干燥20小时，得到(z)-(3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸酯(2.70kg，92％)。保留时间(rt)＝13.75分钟；方法-agilentlc/msd1200系列；色谱柱：zorbaxsb-c18，ods2000(50×4.6mm，5μm)，以es(+)或(-)电离模式运行；流速1.5ml/分钟；温度(t)＝30℃；检测波长：214nm；流动相：在24分钟内从5％的乙腈(含0.05％的三氟乙酸(tfa))和95％的水(含0.05％的tfa)到90％的乙腈和10％的水。程序ah：制备(z)-3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物1)向装有hcl(4.00m的乙酸乙酯溶液；13.5l，54.0mol)并冷却至10–20℃的容器中，加入(z)-(3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(2.70kg，8.20mol)在乙酸乙酯(27.0l)中的滤过的溶液(hyflo)。将反应混合物在10–20℃下搅拌6小时。过滤分离所得固体，并且将滤“饼”用乙酸乙酯(8.0l)洗涤。然后将固体在50–55℃下真空干燥40小时，得到(z)-3-氟-4-(苯基磺酰基)丁-2-烯-1-胺盐酸盐(化合物1)(2.10kg；96％)。1h-nmr(300mhz；cd3od)δppm:3.64(2h,dd,j＝7.3,1.2hz),4.36(2h,d,j＝19.1hz),5.18(1h,dt,j＝32.7,7.4hz),7.65-7.71(2h,m),7.79(1h,tt,j＝7.4,1.2hz),7.96-8.00(2h,m)；lcms:对于c10h12fno2s，计算值229.1，实测值230.1[m+1]+。实例21根据程序ai、aj和ak制备以下化合物。制备(z)-3-氟-4-(喹啉-8-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐一水合物(化合物33)程序ai：制备喹啉8-亚磺酸钠在室温下，将装有na2so3(6.70kg，53.2mol)和水(21.0l)的容器搅拌20分钟。向容器中加入na2so3(5.50kg，51.9mol)，并在室温下继续搅拌20分钟。然后分批加入喹啉-8-磺酰氯(6.00kg，26.4mol)，同时保持温度低于40℃。将所得混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物过滤并将滤“饼”用甲醇(7.0l)洗涤。真空浓缩滤液至干，并向所得残余物中加入甲醇(7.0l)。在室温下搅拌1小时后，将混合物过滤并将滤液浓缩至干。在第二个也是最后的洗涤循环中，将残余物吸收在甲醇(10.0l)中，并在室温下继续搅拌1小时。过滤混合物，并将滤液真空浓缩，得到喹啉-8-亚磺酸钠(4.10kg，72％)。过程aj：制备(z)-(3-氟-4-(喹啉-8-基磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯将装有(z)-(4-溴-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3.50kg，13.1mol)、喹啉-8-亚磺酸钠(4.20kg，19.5mol)和dmf(17.5l)冷却至15–20℃。将所得混合物在这一温度下搅拌20小时。然后将混合物用乙酸乙酯(35.0l)和水(35.0l)稀释，并继续再搅拌10分钟。然后分离有机层，并用水(20.0l×2)洗涤。将有机层浓缩至约20l后，滴加正庚烷(42.0l)。将所得混悬剂在20–30℃下搅拌20小时。过滤分离固体，用正庚烷洗涤，然后在50–55℃下真空干燥20小时，得到(z)-(3-氟-4-(喹啉-8-基磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3.80kg，77％)。rt＝12.97分钟；方法-agilentlc/msd1200系列；色谱柱：zorbaxsb-c18，ods2000(50×4.6mm，5μm)，以es(+)或(-)电离模式运行；流速1.5ml/分钟；温度(t)＝30℃；检测波长：214nm；流动相：在24分钟内从5％的乙腈(含0.05％的三氟乙酸(tfa))和95％的水(含0.05％的tfa)到90％的乙腈和10％的水。程序ak：制备(z)-3-氟-4-(喹啉-8-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐一水合物(化合物33)在10–20℃下，向装有hcl(在乙酸乙酯中1.5m；53l)的容器中，加入(z)-(3-氟-4-(喹啉-8-基磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(5.3kg，14mol)。将混合物在15℃下搅拌4小时。过滤分离所得固体，并用乙酸乙酯(20l)洗涤。向装有固体的烧瓶中加入乙酸乙酯(53l)。然后将混悬剂在10–20℃下搅拌2小时。过滤分离固体，并用乙酸乙酯(20l)洗涤。将固体溶解在甲醇(53l)中，并将溶液过滤。然后向其中滴加水(500ml)和叔丁基甲基醚(53l)，并在15℃下继续再搅拌20小时。过滤收集固体，并在55–60℃下真空干燥，得到(z)-3-氟-4-(喹啉-8-基磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐一水合物(化合物33)(4.4kg，90％)。1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:9.18(d,j＝4.7hz,1h),8.70(dd,j＝8.4,2.6hz,1h),8.57(d,j＝7.4hz,1h),8.45(d,j＝8.5hz,1h),7.99–7.68(m,2h),5.22(dt,j＝32.9,7.4hz,1h),5.00(d,j＝19.4hz,2h),3.60(d,j＝7.7hz,2h)；lcms：对于c13h13fn2o2s，计算值280.1，实测值281.1[m+1]+。实例22根据程序al和am制备以下化合物。(z)-3-氟-4-((喹啉-8-基-d6)磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐的制备(化合物53)过程al：制备(z)-(3-氟-4-((喹啉-8-基-d6)磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯向搅拌的(z)-(4-溴-3-氟丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(606mg，2.26mmol)在dmf(4.0ml)中的溶液中，一次性加入2,3,4,5,6,7-六氘代喹啉-8-亚磺酸钠(500mg，2.26mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将反应混合物用水(40ml)稀释，并将产物用乙酸乙酯(20ml×3)萃取。合并的有机层用饱和nh4cl(20mlx3)水溶液和盐水(20ml)洗涤，经na2so4干燥，然后真空浓缩。粗产物通过正相色谱法(reveleris)纯化，用在己烷中的20–50％乙酸乙酯洗脱，得到(z)-(3-氟-4-((喹啉-8-基-d6)磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(470mg，53％)，为灰白色固体。程序am：制备(z)-3-氟-4-((喹啉-8-基-d6)磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(化合物53)在室温下，向搅拌的(z)-(3-氟-4-((喹啉-8-基-d6)磺酰基)丁-2-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，1.22mmol)在甲醇(1.0ml)中的溶液中，加入hcl(在乙醚中2.0m；4.0ml，8.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，在此期间固体沉淀。将反应混合物转移至小瓶中，并在离心机(4000rpm，4分钟)中离心分离。小心倾析上清液，并将剩余的固体“饼”在高真空下干燥，得到(z)-3-氟-4-((喹啉-8-基-d6)磺酰基)丁-2-烯-1-胺二盐酸盐(355mg，81％)，为白色固体。1hnmr(300mhz,cd3od)δppm:5.20(dt,j＝32.8,7.4hz,1h),5.08–4.96(m,2h),3.59(d,j＝7.4hz,2h)。实例23确定本发明化合物抑制来自不同源的lox和loxl1-4的能力的方法赖氨酰氧化酶(lox)是一种细胞外铜依赖性酶，其氧化胶原蛋白中的肽基赖氨酸和羟基赖氨酸残基以及弹性蛋白中的赖氨酸残基，从而产生肽基α-氨基己二酸-δ-半醛。这一催化反应可被与lox活性位点结合的β-氨基丙腈(bapn)不可逆地抑制(tangss，trackmanpc和kaganhm，“主动脉赖氨酰氧化酶与β-氨基丙腈的反应(reactionofaorticlysyloxidasewithbeta-aminoproprionitrile)”)。《生物化学杂志》1983；258:4331-4338)。有五个lox家族成员；它们是lox、loxl1、loxl2、loxl3和loxl4。lox和loxl家族成员可以以重组活性蛋白的形式从商业渠道获得，也可以从牛主动脉、肌腱、猪皮等动物组织中提取；或从细胞培养物中制备。使用基于过氧化氢检测的方法，以amplexred氧化测定法(zhou等人，《一种稳定的试卤灵非荧光衍生物用于痕量过氧化氢荧光测定：在检测吞噬细胞nadph氧化酶和其他氧化酶的活性中的应用(astablenonfluorescentderivativeofresorufinforthefluorometricdeterminationoftracehydrogenperoxide:applicationsindetectingtheactivityofphagocytenadphoxidaseandotheroxidases)》《分析生物化学(anal.biochem.》1997；253,162-168)，测试本发明化合物对给定lox-loxl制剂的抑制作用。使用384或96孔格式进行测定。简而言之，在标准的黑色透明底部384孔板测定中，在存在1μm莫非吉兰和0.5mm巴吉林(pargyline)(分别抑制ssao和mao-b和mao-a；如果酶来自重组或纯化形式，则不必要)的情况下，将25μl任何同功酶和直向同源物在1.2m尿素中的稀释液、50mm硼酸钠缓冲液(ph8.2)加入到每个孔中。将测试化合物溶解在dmso中，并在37℃下用酶孵育30分钟后，在浓度响应曲线(crc)中以11个数据点进行测试，通常在微摩尔或纳摩尔范围内。然后将在1.2m尿素、50mm硼酸钠缓冲液(ph8.2)中制备的含有腐胺的km值浓度的两倍的(西格玛奥德里奇(sigmaaldrich)，例如20mm，针对lox，或10mm，针对loxl2和loxl3)二十五微升反应混合物、120μm的amplexred(西格玛奥德里奇)和1.5u/ml的辣根过氧化物酶加入到相应的孔中。在96孔板的情况下，上述体积增加一倍。在温度范围为37℃，激发565nm和发射590(optima；bmglabtech)的条件下，每2.5分钟读取荧光(rfu)，持续30分钟。使用mars数据分析软件(bmglabtech)计算每个孔的动力学斜率，并将这一值用于推导ic50值(dotmatics)。表3显示了本发明化合物抑制胺氧化酶活性lox和其他家族成员的能力。表3本发明化合物实例的lox和loxl2抑制活性实例24本发明的化合物显示出对loxl1和loxl2的持续抑制对于在高底物浓度存在下有意义的药理作用，对lox和loxl1-4进行持续、长期抑制的化合物比竞争性抑制剂具有更强大的优势，因为药理作用使未结合抑制剂的存在更持久。在一个优选的实施例中，本发明的化合物显示出对lox和loxl1-4的持续抑制。确定本发明的化合物对lox和loxl1-4的持续抑制的方法跳跃稀释实验：使用96孔格式进行分析，并且起始酶浓度设置为抑制研究的100倍。酶在10倍或(需要确定抑制剂浓度超过酶浓度)或30倍ic50浓度的测试抑制剂存在下于37℃孵育40分钟。孵育后，将混合物在测定缓冲液中稀释50倍，然后在荧光测量之前，在amplexred辣根过氧化物酶-酪氨酸反应混合物(与抑制研究相同)中再稀释2倍。与未抑制的对照相比，结果以指定时间后信号恢复的百分比表示。结果示于表4。表4本发明化合物对loxl1和loxl2的持续抑制的量度化合物loxl1-活性恢复。(％)loxl2–活性恢复。(％)可逆标准(对照)80.996.812.49.5416.721.253.610.062.510.473.0835.194.415.11015.21110.2122.69.3133.58.9141.91526.11614.4175.3186.9197.87.9298.6301.9318.2334.56.9381.6456.6461.0实例25体内药代动力学将测试化合物(在pbs溶液中10mg/kg和30mg/kg，口服，n＝3)施用于7-9周龄的雄性wistar大鼠。在0.25小时–8.00小时的时间点(化合物1)收集测试化合物血液样本；施用后0.5小时–8.00小时(化合物33)，从尾静脉开始。样品制备：将20μl校准样品(单个)、qc样品(一式两份)和大鼠血浆样品与60μl含有内标(is；200ng/ml甲苯磺丁酰胺和50ng/ml丙醇)的乙腈混合。将混合物涡旋1分钟，然后离心10分钟，将50μl上清液转移至装有100μl水的96孔板中。摇动10分钟后，将10μl注入液相色谱质谱(lc-ms/ms)系统进行分析。lc方法(化合物1)hplc：agilent1100；质谱仪：api4000色谱柱：phenomenexgeminic185μm50x4.6mm流动相：水中0.1％甲酸，乙腈中0.1％甲酸lc方法(化合物33)hplc：shimadzulc30ad；质谱仪：api4000色谱柱：agilentsbc181.8μm50x2.1mm流动相：水中0.1％甲酸，乙腈中0.1％甲酸对于稀释样品：将10μl样品加入到90μl空白大鼠血浆中。混合物在eppendorf管中用含有is的300μl乙腈沉淀。将混合物涡旋1分钟，然后离心10分钟，将50μl上清液转移至装有100μl水的96孔板中。摇动10分钟后，将10μl注入lc-ms/ms系统进行分析。表5和表6分别显示了确定的化合物1和33的平均血浆浓度。表5口服给药10和30mg/kg后化合物1的平均血浆浓度表6口服给药10和30mg/kg后化合物33的平均血浆浓度实例26目标参与单剂量的基于机理的抑制剂可能足以长时间地阻断体内的酶活性。赖氨酰氧化酶活性的测定–耳片测定处死大鼠后立即收集的耳朵(用lox抑制剂处理或未处理)在干冰中速冻-80℃储存。为了进行分析，将5x5mm的样品切下(仍半融化)，包埋在琼脂糖凝胶中，切成200μm厚的横截面(振动切片机)。将薄切片收集在含有蛋白酶抑制剂的冰冷的pbs中，并使其在浴中静置2-3小时，以使可溶性污染物在测定前扩散出去。对于96孔板格式：收集三个薄片，在kimwipe上轻轻吸干，然后转移至装有100μl测定缓冲液(1.2m尿素，50mm硼酸钠缓冲液，ph8.2)的每个孔中，在1μm莫非吉兰和500μm巴吉林存在下，于37℃下预温育30分钟。bapn(500μm)已加入到所有“低对照”孔中。每个条件至少执行三个副本。预温育后，将100μlamplexred辣根过氧化物酶(hrp)混合物(120μmamplexred、1.5u/mlhrp、20mm腐胺)加入所有孔中，并于37℃下，每2.5分钟读取平板13次(在bmgclariostar上，以轨道，顶部读数模式进行544nm激发和590nm发射)。动力学曲线的斜率减去在低对照(在存在bapn的情况下)获得的值，被认为是样品中特定赖氨酰氧化酶活性的量度。实例27测量主动脉中赖氨酰氧化酶的活性样品制备：所有制备活动均在冰上，在存在蛋白酶抑制剂的情况下在缓冲液中进行(pmsf：sigmap7626，0.25mm，抑肽酶：sigmaa6279，1ml/ml)(《细胞生物学方法(methodsincellbiology)》2018；143:147-156)。在解剖显微镜下，使用细镊子在冰冷的洗涤缓冲液(0.15mnacl，50mm硼酸钠，ph＝8.0，含蛋白酶抑制剂)中除去冷冻主动脉样品周围的外膜和肌肉/脂肪。将主动脉在kimwipe上吸干，并在1.5mleppendorf管中称重，然后放在冰上。将主动脉在液氮中速冻后，用研钵和研棒(储存在-80℃下)粉碎组织。将粉碎的组织转移至装有金属珠、10xv/w洗涤缓冲液+蛋白酶抑制剂的指定试管中。使用珠磨机将组织均质化5秒钟。将匀浆在4℃下以10,000xg离心10分钟，然后弃去上清液。再重复均质化和洗涤步骤两次。将所得沉淀物重悬于3xv/w的6m尿素缓冲液(50mm硼酸钠，6m尿素，ph＝8.2)+蛋白酶抑制剂中，然后涡旋。然后于4℃下，将样品放置在辊上进行3小时萃取。萃取后，将样品离心(10,000xg，在4℃下，20分钟)，并保留上清液。将所有样品的等量样品转移至新鲜试管中进行稀释(最低要求为33μl)。用硼酸钠缓冲液(50mm硼酸钠，ph8.2)+蛋白酶抑制剂将样品稀释至2.4m尿素(这一阶段的样品为约4.5m尿素)，并用于后续测定。测定：将巴吉林(终浓度为0.5mm)和莫非吉兰(终浓度为1μm)加入到样品中。将重复的孔设置在黑色384板中，每孔25μl。向一式两份中加入0.5μl30mmbapn(泛赖氨酰氧化酶抑制剂)；提供背景值(低对照)。然后将样品在37℃下孵育30分钟。将反应混合物(25μl)加入到每个孔中(浓度显示为测定中终浓度的2倍：120μmamplexred、1.5u/mlhrp、20mm腐胺)。然后在fluostartm上每2.5分钟(例如：544nm/em：590nm/增益：1260；37℃)测量板荧光。给予年轻的雄性wistar大鼠单次口服剂量(10或30mg/kg)的化合物1或33(分别见表5和6)，并在这一年龄的耳朵中具有高基础活性的组织中测量酶活性(图2a和b；分别为化合物1和33)和主动脉(图3c；仅化合物33)。将反应标准化为在用盐水处理的动物中测得的活性(对照)。本文所述的化合物1对lox具有持久的抑制作用。尽管8小时后在大鼠血浆中的化合物1的血浆浓度远低于ic50(表5)，但在单次口服剂量后24小时即可测量剂量依赖性lox活性的持续降低(图2a)；>20小时后，化合物1的血浆浓度降至低于ic50。发现单次高(30mg/kg)剂量的化合物33完全消除了赖氨酰氧化酶的活性。尽管在8小时后化合物33的血浆浓度(表6)远低于ic50，但恢复的半衰期在2-3天(耳朵)和24小时(主动脉)之间(图2b和2c)。因此，化合物33引起持久的抑制作用，使血浆中活性化合物的存在持久。实例28确定式i化合物抑制人重组ssao/vap-1的能力的方法使用针对单胺氧化酶、含铜胺氧化酶和相关酶描述的偶联比色法测定人重组ssao/vap-1胺氧化酶活性(holta.和palcicm.《一种用于黄素单胺氧化酶、含铜胺氧化酶和相关酶的过氧化物酶偶联连续吸收酶标仪测定(aperoxidase-coupledcontinuousabsorbanceplate-readerassayforflavinmonoamineoxidases,copper-containingamineoxidasesandrelatedenzymes)》，《自然实验手册(natprotoc)》2006；1:2498-2505)。简而言之，通过geneartag，在哺乳动物表达载体(plo-cmv)中组装了与人ssao/vap-1的残基34-763相对应并结合了小鼠igkappa(κ)信号序列、n端标志表位标签和烟草蚀刻病毒(tev)切割位点的克隆的cdna模板。将这一含有人ssao/vap-1残基的载体转染到cho-k1糖基化突变细胞系lec8中。稳定表达人ssao/vap-1的克隆被分离并大规模培养。使用免疫亲和色谱法纯化并恢复活性人ssao/vap-1。这被用作ssao/vap-1活性的来源。使用96或384孔格式开发了高通量比色测定法。简而言之，在标准96孔板测定中，将在0.1m磷酸钠缓冲液(ph7.4)中的50μl纯化的人ssao/vap-1(0.25μg/ml)加入到每个孔中。将测试化合物溶解在dmso中，并37℃下在用人ssao/vap-1温育30分钟后，在浓度响应曲线(crc)中以4-11个数据点进行测试，通常在微摩尔或纳摩尔范围内。孵育30分钟后，将在0.1m磷酸钠缓冲液(ph)中制备的含有600μm苄胺(西格玛奥德里奇)的50μl的反应混合物、120μmamplexred(西格玛奥德里奇)和1.5u/ml辣根过氧化物酶(西格玛奥德里奇)7.4)加入到相应的孔中。在激发565nm，发射590(optima；bmglabtech)处，在37℃下，每2.5分钟读取一次荧光单位(rfu)，持续30分钟。使用mars数据分析软件(bmglabtech)计算每个孔的动力学斜率，并将这一值用于推导ic50值(dotmatics)。表7显示了式i化合物抑制ssao/vap-1的能力。实例29确定式i化合物抑制人重组mao-b的能力的方法通过确定它们在体外抑制mao-b活性的能力来测试本发明的化合物的特异性。重组人mao-b(0.06mg/ml；西格玛奥德里奇)用作mao-b酶活性的来源。以与人ssao/vap-1(实施例28)类似的方式进行测定，不同之处在于使用100μm底物苄胺。表7显示了式i化合物抑制mao-b的能力。表7与ssao/vap-1和mao-b相比，式i化合物对lox和loxl2的选择性lox和loxl1-4酶是一大类黄素依赖性和铜依赖性胺氧化酶的成员，其中包括ssao/vap-1和单胺氧化酶b(mao-b)。关于ssao/vap-1、mao-b和其他家族成员胺氧化酶，本发明的化合物选择性抑制酶的lox家族成员。选择性幅度的示例可见表7。实例30啮齿动物伤害模型小鼠通过切除皮肤组织而受到伤害。在治疗组中，从受伤后24小时至受伤后1周局部应用1％的化合物1溶液。然后使伤口再愈合一周。在受到伤害后第14天对小鼠实施安乐死，并分析组织中的胶原蛋白i含量，以及总体形态和组织学变化。与对照相比，处理过的组织中的胶原蛋白i量(使用lcms测量并标准化为蛋白质含量)减少(图3a)。组织学显示在对照瘢痕组织中平行的胶原束很粗。用化合物1处理的组织显示束密度降低，并且胶原蛋白的结构更“正常”(图3b和3c)。实例31猪烧伤模型猪受到4x25cm2的深层皮肤烧伤，每侧2个。从上皮再生开始，每头猪每天用3％的化合物1乳膏治疗2个伤口，持续4周，并且2个接受对照乳膏。对猪实施安乐死并处理组织进行分析。在处理的组织中，lox活性显着降低(图4a)，总胶原i蛋白也是如此(图4b)。大体形态(图4c-f)和组织学(图4g-h)支持在治疗的伤口中降低厚胶原蛋白纤维的密度。实例32胰腺癌小鼠模型雌性无胸腺裸鼠(4-5周大)直接在胰腺中接种miapaca-2luc(人胰腺细胞系)。初次接种后第14天，将测得的生物发光信号强度和体重用于将肿瘤分为治疗组。治疗组包括1.媒剂，腹膜内注射，一周3次。2.abraxane(白蛋白结合型紫杉醇)(10mg/kg，腹膜内注射，每周2次)和吉西他滨(初始剂量100mg/kg，腹膜内注射；第二次剂量由于急性毒性而降至60mg/kg，腹膜内注射，每周两次)。3.(白蛋白结合型紫杉醇)(如上所述给药)和吉西他滨(如上所述给药)和化合物33(10mg/kg，腹膜内注射，每周3次)(请参见图5a)。在肿瘤接种后第43天对小鼠实施安乐死。每周两次监测小鼠的状况和体重变化。在整个研究中，通过生物发光成像在体内监测肿瘤的生长(图5b)，并且在组织收集时离体监测器官(图5c-e)。实例33硬化症的小鼠模型每隔一天(总共20天)对雌性c57bl/6施用皮下博来霉素，以诱导皮肤纤维化作为硬化模型。用媒剂、0.5％、1％或3％的化合物1治疗病变。21天后组织学完成。组织学分析显示在图6(a-c)中。实例34原发性骨髓纤维化的小鼠模型向十五至十六周龄的gata1低雄性和雌性小鼠腹膜内注射媒剂(橄榄油)或化合物19，剂量为15mg/kg，每周四次，共10周。然后处死小鼠，并收集脾脏和股骨用于组织学和分析(图7(a-e)和图8(a-d))。与媒剂组相比，用化合物19处理的小鼠脾脏重量经调整后相对体重显着降低(242.25±18mg对305.11±22.4mg，p<0.05)。治疗前的血液学参数没有差异，然而与治疗后的媒剂小鼠相比，治疗组的小鼠血小板计数显着降低(77.5±4.4k/ul对106±12，p<0.05)。与媒剂相比，治疗组小鼠的骨髓(bm)和脾纤维化明显减少。与媒剂相比，治疗组小鼠的h&e染色的形态学bm巨核细胞(mk)计数并减少(每20x视野24.65±0.6对32.91±0.71，p<0.001)。实例35单侧输尿管梗阻(uuo)模型进行了小鼠急性肾纤维化的14天单侧输尿管梗阻(uuo)模型，以加速方式模拟阻塞性肾病导致肾小管间质纤维化的不同阶段。uuo手术是通过结扎左输尿管进行的，并导致左肾厚度和萎缩的减少(通过与对侧相比，肾脏重量和肾脏/体重比显着降低来表明)以及肾脏纤维化的显着增加。在研究期间，治疗组口服接受化合物33(每天10mg/kg)。化合物33增加了肾脏重量和厚度，并减少了用天狼猩红测量的纤维化面积(图9)。卡托普利(约32mg/kg/天，在饮用水中)用作阳性对照。实例36博来霉素诱导的肺纤维化模型通过口咽施用给予c57bl/6小鼠1.5u/kg量的通用临床博来霉素(blenoxane)。每天通过管饲法给药化合物33，持续21天，然后收集并分析组织。如图10所示，化合物33显着降低了ashcroft评分和肺重量。正如对赖氨酰氧化酶抑制剂的预期，每个肺中未成熟(dhlnl)和成熟(pyd)交联的数量也分别减少了37％和45％。实例37化合物33减少与纤维化有关的转移越来越多的证据表明，要发生癌症转移，需要建立转移前的小生境(niche)，以帮助外渗和转移性定植。纤维化的微环境被认为可以增强肿瘤的侵袭和转移。每周两次用1mg/kg四氯化碳(ccl4)处理balb/c小鼠，诱导肝纤维化，持续8周。同时，提供了用化合物33(每天腹膜内注射20mg/kg)治疗，可显着减少肝纤维化(图11a和b)。在第4周结束时，原位注射小鼠乳腺癌细胞系(4t1)(如图11a所示)。用化合物33处理显着减少了肝纤维化(图11b)、胶原蛋白交联和肝脏中的转移负荷(图11c和11d)。未观察到原发肿瘤生长或胶原蛋白交联的差异。实例38与e-烯烃、异构体的对应物相比，本发明的化合物对ssao的底物活性降低。使脱靶活性最小化是设计和开发用于治疗应用的化合物的关键考虑因素。已经举例说明了包括e-1的化合物作为氨基脲敏感性胺氧化酶(ssao)的抑制剂[wo2009/066152]。据报道，这一类型的分子也可以作为ssao的底物而被转化，产生潜在的有毒代谢产物(foot等人，2012)。在一个优选的实施例中，本发明的化合物既不是ssao的抑制剂也不是其底物。通过ssao测量底物转化简而言之，所用的测定法确定了化合物相对于背景(仅二甲基亚砜)的底物倾向。通过荧光测定法测量通过rhssao进行的化合物氧化(holt和palcic，2006)。简而言之，将rhssao在hepes缓冲液中于37℃孵育2小时，然后在相同缓冲液中添加等体积的amplexred(20mm)、辣根过氧化物酶(4u/ml)和化合物(2.5mm)。立即使用optima阅读器(bmglabtechgmbh，ortenburg，德国)在37℃下测量试卤灵的形成的动力学。代表性结果示于表6。表6当前第1页12当前第1页12