一种固定化全细胞及其制备方法与在产3-氨基丙酸中的应用与流程

文档序号:21198453发布日期:2020-06-23 19:02阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种固定化全细胞的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将l-天冬氨酸脱羧酶菌株培养,离心,得到菌体;

(2)用水将步骤(1)得到的菌体重悬,得到细胞重悬液;

(3)将步骤(2)得到的细胞重悬液与离子溶液混合,再加入配体溶液,搅拌,洗涤,将洗涤后的固体部分沉淀,所得沉淀物即为固定化全细胞。

2.根据权利要求1所述的固定化全细胞的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,用水重悬菌体至5~15od。

3.根据权利要求1所述的固定化全细胞的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的离子为二价金属离子;离子溶液的浓度为20~100mmol/l,溶剂为水;细胞重悬液与离子溶液的体积比为1.5~3:1。

4.根据权利要求1所述的固定化全细胞的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的配体为咪唑或咪唑衍生物;配体溶液的浓度为50~200mmol/l,溶剂为水;配体溶液与离子溶液的体积比为1:0.5~2。

5.根据权利要求1所述的固定化全细胞的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的搅拌为在200~800rpm的转速下搅拌30~60min。

6.权利要求1~5中任意一项所述方法制备得到的固定化全细胞。

7.权利要求6所述固定化全细胞在产3-氨基丙酸中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,包括如下步骤:向pbs缓冲液中加入权利6所述的固定化全细胞,反应。

9.根据权利要求8所述的反应,其特征在于,控制固定化全细胞的用量,使每1mlpbs缓冲液中固定化全细胞的细胞浓度为od600=0.1~5。

10.根据权利要求8所述的反应,其特征在于,所述的反应为在30~40℃下50~300rpm振荡反应8~12h。


技术总结
本发明公开了一种固定化全细胞及其制备方法与在产3‑氨基丙酸中的应用,固定化全细胞的制备方法包括如下步骤:(1)将L‑天冬氨酸脱羧酶菌株培养,离心,得到菌体;(2)用水将步骤(1)得到的菌体重悬,得到细胞重悬液;(3)将步骤(2)得到的细胞重悬液与离子溶液混合,再加入配体溶液,搅拌,洗涤,将洗涤后的固体部分沉淀,所得沉淀物即为固定化全细胞。与现有技术相比,本发明通过固定化全细胞的方法,提高了细胞的在催化体系中的催化活性、耐受性和重复利用率。

技术研发人员:陈可泉;许晟;王昕;冯娇
受保护的技术使用者:南京凯诺生物科技有限公司
技术研发日:2020.02.25
技术公布日:2020.06.23
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