离心内管使用状态下的结构示意图。
[0035]附图2是本发明过滤装置各组件的示意图。
[0036]附图中所示标号:
[0037]1、离心内管；2、离心管；3、过滤装置；4、滤纸支架；5、滤纸；6、滤纸压环；7、内管密封盖；8、螺纹；9、密封胶垫；10、胶皮垫圈。
【具体实施方式】
[0038]下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
[0039]实施例1:本发明所述一种精子分离装置，主体结构包括离心内管I和离心管2。所述离心管2采用规格为15ml的离心管2，所述离心内管I置于离心管2内。所述离心内管I的中上部为圆筒状结构，且其管壁厚度0.5mm、外径13mm、长度95mm。使其能够与15ml规格的离心管2相配合。所述离心内管I的下部为尖端开口的圆锥体结构，使分离出的精子团能够集中于离心内管I底部中心，且分离出的精子团在离心内管I与离心管2分离时能够通过开口留在离心管2底部。且下部圆锥体的底部直径13mm、尖部直径3mm，锥高15mm。所述离心内管I的内部设置过滤装置3，结合低速离心操作，可使精液的过滤液化和离心内管I的负压生成同步完成，即能够使精液充分液化，保证了下一步分离操作的进行，又能为下一步的分离操作提供负压吸力，且过程紧凑高效，避免了人工过滤的染菌问题，提高成功率；所述离心内管I管内据管口 50mm/8ml刻度处设置一圈凸起形成凸台，用以将过滤装置3托起固定，使过滤装置3位于离心内管I的中部。所述过滤装置3包括有滤纸支架4、滤纸5和滤纸压环6。所述滤纸支架4为形状与离心内管I的管内横截面相对应的网孔结构，易于精子的通过，且由环形网架和网丝构成。所述环形网架的外圆直径与离心内管I的内径相同，所述环形网架紧密贴附离心内管I内壁，并由离心内管I内壁的凸台托起固定，所述环形网架的环粗为1mm。所述网丝纵横各位三条且与环形网架的内侧环面固定连接，所述网丝的为直径0.5mm的圆柱状网丝。所述滤纸支架4上设置两层滤纸5，所述滤纸5为孔径30?50微米的中速定性滤纸5。所述滤纸5上设置滤纸压环6。所述滤纸压环6为外圆直径12.5mm，且环粗为2mm的圆环，能够将所述滤纸5压牢固定于滤纸支架4上。所述离心内管管体的顶部设置内管密封盖7。能够保证离心内管I的密封，使其在低速离心操作后能够产生负压。所述离心内管I的顶端与内管密封盖7的连接处均设置相对应的螺纹8，能够使二者的连接更加紧固，所述内管密封盖7内设置密封胶垫9，进一步保证离心内管I的密封性。所述离心内管I的外侧套接有胶皮垫圈10，所述胶皮垫圈10紧密贴附于离心内管I的外壁上且能够调整与离心内管I的相对高度。当离心内管I插入离心管2并靠近离心管2底部后，通过调整所述胶皮垫圈10在离心内管I上的位置，使胶皮垫圈10担托于离心管2管壁顶端，从而使离心内管I与离心管2的相对位置固定。所述离心内管1、滤纸支架4、滤纸压环6均由医用聚丙烯制成。医用聚丙烯具有比重小、造价低、耐高温、易加工、透明度高、表面光滑、卫生等优点。
[0040]利用上述一种精子分离装置实施的一种双管真空薄膜精子分离法，具体操作步骤如下:
[0041](I)实验采用Vit1life瑞典公司的产品:SpermGrad精子梯度分离液(用于精子梯度分离，是碳酸氢盐和HEPES缓冲系统，硅烷包被的胶质二氧化硅颗粒，)和SpermRinse精子洗液(是HEPES缓冲培养液，包含用于保证精子活力的糖类和抗生素。用于洗精、上游、稀释SpermGrad，)，处理精子前将精子洗液SpermRinse和密度梯度溶液SpermGrad放置37°C。用精子洗液将密度梯度溶液稀释配成90%和45%两种密度梯度溶液，用5ml巴士德吸管吸取45%密度梯度溶液2.0毫升置于15毫升(内径1.5厘米)离心管2底部，再吸取90%密度梯度溶液2.0毫升，小心将吸管插入15ml离心管2底部，缓慢将90%密度梯度溶液加到离心管2底部，45%密度梯度溶液会浮在上层，保证两者之间的界面清晰。(此步骤为经典密度梯度分离精子方法中密度梯度溶液准备过程)。
[0042](2)将离心内管I缓慢插入上述盛有密度梯度离心溶液的15ml离心管2中至底部5mm处，为精子的落出提供一定空间，故离心内管I底端的开口被密度梯度溶液密封，此操作需缓慢轻柔，保证不破坏密度梯度溶液的界面。调整离心内管I外侧的胶皮垫圈10，使其撑在离心外管上。
[0043](3)滴加0.2ml精子洗液至离心内管I使离心内管I内的滤纸5湿润。
[0044](4)将刚取出的精液在37°C温度下放置10分钟，液化精液或不液化精液均可采用此方法分离处理。将精液缓缓滴加在离心内管I的过滤装置3的滤膜上，注意不要接触到滤纸5以免戳破。
[0045](5)旋紧离心内管I上的密封盖保证离心内管I管内的密封。
[0046](6)将插有离心内管I的离心管2进行2500rpm离心lOmin。离心处理使精液无论液化与否均可通过过滤装置3实现液化，并融于离心内管I底部的密度梯度溶液，从而使离心内管I内产生一定的负压，并且由于离心沉降分层使得精液中的杂质、有害物质等溶于离心内管I内的45%密度梯度溶液。轻轻取出离心内管1，将所述离心内管I自离心管2内取出时，所述离心内管I内的负压能够将离心内管I里的45%密度梯度溶液和部分90%密度梯度溶液一同吸出，离心内管I里的部分90%密度梯度溶液以及底部的精子团则落到离心管2底部。这样一来精液中的杂质和有害物质也被一并去除，所有的除活动精子外的上层所有细胞、颗粒均分离出去，从而达到分离精子的目的。与传统的密度离心法不同的是不会因吸管抽吸分离精子的过程带入部分的上层杂质进入已分离的精子内，使精浆物质彻底与精子分尚。
[0047](7)将所述离心管2内的剩余物质使用6ml精子洗液混匀后，进行2500rpm离心lOmin，可将多余90%的密度梯度溶液去除，剩余所需分离的活动精子，可用于人工授精或其他研宄。
[0048]所有步骤使用器材、精子洗液、密度梯度溶液均为无菌一次性使用耗材、试剂。
[0049]通过应用本发明装置离心内管I进行如上操作，可以将精液的液化和精子的分离同步进行，无论精液液化与否，均可直接进行试验操作，而无需进行添加培养液、蛋白酶及进行吹打等对精子有所损害的操作环节，使精子的收率大大提高。且离心内管I自身产生负压吸取代替了传统离心处理后的手动吸取，在保留传统密度梯度离心法的高回收率的同时，使精浆物质彻底与精子分离，保证了分理处的精子的质量。
[0050]实施例2:本发明所述一种精子分离装置，主体结构包括离心内管I和离心管2。所述离心管2采用规格为1ml的离心管2，所述离心内管I置于离心管2内。所述离心内管I的中上部为直径上大下小的圆筒状结构，且其外径13mm、上端内径12mm、下端内径11mm、长度100mm。使其能够与1ml规格的离心管2相配合。所述离心内管I的下部为尖端开口的圆锥体结构，使分离出的精子团能够集中于离心内管I底部中心，且分理出的精子团在离心内管I与离心管2分离时能够通过开口留在离心管2底部，且下部圆锥体的底部直径13mm、尖部直径3mm，锥高15mm。所述离心内管I的内部设置过滤装置3，结合低速离心操作，可使精液的过滤液化和离心内管I的负压生成同步完成，即能够使精液充分液化，保证了下一步分离操作的进行，又能为下一步的分离操作提供负压吸力，且过程紧凑高效，避免了人工过滤的染菌问题，提高成功率；所述过滤装置3包括有滤纸支架4、滤纸5和滤纸压环6。所述滤纸支架4为形状与离心内管I的管内横截面相对应的网孔结构，易于精子的通过，且由环形网架和网丝构成。所述环形网架的外圆半径为11.5mm，正好卡固与离心内管I管内的中央，所述环形网架的环粗为0.8mm。所述网丝纵横各位2条且与环形网架的内侧环面固定连接，所述网丝的为直径0.2mm的圆柱状网丝。所述滤纸支架4上设置若三层滤纸5，所述滤纸5为孔径30?50微米的中速定性滤纸5。所述滤纸5上设置滤纸压环6。所述滤纸压环6为外圆直径11.5mm，且环粗为2mm的圆环，所述滤纸支架4、滤纸5和滤纸压环6依次粘接。所述离心内管管体的顶部设置内管密封盖7。能够保证离心内管I的密封，使其在低速离心操作后能够产生负压。所述离心内管I的顶端与内管密封盖7的连接处