节pH为6,以乙酸乙酯为 萃取剂，每次取20mL，萃取3次，将有机层合并，依次用水和饱和食盐水洗涤2次，经无水硫 酸钠干燥后，减压蒸馏，在硅胶柱中以石油醚：乙酸乙酯体积比3 : 1为洗脱剂，层析分离 后得化合物2e ;
[0042]
[0043] 步骤二、在100mL烧瓶中加入0. 5mmol化合物2e，1. Ommol三水合醋酸钠，1. 5mmol 盐酸羟胺以及30mL体积分数为95%的酒精，搅拌，油浴升温至80°C反应6h。TLC监测反 应进程，在原料点消失后旋转减压蒸干，以乙酸乙酯为萃取剂，每次取20mL，萃取3次，将有 机层合并，依次用饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥有机相，减压蒸馏 后，在硅胶柱中以石油醚：乙酸乙酯体积比2 : 1为洗脱剂，层析分离后得到产物3e，所述 产物3e为白色固体0. 200g，产率91 %。
[0044]
[0045] 实施例4
[0046] 步骤一、3.7mmol柚皮素溶于45mLN，N-二甲基甲酰胺中，边搅拌边加入7. Ommol 新干燥的无水碳酸氢钠，70°C加热回流12min后，缓慢滴加9mmol溴代丙酮，继续在70°C 加热回流9h后减压蒸馏，加水溶解后用稀盐酸调节pH为5,以乙酸乙酯为萃取剂，每次取 20mL，萃取3次，合并有机层，依次用水和饱和食盐水洗涤3次，经无水硫酸钠干燥后，减压 蒸馏后，在硅胶柱中以石油醚：乙酸乙酯体积比4 : 1为洗脱剂，层析分离后得化合物2b;
[0047]
[0048] 步骤二、在lOOmL烧瓶中加入2mmol化合物2b，5mmol三水合醋酸钠，8mmol盐酸 羟胺以及30mL体积分数为95%的酒精，搅拌，油浴升温至80°C反应10h。TLC监测反应进 程，在原料点消失后旋转减压蒸干，以乙酸乙酯为萃取剂，每次取20mL，萃取3次，将有机层 合并，依次用饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥有机相。减压蒸馏后， 在硅胶柱中以石油醚：乙酸乙酯体积比2 : 1为洗脱剂，层析分离后得到产物3b，所述产物 3b为白色固体0. 47g，产率41%。
[0049]
[0050] 实施例5
[0051] 步骤一、3. 7mmol柚皮素溶于50mLN，N-二甲基甲酰胺中，边搅拌边加入7. 5mmol 新干燥的无水碳酸氢钠，70°C加热回流lOmin后，缓慢滴加lOmmol溴代苯乙酮，继续在70°C 加热回流l〇h后减压蒸馏，加水溶解所得溶质后用稀盐酸调节pH为4,以乙酸乙酯为萃取 剂，每次取20mL，萃取3次，合并有机层，依次用水和饱和食盐水洗涤2次，经无水硫酸钠干 燥后，减压蒸馏后，在硅胶柱中以石油醚：乙酸乙酯体积比5:1为洗脱剂，层析分离后得 化合物2d ;
[0052]
[0053] 步骤二、在100mL烧瓶中加入2mmol化合物2d，6mmol三水合醋酸钠，lOmmol盐酸 羟胺以及30mL体积分数为95%的酒精，搅拌，油浴升温至80°C反应12h。TLC监测反应进 程，在原料点消失后旋转减压蒸干，以乙酸乙酯为萃取剂，每次取20mL，萃取3次，将有机层 合并，依次用饱和碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤2次，无水硫酸钠干燥有机相。减压蒸馏后， 在硅胶柱中以石油醚：乙酸乙酯体积比1:1为洗脱剂，层析分离后得到产物3d，所述产物 3d为白色固体0. 48g，产率45%。
[0054]
[0055] 实施例6
[0056] 步骤一、3. 7mmol柚皮素溶于50mLN，N-二甲基甲酰胺中，边搅拌边加入7. 5mmol 新干燥的无水碳酸氢钠，75°C加热回流lOmin后，缓慢滴加lOmmol溴代苯乙酮，继续在75°C 加热回流l〇h后减压蒸馏，加水溶解所得溶质后用稀盐酸调节pH为4,以乙酸乙酯为萃取 剂，每次取20mL，萃取3次，合并有机层，依次用水和饱和食盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥 后，减压蒸馏后，在硅胶柱中以石油醚：乙酸乙酯体积比5:1为洗脱剂，层析分离得化合 物2f;
[0057]
[0058] 步骤二、在100mL烧瓶中加入2mmol化合物2f，6mmol三水合醋酸钠，lOmmol盐酸 羟胺以及30mL体积分数为95%的酒精，搅拌，油浴升温至80°C反应12h。TLC监测反应进 程，在原料点消失后旋转减压蒸干，以乙酸乙酯为萃取剂，每次取20mL，萃取3次，将有机层 合并，依次用饱和NaHC03和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥有机相。减压蒸馏后，在硅胶 柱中以石油醚：乙酸乙酯体积比1 : 1为洗脱剂，层析分离后得到产物3f，所述产物3f为 白色固体0.06g，产率48%。
[0059]
[0060] 为了说明本发明的效果，发明人提供比较实验如下：
[0061] 采用本发明所述的多肟基柚皮素衍生物对胃癌细胞进行抑制细胞生长增值活性 试验的测试。选择本发明的多肟基柚皮素衍生物试验其对胃癌细胞细胞毒性。采用MTT方 法，进行体外细胞毒性测定。在96孔板中培养的对数生长期细胞中加入不同浓度的多肟基 柚皮素衍生物，同时进行3个平行试验，与对照组进行比较。培养72小时后，加入MTT，测定 其吸光度，分别计算抑制胃癌细胞生长增殖到50%时化合物的浓度，以IC5。值表示，结果如 表1所示：
[0062] 表1.多肟基柚皮素衍生物体外抑制胃癌细胞生长增殖活性（IC5。，ymol/L)
[0063]
[0064] 本发明所述多肟基柚皮素衍生物对胃癌细胞的体外活性测试试验结果表明，部 分化合物对胃癌细胞有着较好的抑制作用，其中3b和3c的效果较好，半抑制浓度分别为 15. 3ymol/L和22. 1ymol/L，可用于筛选治疗胃癌的药物或辅助药物。
[0065] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列 运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地 实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限 于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
【主权项】
1. 一种多肟基柚皮素衍生物，具有通式（I)的结构：2. 如权利要求1所述多肟基柚皮素衍生物的制备方法，其中制备方法包括： 步骤一、将柚皮素加入N，N-二甲基甲酰胺中，加入无水碳酸氢钠后，70~75°C回流 10~15min后滴加a-卤代酮类化合物，继续在70~75°C回流4~IOh后提纯，得到产物 为具有化学式（II)的化合物；步骤二、将具有化学式（II)的化合物、三水合醋酸钠以及盐酸羟胺加入酒精中，80~ 85°C反应6~12h后提纯得到产物为具有化学式（I)的化合物。3. 如权利要求2所述的多肟基柚皮素衍生物的制备方法，其中所述步骤一中N，N-二 甲基甲酰胺的用量为每Ig柚皮素加入N，N-二甲基甲酰胺40~50ml。4. 如权利要求2所述的多肟基柚皮素衍生物的制备方法，其中所述步骤一中所述柚皮 素与所述无水碳酸氢钠的摩尔比为1 : 1.2~2,所述柚皮素与所述a-卤代酮类化合物的 摩尔比为I: 1. 2~2. 7。5. 如权利要求2所述的多肟基柚皮素衍生物的制备方法，其中所述步骤二中所述具有 化学式（II)的化合物与所述三水合醋酸钠的摩尔比为1 : 2~3,所述步骤二中所述具有 化学式（II)的化合物与所述盐酸羟胺的摩尔比为1 : 3~5。6. 如权利要求2所述的多肟基柚皮素衍生物的制备方法，其中所述a-卤代酮类化合 物为溴代苯乙酮、溴代丙酮或对氯溴代苯乙酮中的一种。7. 如权利要求2所述的多肟基柚皮素衍生物的制备方法，其中所述提纯为：将反应后 的产物减压蒸馏，所得溶质加水溶解，用稀盐酸调节溶液PH为4~6,以乙酸乙酯为萃取剂， 所述乙酸乙酯每次取20mL，萃取3次，将有机层合并，依次用水和饱和食盐水洗涤2~3次 后，经无水硫酸钠干燥，减压蒸馏后在硅胶柱中层析分离。8. 如权利要求7所述的多肟基柚皮素衍生物的制备方法，其中所述步骤一的提纯中硅 胶柱层析分离，以石油醚：乙酸乙酯体积比3~5 : 1为洗脱剂，所述步骤二的提纯中硅胶 柱层析分离，以石油醚：乙酸乙酯体积比1~3 : 1为洗脱剂。9. 一种如权利要求1所述的多肟基柚皮素衍生物的用途，其用途在于，所述多肟基柚 皮素衍生物在制备治疗胃癌药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种多肟基柚皮素衍生物及其制备方法和应用，其结构通式为：其中，R1表示CH3、C6H5或p-ClC6H4中的任一种；R2表示OH或中的任一种。本发明的多肟基柚皮素衍生物制备方法简单，原料来源广泛，本发明的多肟基柚皮素衍生物在低浓度时对胃癌细胞有有效的抑制作用，可作为药物中间体或辅助成分用于治疗胃癌药物的制备。
【IPC分类】A61P35/00, C07D311/68
【公开号】CN105037314
【申请号】CN201510304421
【发明人】刘志平, 甘春芳, 黄燕敏, 崔建国
【申请人】广西师范学院
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年6月7日